小米蛋白提取、测定以及SDS-PAGE电泳

依照Osborne法对小米清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白进行分离提取,通过单因素试验确定小米蛋白提取时的最佳条件,并通过SDS-PAGE对小米蛋白组分进行了亚基分析。结果表明,小米清蛋白提取的最佳温度为40℃,球蛋白提取的最佳氯化钠质量分数为2%,醇溶蛋白提取的最佳醇体积分数为80%,谷蛋白提取的最佳氢氧化钠浓度为0.05 mol/L。小米蛋白各组分SDS-PAGE凝胶电泳图谱显示,小米清蛋白的亚基主要分布在(97.4~22)ku范围内且含有二硫键;小米球蛋白的亚基主要分布在(66.2~10)ku范围内;小米醇溶蛋白的亚基条带分布广泛且含有二硫键;小米谷蛋白的亚基条带分布在(66.2~10)ku范围内。不同提取条件不仅会影响提取率,同时也会影响蛋白组分的亚基组成。     

香菇柄中水溶性蛋白的提取及组成分析

本文研究了在微碱性环境下提取香菇柄水溶性蛋白的最佳工艺,并测定了该蛋白的等电点与分子量。结果表明:香菇柄水溶性蛋白的最佳提取条件为料液比1∶28,提取时间6h,提取温度24℃;此条件下,水溶性蛋白的提取率可以达到香菇柄中总蛋白的52.8%;SDS-PAGE电泳分析表明:在该条件下,得到的水溶性蛋白质分子量较大,且大都集中于40⁵0ku左右;香菇柄中水溶性蛋白的等电点结果为p H4.3,与大多植物蛋白的等电点接近。      

香菇柄中水溶性蛋白的提取及组成分析

本文研究了在微碱性环境下提取香菇柄水溶性蛋白的最佳工艺,并测定了该蛋白的等电点与分子量。结果表明:香菇柄水溶性蛋白的最佳提取条件为料液比1∶28,提取时间6h,提取温度24℃;此条件下,水溶性蛋白的提取率可以达到香菇柄中总蛋白的52.8%;SDS-PAGE电泳分析表明:在该条件下,得到的水溶性蛋白质分子量较大,且大都集中于40~50ku左右;香菇柄中水溶性蛋白的等电点结果为p H4.3,与大多植物蛋白的等电点接近。     

米糠4种蛋白质的提取与功能性质

按照Osbron法提取米糠中的清蛋白、球蛋白、醇蛋白、谷蛋白,并对4种蛋白进行功能性质评价。结果表明:米糠中清蛋白、球蛋白、醇蛋白、谷蛋白占米糠蛋白总量依次是56.93%、20.84%、3.167%、19.06%;等电点依次是pH4.0、4.0、5.0、4.6。4种蛋白的功能性质对比评价表明:清蛋白的持水性最大,醇蛋白的乳化性最高,清蛋白在等电点处的起泡性最差。SDS-PAGE凝胶电泳分析表明:清蛋白分子的亚基组成分子质量为95.43、76.51、52.85kD;球蛋白的亚基组成分子质量为103.12、76.51kD;醇蛋白的亚基组成分子质量为14.00kD;谷蛋白的亚基组成分子质量为36.29、20.00、14.00kD。     

平欧榛子蛋白分离及功能特性分析

为了充分利用平欧榛子资源,提高附加值,采用Osborne蛋白分级法及聚丙烯酰氨凝胶电泳提取并分析了其蛋白质组分和相对分子质量分布。采用碱溶酸沉法提取其分离蛋白并对分离蛋白的功能特性进行了检测和分析。结果表明:清蛋白占榛子粗蛋白的67.18%,球蛋白占17.62%,谷蛋白占6.53%,醇溶蛋白占3.17%;还原和非还原聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表明,榛子蛋白质各组分中均存在二硫键,非还原条件下,各组分亚基相对分子质量主要分布在35⁷1 kDa,还原条件下,各组分亚基相对分子质量主要分布在1671 kDa,还原条件下,各组分亚基相对分子质量主要分布在16⁵0 kDa且均有2条明显的亚基带;分离蛋白功能特性研究显示,pH值在等电点附近榛子蛋白的溶解性、持水性、起泡性和乳化性最低,而泡沫稳定性在等电点附近有最大值,50℃时持水性最高,而吸油性在50℃时最低为2.815 g/g。     

