超高效液相色谱法测定乳及乳制品中维生素D的含量

目的建立用正相高效液相色谱硅胶柱净化维生素D,通过反相超高效液相色谱测定乳及乳制品中维生素D的含量的一种快速检测方法。方法样品经氢氧化-–钾皂化后,用石油醚萃取,萃取液经无水硫酸钠脱水、旋蒸,定容,用正向色谱净化,反相超高效液相色谱用以0.1mL/min流速的甲醇/水(97:3V:V)为流动相,采用WatersACQUITY UPLC BEH C18色谱柱分离,紫外检测器检测,内标法定量。结果维生素D3浓度在0.05–1.00μg/mL内标准曲线相关系数(r~2)均大于0.995。在质量分数为0.5、1.0、2.0μg/mL 3个加标水平下,加标回收率为65.0–115.0%,相对标准偏差为0.1%–1.4%。结论该方法简便、快速、实用、准确,各项技术指标满足标准的要求,可用于乳及乳制品中维生素D的定量检测。     

高效液相色谱法测定乳粉中维生素A,D

研究了高效液相色谱法,同时测定牛乳中维生素A,D。乳粉样品通过皂化、萃取,提取液通过aminocyano色谱柱净化、silica色谱柱分离,紫外检测器,外标定量法,同时测定出样品中维生素A,D。本法最低检出限VA为1.1×10-8g,VD为2.5×10-8g;变异系数VA为1.917%,VD为5.518%;平均回收率VA为96.3%,VD为90.2%。     

二维液相色谱同时测定婴幼儿配方乳粉中多种脂溶性维生素

建立二维液相色谱法同时测定婴幼儿配方乳粉中维生素A、维生素E、维生素D_2、维生素D_3及β-胡萝卜素含量的方法。样品经皂化后以石油醚提取,经旋转蒸发浓缩后以乙腈/甲醇/四氢呋喃(75∶25∶5,体积比)定容,以二维液相色谱同时分析维生素A、维生素E、维生素D_2、维生素D_3及β-胡萝卜素,以InfinityLab Poroshell 120 EC-C8(3.0 mm×150 mm,2.7μm)为一维色谱柱,流动相乙腈/甲醇/四氢呋喃(75∶25∶5,体积比)-水/四氢呋喃(95/5,体积比)0.6 mL/min梯度洗脱,以Zorbax Eclipse PAH(4.6 mm×250 mm,5μm)为二维色谱柱,流动相甲醇0.3 mL/min,柱温25℃,一维DAD检测器采用波长切换方式检测(VA∶325 nm;VE∶294 nm;β-胡萝卜素:450 nm),二维DAD检测器检测((维生素D_2与维生素D_3∶264 nm)。)。结果维生素A在0.0945μg/mL～14.17μg/mL浓度范围内线性关系良好,维生素E在1.21μg/mL～181.5μg/mL浓度范围内线性关系良好,β-胡萝卜素在0.0163μg/mL～2.445μg/mL浓度范围内线性关系良好,维生素D_3在0.0163μg/mL～2.445μg/mL浓度范围内线性关系良好,维生素D_3在0.0150μg/mL～2.500μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数r大于0.999。分析时间为25 min。本方法可快速准确测定婴幼儿配方乳粉维生素A、维生素E、维生素D_2、维生素D_3及β-胡萝卜素。     

衍生法结合液相色谱串联质谱法测定婴幼儿配方食品中维生素D

目的 建立衍生法结合液相色谱串联质谱法测定婴幼儿配方食品中维生素D。方法 试样经酶解、皂化、液-液萃取、4-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮（PTAD）衍生化反应，经Atlantis?T3色谱柱分离，甲醇-5 mmol/L甲酸铵溶液作为流动相，梯度洗脱，采用电喷雾电离（ESI），正离子多反应监测模式（MRM）测定，同位素内标法定量。结果 方法的线性关系良好，相关系数r>0.99,3个质量浓度水平的加标回收率为92.3%～94.2%，相对标准偏差为3.03%～5.34%(n=6)，方法定量限为1μg/kg。结论 该方法简便准确，灵敏度高，选择性强，适用于婴幼儿食品中维生素D的检测。     

