含RGD序列多肽的~(188)Re标记及其生物分布

以fac-[188Re(CO)3(H2O)3]+为前体标记了含RGD的环状多肽H-c(RGDyK)(Pc1):75℃下反应30 min即可得到标记率和放化产率大于90%的目标产物188Re(CO)3-Pc1。此标记物在小牛血清及磷酸缓冲液(pH=7.4)中稳定性良好,Pc1对U87 MG细胞有良好的亲和力,半抑制常数(IC50)为84.9 nmol/L。生物分布数据显示,188Re-Pc1在血液内清除较快,且通过肝胆和肾代谢排出体外;在肿瘤内有一定的摄取。     

~(188)Re-DTPA的制备及生物分布研究

以SnCl2·2H2O为还原剂,还原188ReO-4并与DTPA直接配合获得188Re DTPA,优化了标记反应条件;对188Re DTPA和Na188ReO4在正常小鼠体内分布进行了比较。实验结果表明,在最佳标记条件下,188Re DT PA的标记率大于95%;标记物体外稳定,经生理盐水稀释后,其稳定性下降。188Re DTPA在小鼠体内血液清除快,在甲状腺、胃及其它组织中的摄取率明显低于Na188ReO4,主要经肾脏通过尿液排出体外。     

直接法制备188Re-碘化油

探讨直接法制备188Re-碘化油的实验条件及标记物性质.在温度为75～120℃和不同实验条件下,直接标记法制备188>Re-碘化油,观测标记物标记率在室温和37℃人血浆体系中随时间的变化情况;采用红外光谱仪分析标记对碘化油分子结构的影响;用肿瘤模型动物显像验证碘油对188Re的包埋效果,以及在生物体内的稳定性半定量分析.直接法制备188Re-碘化油,在最佳标记条件下,标记物标记率可达(99.1±0.4)%;标记物在室温和37℃人血浆体系中放置3 d,标记率可保持在(90.9±1.9)%和(92.8±1.2)%.红外光谱结果显示本标记方法不改变碘化油的分子结构;荷S180骨肉瘤鼠显像表明,瘤内注射标记物48 h后,肿瘤部位仍有明显的放射性浓聚.188Re直接标记碘化油易于操作,标记物标记率高,体外稳定性好,碘油对放射性核素铼的包裹效果良好.     

Lanreotide的188Re标记及其生物分布

以氯化亚锡为还原剂，酒石酸钠为转换络合剂，用188Re直接标记了Lanreotide；并观察了标记物在动物体内的分布，结果表明，标记反应的最佳条件是：10μg Lagreotide,1.5mg酒石酸钠，1．0mg氯化亚锡和100μL（74MBq)^188ReO4^-溶液，调反应液pH2-3.60℃下反应40min，标记率为88％－94％，标记物经Sep-Pak C18柱纯化，放化纯度大于95％；标记物的体外稳定性较差，但加入一定量的Vc可以提高其稳定性；动物实验表明，^188Re-lanreotide在肠和肺中的摄取量较高，血液清除速度较快，并经肝脏代谢。     

MAG3在放射性金属标记应用中的最新研究进展

综述了利用巯乙酰基三甘氨酸(MAG3)标记的多肽的生物学特性。经MAG3形成的^99Tc^m标记物的标记率和比放射性高,体内稳定性好,与血清蛋白的非特异性结合低;经MAG3形成的^186/188Re标记物也具有良好的体内外稳定性。     

~(188)Re-AEDP的标记条件研究

用18 8 W / 188Re发生器淋洗得到的188Re研制具有潜在临床应用价值的骨疼痛治疗剂188Re -AEDP。研究了在不同配体用量、亚锡含量和 pH条件下 ,载体用量对标记率和稳定性的影响。实验结果表明 :在最佳条件 (pH1.10 ,AEDP 2 0mg/mL ,氯化亚锡 2mg/mL ,抗坏血酸 3mg/mL)下 ,用无载体188Re标记的188Re -AEDP的标记率为 90 %— 93% ;标记后调 pH为 6 ,2 4h后放化纯度为70 % ;而用含一定量载体的188Re标记的标记率为 95%— 98% ,标记 2 4h后放化纯度为 93%。     

^188Re—AEDP的标记条件研究

用^188W/^188Re发生器淋洗得到的^188Re研制具有潜在临床应用价值的骨疼痛治疗剂^188Re-AEDP。研究了在不同配体用量、亚锡含量和pH条件下,载体用量对标记率和稳定性的影响。实验结果表明：在最佳条件（pH1.10,AEDP20mg/mL,氯化亚锡2mg/mL,抗坏血酸3mg/mL)下,用无载体^188Re标记的^188Re-AEDP的标记率为９０％－９３％;标记后调pH为6,24h后放化纯度为70％;而用含一定量载体的^188Re标记的标记率为95％－98％,标记24h后放化纯度为93％。     

