Ras-GRF1基因敲除小鼠的行为学研究

Ras基因广泛存在于自然界中,其控制的Ras-GRF1蛋白在细胞信号传导,在细胞分化与生长过程中起着极其重要的作用。已有研究表明,Ras基因与信号通路和学习记忆功能密切相关。本实验利用行为学研究敲除Ras-GRF1基因的小鼠在学习记忆上与野生老鼠的差异,通过Morris水迷宫等实验发现Ras-GRF1基因敲除小鼠的学习记忆能力弱于野生型小鼠。     

大肠杆菌arpA基因的表达及功能鉴定

E.coli的arpA基因位于异柠檬酸脱氢酶激酶(aceK)基因和异柠檬酸裂解酶调节因子基因(iclR)之间。根据E.coli基因组序列设计引物,利用PCR技术扩增了arpA基因,并将其克隆入pET-28b(+)。经IPTG诱导,ArpA蛋白可以获得高效表达。通过细菌染色体同源重组技术,构建arpA基因敲除菌株ΔarpA-MG1655。ΔarpA-MG1655在葡萄糖-MOPS培养基中的生长速率和野生型E.coli MG1655的生长速率很接近,前者约是后者的95%。ΔarpA-MG1655在乙酸-MOPS培养基中的生长速率几乎与野生型E.coliMG1655一样,说明ArpA对细菌在乙酸-MOPS培养基中的生长没有明显的影响,对乙酰辅酶A合成酶(Acs)没有明显的调控作用。ArpA包含锚蛋白重复序列,与很多真核生物包含锚蛋白重复序列的蛋白质高度同源,分子系统学分析认为一些在病毒和细菌中发现的锚蛋白重复类似蛋白,可能是进化过程中基因水平迁移的结果。     

新疆艾比湖细菌视蛋白基因资源研究

针对新疆艾比湖这一特定生境中的嗜盐古菌的细菌视蛋白（bacterio-opsin, bop）基因资源进行了研究.通过PCR方法扩增并测定了11株菌株的编码细菌视蛋白螺旋C至螺旋G片段的基因序列.根据该片段基因序列进行的系统发育分析表明,艾比湖获得的bop基因大部分聚类到同一个类群,具有明显的地域特征.将翻译出的氨基酸序列与已报道的相应片段进行对比表明,从艾比湖菌株获得的序列与其他菌株来源的序列间存在明显差异.这些天然的突变体,尤其是菌株AB9、AB27、AB47,都是研究细菌视紫红质（bacteriorhodopsin,BR）蛋白结构和功能的良好材料,而细菌视紫红质是人工视网膜和光子开关等的良好生物材料     

马来酸酐熔融接枝醋酸纤维素的研究

以醋酸纤维素（CA）为基体树脂,过氧化二异丙苯（DCP）为引发剂,马来酸酐（MAH）为接枝单体,在双螺杆挤出机中于175～200℃进行熔融接枝．以红外光谱表征法确定了接枝反应的发生,研究了引发剂、接枝单体用量对接枝反应的影响,并研究了接枝单体及其用量对接枝CA材料热稳定性能、流变性能的影响．结果表明：引发剂DCP添加量为0．4％时接枝率最高;随着MAH添加量的增加,接枝率随之增加;CA—g—MAH较纯CA的热稳定性有所提高,熔体黏度下降,熔体流动速率提高．     

克鲁维酵母菊粉酶基因在毕赤酵母中的表达

从菊粉酶酶源菌株克鲁维酵母GKluyveromycesmarxianus)Y109中提取菊粉酶基因,PCR扩增Y109的菊粉酶基因inuB1,核苷酸序列测定分析表明inuB1的阅读框架全长1665bp,没有内含子,其中存在4个潜在的N 糖基化位点。以pPIC9K为表达载体,构建inuB1的酵母转化载体,转化毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115,获得菊粉酶基因工程菌GS115/inuB1。GS115/inuB1甲醇诱导发酵表达菊粉酶,inuB1基因重组胞外菊粉酶表观分子量为90kD(SDS PAGE),比酶活性是12.29U/mg。     

