罗非鱼鳞胶原肽亚铁螯合物制备工艺优化及结构表征

以罗非鱼鳞胶原肽与氯化亚铁盐为原料制备多肽亚铁螯合物,并对其最佳螯合条件及螯合物结构进行探究。以螯合物得率为指标通过单因素和响应面法对螯合条件进行优化;通过扫描电镜、傅里叶红外光谱、X衍射和氨基酸分析等方法对螯合物结构及氨基酸组成进行分析。结果表明,制备螯合物的最佳反应条件为pH 5.30,多肽浓度3.00%,多肽与铁质量比3.2∶1.0,该条件下螯合率为82%,螯合物得率为65.43%;通过氨基酸组成分析表明,氨基酸组成符合胶原多肽的成分特征,螯合后天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、组氨酸和精氨酸含量增加;扫描电镜、红外光谱以及X衍射等结果表明多肽与亚铁盐以配位键结合成多肽亚铁螯合物。     

固态发酵法制备罗非鱼皮胶原蛋白肽及其抗氧化活性研究

以罗非鱼鱼皮为原料,利用枯草芽孢杆菌固态发酵(solid-state fermentation,SSF)制备胶原蛋白肽。以胶原酶酶活力为评价指标,优化产酶发酵条件,并对发酵产物进行氨基酸组成分析、超滤分离及体外抗氧化活性的研究。结果表明,最佳发酵条件为培养基初始pH值为7,种子液菌龄为14 h,加水量为10 mL,发酵温度为35℃,发酵时间为24 h,在此条件下胶原酶酶活力为90.05 U/mL,水解度高达41.73%。经超滤分离得到3种不同分子质量(molecular weight,MW)范围的胶原蛋白肽组分:TSCP-a(M_W> 10 kDa)、TSCP-b(M_W5 k～10 kDa)、TSCP-c(M_W<5 kDa)。其中TSCP-c的抗氧化活性最高,其羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(·O₂^-)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1-diphenyl-2-picrylhydrazy,DPPH)自由基清除率的半抑制浓度(half inhhibitory co...     

碱性蛋白酶水解罗非鱼皮提取胶原蛋白肽的最佳条件研究

以罗非鱼皮为原料,采用酶法提取胶原蛋白肽,用正交实验对罗非鱼皮胶原蛋白肽的提取工艺进行优化,并测定了罗非鱼皮的基本组成成分和鱼皮胶原蛋白肽的氨基酸组成.结果表明,碱性蛋白酶添加量为0.5%,固液比1:3,酶解时间为3 h,酶解温度为50℃时鱼皮胶原蛋白肽的提取率最高为13.5%.     

罗非鱼皮胶原蛋白肽酶解液的制备及其抗氧化特性研究

以罗非鱼皮为原料,采用直接酶法提取胶原蛋白肽,用正交试验对罗非鱼皮胶原蛋白肽的制备工艺进行优化,并测定了罗非鱼皮的基本组成成分和鱼皮胶原蛋白肽的氨基酸组成。结果表明,碱性蛋白酶添加量为0．5％,固液比1：3,酶解时间为3h,酶解温度50℃时鱼皮胶原蛋白肽的提取率最高为13．5％。并对产品胶原蛋白肽的抗氧化特性进行了分析。     

罗非鱼皮胶原蛋白肽制备的工艺优化

以罗非鱼鱼皮为原料,研究利用酶法制备胶原蛋白肽制品。测定了罗非鱼皮的基木组成成分,利用低温连续相变萃取技术进行脱脂处理;以水解度、水解产物分子量和感官评定为指标,研究蛋白酶种类对酶解的影响;以水解度为指标,研究酶解条件对水解度的影响,并采用响应面试验对鱼皮胶原肽制备工艺进行优化;用凝胶过滤色谱法测定酶解液分子质量分布。结果表明:采用碱性蛋白酶水解鱼皮效果最好,酶解的最佳工艺条件为:时间7 h、加酶量7%、温度60℃、pH值10.38,在此条件下碱性蛋白酶水解罗非鱼皮的水解度最高可达23.01%。由本法所得胶原肽是以分子质量180~1000 u之间的寡肽(约2~8个氨基酸残基)为主的物质,具有较好的生理活性,可作为功能因子广泛应用于保健食品、化妆品、医药等各个行业当中。     

