产β-甘露聚糖酶菌株的筛选及产酶条件优化的研究

本实验用培养基透明圈法从7种芽孢杆菌中筛选到酶活最高的三株芽孢杆菌(枯草芽孢杆菌4.37、高龙枯草芽孢杆菌w-031 3.83、地衣芽孢杆菌3.83)。用测定发酵液酶活的方法进行菌株的复筛,酶活最高的菌株为枯草芽孢杆菌。对该菌产酶条件进行了单因素实验发酵条件的优化,最优产酶条件为:最佳碳源是魔芋粉,含量为4%,最佳有机氮源为酵母浸粉,最佳无机氮源为硝酸钠,最佳产酶时间为36 h。     

金属离子对红球菌腈水合酶活力的影响

不同金属离子对红球菌（Rhodococcus sp．）TCCC 28001的生长及其腈水合酶的酶活有着不同程度的影响．菌株TCCC 28001产生的腈水合酶是钴型,且Co^2＋对该腈水合酶诱导激活的最适浓度为10×10^-5mol／L．选择酵母粉中含有且含量波动较大的5种金属离子,考察了在添加10×10^-5 mol／L Co^2＋诱导激活下,5种金属离子对酶活的影响．结果表明：Fe^2＋,Mn^2＋,Mo^6＋,Cu^2＋4种金属离子具有促进作用,Zn^2＋产生轻微抑制作用．6×10^-5mol／L Fe^2＋的促进效果显著,使菌株TCCC 28001的酶活从453U／mL增加到1941U／mL,提高了328％．     

脂肪酶产生菌的筛选及产酶条件优化

从不同土样中分离获得36株脂肪酶产生茼,其中zj-5菌株产酶活性最高,通过对zj-5进行形态学观察,初步确定其属于酵母茵.通过正交试验设计,对zj-5的产脂肪酶条件进行优化,在摇瓶培养条件下,其最适产酶条件为:葡萄糖10.0 g/L,蛋白胨6.0 g/L,反应起始pH值为6.0,发酵温度为42℃,在此条件下的产酶可达245 U/mL.     

菊粉酶酵母菌株的筛选及鉴定

从菊芋周围土壤和实验室保存的菌株中分离筛选产菊粉酶的酵母菌株，得到产菊粉酶活力较高的酵母菌7株。以K.Marxianus为对照，对其中5株未知菌进行菌种鉴定，并将它们归列到属。经进一步复筛，选定酶活最高的酵母KI07，初步研究KI07菊粉酶的酶学性质。结果表明该酶的最适作用pH为4.5、最适反应温度为55℃，作用于菊粉、蔗糖和棉子糖，其I/S、I/R值分别为1/2.80、1/2.89，该酶为外切型菊粉酶。     

利用ATC产半胱氨酸菌的筛选及产酶条件的测定

从土样中分离筛选出一株性能较好的能利用２－氨基－Δ＾２－噻唑啉－４羟酸合成半胱氨酸的菌株ＳＢ－６。该菌的较适产酶培养基：葡萄糖２％,（ＮＨ４）２ＳＯ４ ０．３％,无机盐溶液,较适产酶条件;培养基起始ｐＨ值为７．５;３３℃振荡培养。加大通气量,以甘油为碳源有益于产酶。菌株的生长条件与产酶条件略有不同     

产脂肪酶细菌的筛选及产酶条件优化

从富油土壤中分离到9株产脂肪酶杆菌,其中BD3菌株产脂肪酶能力较强,通过测定其生理生化特征,初步鉴定该菌为假单胞菌属.对BD3菌株的发酵培养条件进行了优化,以橄榄油作碳源,蛋白胨为氮源,其发酵最佳温度为40℃,最佳pH值为6.5.     

α—葡萄糖苷酶产生菌的筛选及其产酶条件的研究

从某些霉菌中通过筛选获得一株产α－糖苷酶活力较高的黑曲霉菌株Ｈ－产生菌的选及其产酶采用均匀设计试验法探讨了该菌株产酶的最适培养条件，研究结果表明，在适宜条件下本菌产酶水平可达６９７．４Ｕ／ｇ具有实际应用前景。     