再生细菌纤维素/氧化铝复合纤维的制备及性能研究

通过物理气相沉积技术（PVDT）制备再生细菌纤维素/氧化铝（RBC/Al2O3）复合纤维,运用SEM,FT-IR,XPS,XRD,TGA及电子单丝强力仪对样品的形貌、结构、成分、热稳定性和机械强度进行表征。结果表明：再生细菌纤维素纤维表面形成了致密的Al2O3包覆层,当Al2O3包覆层厚度达到40 nm时,RBC/Al2O3复合纤维的机械强度提高了大约60%,优于商用的黏胶纤维;氧化铝包覆层对RBC纤维的热稳定性没有影响。因此,RBC/Al2O3复合纤维在纺织工业方面具有较大的应用潜力。     

细菌纤维素的研究及其应用

细菌纤维素作为新型纳米材料,具有极好的物理特性、生物相容性和生物可降解性等。本文介绍了国内外目前对细菌纤维素代谢及生物合成机制的研究现状,及细菌纤维素在食品、造纸和医学等领域的应用。并展望了细菌纤维素未来的研究趋势与应用前景。     

一株产漆酶细菌的筛选鉴定及其漆酶对染料废水的脱色研究

从云南大理市大理大学情人湖边茶树根际的土壤中筛选到一株产漆酶细菌,对其显微形态、生理生化特征以及16S rRNA基因序列进行分析,初步鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)的一株菌,命名为Bacillus sp. Lac-Q.对其所产漆酶的性质及其漆酶对染料废水的脱色进行了研究.结果表明:Lac-Q漆酶最适酶活温度为28℃,最适反应pH值为6.0.在4℃下,能保持良好的稳定性.Mn~(2+)、Zn~(2+)和K~+对该酶酶活有一定的抑制作用,其中K~+的抑制作用最强;Ca~(2+)、Mg~(2+)、Cu~(2+)、Fe~(2+)对该漆酶酶活具有激活作用,其中Fe~(2+)的激活效果最为显著.在最适酶活条件下,对三苯甲烷类染料孔雀石绿和结晶紫废水进行脱色,脱色率分别可达60%和55%.     

黑曲霉bgl基因在毕赤酵母中的表达研究

为构建具有分泌黑曲霉β-葡萄糖苷酶活力的酵母工程菌,探讨β-葡萄糖苷酶基因(bgl基因)在酵母菌中的表达情况.克隆了黑曲霉bgl基因的cDNA片段,利用质粒pPICZαA构建了该基因的酵母表达载体,经线性化后采用电穿孔法转入毕赤酵母菌中.以甲醇为诱导物进行诱导培养,检测结果表明黑曲霉bgl基因已成功转入酵母菌中并可正常表达,重组蛋白具有β-葡萄糖苷酶水解活性,在诱导培养72 h后,发酵液的酶活力可达到0.78 U/mL.     

一种酵母菌菊粉酶性质及其基因测序

报道了来源于毕赤酵母 (Pichia)YI0 9菊粉酶酶学性质和该菊粉酶基因的序列分析。YI0 9菊粉酶最适反应pH值 4.5 ,最适反应温度 5 5℃ ,为外切型菊粉酶。PCR扩增YI0 9菊粉酶基因并进行核苷酸序列分析 ,该菊粉酶的基因全长 1665bp,没有内含子 ,存在 4个潜在的N 糖基化位点     

机械产品基因研究综述

通过对产品基因文献的综合分析，对产品基因理论研究和应用研究进行了分析总结，将产品基因的应用领域进一步细分为概念设计、结构设计、制造系统、变型设计和进化设计。最后展望了产品基因研究的方向．     