高效液相色谱-串联质谱法测定保健食品中的维生素A、D、E

目的建立高效液相色谱-串联质谱法同时测定保健食品中维生素A、D、E的分析方法。方法样品中的维生素在氮气保护下进行皂化反应,经正己烷提取,旋蒸至近干后用流动相定容至一定体积,采用高效液相色谱-串联质谱法选择反应监测(SRM)正离子模式进行测定。结果维生素A、维生素D_2、维生素D_3、α-维生素E、β-维生素E、γ-维生素E和δ-维生素E的线性范围分别为10~1 000、2~100、1~100、25~2 000、5~500、5~500、5~500μg/L,且浓度范围内线性关系良好。方法的相对标准偏差范围为1.3%~5.5%(n=6),保健食品中维生素A、D、E的平均回收率范围为90.4%~105.0%,7种维生素检出限分别为:维生素A 2.0μg/kg、维生素D_2 2.0μg/kg、维生素D_3 0.2μg/kg、α-维生素E 0.2μg/kg、β-维生素E 0.5μg/kg、γ-维生素E 0.5μg/kg、δ-维生素E 1.0μg/kg。结论本法可同时对保健食品中维生素A、D、E进行定性和定量分析,方法的精密度、回收率和检出限能满足实际检测要求,可用于保健食品中维生素A、D、E含量的日常监测。     

高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿乳粉中维生素D_2和D_3

建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定婴幼儿乳粉中维生素D2和D3含量的分析方法。婴幼儿配方乳粉中的维生素D2和D3经过皂化,以石油醚作为萃取溶剂,采用JADE-PAK CB-C18色谱柱分离,以0.1%甲酸甲醇为流动相进行等度洗脱,流速为200μL/min,进样体积为10μL,柱温25℃,电喷雾质谱检测,正离子选择反应监测模式进行定性和定量分析。结果表明:维生素D2和D3在0.05~0.5 mg/L范围内与维生素D2和D3峰面积的线性关系良好(R20.98);以20,40和100μg/kg 3个添加水平进行添加回收试验,维生素D2和D3的平均回收率为85%~90%之间,相对标准偏差不高于5.3%;维生素D2、维生素D3的检出限均为2μg/kg。该方法简单、快速、重复性好,可以为婴幼儿配方乳粉中维生素D2和D3含量的分析测定提供依据。     

二维液相色谱法测定乳粉中维生素A、D、E含量

为检测乳粉中维生素A、D、E的含量,建立起乳粉中维生素A、4种维生素E同分异构体、维生素D₂、D₃的二维液相色谱法。样品经皂化、萃取、洗涤、浓缩、定容,以PFP色谱柱和C₁₈色谱柱进行双柱分离,甲醇-水为流动相进行洗脱,紫外检测器进行200～500nm波长扫描,外标法定量分析。结果表明,维生素A、4种维生素E同分异构体、维生素D₂、D₃的线性关系良好,线性范围为1.56～7.80mg/L,相关系数为0.999,平均回收率在94.0%～99.3%,相对标准偏差均小于1%,检出限为0.5～30μg/100g,定量限为1.5～90μg/100g。该方法可一次进样同时完成维生素A,α、β、γ、δ-维生素E,维生素D₂、D₃的分离测定,简便快捷,准确可靠,适用于乳粉中维生素A、D、E含量的检测。     