4种花生粕蛋白的理化性质及功能特性研究

以花生粕为原料,采用分级提取工艺提取花生清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,研究4种花生粕蛋白的理化性质和功能特性。扫描电镜观察,4种花生粕蛋白的形态结构各不相同。SDS-PAGE法测定分子质量表明,清蛋白含有4种亚基,分子质量为70、40、30、25和15 ku;醇溶蛋白含有2种亚基,分子质量分别为25和1 5 ku;球蛋白含有5种亚基,相对分子质量分别为40、38、30、25和15 ku;谷蛋白含有4种亚基,相对分子质量分别为40、30、25和15 ku。花生清蛋白、醇溶蛋白、球蛋白、谷蛋白的等电点分别为pH 3.6、pH 5.2、pH 4.6、pH 5.0。功能性质研究表明,球蛋白的持水性最好,为1.52 mL/g,其次为谷蛋白1.10 mL/g,清蛋白和醇溶蛋白的持水性较低分别为0.49、0.14 mL/g;清蛋白的持油量相对较高为8.21mL/g,其次为球蛋白为7.16 mL/g,谷蛋白和醇溶蛋白的持油量相对较低,分别为3.82 mL/g和5.49 mL/g;清蛋白的乳化性和乳化稳定性相对较高,乳化能力(EC)值和乳化稳定性(ES)值分别为7 1.4%和83.33%,谷蛋白次之,EC和ES值分别为66.7%和82.86%,醇溶蛋白和球蛋白相对较低,EC值分别为64.0%和62.2%,ES值分别为82.35%和76.67%。综上,花生粕清蛋白的持油性、乳化性和乳化稳定性相对较好。     

鸡腿菇子实体蛋白提取工艺优化及其特性研究

以鸡腿菇子实体为原料,研究其蛋白的提取工艺及特性。以提取液pH值、提取温度、料液比、提取时间为提取鸡腿菇子实体蛋白的影响因素,采用正交试验优化碱溶酸沉法提取蛋白的工艺条件,结果表明:鸡腿菇子实体蛋白的最佳提取工艺参数为提取液pH11.5,提取温度50℃,料液比1:15,提取时间50min,此时蛋白提取率为24.3%。在pH3.5条件下沉淀蛋白效果最佳。对制备的鸡腿菇子实体蛋白特性的分析表明:其分子质量主要集中在50～90ku,20～35ku和13～17ku等区间内;必需氨基酸(EAA)占氨基酸总量(TAA)的40.57%,必需氨基酸与非必需氨基酸(NEAA)的比值为0.68,为理想蛋白质,且其所含人体必需氨基酸种类齐全,比例均衡,比值系数分(SRC)为80.69;在碱性条件下,鸡腿菇子实体蛋白具有良好的溶解性、乳化性和起泡能力。     

樱桃仁蛋白的提取

对樱桃仁蛋白的提取方法进行了研究,采用碱溶酸沉法提取樱桃仁中的蛋白质并测定其等电点,使用SDS-PAGE法测定了樱桃仁蛋白的亚基组成及其分子量.结果表明,樱桃仁蛋白的等电点为3.72,优化后的提取条件是pH值为9.5,浸提时间为40min,温度为40℃,料液比1∶15,樱桃仁蛋白中含有7种亚基,其中分子量为18 694的亚基含量最高,为41.8%.     

棉籽蛋白提取工艺及其主要理化性质研究

对棉籽蛋白的提取工艺条件进行研究,并对所提取的蛋白的等电点、变性温度及分子量分布等主要理化特性进行探讨.结果表明,棉籽蛋白提取的最佳工艺条件为:pH值10,温度40℃,料液比10:1,浸提时间60min,此时蛋白质的提取率为755%;所提棉籽蛋白的等电点在5.00左右,变性温度为67.23℃,SDS-PAGE电泳图谱中主要有9条蛋白谱带,所对应的亚基相对分子量,从上至下依次约为55400、46600、36400、29100、27300、24200、18200、16300、14600u.     

