抗番茄溃疡病菌菱角壳活性物质提取条件优化及抑菌活性研究

在单因素试验基础上,通过L27(313)正交试验对抗番茄溃疡病菌的菱角壳活性物质的提取条件进行优化。结果表明:提取温度和提取时间对活性物质抑菌效果的影响极显著,提取时间与提取温度之间及提取时间与料液比之间存在显著交互作用;优化后提取条件为提取温度60℃,提取时间9 h,料液比1︰5 g/mL。通过检测番茄溃疡病菌(Cmm)被菱角壳活性物质处理后细胞外AKP活性、细胞膜通透性及细胞膜电位,分析菱角壳活性物质抑菌活性。结果表明:菱角壳活性物质破坏Cmm的细胞壁,导致AKP外漏;改变细胞膜电位,损伤Cmm细胞膜的通透性,影响正常生命活动。     

猴腿蹄盖蕨总黄酮的超声提取工艺

以提取得率为考察指标,通过单因素和正交试验探索了猴腿蹄盖蕨总黄酮的超声提取工艺条件。猴腿蹄盖蕨总黄酮最佳的超声提取条件为:料液比为1∶45(g/m L),乙醇浓度为60%,提取时间为105 min,提取次数为3次,在此条件下,猴腿蹄盖蕨总黄酮的提取率为162.71 mg/g,说明超声法可用于猴腿蹄盖蕨总黄酮的提取,具有一定的应用价值。     

蒙自蹄盖蕨醇提物的不同萃取物的抗氧化、降血糖及抗炎活性

为探究蒙自蹄盖蕨醇提物的不同萃取物的抗氧化、降血糖及抗炎活性,采用95%乙醇回流提取蒙自蹄盖蕨制备提取物,并以有机溶剂萃取法进行纯化,得石油醚部分、乙酸乙酯部分、正丁醇部分和水相,采用Folin-Ciocalteu法分别测定其多酚含量,通过DPPH法、ABTS法、α-葡萄糖苷酶抑制活性和脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞建立炎症模型评价蒙自蹄盖蕨各萃取物的体外抗氧化、降血糖和抗炎活性。结果显示,蒙自蹄盖蕨醇提物中多酚含量丰富,经萃取分段后乙酸乙酯萃取物中多酚含量最高,可达(258.6±1.7) mg/g。蒙自蹄盖蕨醇提物及其各萃取物均对DPPH、ABTS自由基表现出不同程度的清除活性,其中乙酸乙酯萃取物清除自由基的能力最强,同时该萃取物对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制活性,IC_(50)为(93.4±3.7)μg/m L,其作用强度与阳性对照阿卡波糖相当。石油醚萃取物显示出良好的抗炎活性,在12.5～50.0μg/m L浓度范围内均能极显著降低脂多糖诱导的RAW264.7细胞释放一氧化氮的水平(p 0.01),且对细胞的正常增殖无明显影响。     

蕨麻抑菌成分的提取工艺研究

为了研究蕨麻中抑菌活性物质的提取工艺,以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为指示菌,以抑菌圈直径为活性检验指标,在单因素试验的基础上通过正交试验优化工艺参数。试验结果表明,对蕨麻抑菌活性物质提取效果的影响次序是:乙醇体积分数、提取温度、提取时间、固液比;其最佳提取工艺条件:乙醇体积分数80%,提取温度70℃,提取时间8h,固液比1:10。在此条件下,蕨麻提取液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈直径分别为15.6mm和15.3mm。     

黑木耳多糖提取工艺条件的研究

黑木耳多糖是黑木耳子实体中的重要活性物质,除具有一般的生化性质外,还具有调节免疫功能、抗血栓、抑菌、降血糖、抗溃疡、抗肝炎和抗突变、降血脂和促进血清蛋白生物合成等多种功效。为优化黑木耳多糖的提取工艺,本文在单因素试验结果的基础上,选择料液比、提取温度、提取时间为自变量,黑木耳多糖的得率为响应值,研究各自变量交互作用及其对黑木耳多糖得率的影响,确定了黑木耳多糖提取的最佳条件为:提取温度60℃、料液比为1∶40、提取时间为2.5h,在此最佳提取条件下,黑木耳多糖的得率达到5.12%。对提取的黑木耳多糖的营养成分进行了分析,所制备的多糖以大分子多糖为主,还含有一定量的蛋白质、水分、还原糖及灰分,为一种粗多糖。     

