马尾藻岩藻聚糖硫酸酯降解工艺的研究

利用超声波降解法,以还原糖释放量为指标,对超声波功率、超声波时间及温度与多糖(马尾藻岩藻聚糖硫酸酯SF1)降解率的相关性进行分析,用响应面设计优化降解条件,建立了多糖降解率与超声波功率、时间和温度之间的二次回归模型。选择超声功率350W,温度50℃,时间59min,还原糖释放量为32.86μg/mL;降解后总糖含量为70.55%,岩藻糖含量为37.62%,硫酸根含量为36.12%,糖醛酸含量为6.15%。     

不同分子质量马尾藻岩藻聚糖硫酸酯的制备和化学组成分析

研究H2SO4降解法制备不同分子质量岩藻聚糖硫酸酯的降解条件及其产物的化学组成。依次采用DEAE-52纤维素离子交换层析法、H2SO4降解法、Sephacryl S-200凝胶色谱,制备不同分子质量的岩藻聚糖硫酸酯。运用高效凝胶色谱测定其相对分子质量,并借助衍生化气相色谱和红外光谱对其单糖的组成和结构进行解析。结果表明:在60℃下,含有1%岩藻聚糖硫酸酯的0.05 mol/L H2SO4溶液反应4 h和8 h时后,可以有效可控地将围氏马尾藻岩藻聚糖硫酸酯降解,经纯化后得到MMWF1、MMWF2、LMWF1、LMWF2四组分,其分子质量分别为16.32、15.49、7.65和7.21 k D,总糖含量分别为57.89%、55.45%、56.18%和52.64%,硫酸基含量分别为18.89%、25.11%、14.42%和19.76%。另外,4组分均由鼠李糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,但各组分的单糖含量不同,红外光谱测定结果显示其均含有多糖的特征吸收峰和硫酸基的吸收峰。     

海带岩藻聚糖硫酸酯对小鼠的免疫调节作用

目的:采用免疫学评价方法,研究海带岩藻聚糖硫酸酯对小鼠免疫功能的调节作用。方法:以海带粗多糖为原料,采用酸提取、离子交换和自由基氧化降解法制备得到不同的岩藻聚糖硫酸酯组分。KM小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组和海带岩藻聚糖硫酸酯组分F-2、Fa和Fb的低、中、高剂量组。除正常组外,其余皮下注射氢化可的松造成免疫低下模型后灌胃。海带岩藻聚糖硫酸酯F-2、Fa和Fb组小鼠分别灌胃F-2、Fa和Fb不同剂量多糖溶液(分别为25、50、100mg/(kg.d)),阳性对照组灌胃盐酸左旋咪唑(20mg/(kg.d)),进行免疫指标的测定。结果:F-2、Fa和Fb组均能显著提高免疫低下小鼠的脾脏质量/体质量比值,提高血清溶血素含量和提高腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力,且F-2和Fa组能增强迟发型变态反应能力,但Fb组对迟发型变态反应能力无显著性影响。结论:海带岩藻聚糖硫酸酯对免疫低下小鼠具有较好的免疫调节作用,且中、低分子质量的岩藻聚糖硫酸酯对免疫低下小鼠的免疫调节作用没有显著性差异。     

海带中岩藻聚糖硫酸酯的测定方法比较

比较4种常用的岩藻聚糖硫酸酯定量方法来测定海带岩藻聚糖硫酸酯功效成分的含量,建立海带中岩藻聚糖硫酸酯的测定方法。采用4种常用的多糖测定方法:PMP柱前衍生-HPLC法、Dische法、次甲基蓝染色法、Cameron法进行测定,岩藻糖含量分别是9.23%、10.01%、23.65%、6.75%。经比较分析,Dische比色法简便、快速、准确,不需要昂贵的分析仪器,安全可靠。     

厚叶海带岩藻聚糖硫酸酯分离纯化及其体外肿瘤抑制活性研究

本研究以日本厚叶海带(Kjellmaniella crassifolia)中提取的岩藻聚糖硫酸酯(Fuciodan)为原料,采用DEAESepharose Fast Flow弱阴离子交换柱层析分离纯化,通过苯酚-硫酸法和氯化钡-明胶法检测各组分中多糖及硫酸根(SO_4~2)含量,MTT法分析50、200、800μg/m L的日本厚叶海带岩藻聚糖硫酸酯粗品(F)及分离组分对肝癌细胞Hep G2、肺癌细胞A549和结肠癌细胞HT-29细胞存活率影响。研究结果表明,DEAE-Sepharose Fast Flow弱阴离子交换柱对粗品F的分离纯化效果良好,可以得到5个组分(F-0、F-1、F-2、F-3和F-4);组分F-4多糖与SO_4~(2-)含量最高,分别为64.25%和26.32%。MTT实验结果显示,岩藻聚糖硫酸酯粗品及各分离组分对三种肿瘤细胞均具有肿瘤抑制活性,不同组分对HepG2、A549、HT-29的最低细胞存活率分别为67.69%、56.03%和27.56%。基于以上研究结果,表明日本厚叶海带岩藻聚糖硫酸酯具有很大的发展潜力,开发成为一种有效的天然抗肿瘤药物。     