罗非鱼鳞胶原蛋白肽锌螯合物制备工艺优化

为了获得罗非鱼鳞胶原蛋白肽锌螯合物的最佳制备工艺,采用响应面法进行优化其制备工艺,建立了肽锌螯合率与pH、肽锌质量比、时间和温度的数学模型。得到最佳制备工艺参数为:pH 5.0、肽锌质量比2.5∶1、时间35 min和温度54℃,肽锌螯合率的预测值为92.79%,验证试验值为91.96%,与预测值无显著性差异。     

南极磷虾肽-亚铁螯合物的制备及理化性质分析

以南极磷虾肽(antarctic krill peptides,AKP)和FeCl2·4H2O为原料,以亚铁螯合率和螯合物得率为评价指标,在单因素试验基础上,利用正交试验优化制备出南极磷虾肽-亚铁螯合物(antarctic krill peptide-ferrous chelates,AKP-Fe),并对其理化性质进行分析。结果表明:AKP-Fe的最佳制备条件为:肽铁质量比3∶1,螯合温度40℃,螯合时间40 min,pH值5.5,肽浓度4%,乙醇体积倍数6。在此条件下测得亚铁螯合率为77.25%,螯合物得率为41.03%。傅里叶变换红外光谱分析显示AKP的氨基和羧基与Fe2+发生结合;扫描电镜分析显示AKP与Fe2+螯合后由松疏的片状结构变为颗粒状的聚集体。     

罗非鱼皮胶原肽的制备及抗氧化活性研究

采用酶法从罗非鱼皮中制取胶原肽,选用动物蛋白水解酶,当酶的添加量为0.5%,61℃,pH 6.7下水解3 h时,蛋白质的回收率为92.97%,水解度为9.37%.水解产物90%以上相对分子质量低于10 kD的胶原肽.胶原肽对由Fe^2＋引发的卵磷脂脂质体过氧化有一定抑制作用,同时对·OH具备一定的清除作用.     

螺旋藻肽亚铁螯合物的制备及结构表征

为了提高螺旋藻的高值化利用,本文以钝顶螺旋藻蛋白肽为实验原料,氯化亚铁为铁源,采用初步优化螺旋藻肽亚铁螯合物的螯合条件,并对螯合物通过分子量测定、氨基酸组成实验、荧光光谱、扫描电镜、量子化学计算进行结构表征。结果表明：初步合适的螯合条件为pH6、肽亚铁质量比6:1、肽液浓度1%、温度60 ℃、时间40 min,在此条件下螯合物得率为44.13%。螺旋藻蛋白肽与亚铁盐螯合反应后产生了新结构,铁主要与谷氨酸和天冬氨酸的羧基、精氨酸的氨基、赖氨酸的胍基结合,且镶嵌在氨基酸电负性末端形成的空腔中,形成稳定的结构,证明了螯合物的形成。研究结果将为螺旋藻补铁剂的开发提供一定的理论依据。

     

发酵法制备罗非鱼皮胶原蛋白肽的工艺的研究

目的:研究利用枯草芽孢杆菌进行发酵法生产罗非鱼皮胶原蛋白肽的制备工艺。方法:以罗非鱼皮和水为原料,接入枯草芽孢杆菌进行发酵,对罗非鱼鱼皮浓度、装液量、接种时间、接种量、发酵时间进行了考察,通过单因子实验和正交实验优化确定了最佳发酵工艺。结果:最佳发酵工艺为:罗非鱼鱼皮含量为3%,装液量为90mL/250mL,接种量为5%,接种时间为14h,发酵时间为52h。并且在此发酵工艺下,罗非鱼鱼皮蛋白的水解度高达36.88%。结论:采用枯草芽孢杆菌发酵法制备罗非鱼皮胶原蛋白肽,工艺简单、成本低、不污染环境、水解度高,是值得推广的制备胶原蛋白肽的方法。     

三酶法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽及活性研究

为了探索制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的最佳工艺,在碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解的基础上,以酶解温度、酶解时间、酶解pH值和酶与底物质量比([E]/[S])为试验因素,以水解度和DPPH自由基清除率为响应值,采用响应面分析法优化Orientase 20A酶的酶解条件。结果表明:最优工艺参数为:酶解温度为41.74℃、pH3.97、酶解时间为6h、[E]/[S]为1.5%,酶解液水解度和DPPH自由基清除率的预测值分别为9.42%和35.01%,验证值分别为9.57%和35.21%。响应面对酶解法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的酶解条件的优化是可行的,可以用于实际预测。抗氧化活性实验表明,酶解肽具有较强的清除DPPH自由基和ABTS+.能力,其IC50值分别为10.78mg/mL和8.26mg/mL。     

