碱性脂肪酶的发酵及提取工艺

对圆弧青霉ＰＧ３７发酵产酶工艺及脂肪酶提取工艺等进行了系统的研究。实验结果表明，２０ｍ＾３发酵罐在通风量为０．３￣０．８Ｖ／Ｖｍｉｎ、搅拌转速为１８０ｒ／ｍｉｎ、发酵温度为２８℃、培养过程中流加棉籽油以控制发酵醪ｐＨ值为６．５￣７．０的条件下，发酵８４ｈ左右，成熟发酵醪酶活为４５２０Ｕ／ｍＬ。发酵液经过滤、超滤波浓缩、硫铵沉淀、造粒等过程制得颗粒碱性脂肪酶成品，酶的提取总收率在７０％以上，颗粒酶活     

土壤中产碱性脂肪酶霉菌的筛选

利用RhodamineB平板筛选模型，以PVA橄榄油为底物的NaOH滴定法为测酶活主要方法，从沈阳化工学院附近含油脂丰富的土壤中筛选得到产碱性脂肪酶能力较高的霉菌M20．对其产酶条件进行优化，最终得到培养基中最佳碳源为葡萄糖2％＋植物油3％，最佳氮源为4％酵母膏，最适初始pH为8．0，最适产酶时间36h，将酶液于4℃下保存，酶活力可在3d内保持稳定．     

碱性脂肪酶生产菌假单孢菌4631菌株的筛选

从３２个土样中分离获得碱性脂肪酶产生菌１６６株，其中４６３１号菌株产酶能力最高，达到９．１ＩＵ／ｍｌ。初步鉴定为假单孢菌属。对研究结果统计分析表明，Ｄ／ｄ值与ＬＡ呈线性相关关系。     

低温碱性脂肪酶产生菌的筛选及产酶培养基的优化

以橄榄油为唯一碳源,从渤海湾盐碱地被油污染的土样中分离筛选出1株产低温碱性脂肪酶菌株34-5,初步酶学性质研究表明,该菌所产脂肪酶的最适温度为25℃,最适pH为9．6,该菌的16S rDNA基因序列与伯克霍尔德氏菌（Burkholderia）的同源性为99％摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基为（g／L）;淀粉10,黄豆饼粉20,玉米浆20,K2HPO4 1,聚乙烯醇大豆油乳化液20．其最高酶活为6．87U／mL。     

用筛选抗性突变株法选育碱性脂肪酶的高产菌

以圆弧青霉白色变株ＰＢ２２７为出发株,通过多次诱变,筛选抗真菌抗生素的抗性株和抗底物,底物结构类似物或分解产物的抗性株,获得一株己酸抗性突变株ＰＧ３７,其产酶水平比出发株ＰＢ２２７菌株提高了１．５倍,达到５５７μｍｏｌ／（ｍｉｎ·ｍＬ）ＰＧ３７所产脂肪酶的最优作用ｐＨ为１０．０,最适作用温度为２５℃,在ｐＨ７．０～１０．５范围内稳定。     

洗涤剂用酶的研究与开发：新型碱性脂肪酶

讨论了碱性脂肪酶的性质，生产及其在洗涤剂中的应用。     

平板扩散法粗略确定碱性脂肪酶的活性

通过对圆弧青霉ＰＧ３７所产碱性脂肪酶活性测定方法的研究和比较,建立了一种快速、直观、灵敏的固体琼脂平板脂肪酶活性测定方法,利用脂肪酶在一定条件下分解三丁酸甘油酯所释放出的游离脂记酸指示剂变色的原理,根据变色圈直径的大小对酶活性进行粗略分析,特别适合于酶提纯过程中大批理样品酶活性的估测以及酶活性条带和其它蛋白质条带的区分     

碱性脂肪酶特性的研究

本文对圆弧青霉ＰＧ３７所产碱性脂肪酶的酶学性质进行了研究。结果表明该酶的最适ｐＨ、最适作用温度及耐金属离子等特性非常适合作洗涤剂用酶。     

环烷酸中脂肪酸含量测定方法的改进

讨论了尿素络合酸碱“滴定法”测定从煤、柴油碱碴生产的环烷酸中脂肪酸含量的测定条件和干扰因素并与尿素络合“重量法”进行了比较,“滴定法”比“重量法”操作简单且操作耗时少,而精确度比“重量法”有所提高。该分析方法当环烷酸中脂肪酸的含量为１％￣２％时,相对误差不大于６％,变异系数不大于５％;当环烷酸中脂肪酸的含量为１％￣２％,而加标量为样品中脂肪酸含量的１倍左右时回收率８０％左右。     