双歧杆菌分子生物学研究

对双歧杆菌的表面结构、生物酶、胞外分泌物及质粒进行了较为详细的论述。     

预处理方法提高木质纤维酶解转化率的研究

木质纤维原料中存在的半纤维素和木素会阻碍纤维素的酶解,从而降低纤维原料的酶解转化率。因此,在纤维素酶解之前,都要经过预处理,以破坏阻碍酶解糖化的生物质内在结构,解除半纤维素和木素对纤维素的保护,提高纤维素酶的可及性,从而提高纤维原料的酶解转化率。介绍了不同的预处理方法对纤维原料酶解转化率的影响,以及预处理工艺的研究现状和发展趋势。     

微生物在堆肥化中的应用研究

介绍了堆肥化的基本原理、分类和堆肥微生物的种类,概括了目前国内外将微生物的混合培养应用于堆肥的情况,着重介绍了微生物的混合培养有利于对纤维素的降解以及提高微生物对纤维素降解能力的途径.     

分解酒糟生物质的纤维素酶生产菌的筛选研究

从白酒糟采集的样品中分离到15株菌,经过刚果红染色,初筛得到产纤维素酶酶活较高的5株菌。纤维素酶和滤纸酶活研究结果表明,这5株菌在分泌纤维素酶活力及降解滤纸能力方面均较强,其分解纤维素的酶活最高达到11.9 U/mL,而分解滤纸的酶活力则最高达到6.4 U/mL。最适产酶条件为:发酵时间72~96 h,发酵温度25~30℃。对酒糟发酵减重最高达18%。     

静电纺丝法制备聚丙烯腈／细菌纤维素复合纳米纤维研究

利用静电纺丝方法制备了聚丙烯腈／细菌纤维素复合纳米纤维．研究了溶液浓度、细菌纤维素含量对复合纳米纤维成形及吸水性能的影响．研究结果表明：随着溶液浓度的增加,静电纺丝产物由珠状结构纤维逐渐成为平滑纤维,上工平均纤维直径逐渐增大;随着细菌纤维素含量的增加,共混纺丝溶液的黏度增加,得到的复合纳米纤维直径也增加,同时其吸水性也有较大的提高．     

再生细菌纤维素在NaOH/尿素/硫脲溶剂体系中的溶解性能研究

细菌纤维素经过LiCl／DMAc体系溶解再生后可溶于碱溶剂体系NaOH／尿素／硫脲混合液中．本实验研究了再生细菌纤维素在NaOH／尿素／硫脲溶剂体系中的溶解机理以及NaOH、尿素、硫脲的浓度对溶解性能的影响,从而得到该体系下的最佳溶解条件：NaOH质量分数7％,尿素质量分数8％,硫脲质量分数10％,预冷温度在-10℃以下．     

人参二醇类皂苷转化成C-K细菌的研究

为了得到把人参二醇类皂苷转化为C-K的特种人参皂苷糖苷酶,采用TLC、HPLC等酶活力检测方法对Arthrobacter sp.3,Rhodopseudomonas sp.18菌进行了菌种筛选.结果表明,该菌大豆汁培养基中25 ℃发酵主要产生将人参二醇类皂苷转化成Rg3的酶;35 ℃发酵主要产将人参二醇类皂苷转化成F2和C-K的酶.3号菌产酶发酵时间短,一般为2～4 d;18号菌发酵时间长,一般为4～8 d.     

人参二醇类皂苷转化成C-K细菌的研究

为了得到把人参二醇类皂苷转化为C-K的特种人参皂苷糖苷酶,采用TLC、HPLC等酶活力检测方法对Arthrobactersp.3,Rhodopseudomonassp.18菌进行了菌种筛选。结果表明,该菌大豆汁培养基中25℃发酵主要产生将人参二醇类皂苷转化成Rg3的酶;35℃发酵主要产将人参二醇类皂苷转化成F2和C-K的酶。3号菌产酶发酵时间短,一般为2~4 d;18号菌发酵时间长,一般为4~8 d。