青稞源ACE抑制糖肽结构及其稳定性研究

为制备一种血管紧张素转换酶（ACE）抑制糖肽并研究其结构及稳定性，选用嗜热链球菌和米根霉混合发酵青稞，单因素和响应面法优化发酵条件，凝胶色谱、高效液相色谱（RP-HPLC）分离纯化，红外光谱和β-消除法分析其结构，考察ACE抑制糖肽物理化学和体外胃肠模拟消化稳定性。结果表明：料液比1:15.5（g/mL），接菌量为2.4%，嗜热链球菌：米根霉为1:1，发酵时间为6.4 d，ACE抑制率达65.79%；Sephadex G-15分离获得的A2组分ACE抑制活性最高（IC50 = 2.0 mg/mL）；RP-HPLC分离得到的ACE抑制糖肽纯度达95.17%；ACE抑制糖肽具有糖和多肽的典型结构，糖苷键类型为O-糖肽键；高温、强碱、高NaCl含量及体外胃肠模拟消化显著影响ACE抑制糖肽活性。因此，青稞源ACE抑制糖肽有望用于开发降血压功能性食品。     

醪糟发酵液对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

通过一系列功能性实验，对醪糟发酵液的抗老年性痴呆、抗氧化、降血压、降血糖等作用进行了初步研究，发现醪糟发酵液抑制血管紧张素转换酶和α-葡萄糖苷酶的作用确切而且明显，具有潜在的降血压和降血糖作用。然后，主要研究了不同产地、不同发酵时间的醪糟发酵液以及它们在不同的稀释度下对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，并排除了乙醇的抑制作用。发酵液经灭活、离心处理，用p-NPG（α-葡萄糖苷对硝幕苯酚）法测定α-葡萄糖苷酶的活性。结果表明，在原浓度下，不同产地的醪糟发酵液对α-葡萄糖苷酶的抑制效果基本相同；在醪糟发酵的过程中，发酵液对α-葡萄糖苷酶的抑制效果保持稳定，均在60％以上，且在发酵的第60-66h内抑制效果最好。此外，不同稀释度下的醪糟发酵液对α-葡萄糖苷酶的抑制效果不同，随着其浓度的增大，醪糟发酵液的抑制效果明显增强。这说明醪糟发酵液埘α-葡萄糖苷酶具有稳定的抑制作用（由于篇幅有限，降血压作用另作介绍）。     

南瓜醪糟发酵液对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

以糯米和南瓜为原料,安琪酒曲为发酵菌剂,采用半固态发酵法制作南瓜醪糟,比较分析南瓜醪糟与纯米醪糟对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,研究发酵液不同稀释倍数、发酵时间、南瓜加入量对α-葡萄糖苷酶抑制作用的影响,同时测定南瓜醪糟的部分理化指标。结果表明,南瓜醪糟发酵液对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,原液抑制率可达80%以上,且抑制活性较纯米醪糟发酵液强;发酵液不同稀释倍数、发酵时间及南瓜加入量对α-葡萄糖苷酶的抑制作用均有极显著影响,发酵时间为48h时,抑制效果最好,南瓜加入量以米∶南瓜2∶1(g/g)为宜;南瓜醪糟中多糖为2.87 mg/g,还原糖为3.88%,V_C为0.024 mg/100 g,蛋白质为0.071 2mg/g,酒精为2mL/g,pH为3.75。     

双齿围沙蚕β-1,3-葡萄糖苷酶分离纯化及其酶学性质

从双齿围沙蚕中提取、分离纯化β-1,3-葡萄糖苷酶,并研究其酶学性质。通过80%饱和度(NH4)2SO4沉淀从双齿围沙蚕中得到粗β-1,3-葡萄糖苷酶,粗酶依次经DEAE-52离子交换层析、Sephadex G-100凝胶过滤层析进行分离纯化。酶纯化倍数为35.74,回收率为39.49%。SDS-PAGE检测表明其分子量为28.7 k Da。该酶最适温度为50℃,最适p H为7,Km为8.2×10-4mol/L,Vmax为3.2×10-4μmol/h。金属离子K+、Mg~(2+)、Fe~(2+)、Ba~(2+)、Ca~(2+)对β-1,3-葡萄糖苷酶酶活力影响较小,Al~(3+)、Cu~(2+)、Zn~(2+)、Ag~+对β-1,3-葡萄糖苷酶酶活力抑制较大,其中Zn~(2+)抑制作用最强。双齿围沙蚕可作为β-1,3-葡萄糖苷酶的潜在来源。     

乳酸菌β-葡萄糖苷酶的分离纯化及特性研究

本文采用硫酸铵分级沉淀、DEAE-52离子交换层析、Sephadex G-100凝胶过滤方法分离纯化乳酸菌中β-葡萄糖苷酶.经SDS-PAGE测定其相对分子量约为60kD.该酶以对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷为底物时,最适pH值和最适温度分别为6.0和40℃.在45℃以下,pH值在4.5～7.0之间酶活力相对稳定.Hg^2＋和Ag^＋对该酶活力有明显的抑制作用.     