五味子和番泻叶中提取物的提取条件优化

以番茄晚疫病菌(Tomato late blight)为供试菌,采用抑菌圈法检测抑菌活性,系统地研究了五味子和番泻叶中具有抑菌特性的提取物的提取条件。实验结果表明,五味子中有效抑菌成分的最佳提取条件:提取溶剂为水、提取温度70℃、料液比1:8、提取时间2h、提取次数3次。在此条件下五味子提取物对番茄晚疫病菌的抑菌圈直径为32.5mm。番泻叶中有效抑菌成分的最佳提取条件:提取溶剂为50%的乙醇、提取温度40℃、料液比1:14、提取时间3.5h、提取次数2次。在此条件下番泻叶提取物对番茄晚疫病菌的抑菌圈直径为22.5mm。     

水法提取大蒜抑菌活性物质条件优化

为优化水法提取大蒜抑菌活性物质的工艺,研究料液比、浸提时间、浸提温度、pH对水法提取抑菌活性物质的影响,并采用正交试验法优化其工艺参数.利用GC-MS对大蒜水提液中的有效物质进行鉴定.试验结果表明,水法提取大蒜抑菌活性物质的最优条件是:料液比1:3,浸提温度30℃,漫提时间30min,pH6;大蒜水漫提液中主要的活性物质为S-甲基甲烷硫代亚磺酸酯、3-乙烯基-1,2-二硫杂-4-环己烯、3-乙烯基-1、2-二硫杂-5-环已烯、二烯丙基三硫醚等.     

蕨麻多糖提取及抗氧化活性研究

通过水提法探讨蕨麻多糖适宜的提取工艺,并研究其抗氧化活性。考察料液比、浸提温度、浸提时间对蕨麻多糖含量的影响,在单因素试验的基础上做L9(34)正交试验优化提取工艺参数。通过测定蕨麻多糖总抗氧化能力,清除DPPH、·OH、O2-·自由基的能力来评价其抗氧化活性。研究结果表明,蕨麻多糖适宜的提取工艺参数是:浸提温度90℃、浸提时间2 h、料液比1∶30。在此条件下蕨麻多糖含量为2.54%。蕨麻多糖具有较好的抗氧化能力,对DPPH、·OH、O2-·自由基的IC50分别为5.47,2.62,27.53 mg/mL。本研究结果为蕨麻开发利用奠定理论基础。     

酶解法提取韭菜籽蛋白及抗氧化活性的研究

以脱脂韭菜籽粉为原料,采用纤维素酶酶解法提取韭菜籽蛋白。以韭菜籽蛋白得率为指标,考察酶含量、料液比、提取时间及提取温度对得率的影响。在单因素试验的基础上,采用响应面分析法确定韭菜籽蛋白提取工艺,同时建立韭菜籽蛋白质提取的二次项数学模型并验证其可靠性。以酶含量、料液比、提取时间及提取温度为自变量,探讨这4个因素交互作用和最佳提取条件,并对其进行验证。试验结果表明:影响韭菜籽蛋白提取工艺的因素主次顺序为:料液比提取温度酶含量提取时间。韭菜籽蛋白质提取的最佳工艺条件:酶含量0.75%,料液比1︰6(g/m L),提取时间3.0 h,提取温度51℃,得率为15.141 9%。在韭菜籽蛋白质量浓度为2.0 mg/m L时,对·OH和DPPH·清除率分别为49.3%和61.3%,表明采用纤维素酶酶解法制备得到的韭菜籽蛋白具有抗氧化活性。     

毛木耳蛋白提取物保护酒精性肝损伤功能研究

以正常人肝细胞L02为实验对象,采用乙醇诱导建立酒精性肝脏损伤的细胞模型,并以MTT法筛选出毛木耳蛋白的作用浓度范围。通过检测细胞内甘油三酯(TG),活性氧(ROS)含量以及胞外谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)含量来评价毛木耳蛋白保护酒精性肝脏损伤的功效。结果表明,毛木耳蛋白的作用浓度为30μg/m L时,其细胞活性较模型组提高42.8%,同时细胞内甘油三酯的含量明显降低,特征性指标明显改善,说明其可以恢复损伤细胞活性,改善酒精引发的脂肪堆积。通过游离活性氧检测发现细胞内活性氧的含量降低,说明毛木耳蛋白提取物可能是通过抗氧化途径发挥防护作用。     