罗非鱼皮胶原蛋白肽在润肤霜中的应用及性能评价

本研究采用酶解法从罗非鱼皮中提取胶原蛋白肽,并对其基本成分、分子量分布、抗氧化活性、保湿性以及紫外吸收性能进行考察和分析,同时将提取到的罗非鱼皮肽与羧甲基壳聚糖按不同比例进行复配,应用到润肤霜中并进行性能评价。结果表明:酶解法所提取的罗非鱼皮肽蛋白质含量为94.75%,罗非鱼皮肽中分子量小于1000 Da的组分高达82.27%,平均分子量为614 Da,对OH^-、DPPH·、O₂^-·、清除率的IC₅₀值分别为5.34、5.03、7.63 mg/mL,且具有良好的保湿效果,并对UBC和UVB波段的紫外线有吸收;所制备的润肤霜具有良好的保水和体外抗氧化活性以及防晒功效,其感官和理化指标符合国家润肤霜产品质量标准规定,其中RFS-4的综合效果最佳。通过裸鼠在体皮肤刺激性实验和抗皮肤光老化实验,对比不同组别裸鼠皮肤表征情况,结果表明:自制润肤霜安全无刺激并具有较好的抗皮肤光老化作用。本研究为罗非鱼皮肽在抗光老化日化产品的开发利用提供科学的理论基础。     

鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽的抗氧化活性

选取铁离子还原体系和3 种自由基体系为指标,研究鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽体外清除自由基效果和抗氧化作用。采用超滤膜分离鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽组分,筛选出体外清除•OH活性最好的组分,再建立小鼠衰老模型,将分离得到活性最好的组分采用灌胃法,测定小鼠皮肤中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）及丙二醛（malondialdehyde,MDA）和羟脯氨酸（hydroxyproline,Hyp）的含量,研究鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽体内抗氧化和清除自由基作用。结果表明：鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽具有较强的还原能力且对O－2•、DPPH自由基、•OH具有清除效果,质量浓度为10 mg/mL时对•OH、DPPH自由基、O－2•的清除率和对Fe3+ 的还原能力分别为70.48%、68.78%、42.53%和0.676;分子质量小于2 000 D的鮟鱇皮胶原蛋白肽组分对•OH具有较好的清除效果,IC50为15.7 mg/mL;剂量为100 mg/（kg•d）时,显著提高了皮肤中SOD、GSH-Px、CAT的活性,较模型组分别增加20.9%、41.3%和58.1%,且显著抑制MDA的形成。     

罗非鱼皮胶原蛋白肽-锌螯合物的制备及结构表征与体外消化分析

为生产出易于人体吸收的锌补充剂,提高加工副产物罗非鱼皮的利用价值,该试验以锌离子螯合率为指标,筛选最佳活性的胶原蛋白肽,通过高效液相色谱对其分子质量分布进行测定.运用紫外光谱、傅里叶红外光谱、原子力显微镜和扫描电镜对螯合前后的结构变化进行表征.此外,采用体外模拟胃肠道消化模型,对肽-锌螯合物中锌离子溶解率进行评估.研究...     

卵黄高磷蛋白肽-亚铁螯合物的制备及其稳定性分析

目的 优化卵黄高磷蛋白肽螯合亚铁的制备工艺,筛选结合亚铁含量最高的卵黄高磷蛋白肽制备肽-亚铁螯合物,并分析该螯合物的耐温、耐盐、耐酸碱稳定性。方法 响应面法优化亚铁螯合物的制备工艺,超滤分离得到不同分子量大小的肽组分,采用邻菲罗啉法测定亚铁结合含量,采用Ferrozine法测定温度、盐浓度、pH对游离铁释放量的影响。结果 最优螯合工艺条件为肽-亚铁质量比4:1、63℃、pH 4.8、43 min,该条件下小于3 kDa卵黄高磷蛋白肽的亚铁结合含量最高,为(96.13±2.86) μg Fe2+?mg pro,该螯合物耐温、耐盐、耐酸碱稳定性较好。结论 优化工艺的亚铁螯合率高,既能够节约亚铁离子的用量,还能够提高肽-亚铁的结合含量。小于3 kDa卵黄高磷蛋白肽-亚铁螯合物的亚铁含量高、稳定性好,是一种潜在的铁补充剂。关键词：卵黄高磷蛋白肽;肽-亚铁螯合物;稳定性     

