硫乙醇酸盐培养基

硫乙醇酸盐培养基系为培养、分离需气菌、厌气菌的培养基。它由酪胨、葡萄糖、ι-胱氨酸、硫乙醇酸钠(或硫乙醇酸)、酵母浸出粉、氯化钠、琼脂、亚甲蓝(或刃天青)和水等制成。它是被国际卫生组织推荐,并为美国药典及食品、生物制品管理条例所规定使用的培养基,并被我国1985年版药典规定为药品无菌试验用培养基。上海生物制品研究所于1976年配制了这种培养基,并于1980年制成干粉培养基供应全国。无论是新鲜配制的还是干粉制剂,质量均     

几种常用蛋白胨的氨基酸含量分析

采用日立 835型氨基酸组分分析仪测定了生物制品培养基常用蛋白胨的氨基酸含量 ,结果表明 ,氨基酸总量由高到低依次为厚氏消化液、盐酸水解酪蛋白液、酪蛋白胰酶消化液、黄豆蛋白酶水解液 ;必需氨基酸总量由高到低依次为厚氏消化液、酪蛋白胰酶消化液、盐酸水解酪蛋白液、黄豆蛋白酶水解液     

几种常用蛋白胨的基酸含量分析

采用日立－８３５型氨基酸组分分析仪测定了生物制品培养基常用蛋白胨的氨基酸含量，结果表明，氨基酸总量由高到低依次为厚氏消化液，盐酸水解酪蛋白液、酪蛋白胰酶消化液、黄豆蛋白酶水解液；必需氨基酸总量由高到低次为厚氏消化液、酪蛋白胰蛋消化液、盐酸水解酪蛋白液、黄豆蛋白酶水解液。     

市场动态

<正> 国产胰蛋白胨(F802型)投入市场随着科学事业的发展,我国医疗卫生、商检和科学研究需要蛋白胨的品种日益增多。但目前不少品种还靠进口,其中胰蛋白胨一项近年来每年进口数量相当可观。为了满足国内需要,减少国家外汇支出,上海东海制药厂在上海化学试剂采购供应站的支持下,从1979年起进行了胰胨的试制,最近已投产成功,进入市场。胰蛋白胨(F802型)经上海第一医学院、中国人民解放军     

蚕蛹蛋白替代蛋白胨研制新型细菌培养基的初步研究

为了探究蚕蛹蛋白在细菌培养方面的能力及替代蛋白胨配制细菌培养基的可行性,将蚕蛹预处理后经酶解消化得到可溶性蚕蛹蛋白粉,将其以不同比例替代或完全替代普通LB培养基中的蛋白胨成分进行革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌CGMCC1.3358和阴性菌大肠杆菌AB90054的培养实验。结果表明:蚕蛹经酸洗、脱脂脱色、酶解制备可溶性蚕蛹蛋白粉的收率为48.3%,蛋白复溶率可达99.4%;蚕蛹蛋白培养基经高压蒸汽灭菌后色泽微黄且清亮;蚕蛹蛋白可完全替代蛋白胨提供细菌生长所需的氮源和碳源;蚕蛹蛋白培养基能在保证菌体生物量快速积累的同时维持菌体生长形态正常。蚕蛹蛋白具有来源广、价格低、可工业化加工等特点,可作为一种新的廉价的蛋白胨替代原料进行新型细菌培养基的研制。     

试验设计法优化肺炎支原体培养基

目的试验设计(design of experiment,DOE)法优化肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)培养基,以期提高MP产量。方法以MP(FH株)为试验菌株,PPLO培养基为基础,菌体蛋白含量为响应值,采用Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验及Box-Behnken试验对脑心浸液、水解乳蛋白、胨3号、精氨酸、小牛胸腺DNA、葡萄糖和胰蛋白胨7种培养基添加成分进行筛选及优化。以菌体蛋白含量及颜色变化单位(color change unit,CCU)为指标,验证改良培养基培养MP的效果。结果培养基各添加成分对MP生长影响作用大小依次为葡萄糖、胰蛋白胨、脑心浸液、精氨酸、月胨3号、水解乳蛋白、小牛胸腺DNA,最终筛选出脑心浸液、葡萄糖及胰蛋白胨3种添加物,最适浓度分别为5. 68、1. 34及2. 64 g/L。采用改良培养基培养MP 96 h时,菌体蛋白含量及CCU达最大,分别为851. 29μg/mL及10~9 ccu/mL。结论 DOE法实现了对MP培养基的优化,获得了影响MP生长的主要参数,提高了MP菌体产量。     