藜蒿茎抑制黄嘌呤氧化酶活性成分提取条件优化及其成分分析

以黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase,XOD)抑制活性为监测指标,采用乙醇回流提取法提取藜蒿茎活性成分。首先进行单因素实验,然后以此为基础,通过响应曲面法优化藜蒿茎中抑制XOD活性成分提取条件,最后通过超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱仪(UPLC/Q-TOF-MS/MS)对藜蒿茎乙醇提取液定性分析。结果表明,最佳提取条件为乙醇浓度53%,提取温度79℃,液料比34:1(mL/g),在此条件下得到提取液的XOD活性抑制率为56.4%。鉴定出藜蒿茎乙醇提取液的主要成分包括新绿原酸(5-CQA)、绿原酸(3-CQA)、异绿原酸b (3,4-diCQA)、异绿原酸a (3,5-diCQA)、1,5-二咖啡酰基奎宁酸(1,5-diCQA)和异绿原酸c (4,5-diCQA)。     

海洋链霉菌Streptomyces sp.MCCC 1A09830抗菌成分的分离与鉴定

目的:研究海洋链霉菌Streptomyces sp. MCCC 1A09830与其它菌种的亲缘关系,并分离纯化Streptomyces sp. MCCC 1A09830产生的抗菌成分,鉴定抗菌成分的结构。方法:通过构建系统发育树研究Streptomyces sp. MCCC 1A09830与其它菌种的亲缘关系;采用甲醇提取、硅胶柱层析、高效液相色谱法等分离技术纯化抗菌成分,鉴定抗菌成分的结构。结果:Streptomyces sp. MCCC 1A09830与Streptomyces sp. NEAE-126存在很近的亲缘关系;Streptomyces sp. MCCC 1A09830产生的抗菌成分得到了纯化,获得了化合物1。化合物1经高分辨质谱(High Resolution Mass Spectrometry,HRMS)、一维及二维核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)分析鉴定为Borrelidin A(疏螺旋体素)。结论:从Streptomyces sp. MCCC 1A09830的发酵液中分离得到1种抗菌成分,丰富了Borrelidin的生产菌库,为海洋菌株活性产物的分离提供了支持。     

响应面优化超声波辅助酶法提取湖北海棠叶抗氧化物

为研究湖北海棠叶中抗氧化物最佳提取工艺,以羟基自由基清除率为参考指标,采用响应面优化超声波辅助酶法对湖北海棠叶抗氧化物提取条件进行研究。结果表明:超声波辅助酶法最佳工艺为超声功率100 W,液料比17:1 mL?g?1,超声时间32 min,加纤维素酶量2.6%,酶解时间49 min。此条件下羟基自由基清除率为89.9%±0.06%,提取物中黄酮含量14.01%,多酚含量8.93%,多糖含量7.65%,相比煎煮法、回流法、酶法和超声波法,提取物活性物质含量提高了10%以上,DPPH清除率和羟基自由基清除均提高20%以上。利用超声波辅助酶法提取湖北海棠叶抗氧化物效果较好。     

迷迭香中迷迭香酸、鼠尾草酸和熊果酸的联合提取

为同时高效提取迷迭香中的3种有效物质:迷迭香酸、鼠尾草酸和熊果酸,本文采用超声波辅助法,以改进的高效液相色谱法检测迷迭香提取液中3种物质的含量,计算其得率,并以总得率为指标,正交试验优化了迷迭香中3种有效物质的提取工艺。结果表明,最佳工艺参数为乙醇体积分数100%、料液比1:20 (g/mL)、超声时间30 min,在该条件下3种物质总得率为6.15%。     

碎米荠硒肽的制备及其体外抗氧化活性分析

本文以恩施碎米荠为原料,采用酶法制备具有抗氧化活性的碎米荠硒肽.以蛋白提取率为指标,通过单因素实验和正交试验优化了碎米荠蛋白的提取条件;以DPPH·、ABTS+·清除率为考察指标,优化了碎米荠蛋白的酶解参数,利用超滤设备对碎米荠蛋白酶解液进行分级分离,确定了碎米荠硒肽制备的最佳方案;考察了碎米荠硒肽的还原力、Fe2+螯...     