鱼鳞胶原蛋白肽钙螯合物制备工艺的优化

采用响应面法对罗非鱼鳞胶原蛋白肽钙螯合物的制备工艺进行优化,建立了肽钙螯合率与时间、肽与氯化钙质量比、温度、pH的数学模型。最佳制备参数为:时间39min、肽与氯化钙质量比3.3∶1、温度61℃和pH7.2,此条件下肽钙螯合率的验证值为65.01%,与预测值(65.05%)无显著性差异。红外光谱分析表明罗非鱼鳞胶原蛋白肽与钙形成了螯合物。为新型钙制剂的开发及鱼鳞的高值化利用提供了理论依据。      

罗非鱼皮胶原蛋白水解产物的体外抗氧化活性和体内抗衰老作用

对罗非鱼皮胶原蛋白水解制备水解产物（tilapia skin gelatin hydrolysate,TSGH）,分离得到3 个肽组分（TSGH-1、TSGH-2和TSGH-3）,分析肽组分氨基酸组成,并对TSGH-3的体外抗氧化活性和体内抗衰老能力进行评价。结果表明：TSGH-3的分子质量低,疏水性氨基酸含量高,从自由基清除和金属螯合两个方面证实了TSGH-3具有很好的体外抗氧化活性。TSGH-3能显著增加由D-半乳糖诱导衰老大鼠的血清、肝脏和肾脏组织的总抗氧化能力、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性,并且能显著降低丙二醛的含量。此外,TSGH-3的摄入可以保护大鼠的肝脏和肾脏指数。因此,TSGH-3在抗氧化、抗衰老方面具有较好的应用潜力。     

鳕鱼皮胶原蛋白肽的功能特性及抗氧化活性

以鳕鱼皮胶原蛋白肽为实验材料,研究其吸水性、保水性、乳化性等功能特性,并且进行了体外抗氧化实验。结果表明鳕鱼皮胶原蛋白肽具有较好的吸水性、保水性、吸油性和起泡性,具有一定的乳化性和较弱的泡沫稳定性。体外抗氧化实验结果显示,鳕鱼皮胶原蛋白肽对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基均有一定的清除效果,且清除率与样品溶液的浓度存在剂量依赖关系;浓度为30mg/mL时,胶原蛋白肽对DPPH·、·OH和O2-·的抑制率分别可达到73.84%、85.76%、64.09%。分级后,分子量1ku以下的胶原蛋白肽对DPPH·和·OH的清除能力最强,30mg/mL时清除率达到84%和90.97%;分子量5ku以上的胶原蛋白肽对O2-·清除能力最强,30mg/mL时清除率达到74.02%。      

鳕鱼皮胶原蛋白肽的功能特性及抗氧化活性

以鳕鱼皮胶原蛋白肽为实验材料,研究其吸水性、保水性、乳化性等功能特性,并且进行了体外抗氧化实验。结果表明鳕鱼皮胶原蛋白肽具有较好的吸水性、保水性、吸油性和起泡性,具有一定的乳化性和较弱的泡沫稳定性。体外抗氧化实验结果显示,鳕鱼皮胶原蛋白肽对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基均有一定的清除效果,且清除率与样品溶液的浓度存在剂量依赖关系;浓度为30mg/mL时,胶原蛋白肽对DPPH·、·OH和O2-·的抑制率分别可达到73.84%、85.76%、64.09%。分级后,分子量1ku以下的胶原蛋白肽对DPPH·和·OH的清除能力最强,30mg/mL时清除率达到84%和90.97%;分子量5ku以上的胶原蛋白肽对O2-·清除能力最强,30mg/mL时清除率达到74.02%。     

响应面法优化鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合铁工艺

采用响应面法优化鳕鱼皮胶原蛋白肽与氯化亚铁进行螯合反应的条件,制备小分子肽螯合铁产品。以pH值、小分子肽与FeCl2的质量比和小分子肽液质量分数3因素的5水平进行二次正交旋转组合试验,建立螯合物得率的二次回归方程。结果表明：最佳螯合工艺条件为胶原蛋白肽与氯化亚铁的质量比4:1、小分子肽液质量分数3.5%、pH7.0。在此条件下,螯合物得率为37.31%,与模型的预测值37.46%接近。红外光谱检测结果显示,亚铁离子与小分子肽中的NH2+和COO－有螯合,是一种新型螯合物。