碘标记bcl-2反义寡核苷酸的研究及其稳定性与生物分布的评价

为了建立Iodogen直接法碘标记反义寡核苷酸(ASON)方法,评价探针的稳定性及生物分布特征。用Iodogen对15merbcl-2mRNA的反义寡核苷酸进行直接标记,SephadexG-25凝胶柱纯化,测定标记率和纯度,评价标记ASON的稳定性。在BALB/c裸鼠及荷CNE2瘤小鼠中研究其生物分布特征。结果显示:1)在适当条件下,本法标记率可达85%,放射性纯度为90%,放射性比度为4.77×105Bq/μg(ASON)。2)标记ASON室温下96h保持较稳定,但新鲜血浆下部分分解。3)标记ASON在大多数组织器官中的放射性活度随时间减少迅速,大多数曲线呈示踪剂为两相分布。30min时胃肠道和甲状腺放射性浓集明显,提示标记探针体内不稳定。肿瘤对探针的摄取较少,免疫组化证实肿瘤组织bcl-2表达极低。结果表明Iodogen直接法碘标记反义寡核苷酸(ASON)方法简单可靠,可获得标记率高、纯度较高且稳定性较好的标记探针,但碘标寡核苷酸在体内因核酶的分解而稳定性较差。     

188Re标记抗人前列腺癌单克隆抗体及其在荷瘤裸鼠体内的放射性分布

为探讨188Re标记抗前列腺癌单克隆抗体7E11C5.3的方法及其生物学分布,采用2-巯基乙醇直接还原法制备188Re-7E11C5.3标记物,常规测定标记率和免疫活性,在荷瘤裸鼠体内检测标记物的生物学分布.结果显示,188Re-7E11C5.3的标记率为(93.16±2.18)%,免疫活性分数为(74.86±1.86)%;经尾静脉注入裸鼠体内后,肿瘤组织摄取率在24h达高峰,非肿瘤组织在4h摄取率较高,以后均随时间延长逐步降低;血液放射性清除迅速;24h时T/NT值达最大,至72h仍可保持在较高水平.结果表明,188Re-7E11C5.3在裸鼠体内对前列腺癌移植瘤有良好的靶向定位作用,可用于前列腺癌放射免疫显像和治疗研究.     

无载体188Re标记氟哌酸的研究

用188W/188Re发生器得到的188Re研制了具有潜在临床应用价值的188Re标记的氟哌酸(188Re-Norfloxacin).研究了在无载体的条件下,pH值、温度、时间、氯化亚锡含量对标记率的影响,确定了最佳标记条件.实验结果表明用无载体188Re标记的188Re-Norfloxacin的标记率为92%以上,标记后调pH为4,24h后,放化纯度基本不变.     

188Re标记抗CEA单克隆抗体及荷瘤裸鼠治疗实验研究

为建立18 8Re标记抗癌胚抗原 (CEA)单克隆抗体 (McAb )C50 的直接标记方法 ,探讨其标记条件 ,用抗坏血酸还原McAb ,并以葡萄糖酸钠为中间螯合剂 ,以氯化亚锡作还原剂 ,用188Re标记C50 。观察188Re标记McAb的体外稳定性 ,探讨还原剂SnCl2 浓度、螯合剂葡萄糖酸钠浓度、抗体浓度、加入抗体间隔的时间对标记物放化纯度的影响。SPECT显像观察荷瘤裸鼠瘤内注射188Re-C50 后放射性分布 ,对治疗后的瘤体行病理观察。实验结果显示 ,188Re标记C50 的合适条件为 :2 .2— 4 .0g/LSnCl2 、0 .3mol/L葡萄糖酸钠溶液、2 .5× 10 5— 5 .0× 10 5mol/LMcAb ,反应 2h后放化纯度可达 90 %。荷瘤裸鼠瘤内注射188Re -C50 后 ,放射性集中在瘤内 ,2周后瘤体明显缩小 ,镜下观察到肿瘤细胞破裂 ,坏死。     

磁性纳米微粒的188Re标记

将组氨酸固载到氨基化磁性纳米微粒表面.以188Re的面式结构三羰基配合物fac-[188Re(CO)3(H2O)3]+为放射性标记前体,对磁性纳米微粒进行了标记.固载有组氨酸的磁性纳米微粒在70 ℃、pH 6.6下反应40 min ,标记率为(91.4±0.3)%,并且标记物在37 ℃的小牛血清中有良好的体外稳定性,72 h后放射性仍保留80%以上.     

