β-葡萄糖苷酶对豆奶及豆奶粉中大豆异黄酮糖苷化合物的转化作用研究

对利用β-葡萄糖苷酶将豆奶及豆奶粉中生物有效性较低的异黄酮糖苷化合物转化为高活性的异黄酮糖苷配基化合物进行了试验研究。研究了不同浓度β-葡萄糖苷酶对豆奶及豆奶粉中大豆苷、乙酰大豆苷和丙二酰大豆苷的降解转化作用。结果表明,在β-葡萄糖苷酶浓度1.5U/mL、pH5.5、45℃保温1h的条件下,豆奶及豆奶粉中大豆苷、乙酰大豆苷和丙二酰大豆苷的总量分别降低了89.1%和89.5%,大豆黄素的含量分别增加了57.2和78.7倍;黄豆苷、乙酰黄豆苷和丙二酰黄豆苷的总量分别降低了93.2%和87.7%,黄豆黄素的含量分别增加了4.2和11.7倍;染料木苷、乙酰染料木苷和丙二酰染料木苷的总量分别降低了93.8%和82.4%,染料木黄酮的含量分别增加了5.2和23.0倍。试验结论:利用β-葡萄糖苷酶能够将豆奶及豆奶粉中生物有效性较低的异黄酮糖苷化合物高效转化为高活性的异黄酮糖苷配基化合物。     

热处理与大豆异黄酮苷元的转化分析

目的研究不同加热处理后大豆异黄酮苷元的含量和比例变化情况。方法大豆样品经烘箱50、100和150℃烘干,微波加热5min和炒熟等热处理后,由80%乙醇溶液超声提取,经高效液相色谱SB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm)分离,0.2%冰乙酸+甲醇溶液梯度洗脱,紫外检测器260nm检测苷元和β-葡萄糖苷型大豆异黄酮含量。结果黄豆中检测出黄豆苷元、染料木素2种苷元和黄豆苷、黄豆黄苷2种β-葡萄糖苷。随烘箱加热温度升高,黄豆苷元含量增加1～5倍;染料木素增加3～15倍。炒豆中苷元和β-葡萄糖苷增加量最多。微波加热与50℃烘箱加热结果基本相同。青豆、黑豆与黄豆结果相近。结论加热使豆粉中部分糖苷型大豆异黄酮分解转化为苷元,活性成分增多,营养保健价值提高。     

苦杏仁β-葡萄糖苷酶水解豆浆中大豆异黄酮的工艺研究

大豆异黄酮的生理活性主要靠异黄酮苷元来发挥,该试验研究在豆浆中添加苦杏仁β-葡萄糖苷酶对大豆异黄酮苷元的影响。采取高效液相色谱检测的方法,通过响应面优化试验,得到最佳组合为:加酶量为1.4 U/5mL,酶解时间40 min,酶解温度46.0℃。测得染料木素(Ge)、黄豆黄素(Gle)、大豆苷元(De)的含量分别为(38.643±2.03)、(5.119±0.275)、(36.954±1.67)μg/mL。     

高效液相色谱法快速测定大豆异黄酮制品中有效成分的研究

采用高效液相色谱法测定大豆异黄酮制品中染料木苷、黄豆苷、染料木黄酮和黄豆苷元含量.固定相为Agilent-1100 C18柱(3.9 x 150mm);以甲醇:水=35%～45%为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0～2.0mL/min;柱温为室温;检测波长为260nm.实验结果表明,市售30%大豆异黄酮制品中,含大豆异黄酮糖苷近28%,其中染料木苷为4%、黄豆苷为8%,苷元形式异黄酮未检出;采用酶水解法制备的大豆异黄酮水解物中含染料木黄酮14.3%、黄豆苷元9.8%,其大豆异黄酮苷元占大豆异黄酮总含量的96%.     

