ELISA法快速检测婴儿配方奶粉中酪蛋白含量

目的建立快速检测奶粉中酪蛋白含量的方法。方法通过夹心酶联免疫吸附法(ELISA)定量测定婴儿配方奶粉中的酪蛋白含量。按照试剂盒内附的操作说明,制作标准曲线,计算3种奶粉样品所对应的酪蛋白含量,同时测量另外10种奶粉样品的酪蛋白含量。结果酪蛋白在0.5~13.5μg/g内具有良好的线性关系,相关系数(R~)大于0.99。3种奶粉样品实际测得酪蛋白含量与标签上的含量一致性在99%以上。10种奶粉样品酪蛋白含量在4.17~6.65 g/100 g范围内。结论该方法专一性强,灵敏度高,简便、快速、准确,可用于婴儿配方奶粉中的酪蛋白含量的测定。     

荞麦过敏原特异性抗体酶联免疫吸附法检测试剂制备

以天然苦荞过敏蛋白包被聚苯乙烯微孔板,以鼠抗人IgE抗体标记辣根过氧化物酶,以间接酶联免疫吸附法(indirect enzyme-linked immunosorbent assay,IELISA)检测病人血清中的特异性抗体,分析并建立关键操作步骤及反应条件。结果表明:ELISA反应的最适工作条件为包被的抗原质量浓度100μg/mL、阳性血清稀释度1:50、酶标二抗稀释度1:1000,37℃时封闭的最佳时间为40min,包被抗原与阳性血清中抗体的最佳作用时间为40min,阳性血清与酶标二抗的最佳作用时间为40min。本方法具有良好的特异性、重复性和精密度。     

双抗夹心酶联免疫吸附法检测荞麦过敏蛋白

提取制备荞麦过敏原蛋白（TBt）并免疫动物,分别制备鼠多克隆抗体和兔多克隆抗体,建立了双抗夹心酶联免疫吸附检测法（ELISA）用于检测食品中的荞麦过敏原。SDS-PAGE结果表明,纯化的TBt纯度达到98%以上,鼠抗血清效价为1∶6400。建立的双抗夹心ELISA法对荞麦过敏原蛋白的最低检测限为0.16μg/m L,线性范围为0.16¹6μg/m L。并采用建立的双抗夹心ELISA法对市场出售的15种食品中荞麦过敏成分进行了检测。结果显示,该方法对绝大多数食品中的荞麦过敏原都有很好的特异性及灵敏性,说明该法可用于食物过敏原的诊断及食品中微量荞麦过敏成分的检测。      

双抗夹心酶联免疫吸附法检测荞麦过敏蛋白

提取制备荞麦过敏原蛋白(TBt)并免疫动物,分别制备鼠多克隆抗体和兔多克隆抗体,建立了双抗夹心酶联免疫吸附检测法(ELISA)用于检测食品中的荞麦过敏原。SDS-PAGE结果表明,纯化的TBt纯度达到98%以上,鼠抗血清效价为1∶6400。建立的双抗夹心ELISA法对荞麦过敏原蛋白的最低检测限为0.16μg/m L,线性范围为0.16~16μg/m L。并采用建立的双抗夹心ELISA法对市场出售的15种食品中荞麦过敏成分进行了检测。结果显示,该方法对绝大多数食品中的荞麦过敏原都有很好的特异性及灵敏性,说明该法可用于食物过敏原的诊断及食品中微量荞麦过敏成分的检测。     

酶联免疫吸附法(ELISA)检测婴幼儿配方食品中谷蛋白

介绍了利用ELISA法的醇溶谷蛋白试剂盒测定婴幼儿配方食品中的谷蛋白含量。样品经处理后,用提取液提取样品中谷蛋白,提取液经离心,稀释后,用酶联免疫吸附法直接测定。检测的线性范围是5～80μg/kg,相关系数是0.9988,回收率在115.6%～120.6%之间,证明可以用酶联免疫法测定婴幼儿配方食品中的谷蛋白含量。     

