肠杆菌酸性脲酶的提取及基本特性

采用超声破碎和乙醇分级沉淀的方法,对肠杆菌所产酸性脲酶的提取进行了研究,超声破碎最佳条件为:缓冲液pH6.0,湿菌体(质量)︰缓冲液(体积)=1∶5,功率300W,处理时间10min,乙醇分级较好浓度范围为30%～50%;研究乙醇分级后粗酶的基本特性,结果表明,粗酶液的最适温度75℃,温度稳定范围75℃以下,最适pH5.5,pH稳定范围为pH4.0～ pH6.5;粗酶在黄酒中的应用结果表明,在30℃下添加量为0.05U/mL时,24h后尿素去除率可达70%以上。     

肠杆菌酸性脲酶的提取及基本特性

采用超声破碎和乙醇分级沉淀的方法,对肠杆菌所产酸性脲酶的提取进行了研究,超声破碎最佳条件为:缓冲液pH6.0,湿菌体(质量)︰缓冲液(体积)=1∶5,功率300W,处理时间10min,乙醇分级较好浓度范围为30%～50%;研究乙醇分级后粗酶的基本特性,结果表明,粗酶液的最适温度75℃,温度稳定范围75℃以下,最适pH5.5,pH稳定范围为pH4.0～ pH6.5;粗酶在黄酒中的应用结果表明,在30℃下添加量为0.05U/mL时,24h后尿素去除率可达70%以上。      

包埋吸附法固定化酒用酸性脲酶的研究

用包埋吸附法固定化酒用酸性脲酶,探讨了固定化的条件、固定化酶的部分性质以及固定化酶在黄酒中的应用。结果表明:固定化酒用酸性脲酶的最适海藻酸钠浓度、CaCl2质量浓度和壳聚糖浓度分别为2.0、5.0和0.3g/dL,最适固定化时间为2.5h,固定化率为82.3%;最适反应温度40℃、最适pH4.0、半衰期为48d,固定化酶的比活为3.6U/mg;在35℃下添加量为0.1g/mL(固定化酶质量/黄酒体积),24h内黄酒尿素去除率达65%,同样条件下连续使用去除黄酒中尿素,使用13次时尿素去除率达39.7%。     

酸性脲酶分解黄酒中尿素特性的研究

对酸性脲酶在不同的温度、用量、时间及酒体pH值下分解黄酒中尿素的酶解特性进行了研究。结果表明：当酒体pH值〉4．0，温度15℃～20℃，酶用量30mg／L左右，作用时间48h后，可除去黄酒中约80％的尿素。     

酒用酸性脲酶的纯化及其N端序列的测定

采用乙醇分级沉淀、Superdex200凝胶过滤、Mono Q离子交换对Enterobactria sp R-SYB082产酒用酸性脲酶进行了纯化.SDS-PAGE电泳结果表明,该酶已达到电泳纯,纯化倍数为21.1,酶活回收42%.Superdex200凝胶过滤测定其全酶相对分子质量约为430 000,SDS-PAGE电泳测定其亚基相对分子质量约为72 000,表明该酶为同源六聚体,并利用Edman降解法测定了蛋白质N端序列的8个氨基酸残基序列:S-F-K-M-D-R-K-Q.酶反应的最适pH为4.5,最适温度为35℃.以尿素为底物时,该酶表现Km及Vmax分别为19.5μmol/L和0.87μmol/min.Na 、Mn2 对酶活有一定的激活作用,Ca2 、Zn2 对酶活有一定的抑制作用,酒石酸、琥珀酸对酶活有一定的激活作用,草酸、乙酸对酶活有一定的抑制作用.     

高产酸性脲酶菌株的分离、筛选与鉴定

为了筛选高产酸性脲酶菌株,通过酸性平板的初筛和中性平板的复筛,从土壤中分离到17株产酸性脲酶的菌株。通过比较它们所产酸性脲酶的活性,确定了产酶能力最强的菌株ZJU-5,发酵液中酸性脲酶活性可达(17.17±0.185)U/mL。为了了解该菌株的特性,通过生理生化方法及16SrDNA分子生物学方法对ZJU-5进行鉴定,结果表明ZJU-5为肺炎克雷伯氏菌。     

脲酶电极法检测食品中尿素

自1967年Clpdike和Hicks首先提出了酶电极这一概念之后[1],由于酶电极具有高度专一、灵敏和简便快速等特点,很快就受到广泛的重视,并得到多方面的研究和应用。20多年来,酶电极的性能有了很大的提高,应用范围也日益扩大,目前,国外已广泛应用于临床分析、食品、发酵工业及环境监测等领域。     

脲酶电极快速定量分析牛乳中的尿素

将脲酶共价结合于尼龙网上,制备成脲酶电极。用该电极定量检测牛乳中的尿素,其线性响应浓度范围为1.9×10~(-5)～1.0×10~(-3)g/ml,检测下限为6.3×10~(-6)g/ml,极差为52±2mv,一天内测定的CV值小于4％。测定一个样品只需3～4min,方法特异性好,灵敏度高。目前,社会上有些不法奶户利用人们对牛奶迫切需求的心理,为牟取暴利,见利忘义,往往在牛奶掺水后,为提高牛奶的比重,在掺水牛奶中再加入化肥尿素。经试验,每公斤牛奶加4g尿素可使其比重增加0.001。为确保鲜乳质量,保障消费者的健康,各鲜奶收购和检测部门迫切需要一种快速、简便而准确的尿素检验法。以前的尿素检测方法多非特异性且多定性的,干扰较多,方法复杂。为此,本文将介绍脲酶电极法。该法可快速定量地测定鲜奶中掺杂尿素的含量,且方法简便、灵敏、专一性好。     