白鲳鱼肠道中产蛋白酶菌的筛选、鉴定及产酶条件

为了促进蛋白酶的生产及应用,开展了从海水白鲳鱼肠道中筛选蛋白酶高产菌以及相关研究.经平板筛选和摇瓶发酵筛选,获得一株蛋白酶高产菌种EF21,该菌种被鉴定为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus).通过产酶条件的初步研究,优选蛋白胨为菌种EF21产蛋白酶的最佳氮源,并确定产酶的最佳初始pH为7.5,最佳温度为20℃,最佳时间为64 h.在最佳条件下,发酵液中蛋白酶活力达1 292 U/m L.相对于文献报道的数据,菌种EF21低温环境中具有较强的产酶能力,具有一定的应用潜力.经过初步分析,菌种EF21在低温下良好生长情况与其来源于海洋环境有关,同时,由于EF21的16S rDNA序列与NCBI数据库中菌种的最大同源性仅为97%,可能是新发现的微生物菌种,今后通过开展毒性试验、所产蛋白酶的酶学性质以及发酵条件的优化方面的深入研究,可以进一步促进工业化应用.     

产耐温漆酶菌的筛选及培养基优化

采用愈创木酚CPDA平板法对由广州地区多个不同场所采集的土样进行了菌种分离纯化,筛选出1株产耐温漆酶的菌株Tr0702,通过形态学观察初步判断该菌为木霉属．该菌所产漆酶的最适反应温度为65℃,在70℃下保温60min后残余酶活保留60％以上;发酵培养基经响应面法优化后关键参数如下：可溶性淀粉44．40g／L、吐温（80）9．00g／L、愈创木酚15．04mmol／L,以此优化培养基发酵酶活可达50．15U／mL     

菊粉酶酶源菌株的筛选及其发酵条件

从天然样品中筛选出28株菊粉酶酶源菌株,经过复筛,得到产菊粉酶活力高于5.0u/mL的菌株9株,其中黑曲霉5株,酵母4株,经过发酵条件的优化后,确立了酶母Y108产酶的适宜培养基组成,麦芽糖8.0%,蛋白胨1.6%,（NH4）2SO40.5%,NaCl0.3%,K2HPO40.5%;pH.4.5,在32℃摇瓶150r/min条件下,培养72h,Y108酶活力为46.42u/mL。     

半纤维素酶高产菌株的筛选及产酶条件的研究

以半纤维素为唯一碳源,采用平板透明圈和摇瓶发酵相结合的方法,筛选得到1株半纤维素酶高产菌株Hc-3,经形态学初步鉴定为曲霉属.通过液体发酵对该曲霉菌株发酵生产半纤维素所需碳源、氮源、培养温度、起始pH、培养时间等进行研究,结果表明上述因素对酶产量均有一定的影响.在单因素结果的基础上,设计3因素3水平的正交试验,根据试验结果确定菌株Hc-3发酵产酶的最佳条件:豆粕20 g/L,(NH4)2SO43 g/L,装液量80 mL(250 mL三角瓶),培养温度30℃,起始pH值为5.5,培养时间46 h,发酵液半纤维素酶活性可以达到2 000 U/mL以上,其中,起始pH值为影响最为明显的因素.     

菊粉酶产酶菌株筛选与鉴定

从徐州沛县河口镇秦庄村牛蒡种植基地取得的土壤样本中,筛选出产菊粉酶的菌株,对从土壤中分离到的40株产菊粉酶的各类菌株进行酶活的测定．通过透明圈法初筛及摇瓶复筛,获得产菊粉酶能力较高的霉菌3株,为C122803、D081506和D081513．这三株菌株的酶活分别达到1．411u／mL、1．895u／mL、1．792u／mL,且其I／S值各达到1．1821、1．6806、1．3483．其中D081506的I／S值最大．对这三株菌株进行初步的微生物分类鉴定,符合黑曲霉的形态特征,初步鉴定为黑曲霉．     

利用原生质体融合和诱变育种技术选育高酶活菌株

以白曲霉(Aspergillus kawachii )基因工程菌TR12和黑曲霉(Aspergillus niger)34309为出发菌株，分别用纤维素酶和纤维素酶、溶菌酶的混合酶液制得了两个亲本的原生质体。在研究了培养时间、培养方法、酶解时间、酶解液的配比等条件对原生质体产量影响的基础上，以PDG诱导进行了原生质体的融合，并进行了紫外线照射的诱变育种。通过比较在菌落外观、颜色及形态上与白曲霉和黑曲霉菌株的不同，以及进行分离培养和液态培养摇瓶筛选，获得了一株具有较高酶活力的新菌株，其耐酸性α-淀粉酶活性和糖化酶活性分别达到91．2u／ml和3216．2u／ml的水平。     

