产磷脂酶D链霉菌发酵条件优化

以链霉菌为发酵菌株,研究了10 L发酵罐中不同培养条件对链霉菌发酵产生磷脂酶D和链霉菌生长的影响。结果表明,10 L发酵罐中最佳发酵条件为:接种量12%,种龄17 h,温度28℃,通气量0.8 L/h,转速600 r/min。在最佳发酵条件下,酶活可达到3.48 U/m L。     

色褐链霉菌产磷脂酶D的发酵条件研究

采用单因素试验,对色褐链霉菌产磷脂酶D(PLD)的发酵培养条件和培养基组成进行了优化。结果表明,色褐链霉菌摇瓶发酵最佳条件为:发酵周期7 d,发酵温度28℃,发酵培养基初始pH 6.0,接种量3%,发酵培养基装液量10 mL(100 mL三角瓶),摇床转速200 r/min;培养基最佳组成为:蛋白胨20.0 g/L,可溶性淀粉25.0 g/L,MgSO4.7H2O 0.5 g/L,CaCO3 1.0 g/L,Tween 8020.0 g/L。     

链霉菌S-pMS02发酵制备磷脂酶D的关键技术研究

实验室前期构建了重组链霉菌菌株S-pMS02用于高效分泌表达磷脂酶D（phospholipase D, PLD）,但是其PLD产量依然难以满足大规模生产需求。为了进一步提高PLD产量,该研究对S-pMS02的最佳产酶条件进行了探索,并改进了制备工艺。结果显示,该菌株最适发酵产酶碳源为可溶性淀粉、氮源为硫酸铵酪蛋白氨基酸复合物,此外1.5 g/L的Mg²⁺能显著提高PLD的产量。在接种孢子浓度为1×10⁵个/mL,发酵温度为32℃,发酵6 d时PLD酶活力达到最高,为25.56 U/mL。通过在发酵制备过程中使用剪切搅散和保温装置,进一步将PLD产量提升至33 U/mL,为最初的2倍。该研究的结果为促进PLD的生产以及工业化应用奠定了基础。     

天蓝色链霉菌产蓝色素的工业化培养基优化

对天蓝色链霉菌 1 0 0产蓝色素进行了培养基的优化 ,初步确定了促使蓝色素产率提高的适合生产用的培养基配方 .经过 8d培养 ,蓝色素总色价相对单位可达 2 62 .5U/mL ,比培养基优化前的总色价相对单位 1 60U/mL提高了 64 % .2L罐发酵 6.5d蓝色素总色价相对单位为摇瓶水平的 75% ,但产色素最高峰时间提前了 1 .5d .     

蜡样芽孢杆菌产磷脂酶D发酵条件优化

通过单因素和正交试验,对蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）产磷脂酶D发酵条件进行了优化。结果表明,培养基最佳组成为卵黄10 g/L、蛋白胨15 g/L、牛肉粉2 g/L、MgSO4·7H2O 1 g/L、氯化钠3 g/L;最佳发酵条件为：培养基初始pH8.0,接种量1.0%,于36 ℃,200 r/min培养8 h。在最适发酵条件下磷脂酶D酶活达4.21 U/mL。     

响应面法优化异硫链霉菌LMZM利用玉米芯粉产木聚糖酶发酵培养基的研究

本研究采用响应面法对异硫链霉菌LMZM产木聚糖酶的发酵培养基进行优化。首先利用Plackett-Burman实验设计筛选出影响产酶的4个显著性因素:玉米芯粉、大豆粉、酵母粉和MgSO——4。在此基础上,研究不显著因素的最低添加量来降低生产成本,然后运用最陡爬坡法逼近最大响应值区域,最后利用中心复合设计确定显著性因素之间的交互作用及最佳组成。结果表明,玉米芯粉27.85 g/L、大豆粉16.25 g/L、酵母粉3.46 g/L、MgSO₄1.18 g/L、K₂HPO₄0.60 g/L、Na₂HPO₄0.40 g/L,木聚糖酶最大理论酶活可达117.80 U/m L,经3次平行实验验证,实际酶活平均值为116.63 U/m L与预测酶活相近,且比优化之前的酶活提高了1.28倍。      