直接竞争酶联免疫吸附法检测虾过敏蛋白

目的:建立酶标抗原的直接竞争酶联免疫吸附法(dcELISA)检测食品中虾过敏蛋白,为食品过敏诊断试剂的开发和应用提供理论基础。方法:提取虾主要过敏蛋白,免疫小鼠制备抗虾过敏蛋白多克隆抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记抗原,建立酶标抗原的dcELISA检测虾过敏蛋白。结果:所建立的dcELISA法最低检测限为3.94ng/mL,标准曲线在0.12～128.86ng/mL范围内线性良好,批内和批间变异系数分别为6.16%和2.73%,回收率为82%～98%。结论:该方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,为进一步研制检测虾过敏蛋白的ELISA试剂盒提供有效的方法。      

直接竞争酶联免疫吸附法检测虾过敏蛋白

目的:建立酶标抗原的直接竞争酶联免疫吸附法(dcELISA)检测食品中虾过敏蛋白,为食品过敏诊断试剂的开发和应用提供理论基础。方法:提取虾主要过敏蛋白,免疫小鼠制备抗虾过敏蛋白多克隆抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记抗原,建立酶标抗原的dcELISA检测虾过敏蛋白。结果:所建立的dcELISA法最低检测限为3.94ng/mL,标准曲线在0.12～128.86ng/mL范围内线性良好,批内和批间变异系数分别为6.16%和2.73%,回收率为82%～98%。结论:该方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,为进一步研制检测虾过敏蛋白的ELISA试剂盒提供有效的方法。     

食品中沙门氏菌快速检测技术研究进展

沙门氏菌的检验在食品微生物检验中具有十分重要的意义。本文主要针对基于免疫学的快速检测方法-酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、基于分子生物学的聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)和基于蛋白质的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法(matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)在食品中沙门氏菌快速检测的应用进行了分析与比较。基于3种不同原理的检测方法各有其优缺点,ELISA方法成本低,操作简单但检出限高;PCR方法成本较高,但检测快速、灵敏度高且检出限低;MALDI-TOF MS检出限低但需要完善的细菌库进行比对。因此建议将含内控的荧光定量PCR与LAMP法作为食品中检测沙门氏菌的主要方法。     

直接竞争酶联免疫吸附法检测食品中三聚氰胺残留

目的 采用酶标抗原建立高效、高灵敏的三聚氰胺直接竞争酶联免疫吸附法(direct competitive enzyme linked immunosorbent assay,dc-ELISA)检测食品中三聚氰胺(melamine,MEL)残留.方法 以三聚氰胺单克隆抗体包被作为固相抗体,辣根过氧化酶(horseradi...     

氯霉素ELISA检测试剂盒的研制及其性能测试

采用包被多克隆抗体直接竞争ELISA法建立了氯霉素残留的酶联免疫分析方法,并构建了氯霉素残留ELISA检测试剂盒.研究结果表明,所选用的抗体对氯霉素亲合力强、特异性高,试剂盒对氯霉素残留检测的线性范围为0.24～250 ng/mL,检测限(IC10)0.47 ng/mL,样品的加标回收率70%～130%.试剂盒性能测试结果表明,其准确性和重现性较好,保存期至少6个月,可用于虾肉、鸡肉、蜂蜜、鲜奶样品中氯霉素残留的批量快速、廉价检测.     