酶水解对大豆异黄酮粗提物中苷元含量的影响

采用β-葡萄糖苷酶水解的方法将大豆异黄酮糖苷转化为苷元,以染料木素和大豆苷元含量为指标,通过单因素试验对水解过程中的不同影响因素进行了考察。以染料木素含量为指标,运用正交试验优化了β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮的工艺条件为反应温度40℃、水解时间1.5h、水解介质pH4.5、水解底物浓度10mg/mL,在此条件下,水解得到的大豆异黄酮苷元中染料木素的含量可达到22.91%。     

丹贝异黄酮生物活性增强的机理研究

以少孢根霉RT-3孢子接种在含高浓度的大豆异黄酮提取物制成的发酵基质中，发酵36h后大豆异黄酮被部分水解成相应的苷元．用从丹贝中分离的β-葡萄糖苷酶与标准品染料木素糖苷和大豆苷元的糖苷作用10min，染料木素糖苷和大豆苷元的糖苷被水解成相应的苷元．结果表明：丹贝异黄酮生物活性增强是发酵剂RT-3孢子分泌的β-葡萄糖苷酶将异黄酮由糖苷水解成苷元，而苷元比糖苷有更强的活性．     

丹贝异黄酮的提取分离与结构鉴定

从丹贝中分离纯化了 3种异黄酮 ,它们分别是染料木素、大豆黄素、黄豆黄素 ,而未分离到 6 ,7,4’ -三羟基异黄酮。丹贝中异黄酮的组成主要是各种苷元 ,证明丹贝生物活性的提高是由于异黄酮由糖苷水解成苷元所致。同时还发现 ,使用甲醇作溶剂在分离纯化过程中可能使染料木素转变成黄豆黄素     

里氏木霉β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮糖苷的工艺研究

研究了里氏木霉β-葡萄糖苷酶的酶学性质,及其水解大豆异黄酮糖苷能力.该酶反应的最适温度为50℃,最佳pH为5.0;此酶在pH 4.5～5.5之间和低于60℃下酶较稳定,在80℃基本无活力.采用里氏木霉β-葡萄糖苷酶水解的方法,将大豆异黄酮糖苷转化为苷元,以染料木苷水解率为检测指标.通过正交试验确定了该酶水解大豆异黄酮的工艺条件为反应温度50℃、水解时间90 min、水解介质pH4.5、加酶量20U,大豆异黄酮中染料木苷的水解率为99%.     

酶法提高豆浆中大豆异黄酮苷元含量的工艺研究

试验研究了橡胶籽β-葡萄糖苷酶对豆浆中大豆异黄酮的影响。试验表明,响应面优化水解反应的最佳组合为:加酶量4.34 U/5 mL,反应时间2.50 h,反应温度44.98℃。根据最佳水解工艺,测得的大豆苷元(De)、黄豆黄素(Gle)、染料木黄酮(Ge)的质量浓度分别为37.633±1.71, 6.212±0.53和54.337±2.11μg/m L。     

大豆异黄酮水解物制备及放大实验

用发酵黑曲霉得到的β-葡萄糖苷酶水解40%的大豆异黄酮粉,通过正交实验确定最佳水解条件为:加酶量100u,底物浓度20mg/mL,50℃,水解1h。将水解液降温至4℃,4000r/min离心分离30min,离心后沉淀物在-18℃下预冻,于-40℃冷冻干燥,得到固态大豆异黄酮苷元,经检测苷元转化率90.12%、大豆皂苷3.87%、大豆异黄酮94.36%、大豆苷元43.45%、染料木素46.26%。放大实验结果:苷元转化率78.56%、大豆皂苷4.93%、大豆异黄酮88.97%、大豆苷元36.47%、染料木素38.81%。     

硅胶柱层析法分离大豆异黄酮苷元的研究

利用硅胶柱层析分离大豆异黄酮苷元.通过丙酮萃取大豆异黄酮后,经硅胶柱层析可以分离得到染料木素、大豆素、黄豆黄素3种大豆异黄酮苷元异构体.经HPLC检测3种物质的纯度均超过90%.     

淡豆豉、黄大豆及黑大豆中异黄酮苷元的提取与含量比较

为探讨淡豆豉、黄大豆及黑大豆中异黄酮苷元的提取与含量,本研究采用超声提取,用β-葡萄糖苷酶酶解大豆异黄酮中的糖苷键.以聚酰胺薄膜层析定性、HPLC定量检测不同原料中异黄酮苷元含量.实验结果表明,HPLC最佳流动相为甲醇-乙酸-水(12:1:10),染料木苷、大豆苷元和染料木素在20min内分离良好.大豆异黄酮苷元含量依次为:淡豆豉>黄大豆>黑大豆.精密度实验RSD分别为1.45%和1.6%,平均加样回收率100.93%,证明实验所建立的检测方法准确、可靠.     