岩藻聚糖硫酸酯及其酶解产物对 D-半乳糖氧化损伤小鼠的抗氧化作用

本文利用岩藻聚糖硫酸酯降解酶（EQFF）对大分子量岩藻聚糖硫酸酯进行降解,进而得到低分子量的酶解产物,比较并分析了酶解前后岩藻聚糖硫酸酯对D-半乳糖氧化损伤小鼠的抗氧化作用。将SPF级昆明种雄性小鼠随机分为正常对照组、模型组、岩藻聚糖硫酸酯组、酶解物组、阳性对照组,饲养42 d后处死,测定血清和肝脏组织的抗氧化指标。试验结果表明,岩藻聚糖硫酸酯及其酶解产物与模型组相比都具有显著的抗氧化活性。岩藻聚糖硫酸酯酶解物组小鼠抑制血清和肝脏组织的？OH的活性达到500.67±35.67 U/mL和1821.34±162.02 U/mgprot,T-SOD活力达到101.82±3.98 U/mL和3053.36±245.88 U/mgprot;同时,岩藻聚糖硫酸酯酶解物组小鼠的血清CAT活力达到4.05±0.56 U/mL,GSH-Px活力达到348.88±29.22 U,说明低分子量的酶解产物比高分子量的岩藻聚糖硫酸酯有更显著的抗氧化作用,为岩藻聚糖硫酸酯的应用提供了依据。     

半叶马尾藻中岩藻聚糖硫酸酯的提取工艺研究

从半叶马尾藻中提取岩藻聚糖硫酸酯(SPF),以多糖提取率和硫酸根含量为指标,通过单因素和正交优化实验确立提取SPF的最佳工艺条件.结果表明,SPF的最佳提取工艺条件为浸提时间6 h,加水量60倍,漫提温度70℃,pH值为1.5.SPF得率可达8.73%,SPF中总多糖含量为38.32%,岩藻糖含量为12.75%,硫酸根含量为13.16%.     

海参岩藻聚糖硫酸酯的超滤纯化工艺研究

采用超滤膜分离技术对海参岩藻聚糖硫酸酯提取液进行纯化,研究膜截留分子量、跨膜压力等对膜通量及纯化效果的影响,并测定了膜污染后的清洗效果。结果发现:截留分子量200 k Da的UV200膜最适于海参岩藻聚糖硫酸酯的分离纯化,所得固形物产品中总糖含量高达56.12%,蛋白质含量仅为6.37%,岩藻糖含量为36.34%,硫酸根含量为10.75%;超滤工艺优化结果显示,跨膜压强以0.2 MPa为宜,蛋白质脱除率高达91.09%,色素脱除率可达65.30%;膜污染后,采用含酶强碱性清洗剂可有效去除膜面污染物。     

海参多糖硫酸根含量的离子色谱法测定及其差异分析

经过三氟乙酸水解后,利用Dionex ICS-2000离子色谱仪对不同海参粗多糖、海参硫酸软骨素(SC-CHS)和海参岩藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)中的硫酸根(SO42-)进行了分离和测定。平均加标回收率为100.90%,相对标准偏差为2.12%,检测限达到3.9×10-2μg/mL。较之传统的多糖硫酸根的测定方法,本方法重复性好,测定更为简便、准确,可应用于其它硫酸多糖硫酸根的定量测定。测定结果显示,所有种类海参SC-CHS的硫酸根含量高于SC-FUC,不同种类海参的多糖硫酸根含量存在特征性差异。     

鼠尾藻中岩藻聚糖硫酸酯提取工艺及纯化研究

研究利用热水浸提法,复合酶解法提取鼠尾藻中岩藻聚糖硫酸酯的最佳工艺参数及纯化工艺.结果表明:在pH为6,时间为5 h,温度为98℃,料液比为15的条件下浸提,鼠尾藻岩藻聚糖硫酸酯提取率为3.15%,总硫酸根质量分数为0.87%;采用复合酶解法提取岩藻聚糖硫酸酯最佳条件为:复合酶添加量为1.7%,pH为5.5,时间为1h,温度为45℃,在该条件下鼠尾藻中岩藻聚糖硫酸酯提取率为3.6%,总硫酸根质量分数为1.1%,岩藻聚糖硫酸酯经DEAE-52阴离子纤维素变换层析分级得到F1、F2,F3,F4,F5五个组分,硫酸根含量分别为0、3.94%、6.57%、12.60%、38.08%.将含有硫酸根的组分F2、F3、F4、F5分别经Sephadex G-200凝胶柱层析分级纯化后得到f1、f2、f3、f4、f5、f6六个级分,其中f2、f4为大分子质量凝聚体,f1、f3、f5、f6相对分子质量分别为:4.05×104、7.13×104、1.325×105、7.99×104.     