响应面法优化吸水链霉菌产雷帕霉素发酵培养基

目的 优化吸水链霉菌产雷帕霉素发酵培养基,提高雷帕霉素产量。方法 利用Plackett-Burman试验设计筛选出培养基中影响雷帕霉素发酵产量的显著因素,爬坡试验确定主要因素的最适范围,响应面法确定各显著因素的最优水平。结果 获得最优发酵培养基配方为：葡萄糖37.60 g/L、甘露醇30 g/L、黄豆粉28.37 g/L、硫酸铵1.25 g/L、磷酸氢二钾5 g/L、磷酸二氢钾5 g/L、L-赖氨酸1.5 g/L、复合氨基酸1.83 g/L。结论 在最优发酵培养基培养下,雷帕霉素发酵水平由初始182.23 mg/L提高到279.56 mg/L,提高了53.41%。     

天蓝色链霉菌产蓝色素的摇瓶发酵优化

对天蓝色链霉菌 -1 0 0产蓝色素进行了摇瓶条件优化 ,初步确定了促使蓝色素产率提高的合适培养基组成及培养条件 ,经过 8d发酵后 ,蓝色素总色价相对单位可达 1 49.2U/ml,比未优化前的总色价相对单位 1 0 9.2 U/ml提高了 3 7%。     

产磷脂酶D工程菌构建及发酵条件优化

该研究构建产磷脂酶D(phospholipase D,PLD)的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)工程菌,比较4个单启动子(P_HpaⅡ、P₍ylb(F4))、P_2069m、P₄₃)对PLD酶活的影响,摇瓶发酵表明启动子PHpa Ⅱ酶活最高,为0.32 U/mL。进一步以此工程菌作为发酵菌株,通过单因素试验和响应面试验,对该菌株产PLD的发酵条件进行优化。结果表明最佳产酶条件为接种量2.5 mL/dL、发酵温度37℃、硫酸铵质量浓度0.8 g/dL、甘油质量浓度1.94 g/dL、酵母粉质量浓度1.93 g/dL,在此发酵条件下发酵12.5 h,PLD的酶活达到0.85 U/mL,比出发菌株提高62.5%。同时,以环戊基甲醚作为有机相,柠檬酸-柠檬酸钠为水相,利用双相反应体系合成磷脂酰葡萄糖苷(phosphatidyl-glucose,PtdGlc)、磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)和磷脂酰甘油(phosphatidylglycerol,PG),转化率分别为9...     

链霉菌G-HD-4 产黑色素发酵条件的优化

为提高链霉菌G-HD-4 的黑色素产生量,以L- 酪氨酸为底物,对该菌种产黑色素的工艺条件进行研究,通过单因素试验和均匀设计试验,得到最佳产黑色素的发酵条件为：马铃薯15g/100mL、乳糖2.5g/100mL、干酪素2.07g/100mL、MgSO4 0.11g/100mL、KH2PO4 0.25g/100mL、L- 酪氨酸 0.25g/100mL、以接种量为6%(体积分数),培养基起始pH 值为6.0,装液量为25mL,28℃,150r/min 振荡培养5d,黑色素产量可达(13.4 ± 0.05)g/L,比在基础培养基中的黑色素产量(5.78g/L)提高约2.3 倍。     

鞘氨醇单胞菌发酵生产韦兰胶培养基优化研究

韦兰胶是由鞘氨醇单胞菌（Sphingomonas sp.）分泌的一种可溶性胞外多糖。该研究以实验室保存的一株韦兰胶生产菌Sphingomonas sp. 511的产胶率为指标,在单因素试验确定显著因素的基础上,通过最陡爬坡试验确定显著因素的较优水平,再经响应面法设计试验优化韦兰胶发酵培养基,得出韦兰胶最佳发酵培养基组成为葡萄糖35.5 g/L,豆粕6.3 g/L,K2HPO4 2.4 g/L,在此条件下韦兰胶的产胶率达24.87 g/L。     