食品中酪蛋白过敏原检测方法的比较

目的 比较市场上销售的三种检测牛奶中酪蛋白ELISA试剂盒效果。方法 以脱脂奶粉、酪蛋白做作阳性添加成分, 对三个品牌的ELISA试剂盒从回收率、精密度、特异性等方面进行比较。结果 ELISA试剂盒可以对多种食品进行酪蛋白含量检测, 回收率、精密度等各项检测性能指标均可满足相关检测低限要求。结论 ELISA检测试剂盒无需大型分析仪器、操作简便快捷、适用于大量样品快速初筛和各种基层实验室食品品质监控。     

ELISA法在检测食品中镉的研究进展

简述了酶联免疫吸附法的原理、镉抗原及其特异性单克隆抗体的制备、方法的选择.作为一种新型的检测方法,具有灵敏度高、特异性强、省时、省力、操作简单、便于携带等特点,最主要是能实现大量筛选.分析研究了该法在实际检测中的应用,探讨了酶联免疫吸附法在检测中存在的不足以及应用前景.     

酶联免疫法检测食品中乳酸链球菌素

建立了酶联免疫吸附法来检测乳制品、肉制品和含乳饮料中的乳酸链球菌素含量。在抗乳酸链球菌素多克隆抗体的基础上,建立间接竞争酶联免疫吸附法。所建立的间接竞争ELISA方法的灵敏度为0.1μg/mL,标准曲线范围为0.1～62.5μg/mL,乳制品的检测限为1.0μg/mL,肉制品的检测限为0.5μg/g,样本的添加回收率范围在80%～120%之间,变异系数<20%。所建立的间接竞争ELISA方法及制备的相关试剂盒具备准确、快速、简便的优点,能够满足乳制品、肉制品和含乳饮料中乳酸链球菌素含量的检测要求。     

恩诺沙星快速酶联免疫吸附法检测试剂盒的研制

目的：研制恩诺沙星酶联免疫吸附法检测试剂盒。方法：采用EDC-NHS 法制备ENR-M-BSA 免疫原和ENR-OVA 检测抗原,用ENR-M-BSA 免疫BALB/C 小鼠,采用甲基纤维素半固体培养基法筛选单克隆抗体并采用间接竞争ELISA 对其进行分析。结果：通过公式计算ENR-M-BSA 摩尔偶联比为15:1,ENR-OVA 摩尔偶联比为7.2:1。筛选出1 株特异性分泌株3E9,其腹水纯化后间接竞争ELISA 测其效价为107,分型试剂盒测试显示此抗体属于IgG1 型;检测限为1ng/mL,线性范围在1～100ng/mL 之间,半量抑制浓度(IC50 值)为10ng/mL,与4 种结构类似物交叉反应均小于1%。结论：此株单克隆抗体可以用来建立恩诺沙星ELISA 检测试剂盒。     

酶联免疫吸附法快速检测婴儿配方奶粉中乳铁蛋白含量

目的采用乳铁蛋白快速检测试剂盒,通过酶联免疫吸附法定量测定婴儿配方奶粉中的乳铁蛋白含量,并验证该方法的准确性、稳定性和可靠性。方法按照试剂盒操作说明制作标准曲线,选取乳铁蛋白阴性样品进行添加回收实验,验证方法的准确性;选取一个乳铁蛋白阳性样品,重复检测6次,计算结果偏差,验证方法的稳定性;选取12个乳铁蛋白阳性样品,分别采用试剂盒方法和高效液相色谱法进行检测,对比2种方法的检测结果,验证试剂盒方法的可靠性。结果试剂盒检出限为2 mg/100 g;试剂盒检测方法回收率在101.6%~109%;相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为5.34%;试剂盒方法检测结果与标签值的偏差为-6.90%~6.45%,和高效液相色谱法检测结果的偏差为-6.45%~6.9%,说明试剂盒方法具有很好的可靠性。结论乳铁蛋白试剂盒检测方法灵敏度高、操作简单,能快速准确地测定婴儿配方奶粉中的乳铁蛋白含量。     