超声辅助酶法提取香菇柄滋味物质工艺优化

以香菇柄为原料,采用超声辅助酶法提取香菇柄中滋味物质。在单因素实验基础上,以超声时间、纤维素酶添加量和料液比为因素,以可溶性糖、滋味肽、游离氨基酸含量的综合评分为响应值,采用响应面法优化香菇柄滋味物质的提取工艺。结果表明,香菇柄滋味物质的最佳提取工艺为:超声功率120 W,超声时间15 min,酶解时间1.0 h,纤维素酶添加量0.46%,料液比1:30 g/mL,此条件下可溶性糖、游离氨基酸、滋味肽的含量分别为73.38、26.23、595.42 mg/g,滋味综合评分为0.9916,与预测值0.9795间的误差为1.24%,表明模型预测性良好。本研究为香菇柄中滋味物质的开发利用提供了工艺参考。     

响应面法优化结香花总黄酮提取工艺及其抗氧化活性

采用响应面法优化结香花中总黄酮的提取工艺,评价其抗氧化活性。在单因素实验的基础上,以乙醇浓度、液料比、提取温度、提取时间为优化因素,总黄酮得率为评价指标,采用Box-Behnken法优化结香花总黄酮的提取工艺;利用DPPH和ABTS自由基清除实验检测结香花总黄酮的抗氧化能力。结果表明,结香花总黄酮的最佳提取工艺为乙醇浓度80%,液料比35:1,提取温度83℃,提取时间85 min,总黄酮得率22.76 mg·g-1。最佳工艺条件下得到的提取物具有一定的清除自由基能力,且与总黄酮含量呈明显的浓度依赖性,体外清除DPPH自由基和ABTS自由基的IC₅₀值分别为0.75和0.98 mg·mL-1。     

刺果番荔枝叶多酚提取工艺优化及其体外抗氧化活性

本试验选用原料为刺果番荔枝叶,使用乙醇溶剂提取其中的多酚类物质,分别比较乙醇体积分数、提取温度、液料比、提取时间4个要素对多酚提取量的影响,并采用响应面法中的Box-Benhnken中心组合试验确定最优提取工艺。采用DPPH自由基、羟自由基(·OH)法研究刺果番荔枝叶多酚抗氧化活性,比较在最优工艺条件下提取的刺果番荔枝叶多酚与抗坏血酸的清除能力。结果表明:乙醇体积分数55%、液料比50:1 (mL/g)、提取时间96 min、提取温度60 ℃时,多酚提取量最大,达到(20.37±0.34) mg/g。刺果番荔枝叶多酚对DPPH自由基、羟自由基(·OH)的半抑制浓度(IC₅₀)分别为133.33、264.65 μg/mL,样品在试验范围内的最大清除率分别为(51.34%±2.68%)、(52.50%±2.29%)。综上表明,刺果番荔枝叶多酚具有较好的抗氧化能力。     

一种蒲公英饮料的研制

通过对提取工艺中的物料比,浸提时间、浸提温度等因素进行考察,确定蒲公英水取工艺的最佳条件为:料液比1:30,浸提时间30 min,浸提温度80℃。通过单因素和响应面优化试验设计确定了蒲公英饮料的最佳配比为:每100 mL精滤蒲公英汁含有蜂蜜1.6 g、柠檬酸0.03 g、甜菊糖苷0.04 g。分析检测该蒲公英饮料成品的营养成分及其活性物质,结果表明:蒲公英饮料的p H值4.4、还原糖含量8.16 g/L、蛋白质含量10.4 mg/L;饮料中共含有17种游离氨基酸,其中有4种人体必需氨基酸;已知活性成分共有10种,酚酸类5种,类黄酮类5种。优化的蒲公英饮料提取工艺合理、可行,营养丰富,具有一定的保健功能。     

紫果西番莲果皮中多酚提取工艺的比较及优化

以紫果西番莲果皮为原料,研究乙醇提取和纤维素酶辅助提取果皮中多酚的最佳工艺条件并对提取效果进行比较。以多酚得率为指标,通过单因素试验考察各个因素对多酚提取效果的影响;采用L₉(34)正交试验优化了纤维素酶辅助提取工艺条件。结果表明,乙醇提取法的最适工艺条件为乙醇体积分数60%,液料比30:1 mL/g,提取时间150 min,浸提温度为40 ℃,多酚得率为(11.648±0.118) mg/g;酶法辅助提取的最佳工艺条件为纤维素酶用量为25 mg/g,液料比为35:1 mL/g,酶解温度40 ℃,酶解时间为60 min,pH=5,多酚得率为(15.096±0.0948) mg/g。比较两种工艺条件下多酚最大得率可知,纤维素酶法辅助提取比乙醇提取法的多酚得率高出29.6%,证明纤维素酶对西番莲果中细胞壁的破碎效果较好,可以提高果皮中多酚的提取得率。