冷皂化-HPLC测定强化食品中的维生素A、E的方法研究

目的 建立测定强化食品中的维生素A、E的冷皂化-HPLC方法.方法 试样经过夜冷皂化后,醋酸调pH值至6.0～7.5,定容离心后高效液相色谱法测定;色谱条件:色谱柱SUPERIOREX ODS(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:甲醇+水=94+6.结果 方法的线性范围:维生素A:0.25～3.00μg/ml;γ-、δ-、α-维生素E:10.0～150μg/ml.相关系数(r)为0.9997～0.9999;方法的定性检出限维生素A、γ-、δ-、α-维生素E分别为:0.40、5.0、5.0、8.0μg/g;定量检出限:1.30、16.7、16.7、26.7μg/g.高低两个浓度水平加标回收率77.1%～105.0%;相对标准偏差(RSD)均<5%.结论 本方法简便、快速、准确、重现性好,适用于强化食品中维生素A、E的测定.     

HPLC-UV-DAD和LC-MS/MS法测定鲜肉中维生素D_3和25-OH维生素D_3

建立了HPLC-UV-DAD和LC-MS/MS测定肉中维生素D_3和25-OH维生素D_3的方法。样品经皂化、有机相萃取和SPE净化小柱后,维生素D_3用反相高效液相色谱(HPLC)配有紫外二极管阵列检测器(UV-DAD)检测,维生素25-OH-D_3用三重四级杆质谱(APCI-MS/MS)测定,定量采用维生素D_2和25-OH维生素D_2作为内标物质,有证的标准物质维生素D_3和25-OH维生素D_3作为质量控制工具。结果表明,2种物质的检出限分别是0.10μg/100和0.04μg/100g,方法线性范围10-200 ng/mL,相关系数达0.99以上,回收率84.2%,方法的精密度范围为0.01%~4.19%。该方法适用于测定肉(猪肉、牛肉、鸡蛋和鱼等)中维生素D_3和25-OH-维生素D_3。     

固相萃取-高效液相色谱法测定婴幼儿食品中的维生素D_2、D_3

目的:建立固相萃取-高效液相色谱法测定婴幼儿食品中的VD2、VD3含量的方法。方法在已有研究基础上对样品前处理方法进行了优化和改进,利用二甲基亚砜、甲醇和正己烷:甲基叔丁基醚(v∶v=2∶1)进行提取,ProElut VDC萃取分离,10%乙酸乙酯正己烷洗脱,甲醇定容后高效液相色谱仪检测。结果维生素D2、D3在0.1-10μg/mL浓度范围内相关系数均为0.999以上,回收率均在90%以上,相对标准偏差小于4%。结论方法快速、灵敏、准确,前处理简单易行,可用于婴幼儿食品中VD2、VD3的含量。     

在线固相萃取-二维液相色谱法同时测定儿童配方奶粉中维生素A、D、E

建立在线固相萃取(SPE)-二维液相色谱法同时测定儿童配方奶粉中脂溶性维生素A、D₂、D₃和α-、β-、γ-、δ-维生素E含量的方法。样品经皂化后直接进样,以聚合物为填料的PLRP-S色谱柱为在线固相萃取柱净化皂化液,采用SPE泵反向洗脱目标组分,并通过引入在线稀释将目标组分聚焦在第一维色谱柱柱头。以NuovaSil^TM PFP(4.6 mm×150 mm,3μm)为第一维色谱柱,甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,分离维生素A和E的4种异构体。以ChromCore PAH(4.6 mm×150 mm,3μm)为第二维色谱柱,甲醇-乙腈(90:10,v/v)为流动相,分离维生素D₂和D₃。结果表明,维生素A在5.0～500.0 ng/mL、维生素D在1.0～100.0 ng/mL、维生素E在50.0～5000.0 ng/mL线性范围内线性良好,相关系数均大于0.9999。维生素A、D₂、D₃和α-、β-、γ-、δ-维生素E的...     