海洋链霉菌Streptomyces sp.SCSIO1667产星形孢菌素的初步研究

星形孢菌素(Staurosporine,STS)是蛋白激酶C抑制剂,具有很强的抗肿瘤活性.该研究对来自中国南海的链霉菌Streptomyces sp.SCSIO1667发酵产物星形孢菌素进行发酵工艺优化.结果表明,30℃、60h是星形孢菌素最佳收获温度和时间;木薯淀粉和酵母粉是最适碳、氮源;木薯淀粉和海盐是培养基成分的重要影响因子.利用爬坡路径试验和响应面分析法进行优化显示当培养基中木薯淀粉和海盐含量分别为48.64g/L和1.13g/L时STS最大理论值为(50.53.4±0.52)μg/mL,摇瓶实测值为(50.89±0.24)μg/mL,其发酵水平比优化前提高了2.76倍.     

一株产纤维素酶曲霉菌白酒丟糟发酵培养基的优化

为充分利用白酒厂丟糟营养成分,以白酒厂大曲中分离筛选到的一株具有较高纤维素酶活性曲霉菌为菌种,用白酒丟糟为主要原料,对该曲霉菌固态发酵产纤维素酶的培养基进行了优化。结果表明,以白酒丟糟为主要碳源、麸皮为诱导氮源、(NH4)2SO4为速效氮源时,培养基组成以速效氮源(硫酸铵)与诱导氮源(麸皮)比例约为2∶3,碳源(丢糟)与诱导氮源(麸皮)比例约为2∶1,固液比为1∶5时,其纤维素酶活力最高,可达4.07U/mL。     

响应面法优化Streptomyces albus B-215菌发酵产ε-PL的培养基成分

通过响应面法建立模型,分析优化了对Streptomyces albus B-215发酵产ε-聚赖氨酸的培养基成分,得到的优化结果为:葡萄糖55.50g/L,硫酸铵12.25g/L,磷酸二氢钾1.72g/L,酵母膏7.80g/L,装液量50mL/500mL,pH值为7,接种量10％,转速180r/min.在此最佳条件下,ε-PL产量为0.948g/L.验证试验表明试验模型准确、可靠.     

链霉菌Streptomyces sp.FJS31-2产卤化二型聚酮类化合物的发酵条件优化

以产zunyimycin A及BE-24566B类卤化天然化合物的Streptomyces sp. FJS31-2为研究对象,分别利用高分辨质谱（HRMS）和高效液相色谱（HPLC）为检测手段,对不同的碳源、氮源组合的培养基在不同的培养时间和萃取条件下获得的目标化合物进行定性和产量的分析。在基础培养基内添加10 g/L无水乙醇浸泡24 h后的腐殖酸,培养17 d,采取乙酸乙酯萃取可以使目标化合物产量提高。     

微绿球藻富集油脂的培养条件优化

为了寻找提高微绿球藻油脂含量的培养方法,以微绿球藻为实验材料,比较了光照强度、温度、盐度、氮浓度、光径对油脂含量的影响.在单因素实验的基础上选择对油脂含量影响较大的因素进行正交实验设计优化培养条件.结果表明:选用5 cm的光生物反应器,在光照强度为5 000 lx、光周期L∶D=10∶14、温度24℃条件下缺氮培养,微绿球藻的油脂含量最高,为46.72％.     

响应面法优化芽孢杆菌CJPE209产角蛋白酶发酵培养基的研究

采用响应面法对芽孢杆菌（Bacillus sp.）CJPE209产角蛋白酶的发酵培养基组分进行优化。在前期单因素优化的基础上利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响产酶的2个显著性因素：羽毛粉、蔗糖。在此基础上,采用最陡爬坡试验确定中心复合试验的中心点,然后对其他不显著因素进行最低添加量试验以降低生产成本和简化培养基组分。利用中心复合试验,得到预测最佳培养基组成为羽毛粉5.6 g/L、蔗糖13.6 g/L、尿素5.0 g/L、KH2PO4 0.4 g/L、MgSO4 1.44 g/L、CaCl2 1.1 g/L、NaCl 5.0 g/L,预测角蛋白酶酶活为501.9 U/mL。用预测最佳培养基来进行发酵验证试验,结果实际角蛋白酶酶活为503.5 U/mL,表明模型能较好的预测发酵后酶活。