一株细菌发酵大豆的α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

研究了不同菌株发酵大豆的α-葡萄糖苷酶抑制活性,与纳豆菌、米曲霉、黑曲霉和红曲霉菌株相比,细菌菌株SY07发酵大豆表现出对α-葡萄糖苷酶的强抑制作用。SY07菌株发酵大豆过程中,随着微生物代谢活动的增强,样品逐渐呈现α-葡萄糖苷酶抑制活性,12h发酵样品的抑制率为37.93%,发酵24,36,48h抑制率无明显差异,约为50%,发酵12,48h样品的IC50值分别为5.077,2.079mg/mL。SY07菌株具有优良的产α-葡萄糖苷酶抑制剂的潜能,可望应用于新型降血糖功能性发酵大豆食品或调味品的研发。     

豌豆发酵液对莲藕多酚氧化酶的抑制作用及机理

研究了豌豆发酵液(PFB)对莲藕多酚氧化酶(PPO)活性的影响及其机理。采用硫酸铵分级沉淀,DEAE-52和Sephadex G-75柱层析纯化莲藕PPO,测定PFB对PPO的抑制动力学和圆二色谱。结果表明,所得PPO纯化酶纯化倍数、比酶活和蛋白质回收率分别为99.71倍,2 627.36 U/mg和1.85%;PFB(4.0 mg/m L)对PPO的抑制率高达98.65%,其半抑制质量浓度IC50为1.81 mg/m L,对PPO的抑制为竞争性可逆抑制;莲藕PPO蛋白3级结构为全α型,2级结构主要由α-螺旋和无规卷曲构成,PFB作用后α-螺旋含量显著减少,β-折叠含量显著增加。豌豆发酵液是天然有效的多酚氧化酶抑制剂,通过改变酶的2级结构发挥抑制作用。本研究结果为莲藕保鲜提供了新的途径。     

醪糟发酵液对α-葡萄糖苷酶抑制作用及其性质研究

醪糟发酵液能够抑制α-葡萄糖苷酶的活性。醪糟发酵液经离心分离去除可见颗粒,初步研究得知,醪糟发酵液中抑制α-葡萄糖苷酶的物质热稳定性好,pH适应范围广;随着醪糟发酵液浓度的不断增大,对α-葡萄糖苷酶的抑制作用也明显增加;当两者刚混合时,其抑制率达到74%,说明抑制剂与酶亲合速率很快;其抑制动力学试验表明,抑制成分的抑制类型属竞争性抑制,Km=2.343×10-3mol/L。结果表明其作用特点与药物拜糖平类似。     

雅津蛋白桑多糖的分离纯化及生物活性研究

采用纤维素酶法提取桑叶多糖,通过单因素试验和正交试验,确定最优提取工艺参数;并采用Sephadex G-100型葡聚糖凝胶进行初级纯化,比较纯化前后多糖的抗氧化能力和α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明,纤维素酶法提取的最优工艺为提取液pH 6.0、酶解温度50℃、酶浓度1.0%、酶反应时间50min;纯化后的桑叶多糖具有更高的总抗氧化能力、DPPH·和·OH清除能力;但纯化后的桑叶多糖对α-葡萄糖苷酶抑制效果低于纯化前的。优选得到的纤维素酶法提取桑叶多糖工艺具有较好的提取效果,且纯化后的桑叶多糖具有更强的抗氧化活性。     

产α-葡萄糖苷酶抑制剂菌株筛选及固态发酵条件优化

为了探索制备含有α-葡萄糖苷酶抑制剂的降血糖功能性食品的新方法,从传统发酵食品中筛选产α-葡萄糖苷酶抑制剂的菌株,以价廉的农产品加工副产物豆渣为原料,以α-葡萄糖苷酶抑制活性为考察指标,研究菌株固态发酵豆渣的发酵条件。结果表明:细菌5具有较好的产α-葡萄糖苷酶抑制剂能力;接种量及豆渣品种对α-葡萄糖苷酶抑制活性影响不明显,当接种量大于2%时,发酵豆渣提取液的α-葡萄糖苷酶抑制活性均在50%以上,不同品种的发酵豆渣α-葡萄糖苷酶抑制活性均在50%~57%之间;在豆渣含水量80%,初始pH6~8,发酵温度40℃的条件下发酵48h,发酵豆渣表现出较高的α-葡萄糖苷酶抑制活性。以细菌5发酵豆渣获得降糖功能食品,可以大大提高豆渣的利用价值,为降糖功能食品的开发利用开辟新途径。