稳定同位素稀释/液相色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中5种脂溶性维生素

目的 建立稳定同位素稀释/液相色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中5种脂溶性维生素(VA、VD2、VD3、VE和VK1)的分析方法。方法 样品经皂化, 正己烷提取, 甲醇定容, 经ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.7 μm)分离, 以0.2%甲酸水溶液和甲醇-乙腈(4:6, V:V)为流动相, 梯度洗脱, 采用正离子源电喷雾电离, 多反应监测模式测定, 同位素内标法定量。结果 VA、VD2、VD3、VE和VK1在一定浓度范围内具有良好的线性关系, 相关系数(r2)大于0.99, 检出限为0.2~5 ?g/100 g, 定量限为0.6~15 ?g/100 g。5种维生素的加标回收率为89.3%~109.2%, 相对标准偏差(relative standard deviation, RSD) 为3.82%~8.72% (n=6)。结论 本研究建立的方法在很大程度上简化了婴幼儿配方奶粉中脂溶性维生素的检测流程, 提高了实验效率和检测结果的准确性。     

液相色谱串联质谱法测定婴幼儿食品中维生素D_3的质量浓度

建立了同位素内标液相色谱串联质谱法测定婴幼儿食品中维生素D_3质量分数。试样加同位素内标后,乙醇-50%氢氧化钾溶液皂化,石油醚萃取,Atlantis T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,3μm),甲醇-5 mmol/L甲酸胺溶液作为流动相,梯度洗脱进行液相分离,采用电喷雾正离子方式,多反应选择离子监测,内标法峰面积定量。婴幼儿食品中维生素D_3质量浓度在2~200μg/L范围内线性良好,相关系数r均大于0.99,配方奶粉和米粉在10,50和100μg/kg三个质量分数水平的添加回收率分别为86.1%~107%和86.2%~106%,变异系数分别为4.48%~7.08%和2.10%~4.26%(n=6)。方法的定量限为10μg/kg。方法简便、准确,适用于婴幼儿食品中维生素D_3的检测。     

GC-MS/MS测定不同食品中氨基甲酸甲酯及氨基甲酸乙酯的含量

建立内标法同时测定固体半固体及液体基质中氨基甲酸甲酯及氨基甲酸乙酯含量的气相-质谱/质谱(Gaschromatography-Mass/Mass,GC-MS/MS)方法。以D5-氨基甲酸乙酯为内标,采用GC-MS/MS多反应监测模式(Multiple Reaction Monitoring,MRM模式);毛细管色谱柱:DB-INNOWAX,30 m×0.25 mm(内径)×0.25μm(膜厚);进样方式:脉冲不分流;进样量:1μL;柱温:80℃保持2 min,以10℃/min至180℃保持3 min,240℃后运行6 min;流速1.0 mL/min。氨基甲酸甲酯在20 ng/mL~1 000 ng/mL,氨基甲酸乙酯在10 ng/mL~500 ng/mL范围内线性关系良好。相关系数分别为0.998 7和0.999 9。液体基质平均回收率为78.4%及100.20%。固体及半固体基质平均回收率为62.48%及100.49%,检出限分别为6μg/kg及3μg/kg。本方法灵敏度高,专属性强,稳定性好,准确度高。     

正相高效液相色谱法测定鱼肝油中的维生素D3

建立一种正相高效液相色谱法测定鱼肝油中VD3含量的新方法。采用Agilent ZORBAX Rx-SIL色谱柱,以95%正己烷-5%异丙醇为流动相,流速为1.0 mL/min,PDA检测波长264 nm。结果表明:VD3浓度在0.2μg/mL～20μg/mL范围内,峰面积与含量具有良好的线性关系(r=0.999 7);平均相对标准偏差为0.62%,平均回收率为94.2%。该方法可作为鱼肝油中VD3含量的一种快速检测方法。     

固相萃取UPLC-MS/MS测定黄酒中2-甲基咪唑和4-甲基咪唑

建立同位素内标超高效液相色谱串联质谱法同时测定黄酒中2-甲基咪唑和4-甲基咪唑的定量分析方法。样品加入同位素内标后,以质量分数1%的三氯乙酸提取,经MCX固相萃取柱净化,超高效液相色谱串联质谱分离并检测,内标法定量。在优化条件下,2-甲基咪唑和4-甲基咪唑的检出限分别为0.5μg/kg和0.05μg/kg,在0.1 ng/mL～1 000 ng/mL和1 ng/mL～1 000 ng/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数大于0.999。     