藜麦蛋白质的提取及其功能性质研究

以脱皮藜麦为原料,通过碱溶酸沉法提取藜麦蛋白,利用单因素试验比较不同提取p H、温度、料水比和时间对藜麦蛋白提取率的影响,并对藜麦蛋白的亚基分布、氨基酸组成及功能性质进行研究。结果表明,不同提取条件对藜麦蛋白提取率的影响顺序为p H料液比温度提取时间,在p H11、料水比1:12、温度45℃、提取时间3 h条件下,藜麦蛋白的提取率达67.13%,纯度为78.30%。藜麦蛋白的主要亚基包括50 ku,(30~35)ku,20 ku并含有许多分子量小于15 ku的亚基。藜麦蛋白的氨基酸组成平衡,富含各种必需氨基酸,能满足FAO/WHO推荐的(10~12)岁儿童的需要,蛋白提取过程对除含硫氨基酸外的其他氨基酸组成影响不大。尽管藜麦蛋白的凝胶性较差,最小凝胶浓度为180 mg/m L,但其溶解度在p H8时达到63.68%,在p H6时高于豌豆蛋白和大豆蛋白的溶解度,且具有良好的乳化性和乳化稳定性。     

葡萄籽蛋白组分提取及亚基分析

以葡萄酒酿制过程中的废弃物赤霞珠葡萄籽为原料,对葡萄籽蛋白质组分的提取条件和亚基进行了相关研究。试验利用了Osborne法对葡萄籽蛋白进行分离提取,结果表明:葡萄籽清蛋白提取的最佳温度为50℃,球蛋白提取的最佳盐浓度为2%,醇溶蛋白提取的最佳醇浓度为75%,谷蛋白提取的最佳碱浓度为0.02 mol/L。SDS-PAGE凝胶电泳结果表明:不同提取条件对葡萄籽蛋白的提取率有较大影响,但并不影响蛋白亚基组成。     

绿豆清蛋白Osborne分级提取工艺优化及亚基组成分析

以绿豆为原料,采用Osborne分级法从绿豆中提取清蛋白,在单因素试验基础上,用L9(34)正交试验,研究提取温度、提取时间和料液比对绿豆清蛋白提取率的影响,并采用SDS-PAGE电泳分析绿豆清蛋白的亚基组成。结果表明,绿豆清蛋白的最佳提取工艺为料液比110(g/mL)、提取温度45℃、提取时间150min,该条件下绿豆清蛋白的提取率为(86.79±0.31)%,清蛋白纯度为88.33%。提取的绿豆清蛋白中有4条亚基条带,分子量分别为56.2,46.8,26.3,21.9kD。     

荔枝浊汁粗蛋白组分的结构和特性研究

采用Osborne分级法提取荔枝浊汁的上清液蛋白,沉淀中的球蛋白、醇蛋白和谷蛋白,对这4种蛋白进行了十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、差示扫描量热法(DSC)和红外光谱分析,并测定了等电点(p I)、表面疏水性、总巯基和游离巯基及二硫键的含量。结果表明:4种蛋白的等电点在p H=4.0~4.5,上清液蛋白亚基分子量主要集中在(30~95)ku,谷蛋白(270 ku);上清液蛋白、球蛋白、醇蛋白和谷蛋白的游离巯基含量分别占总巯基的71.86%、92.18%、58.82%、37.96%,且二硫键的含量均较低;上清液蛋白和醇蛋白均有2个变性峰,分别为88.0℃和129.5℃、40.5℃和92.3℃,而球蛋白和谷蛋白均只有一个变性峰,分别为103.0℃、85.3℃;4种蛋白的二级结构均以β-折叠和β-转角为主。综上所述,荔枝浊汁在热处理过程中上清液蛋白、醇蛋白和谷蛋白易变性,在贮藏过程中谷蛋白可能直接聚集,而其他几种蛋白可能逐渐变性而聚集。     

小麦胚芽清蛋白提取工艺及分子量测定

小麦胚芽清蛋白是一种优质蛋白质,为了充分开发利用小麦胚芽资源,通过单因素实验和正交实验对清蛋白提取工艺进行研究,得到最佳提取条件为粉碎粒度0.125mm,提取温度30℃,提取时间30min,提取料液比1∶11,此条件下提取清蛋白提取率达29.2%。清蛋白SDS-PAGE凝胶电泳包含7条条带,分子量分别为10.47、14.45、20.89、26.92、38.02、52.48、85.11ku。此方法实现了对小麦胚芽清蛋白最大程度的提取。      

紫花芸豆清蛋白的提取及组分分析

以紫花芸豆为原料,采用正交试验确定紫花芸豆清蛋白提取过程中料液比、提取时间和温度的最佳条件,并对提取的清蛋白等电点、分子量和氨基酸组成进行了测定与分析。结果表明,当料液比为1︰15(g/m L),提取时间为3 h,提取温度为50℃时,测得的紫花芸豆清蛋白的提取率最高为60.93%,等电点为p H 4.8。电泳分析表明清蛋白分子质量分布在18.4~116 k Da之间,氨基酸种类齐全,组成比例合理。     