制备低分子量岩藻聚糖的研究

从我国福建省海域所产海带中提取的岩藻聚糖,经过酸和酶水解,使大分子量的岩藻聚糖降解为低分子量岩藻聚糖。分离水解产物并通过测定硫酸基团保留率,比较盐酸水解和果胶酶水解的优缺点,旨在寻找一种经济、高效、产物生理活性高的降解方法。     

低分子量岩藻聚糖制备工艺及其抗菌活性的研究

采用超声波辅助过氧化氢的方法降解岩藻聚糖,采用膜分离制备分子量50 ku和50 ku 2个组分的低分子量岩藻聚糖组分,并以未降解的岩藻聚糖为对照测定其抗菌活性。通过多糖降解率、硫酸基团保留率和抗菌生物学活性的比较研究证明,超声波辅助降解2 h时的降解效果较好,此时的水解率为30.73%,硫酸基团保留率在24.71%,抑菌圈直径为25 mm。此条件下所制备的低分子量岩藻聚糖具有较好的理化性质及抗菌生物学活性。     

岩藻多糖的研究进展

岩藻多糖,被称为墨角藻多糖、岩藻聚糖硫酸酯、褐藻糖胶、褐藻多糖硫酸酯等,主要来源于褐藻,是一类含有L-岩藻糖和硫酸基团的多糖。它具有多种生物学功能,如抗凝血、抗肿瘤、抗血栓、抗病毒、抗氧化和增强机体免疫机能等,因而被广泛地应用于医药领域和现代食品工业。文中概述了岩藻多糖和低分子量岩藻多糖的制备,结构组成,生物学功能以及其毒性的研究进展。     

基于铜藻岩藻聚糖硫酸酯的负载岩藻黄质纳米粒子制备与分析

为防止岩藻黄质进入肠道前在胃中分解,以岩藻聚糖硫酸酯和壳聚糖为原料,构建pH值敏感性纳米载体,用于运载岩藻黄质,以实现岩藻黄质在胃肠道环境中的高效递送。本实验从铜藻中提取岩藻黄质、岩藻聚糖硫酸酯,采用高效液相色谱法测定岩藻黄质纯度,采用高效凝胶渗透色谱法、化学法、高效液相色谱法测定岩藻聚糖硫酸酯的分子质量、理化性质、单糖组成。以岩藻聚糖硫酸酯和壳聚糖为原料,采用聚电解质自组装法按照岩藻聚糖硫酸酯-壳聚糖质量比0.6∶1、0.8∶1、1∶1制备负载岩藻黄质的纳米粒子。测定纳米粒子红外光谱评价岩藻聚糖硫酸酯和壳聚糖的结合状态;测定负载岩藻黄质纳米粒子的理化性质及在模拟胃、肠液中粒径、岩藻聚糖硫酸酯复合率、岩藻黄质负载率的变化,评价其在胃肠道中的稳定性,获得在模拟胃环境中稳定、模拟肠环境中裂解且可实现岩藻黄质高效递送的纳米粒子。结果表明,铜藻岩藻黄质的纯度为13.57%;岩藻聚糖硫酸酯的分子质量为342 kDa,总糖质量分数为52.45%,蛋白质量分数为7.96%,糖醛酸质量分数为9.25%,硫酸基质量分数为19.26%;由岩藻糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖醛酸和木糖5种单糖组成,其中岩藻糖和半...     

北大西洋瓜参岩藻聚糖硫酸酯分离纯化及结构分析

目的:从北大西洋瓜参(Cucumaria frondosa)体壁中提取纯化得到一种北大西洋瓜参岩藻聚糖硫酸酯(CF-FUC),并对其结构特征进行研究。方法:利用阴离子交换层析和凝胶过滤层析纯化出CF-FUC组分,以高效凝胶过滤色谱法测定分子质量,以离子色谱法测定硫酸根含量,以柱前衍生高效液相色谱法测定单糖组成,并通过核磁共振技术推测其精细结构。结果:CF-FUC的分子质量为360kD,硫酸根含量为(29.8±3.2)%,单糖组成为岩藻糖、半乳糖、氨基葡萄糖、氨基半乳糖物质的量比为1:0.22:0.07:0.07,岩藻糖存在两位硫酸酯化α型吡喃岩藻糖及非硫酸酯化α型吡喃岩藻糖两种形式。结论:CF-FUC结构有别于其他海参岩藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)。     