产低温碱性脂肪酶菌株Acinetobacter johnsonii LP28的鉴定及发酵条件优化

从实验室保藏的49株碱性脂肪酶产生菌中筛选出产低温碱性脂肪酶菌株LP28,初步酶学性质研究表明,该脂肪酶的最适作用温度为30℃,最适作用pH为9．0,粗酶液在室温条件下处理48h仍具有93．78％的残余酶活．该菌经16SrDNA鉴定为约氏不动杆菌（Acinetobacter johnsonii）,同源性为99％．摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基为（g/L）：淀粉10,牛肉膏20,K2HPO41,PvA-大豆油20．最高酶活为3．06U／mL．     

一株低温碱性脂肪酶产生菌TS182的分离与鉴定研究

通过Tween-80平板初筛和摇瓶发酵复筛,从连云港海域海水及海泥样品中分离的菌株中筛选获得一株低温碱性脂肪酶高产菌株TS182。通过形态学、生理生化以及分子生物学鉴定菌株TS182为荧光假单孢菌（Pseudomonas fluorescens）。菌株TS182所产脂肪酶最适温度和最适pH分别为15℃和9．0。     

海洋微生物碱性脂肪酶生产菌的分离选育

从海水,海泥,海洋生物的消化道,碱厂土样等43个样品中分离获得碱性脂肪酶产生菌286株,其中Q53菌株产酶能力最高,达11．4IU/mL,初步鉴定为假单孢菌落属,对研究结果进行统计分析表明,D／d值与LA有线性相关关系,对Q53脂肪酶合成影响因素的研究表明,由尿素和玉米浆组成 的有机氮源为产酶培养基的最佳氮源,橄榄油和豆油有利于脂肪酶的合成,而可溶性淀粉不利于酶的合成,产酶最适条件,起始PH9．5,温度31度,摇瓶转速150r/min,发酵周期48h。     

脂肪酶油脂改性工业应用存在的问题浅析

脂肪酶在油脂改性工业前景广阔，但工业化应用还面临着一定的问题，本文综述了油脂改性的复杂性和工程技术方面存在的问题。     

碱性脂肪酶在洗衣粉中稳定性的研究

本文对各种碱性脂肪酶在洗衣粉中的稳定性做了系统的研究，更加全面深入地了解各种碱性脂肪酶的特性，为碱性脂肪酶在洗涤剂中的应用提供了理论依据。     

圆弧青霉脂肪酶基因的克隆和表达

圆弧青霉PG37总RNA甲醛变性电泳呈现真核生物所特有的28SrRNA和18SrRNA条带。根据PG37所产碱性脂肪酶（Lip PC）N末端氨基酸残基序列和真核生物mRNA在3'端具有poly(A）等所提供的生物信息，采用RT－PCR技术扩增了Lip PC成熟肽和3'非编码区的cDNA片段，并将该PCR产物直接克隆至pUCm-T载体中。序列分析表明，Lip PC含有258个氨基酸残基，其中保守的五肽序列为Gly-His-Ser-Leu-Gly。进一步采用ClonTech公司的Smart^TM PCR cDNA文库构建试剂盒，扩增、克隆和测定了自转录起始点至编码区的cDNA片段，从而完成了Lip PC完整cDNA的分析测定。最后将编码完整脂肪酶蛋白质的cDNA克隆至pGEX-5X-3表达载体中，SDSPAGE检测结果表明，大肠杆菌BL21所表达的GST－Lip PC融合蛋白质分子质量约为53ku。     

微生物脂肪酶的应用领域及研究进展

随着工业催化技术的发展,脂肪酶作为一种重要的生物催化剂现已成为世界研究的热点.对微生物脂肪酶的结构、性质以及在粮油食品加工、生物柴油、有机合成、手性化合物合成及三甘酯结构测定等方面的应用进行了综述和展望.     

固定化脂肪酶催化天然油脂水解和甘油解

概括了国外用于工业化生产的高效水解，甘油解油脂的微生物脂肪酶和固定化酶的各种载体，讨论了固定化脂肪酶催化油脂水解和甘油解的影响因素。介绍了三种固定化脂肪酶生物反应器。