高效液相色谱法同时测定维生素D3和维生素K2的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定维生素D_3和维生素K_2的含量的分析方法。方法以95%甲醇水:异丙醇=(98:2, V:V)为流动相,梯度洗脱,样品经C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm)分离,并于264 nm波长检测。结果维生素D3在浓度0.1282～1.2818μg/mL之间呈现良好的线性关系,r~2=0.9999,平均回收率为95.7%～100.7%,相对标准偏差为1.7%;维生素K_2在浓度0.51397～5.1397μg/mL之间呈现良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率在97.3%～100.7%之间,相对标准偏差为1.3%。结论该方法操作简便、准确、重现性好,能同时测定维生素D_3和维生素K_2含量,可在实验室推广。     

同位素内标-高效液相色谱质谱法测定婴幼儿配方乳粉中维生素B6和生物素

目的建立同位素内标和高效液相色谱串联质谱法(highperformanceliquidchromatographytandem mass spectrometry, HPLC-MS/MS)同时测定婴幼儿配方乳粉中维生素B_6含量(吡哆醛、吡哆醇和吡哆胺)和B_7(生物素)的分析方法。方法样品加入同位素内标后,使用温水溶解,并用高氯酸沉淀蛋白质,上清液过滤后经HSS T3色谱柱分离,三重四极杆质谱仪检测,内标法定量。结果在最优化条件下,维生素B_6和生物素分别在1.0～100μg/L和0.10～10.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.998;定量限分别为10.0μg/100 g和1.0μg/100g。4种化合物的回收率为86.5%～97.9%,相对标准偏差为3.0%～6.6%。质控样品检测结果表明该方法准确可靠。结论该方法灵敏度高、净化效果好、定量准确,适用于婴幼儿配方乳粉中维生素B_6和维生素B_7的检测。     

在线固相萃取/二维液相色谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中多种脂溶性维生素

利用在线固相萃取技术结合二维液相色谱仪，建立婴幼儿配方奶粉中维生素A、D、E、K₁同时测定的方法。将奶粉样品皂化后，利用PLRP-S聚合物为填料的在线固相萃取柱净化强碱性皂化液，以五氟苯基柱为一维色谱柱，在紫外检测器上分离维生素A、E,以多环芳烃柱为二维色谱柱，在二极管阵列检测器上分离维生素D₂、D₃和K₁,建立在线固相萃取/二维液相色谱分析方法。对该方法进行方法验证，并与现行食品安全国家标准进行结果对比。维生素A、D、E、K₁在标准曲线浓度范围内线性良好，维生素A、维生素D₂、维生素D₃、α-维生素E、β-维生素E、δ-维生素E、γ-维生素E和维生素K₁检出限分别为4.0、1.0、1.0、40.0、40.0、40.0、40.0、4.0μg/100g,定量限分别为10、2.5、2.5、100.0、100.0、100.0、100.0、10.0μg/100g,加标回收率为91.23%～107.2%,相对标准偏差为0....     

气相色谱法同时检测焦糖色素中的2-甲基咪唑和4-甲基咪唑

建立了顶空进样毛细管气相色谱法同时测定焦糖色素中2-甲基咪唑和4-甲基咪唑含量的方法。采用HP-5毛细管柱,氮磷检测器,溶剂为二氯甲烷,内标N,N-二甲基苯胺。2-甲基咪唑和4-甲基咪唑的线性范围分别为0.0125～0.150μg/mL和0.025～0.295μg/mL,最低检测浓度分别为0.001μg/mL和0.002μg/mL;回收率在99%以上,相对标准偏差在2%之内。该方法重现性好、简单、快速、准确,能满足对分析检测的需要,适合对焦糖色素的质量进行控制。