188Re直接标记单克隆抗体TGLA及其生物学评价

单克隆抗体TGLA是一种特异性靶向CD20的嵌合抗体,能有效杀伤肿瘤细胞和抑制肿瘤细胞增长,已用于B细胞淋巴瘤的临床治疗。本研究采用直接标记法,制备188Re-TGLA,并优化了标记条件。在最佳标记条件下,标记率可达93%,体外放置24 h后,放化纯度≥85%,体外稳定性良好。荷淋巴瘤裸鼠体内分布结果表明,188Re-TGLA在肿瘤的摄取较高,在24 h时为（6.46±2.01）ID%/g,提示188Re-TGLA可以作为一种有效的显像剂,但是为了更好的显像效果,可使用抗体片段进行标记,以缩短抗体的体内半衰期,更好地与188Re匹配。     

S-乙酰基-NHS-MAG_3在反义显像研究中的应用及进展

随着反义显像研究的深入,一种新的双功能螯合剂巯基乙酰三甘氨酰-N-羟基丁二酰亚胺酯(S-乙酰基-NHS-MAG3)受到广泛重视。利用反义寡核苷酸的NHS-MAG3进行S-乙酰基-NHS-MAG3放射性核素标记,得到的标记产物具有较高的标记率、比活度和放化纯度,且体内外稳定性好,与血清蛋白的非特异性结合低;S-乙酰基-NHS-MAG3不会影响反义寡核苷酸的杂交特异性,并能增加标记的反义寡核苷酸在细胞内的积聚,因此,S-乙酰基-NHS-MAG3在反义显像研究中具有重要的应用价值。     

99Tcm-MAG3-Lys-mPEG的制备及其在小鼠体内的分布

以mPEG-5000、Fmoe-Lysine和MAG3为原料，经过五步反应合成了载体MAG3-Lys-mPEG；对其进行^99Tc^m标记后，进一步研究了标记物的体外稳定性及其在小鼠体内的生物分布。结果表明，^99Tc^m-MAG3-Lys-mPEG的标记率〉98％；标记物在体外有很好的稳定性，在生理盐水中放置24h时，放化纯度〉91％；在血清中温浴16．5h时放化纯度仍〉92％；标记物在小鼠体内的血液清除较快，在肾脏中的摄取最高，标记物主要经肾脏通过尿液排出体外。mPEG有可能用作反义核酸的有效载体。     

S-乙酰基-NHS-MAG3在反义显像研究中的应用及进展

随着反义显像研究的深入．一种新的双功能螫合剂巯基乙酰三甘氨酰-N-羟基丁二酰亚胺酯(S-乙酰基-NHS-MAG3)受到广泛重视。利用反义寡核苷酸的NHSMAG3进行S-乙酰基-NHS-MAG3放射性核素标记，得到的标记产物具有较高的标记率、比活度和放化纯度．且体内外稳定性好．与血清蛋白的非特异性结合低；S-乙酰基NHS-MAG3不会影响反义寡核苷酸的杂交特异性，并能增加标记的反义寡核苷酸在细胞内的积聚，因此，S-乙酰基-NHS-MAG3在反义显像研究中具有重要的应用价值。     

[188Re(CO)3(H2O)3]+标记用双功能联接剂的制备、标记及性质

合成了几个具有代表性的适于[188Re(CO)3(H2O)3] 标记用的双功能联接剂分子,并对其羰基铼的标记条件进行了优化.结果表明:在最优条件下,上述标记物的放化纯均大于95%.放置实验和体外竞争实验表明:标记物皆有很好的稳定性,在48 h内,放化纯无明显改变.该类分子有望用于生物活性分子羰基铼标记工作中.     