半叶马尾藻中岩藻聚糖硫酸酯的提取纯化及抗氧化研究

从半叶马尾藻中提取得到的岩藻聚糖硫酸酯（SPF）,采用十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）沉淀法纯化得SPF1,然后经DEAEC-52柱层析得F1和F2两个级分。化学组成分析表明,这4个级分均含有岩藻糖、硫酸基、糖醛酸以及少量的蛋白质。采用比色法研究岩藻聚糖硫酸酯清除羟基自由基（·OH）及超氧阴离子自由基（O2^-·）的作用,结果显示,4种岩藻聚糖硫酸酯级分均有清除活性氧自由基的能力,并且随着纯度的提高其抗氧化能力越强。     

3种海参多糖的分离纯化及其化学组成差异分析

提取3种海参中的粗多糖,通过Q Sepharose Fast Flow(QFF)阴离子交换柱分离纯化,得到海参硫酸软骨素(SC-CHS)及海参岩藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)2个组分,并比较3种海参多糖的化学组成。对粗多糖、SC-CHS及SC-FUC分别采用高效凝胶排阻色谱法、柱前衍生高效液相色谱法及离子色谱法测定各海参多糖的相对分子质量、单糖组成及硫酸根含量。结果表明,随着海参种类的不同,3种海参SC-CHS相对分子质量之间无显著性差异,均为120kDa左右;各海参SC-FUC相对分子质量存在显著性差异,其中以海地瓜SC-FUC的相对分子质量最大。不同海参多糖葡萄糖醛酸(GlcUA)、氨基半乳糖(GalN)、半乳糖(Gal)及岩藻糖(Fuc)的物质的量比存在显著性差异。各海参SC-CHS的硫酸根含量在29%左右,各海参SC-FUC的硫酸根含量在26%左右。     

岩藻聚糖硫酸酯的硫酸化修饰对其生物活性的影响

岩藻聚糖硫酸酯是一种硫酸化多糖,因其具有多种生物活性而得到广泛的研究,有研究表明岩藻聚糖硫酸酯的生物活性与其硫酸基团含量与位置息息相关。因此,对岩藻聚糖硫酸酯进行硫酸化修饰将有利于提高其生物活性。简述了硫酸基团对岩藻聚糖硫酸酯活性的影响以及岩藻聚糖硫酸酯的硫酸化方法,介绍了硫酸化修饰后的岩藻聚糖硫酸酯生物活性的变化,以期为岩藻聚糖硫酸酯硫酸化修饰的应用与发展提供理论参考。     

海带中褐藻糖胶分级纯化及结构分析

为了纯化海带褐藻糖胶及研究褐藻糖胶结构,利用DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱分离海带褐藻糖胶粗品,得到LP-1、LP-2、LP-3和LP-4 4个组分,通过Sephadex G-150凝胶柱对硫酸根含量较高组分LP-2、LP-3和LP-4进行进一步分离纯化及分子量测定,最终LP-2获得两种均一多糖LP-21和LP-22,其分子量分别为123和105 k Da,LP-3和LP-4为均一多糖,分子量分别为74和32 k Da。通过高效液相色谱法分析得率较高的组分(LP-21、LP-22和LP-3)单糖组成,用红外色谱法分析其结构。高效液相色谱结果表明,分级纯化后的组分(LP-21、LP-22和LP-3)主要由L-岩藻糖、D-半乳糖组成,还有少量D-葡萄糖、D-甘露糖、D-氨基葡萄糖、L-鼠李糖、D-木糖和D-葡萄糖醛酸。红外光谱分析表明,LP-21和LP-22的硫酸根主要结合在岩藻糖C_4位,LP-3硫酸根主要结合在岩藻糖C_2或C_3位上。     

超滤制备海带岩藻聚糖的工艺研究

本文以海带为原料,研究应用超滤技术提取岩藻聚糖的工艺技术参数,研究结果表明：冷浸提法可以防止岩藻聚糖的降解;pH低于2.5时80%以上的褐藻酸会被除去;超滤过程中,压力在0.1～0.3MPa范围内随着压力的升高膜通量升高;浸提液经稀释0～2倍下膜通量升高,多糖得率变化不大。研究结论：在4℃下以料液比1：30浸提5h所得浸提液,调pH至2.0以除去褐藻酸,补蒸馏水至3000mL,采用50ku超滤膜组件在0.2MPa下超滤纯化岩藻聚糖,经醇沉冷冻干燥制得高纯度海带岩藻聚糖干品,其得率为2.32%,总糖含量为38.24%,硫酸基团含量达到21.49%。