北京地区不同大豆品种异黄酮含量比较研究

异黄酮是大豆生长过程中自然产生的化学物质,被认为可以治疗和预防一些人类依赖激素的疾病.为比较北京地区生态条件下大豆品种间异黄酮含量的差异性,对53个品种种子中3种异黄酮(大豆苷元、染料木素和黄豆黄素)进行测定和分析.结果表明,品种间异黄酮含量存在较大多样性,大豆苷元为39.21～2 363.65 μg/g,染料木素为77.35～1 149.50 μg/g,黄豆黄素为0.0～51.30μg/g,3种异黄酮总量为146.73～2 845.60 μg/g.来自山西和山东品种的异黄酮含量显著高于其他地区的品种.异黄酮总量分别与大豆苷元和染料木素呈极显著正相关,而大豆苷元和染料木素之间没有互作.因此,可以利用高含量大豆苷元或染料木素材料选育高异黄酮品种.     

酶法提高豆浆中大豆异黄酮苷元浓度的工艺研究

试验利用黑曲霉β-葡萄糖苷酶处对豆浆进行水解处理,将结合型大豆异黄酮糖苷转化为游离型苷元。选大豆为原料,以单因素实验为基础,考察加酶量、反应时间、反应温度三个因素对豆浆中大豆异黄酮糖苷水解的影响;根据Box-Behnken实验设计原理,选取不同加酶量、反应时间、反应温度3因素3水平进行中心组合实验,建立豆浆中大豆异黄酮苷元含量的多项式回归预测模型,确定了最佳工艺参数。结果表明,最佳水解工艺条件为:加酶量0.028 U/5 mL,反应时间1.64 h,反应温度53.82℃,在此条件下制得豆浆大豆异黄酮苷元含量明显提高。测得大豆苷元(De)、黄豆黄素(Gle)、染料木素(Ge)的浓度分别为39.434±1.410μg/m L、4.626±0.462μg/m L、45.851±2.098μg/m L。而大豆苷元(De、)黄豆黄素(Gle)、染料木素(Ge)浓度的响应面预测值分别为40.905μg/m L、4.263μg/m L、48.441μg/m L,测定值与模拟值接近。优化后的工艺条件合理、可行,能明显提高豆浆中大豆异黄酮苷元的含量。     

β-环糊精对豆浆中异黄酮苷原热稳定性的影响

对β-环糊精对豆浆中的三种异黄酮苷原(黄豆苷原(daidzein)、大豆黄素(glycitein)和染料木黄酮(genistein))的热稳定性的影响进行了研究.结果表明用HPLC 分析时,流动相的配比为甲醇:5%冰乙酸＝40:60(V/V)时,标样及样品溶液的HPLC色谱分离效果最好.添加1% β-环糊精能提高豆浆中三种异黄酮苷原的热稳定性; 95 ℃处理10 min后,添加β-环糊精的豆浆中黄豆苷原含量比未添加的豆浆增加8.89%,大豆黄素增加13.81%,染料木黄酮增加9.75%;121 ℃处理1 min后,添加β-环糊精的豆浆中上述三种异黄酮苷原含量比未添加的豆浆分别增加9.59%、8.77%、2.45%; 140 ℃处理10 s后,则分别增加8.90%、11.92%、6.69%.     

乳酸菌β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮的研究

利用乳酸菌液态发酵得到一种高活性的大豆异黄酮水解酶--乳酸菌β-葡萄糖苷酶,通过单因素试验及正交试验优化了乳酸菌β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮的条件.正交试验结果显示,当加酶量为25 μg/mL,水解温度50℃,水解时间2.0 h,pH 6.0时,黄豆苷水解率可达96.51%;在加酶量为25 μg/mL,水解温度40℃,水解时间2.0 h,pH 5.5时,染料木苷水解率为92.36%.     