113 In m-P-SCN-Bz-DTPA-c-myc反义核酸的合成及其抑制血管平滑肌细胞增殖

为研究113 Inm-p-SCN-Bz-DTPA-c-myc反义核酸对血管平滑肌细胞增殖的影响,合成了c-myc反义核酸,与双功能团连接剂p-SCN-Bz-DTPA偶联后又进行了113Inm标记,考察了标记物113Inm-p-SCN-Bz-DTPA-c-myc反义核酸在生理盐水和牛血清的体外稳定性、杂交能力和对平滑肌细胞增殖的影响.测得标记率为45%～55%,纯化后放化纯＞90%.标记物在生理盐水和牛血清的体外稳定性均较好,48 h后放化纯＞95%.杂交实验中放射性反义链和正义链杂交结合形成大分子,说明偶联和标记没有破坏放射性反义链杂交反应活性.细胞增殖实验显示,113 Inm-p-SCN-Bz-DTPA-c-myc反义核酸对平滑肌细胞增殖的抑制率具有剂量依赖性,浓度为10 μmol/L(2.5×37 GBq/L)时抑制率最大;113Inm-p-SCN-Bz-DTPA-c-myc反义核酸(放射性反义治疗组)和反义核酸(反义治疗组)、113InmCl3溶液(放射性治疗组)、不加核酸或113InmCl3溶液(对照组)和c-myc正义核酸(正义治疗组)对平滑肌细胞增殖的抑制率分别为94.92%,69.28%,20.55%,15.24%,0%,放射性反义治疗组和反义治疗组、放射性治疗组、对照组比较有显著性差异(p＜0.01),反义治疗组和正义治疗组比较具有显著性差异(p＜0.01).说明113 Inm-p-SCN-Bz-DTPA-c-myc反义核酸在体外可有效抑制猪血管平滑肌细胞增殖.     

DTPA-c-myc反义核酸的合成及其~(113)In~m标记

合成了DTPA-c-myc反义核酸,并对其进行了113Inm标记;考察了标记物113Inm-DTPA-c-myc反义核酸在生理盐水和牛血清中的稳定性和对平滑肌细胞增殖的影响。标记结果显示,在最佳标记条件下标记率为35%~40%,标记物纯化后放化纯度>90%1。13Inm-DTPA-c-myc反义核酸在生理盐水中48 h放化纯度>94.0%,在血清中48 h放化纯度仅为76.1%。细胞增殖结果显示:113Inm-DTPA-c-myc反义核酸浓度达到10μmol/L(92.5 GBq/L)时抑制率达到最大,113Inm-DTPA-c-myc反义核酸(放射性反义治疗组)和反义核酸(反义治疗组)1、13InmCl3溶液(放射性治疗组)、不加核酸或113InmCl3溶液(对照组)和c-myc正义核酸(正义治疗组)对平滑肌细胞增殖的抑制率分别为84.5%、69.3%、20.6%、15.2%、0,放射性反义治疗组与反义治疗组、放射性治疗组、对照组相比有显著性差异(P<0.05、P<0.01、P<0.01),反义治疗组和正义治疗组相比也有显著性差异(P<0.01)。这说明合成的113Inm-DTPA-c-myc反义核酸在体外可有效抑制猪血管平滑肌细胞增殖。     

68Ga标记成纤维细胞活化蛋白抑制剂的生物分布和胶质瘤模型micro-PET显像

为研究⁶⁸Ga标记的成纤维细胞活化蛋白抑制剂（⁶⁸Ga-FAPI-04）在正常小鼠和胶质瘤裸鼠模型体内的生物学分布及micro-PET显像,以DOTA修饰的成纤维活化蛋白抑制剂为前体合成⁶⁸Ga-FAPI-04。放射性HPLC测定其标记率,考察放化纯度及体外稳定性,通过测定⁶⁸Ga-FAPI-04脂水分配系数评估其水溶性。将20只ICR小鼠随机分为5组,尾静脉注射3.7 MBq ⁶⁸Ga-FAPI-04后5、15、30、60、120 min后处死并取出各脏器,称重并测定放射性计数,计算各组织器官的放射性摄取率。建立U87MG胶质瘤荷瘤鼠模型,进行生物分布及micro-PET显像研究。结果表明,⁶⁸Ga-FAPI-04的标记率为97.38%±1.32%（n=3）,放化纯度为100%,体外稳定性好,亲水性强。ICR正常小鼠生物分布实验显示,⁶⁸Ga-FAPI-04血液清除快,肾脏为主要排泄器官,脑部放射性摄取低。U87MG荷瘤裸鼠生物分布及micro-PET均显示肿瘤部位有较高的放射性摄取率,⁶⁸Ga-FAPI-04注射后90 min时肿瘤部位放射性摄取率达到（2.50±0.00）%ID/g。注射后30、60、90、120 min时,肿瘤与正常脑的肿瘤本底比(tumor-to-background ratio, TBR)分别为（6.26±0.09）、（5.06±0.02）、（5.54±1.47）、（5.51±0.03）。研究表明,⁶⁸Ga-FAPI-04制备简易方便、标记率高、体外稳定性好,主要通过肾脏排泄,在胶质肿瘤模型中具有较好的肿瘤靶向性,micro-PET显像清晰,是潜在的脑肿瘤显像剂。