一株产蓝色素放线菌的筛选及发酵研究

从土壤中筛选到1株蓝色素产量较高的放线菌,命名为Cya-5.对蓝色素发酵条件进行研究,结果显示发酵培养基的配方为甘油20 g/L、KNO31 g/L,K2HPO40.5 g/L,MgSO4.7H2O 0.5 g/L,FeSO4.7H2O 0.01 g/L,NaCl 0.5 g/L,pH=8.5,装液量为100 mL/250 mL三角瓶、30℃发酵96 h,发酵液的A590总值达到12.02.利用碱沉法提取发酵液中的色素物质,粗提物色价可达到45.8.     

产生物表面活性剂细菌的筛选及发酵条件优化

利用变色圈法、排油圈法从土壤和污泥等样品中分离筛选出1株产生物表面活性剂的细菌菌株WB,并通过单因素实验及L9（3^4）正交实验对该菌株的培养基配方及培养条件进行优化．结果表明：在葡萄糖10g／L,麸皮25g／L,酵母粉0．9g／L,培养基初始pH值为7．2,250mL摇瓶装液量为50mL,发酵时间为72h的条件下,菌株WB的表面活性剂的产量可达3．6g／L．     

产脱落酸真菌的筛选及其发酵条件研究

利用马丁-孟加拉红培养基由20份土壤样品和2份植物病叶样品中分离出57株真菌，分别对其进行液体培养．通过各菌株发酵液抑制莴苣种子发芽的方法筛选得到-株脱落酸产生菌NX-53，通过L9（3^4）正交实验对其产酸条件进行优化，得到该菌株产脱落酸的培养基配方和培养条件：葡萄糖25g／L，维生素B1 1．25mg／L，谷氨酸单钠盐3．0g／L，MgSO4·7H2O 0．2g／L，KCl 0．5g／L，CaCO3 5g／L，KH2PO4 0．8g／L，FeSO4·7H2O 0．5mg／L，ZnSO4·7H2O 2．5mg／L，CuSO4·5H2O 4mg／L，250mL摇瓶装液量50mL，28℃、150r／min培养7d．优化条件下菌株NX-53的脱落酸产量可达276mg／L．     

响应面法优化酶法制备酪蛋白糖巨肽的工艺条件

采用Minitab方法设计实验,对影响酪蛋白糖巨肽制备的酶解因素进行优化,发现酶解时间、酶解温度、酶解pH、酶与底物比是影响酶解酪蛋白的主要因素.由于唾液酸是酪蛋白糖巨肽的特征性组分,本文以唾液酸的含量表征酶解上清液中酪蛋白糖巨肽的含量.根据Minitab分析的结果,采用Design Expert软件中水平设计和响应面分析法对影响酪蛋白糖巨肽产量的主要因素进行优化,建立唾液酸含量A580对酶解主要条件的二次回归模型,其回归方程的决定系数达到了0.962,9.得到的最佳酶解条件为：酶解时间80,min,酶解温度42.5,℃,酶解pH 6.28,酶与底物比270,U/g.唾液酸含量A580最高为0.653,此时酪蛋白糖巨肽的得率为17.91 mg/g.     

快凝NiAl基催化剂制备脂肪伯胺反应参数的优化

利用快速凝固ＮｉＡｌＳｉＦｅＣｅ合金制备了新型ＲａｎｅｙＮｉ催化剂．用正交试验法对其脂肪腈加氢制备伯胺的反应参数进行了优化．结果表明：在本试验调节范围内,在ＰＨ２＝３．０ＭＰａ,ＰＮＨ３＝０．９ＭＰａ,Ｔ＝１５５℃,ｔ＝１．５０ｈ,ｍ（Ｃａｔ．）／ｍ（ＲＣＮ）＝０．５％的反应条件下此新型催化剂具有很好的催化性能,脂肪腈转化率和伯胺选择性分别达到了９９．０７％和９４．４１％．     

豆豉纤溶酶产生菌的筛选及菌种鉴定

在收集的全国21个豆豉产品中分离到369株革兰氏阳性芽孢杆菌,对其进行产纤溶酶活性筛选,得到一株高产纤溶酶菌株HGD107．对菌株HGD107进行形态、生理、生化鉴定,初步鉴定为枯草芽孢杆菌．