不同大豆种质种皮黄酮类色素的差异分析

为探究大豆种皮中黄酮类色素的含量和分布规律,选取167份大豆种质资源为实验材料,利用高效液相色谱(HPLC)法对大豆种皮黄酮类色素含量进行测定。结果表明：大豆种皮花色苷组分中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷含量最多,异黄酮组分中大豆苷含量最高。花色苷组分在野生和半野生大豆种皮中高于栽培大豆。异黄酮组分中染料木苷在野生大豆中最高,黄豆黄苷在半野生大豆中最高,其他组分在栽培大豆中最高。栽培大豆黑色种皮花色苷组分、染料木苷和大豆苷元含量最高,青色种皮大豆苷和黄豆黄苷含量最高,双色种皮黄豆黄素含量最高。相关分析表明3类结合型糖苷内部、3类游离型苷元内部、3种花色苷组分内部两两相关极显著。大豆苷与游离型苷元、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷相关显著。聚类分析将大豆材料划分为三大类群,第一类群除黄豆黄苷和飞燕草素-3-O-葡萄糖苷外,其他色素组分含量均最高,为黄酮类色素的研究和利用提供参考。     

食品胶对豆浆中活性成分异黄酮苷元热稳定性的影响

研究了羧甲基纤维素钠(CMC)、海藻酸钠、黄原胶等食品添加剂对豆浆热处理过程中活性成分异黄酮苷元热稳定性的影响.高效液相色谱分析表明,CMC、黄原胶、海藻酸钠都能减少黄豆苷元、大豆黄素、染料木黄酮三种异黄酮苷元的热损失,其中CMC效果最理想,海藻酸钠次之,黄原胶最差.食品胶的复配能够减少豆浆中异黄酮苷元热损失.CMC/海藻酸钠组合明显好于CMC/黄原胶和黄原胶/海藻酸钠两种组合,当CMC/海藻酸钠=3:2时,在热处理条件为95℃,lOmin条件下,各异黄酮苷元热损失最少,黄豆苷元含量提高9.83%,大豆黄素12.67%,染料木黄酮18.63%.在三种食品胶共同复配组合中,CMC/黄原胶/海藻酸钠(4:3:3)组合的效果最好,黄豆苷元含量提高9.3%,大豆黄素10.13%,染料木黄酮18.26%.     

豆浆热处理过程中3种大豆异黄酮苷原的热降解比较

将大豆加工成豆浆并分别用95、121和140℃处理不同时间，以高效液相色谱（HPLC）法检测其中的3种大豆异黄酮皆原，染料木黄酮（genistein）、黄豆苷原（daidzein）和大豆黄素（glycitein）的含量变化，与原粒大豆、生豆浆进行比较。结果发现，染料木黄酮、黄豆苷原和大豆黄素的热稳定性存在较大差异，在95℃下，染料木黄酮在60min的处理时间内稳定，而黄豆苷原和大豆黄素的T（loss0.5）值（损失50％含量的时间）分别为1442s和453s，表明95℃下3种大豆异黄酮的热稳定性表现为：染料木黄酮〉黄豆苷原〉大豆黄素。而在121℃和140℃的处理条件下，3种大豆异黄酮苷原均随着处理时间的延长而出现不同的热降解，黄豆苷原、大豆黄素和染料木黄酮在121℃的T（loss0.5）值分别为26．36、37．88和1015s，而在140℃下，黄豆苷原、大豆黄素和染料木黄酮的T（loss0.5）值则分别缩短为6．94、8．47和369s，结果表明在121℃和140℃下，3种大豆异黄酮的热稳定性表现为：染料木黄酮〉大豆黄素〉黄豆苷原。     

霉菌型豆豉和纳豆中异黄酮含量的比较研究

目的:比较纳豆和豆豉中异黄酮含量的组成变化。方法:利用超声波提取,采用高效液相色谱法测定,色谱柱填料为Hypersil ODS2(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-水(B)进行梯度洗脱,检测波长为255 nm。结果:豆豉与纳豆相比较,豆豉中大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆甙元、黄豆黄素、染料木素的含量分别为11,未检出,25,320,65,380μg/g;纳豆中中大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆甙元、黄豆黄素、染料木素的含量分别为330,73,410,12,3.3,28μg/g。结论:豆豉中甙元的含量高,纳豆中糖苷的含量高。