酶联免疫吸附法检测动物源性食品中氨苯砜残留

应用间接竞争酶联免疫吸附技术,建立了一种快速检测动物源性食品中氨苯砜残留的方法,并对其各项技术参数进行了评价。结果显示,该方法的半数抑制浓度IC50为0.369μg/L,对鸡肉、猪肉样本的检测限为0.2μg/kg,对鸡蛋、蜂蜜样本的检测限为2μg/kg,对牛奶样本的检测限为0.6μg/L;样本添加回收率为78.2%~104.0%,变异系数为5.2%~13.5%;对实际样本的检测结果与液相色谱-串联质谱法基本一致。该方法操灵敏度高、快速准确,适用于动物源性食品中氨苯砜残留的快速检测。     

快速检测卡和酶联免疫试剂盒检测动物性食品中3种β-兴奋剂

目的评价快速检测卡和酶联免疫试剂盒检测动物性食品中3种β-兴奋剂的准确性。方法分别采用快速检测卡和酶联免疫吸附法检测动物性食品中盐酸克伦特罗(CLB)、莱克多巴胺(RAC)和沙丁胺醇(SAL)3种β-兴奋剂残留,并与液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)进行比较评价。结果盐酸克伦特罗速测卡和克伦特罗-莱克多巴胺-沙丁胺醇三联速测卡的检测结果与LC-MS/MS的符合率分别为83.3%和87.5%(CLB)、12.5%(RAC)、100%(SAL),CLB、RAC、SAL和β-兴奋剂ELISA试剂盒的检测结果与液相色谱-串联质谱法的符合率分别为94%、94%、76.2%和75%。结论试剂盒的准确度相对较高,但部分试剂盒的假阳性和假阴性情况明显。速测卡检测限较高,准确度较差,不满足一般检测要求。     

酶联免疫吸附法快速检测饲料中赭曲霉毒素A

目的建立一种酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)快速检测饲料中赭曲霉毒素A快速的方法。方法样品采用60%的甲醇溶液提取,提取液经过离心、快速滤纸过滤后,用稀释缓冲溶液按10倍的比例对提取液进行稀释即为试样液,采用酶联免疫吸附方法进行检测。结果在加标浓度为25、50和100μg/kg的加标水平下,赭曲霉毒素A在饲料中的加标回收率为88.4%~134.6%,变异系数为3.5%~6.9%。抽取10份样品进行检测,赫曲霉毒素A含量在14.1~38.2μg/kg。符合国家的标准GB 13078-2017对饲料中赫曲霉毒素A含量的规定。结论本方法灵敏度高、快速简便,适用于饲料中赭曲霉毒素A的快速批量检测。     

食品中丙烯酰胺检测方法研究进展

丙烯酰胺(Acrylamide,AA)作为小分子有机化合物具有神经毒性、遗传毒性和致癌性,是一种潜在的致癌物。富含碳水化合物的食品在高温加工过程中容易产生AA,对人体健康存在潜在的威胁。准确分析食品中AA含量能有效评价食品安全风险,有利于保障消费者的安全。因此,准确检测食品中AA的方法至关重要,成为食品安全领域的研究热点。本文总结了近年来食品中AA的主要检测方法以及相应的研究进展,包括传统的液相/气相色谱法、光谱法、毛细管电泳法,以及新型的酶联免疫法、电化学/荧光生物传感器法,并对这些方法进行对比和总结,为AA检测方法发展提供新思路和依据。     

食品中丙烯酰胺检测新技术研究进展

丙烯酰胺(AA)是一种食品热处理加工过程中产生的具有神经毒性与潜在致癌性的物质,已引起全世界范围的广泛关注。准确测定复杂食品体系中AA的含量,是评估其对人体危害的前提。文章评述了AA传统检测方法(液相色谱,气相色谱,液质联用和气质联用)的不足,主要体现在样品前处理过程复杂、需要必要的衍生化、分析仪器昂贵及需要专业技术人员操作等方面;并重点介绍了毛细管电泳法、酶联免疫吸附试验法、超分子识别法、纳米生物传感法等新型的检测方法的优缺点,及在实际应用中遇到的具体问题;同时,对未来检测方法的发展方向进行展望,旨在为更高效、实用检测方法的开发提供思路。