酸性脲酶产生菌诱变育种、产酶条件及粗酶提取的研究

从土壤中分离到一株产酸性脲酶的菌株，该菌株经紫外线（UV）照射，硫酸二乙酯（DES）处理，UVDES复合诱变及培养条件优化，酶活达到2.26u/mL，经诱变后的菌株，在pH6.5、温度28－30℃、尿素深度为5g/100mL时产酶最佳。Ni^2 、Mn^3 对产脲酶有促进作用；Ca^2 、Cu^2 、Zn^2 、Al^3 对产脲酶没有影响；Fe^3 、Ag^ 对产酶有抑制作用，Hg^2 对产酶有强抑制作用，该菌株所产脲酶为胞内酶，经超声波破碎后，用pH6.5，浓度0.05M柠檬酸缓冲液抽提，再用乙醇分级沉淀法获得粗酶液。     

响应面法优化肺炎克雷伯氏菌产酸性脲酶发酵培养基

为了提高酸性脲酶的酶活力,设计响应面方法优化酸性脲酶产生菌肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumonia ssp.)的发酵培养基.通过部分因子试验,从8种成分中筛选对酸性脲酶活性有显著影响的组分,再利用中心组合试验进一步优化培养基组成.试验结果表明,蛋白胨和KH2PO4对酸性脲酶活性有显著影响,优化后的培养基组成(g/L):葡萄糖8,酵母膏1.8,NaCl 5,尿素8,Na2HPO40.9,MgSO40.2,蛋白胨6.015.在此条件下,模型预测发酵液中酸性脲酶酶活力可达28.74U/mL,比优化前酶活提高了67%.     

咖啡酸激活酪氨酸酶催化反应的动力学研究

在30℃,pH6.8的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲体系中,采用酶动力学方法研究了咖啡酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的激活效应.实验结果表明,咖啡酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有激活作用,对单酚酶和二酚酶活力的相对激活率达到50%的咖啡酸浓度(IC50)分别为0.27mmol/L和1.35mmol/L.咖啡酸能消除单酚酶催化反应的迟滞时间,对二酚酶的激活作用表现为混合性激活,当咖啡酸浓度为0、0.50、1.0、1.50mmol/L时,米氏常数Km分别为0.31、0.25、0.20、0.15mmol/L.     

壳聚糖吸附亚硒酸的动力学研究

研究了壳聚糖对亚硒酸的吸附性能,测定了吸附等温线和吸附动力学曲线。实验结果表明壳聚糖对亚硒酸有较强的吸附能力,吸附容量受pH值影响较大,其吸附行为符合Langmuir单分子层吸附模型。紫外和红外光谱分析结果也表明壳聚糖与亚硒酸之间发生的是简单的物理吸附作用,而非配合反应。     

Acid Urease: Reduction of Ethyl Carbamate Formation in Sherry under Simulated Baking Conditions

Acid urease derived from Lactobacillus fermentum was applied to reduce ethyl cthe target level (90 μg/L). However, complete prearbamate (EC) formation in California sherry production. Commercial sherry and sherry base were treated with urease under different conditions. Amounts of urea were determined and EC amounts were monitored by gas chromatography. Urea removal by acid urease reduced EC formation during the baking process and effectively maintained EC concentrations below vention of EC was not achieved because of precursors other than urea.     

塑料薄膜包装材料的渗透反应动力学研究

塑料薄膜包装材料渗透反应动力学研究渗透机理和与渗透速度相关的动力学因素,主要讨论了热力学温度与渗透系数、渗透速度的关系,并探索了塑料薄膜包装材料阻隔性能计算的理论和实用问题.     

含脂肪链段共聚聚酰胺酸环化过程研究

本文采用升温红外光谱研究了含脂肪链段(1,6-己二胺)共聚聚酰胺酸的热环化动力学。研究发现整个热环化过程表现为明显的两个阶段:初期的快速阶段和后期的慢速阶段,即存在明显的"动力学中断"现象。动力学计算结果表明,其环化的速率常数随着脂肪链段比例的增加而增加。     

蓝莓汁抗坏血酸体系非酶褐变反应动力学

通过构建蓝莓汁抗坏血酸非酶褐变体系,测定蓝莓汁在贮藏（4、25 ℃和37 ℃）过程中的相关指标,并相应分别用零级、一级和复合动力学模型拟合。结果表明：褐变指数（A420 nm）符合复合动力学模型;贮藏过程中抗坏血酸不断降解,符合一级动力学模型;5-羟甲基糠醛含量的变化符合零级动力学模型。根据Arrhenius方程进行线性拟合,反映各指标随温度变化情况,在各贮藏温度下5-羟甲基糠醛的产生与褐变指数的变化呈现良好线性关系（R2≥0.949）。     

棉织物聚合-交联体系的酯化反应动力学

研究了对马来酸/衣康酸及马来酸聚合-交联体系的酯化反应动力学,按照一级反应的设定,分别计算了MA/IA和MA聚合-交联整理体系酯化反应的反应速率常数、活化能、频率因子等动力学参数.所得动力学数据能够较好地解释整理品性能的差异.