Osborne分级法提取藜麦糠清蛋白及功能性质研究

以藜麦糠为研究对象,采取超声辅助Osborne分级法对藜麦糠中清蛋白进行提取。在单因素实验基础上,应用Box-Behnken方法选取料液比、提取温度、提取时间3个因素,以清蛋白提取率为响应值进行优化,确定藜麦糠清蛋白的最优提取条件为:料液比1∶37（g/m L）、提取温度46℃、提取时间25 min,在此条件下藜麦糠清蛋白提取率为43.21%,与理论预测值43.76%相比,其相对误差约为1.25%。说明通过响应面分析优化后得到的回归方程在实践指导方面具有一定的意义。对藜麦糠清蛋白功能（溶解性、持水力、乳化性、起泡性）特性进行了测定,结果表明p H为2.5即等电点时,清蛋白的溶解度最低,持水力最小达到1.33 g/g,乳化性最低,乳化稳定性反而最好,而起泡性和起泡稳定性在等电点附近均最差。      

白果蛋白质提取及SDS-PAGE分析

以白果为原料,采用不同的原料处理及蛋白质提取方法,运用单因素和正交设计的方法,以料液比、提取时间、提取液浓度、提取液pH 值为考察因素,研究白果蛋白质提取的最佳工艺条件,并对提取的白果蛋白进行SDS-PAGE 凝胶电泳分析。结果表明：经过冷冻干燥处理的白果采用Tris-HCl 提取法获得的白果蛋白含量较高;Tris-HCl 法提取白果蛋白的最佳工艺为pH8.5、0.15mol/L Tris-HCl 溶液、料液比1:20(g/mL)、提取时间4h,白果蛋白质的提取率达到75.01%。白果蛋白SDS-PAGE 分析表明,白果蛋白中约含13 条亚基,主要为21kD 和32kD 的两种亚基,白果蛋白的亚基主要集中在31～100kD,占亚基总数的77%。     

沙田柚籽中蛋白质的提取及其性质研究

为了提取和利用沙田柚籽中的蛋白质,通过碱溶酸沉法研究其提取条件,并探讨其功能性质。以沙田柚籽为原料,通过单因素试验研究了提取温度、提取液pH值、料液比、提取时间等4个因素对蛋白质提取率的影响,并结合正交试验确定蛋白质的最佳提取条件。结果表明,不同提取条件对柚籽蛋白提取率的影响顺序为料液比>提取液pH值>温度>提取时间,在料液比1:50 g/mL、提取液pH11、提取温度50 ℃、提取时间50 min的条件下,柚籽蛋白的提取率达12.5%。柚籽蛋白的持水性为2 mL/g,持油性为4.4 mL/g,乳化性为53.12%,乳化稳定性为78.43%,等电点为5。可见沙田柚籽蛋白功能性质良好,可利用其改变食品的某些性质,如增强食品的嫩度、出汁率、乳状液稳定等,是一种优质的植物来源蛋白质。     

山核桃饼粕蛋白提取工艺的优化

采用二次正交旋转组合试验设计对碱提酸沉法提取山核桃饼粕蛋白的工艺进行优化。结果表明,山核桃饼粕蛋白的等电点为pI 5.0;其最佳提取条件为提取液pH值9.0,提取时间124min,提取温度53℃,料液比1∶22(m∶V),该条件下的实际平均提取率为(67.94±0.05)%。     

燕麦蛋白组分分离提取及其SDS-PAGE电泳分析

通过单因素实验对燕麦蛋白组分的分离提取工艺进行了优化,并通过SDS-PAGE电泳对燕麦蛋白组分进行亚基分析。结果表明:燕麦清蛋白提取的最佳温度为40℃,球蛋白提取最佳盐浓度为7%,醇溶蛋白提取的最佳乙醇浓度为75%,谷蛋白提取的最佳碱浓度为0.05 mol/L,蛋白质提取率为83.1%。SDS-PAGE实验结果显示:燕麦清蛋白在10~100 kD范围内均有分布,燕麦球蛋白由2个亚基组成,分子量分别在97.4~100 kD和43~66.2 kD范围内,燕麦醇溶蛋白亚基大部分集中在18.39~40.72kD之间,燕麦谷蛋白部分亚基分布在20.67~26.66kD与43.29~50.80 kD之间。