蛋白胨的生产

<正> 1.前言 蛋白胨是由蛋白质水解而制得的产品,供作培养基用,广泛应用于抗菌素工业、发酵工业、生物化工及生物试剂。生产蛋白胨的常用原料是畜骨,但是可供生产蛋白胨的原料甚多:屠宰场提供的牲畜血液;水产品加工厂提供的鱼类脏器;生化药厂提取脏器药物后的残     

关于生物制品工艺验证的审评实践与思考

有效的工艺验证是药品质量的重要保证。由于生物制品来源于细胞基质、制备工艺复杂,具备结构表征不完全等特点,生物制品的工艺验证需进行特殊考虑。本文根据国内外相关指导原则并结合药品审评工作实践,总结了生物制品工艺验证中关于细胞基质、发酵与纯化过程、病毒安全性、层析介质寿命与一次性反应器耗材,以及中间体稳定性等的一般要求。同时,就目前国内生物制品注册管理中出现的工艺验证相关共性问题进行探讨。     

我国生物检测用国家标准物质现状与思考

<正>国家药品标准物质是我国药品质量评价的标尺,生物检测用国家标准物质是国家药品标准物质中非常重要的一类。由于生物制品质量评价常采用生物学方法的有效性指标进行检测,而这些方法一般变异性相对较大,因此,生物检测用标准物质(简称生物标准物质)作为生物制品生产检定中必不可少的重要组成部分,在生物制品质量控制和效力评估中发挥着重要的作用[1]。我院作为国家法定的药品、医疗器械标准物质提供单位,负责药品、医疗器械国     

不同蛋白胨培养仔猪副伤寒菌的效果比较

仔猪副伤寒病是由猪霍乱沙门氏菌引起的仔猪及育成猪发生的败血性急性肠炎。在壮龄猪多为隐性带菌或猪瘟继发感染,人也可因此菌发生食物中毒现象。此菌主要通过污染的饲料和饮水而传播,所引起的仔猪副伤寒病可用疫苗来进行预防。用该菌制备的疫苗在生产中存在着多种不稳定因素。现将不同种蛋白胨培养该菌的效果比较如下。1·材料牛肉蛋白胨、胰蛋白胨、精蛋白胨由北京某厂提供;鱼蛋白胨由上海某厂提供;牛肉汤由本厂提供;仔猪副伤寒标准菌株C500由中国兽医药品监察所提供。2·培养基配制将上述4种蛋白胨按1%~1·5%的比例加入牛肉汤,分别配制…     

植物蛋白胨培养基在23价肺炎球菌多糖疫苗生产中的应用

目的对植物蛋白胨培养基应用于23价肺炎球菌多糖疫苗规模化生产的效果进行初步评价。方法采用植物蛋白胨培养基,按生产规模进行肺炎球菌发酵培养和分离纯化多糖,检测大罐培养浓度、培养液多糖含量及精制多糖各项质量指标,并与现有23价肺炎球菌多糖疫苗生产用动物蛋白胨培养基相比较。结果与动物蛋白胨培养基相比较,使用植物蛋白胨培养基可提高肺炎球菌大罐培养浓度以及培养液多糖含量;精制多糖收率明显提高,各项质量指标均符合企业注册标准要求。结论在生产规模下,使用植物蛋白胨培养基生产的肺炎球菌精制多糖质量符合企业注册标准,且可较大幅度地提高精制多糖收率,为植物蛋白胨培养基应用于23价肺炎球菌多糖疫苗规模化生产奠定了基础。     

从酵母制备氨基酸

<正> 酵母蛋白质是制取混合氨基酸的一种极有前途的原料。培养酵母菌的资源丰富,且不受季节与气候条件限制。用酵母制得的混合氨基酸价格低廉,不仅能补充食用蛋白质的不足及用作微生物培养基的亚硝基成份,而且还能为医药提供原料。     

鱼蛋白胨的制备与质量分析

目的制备鱼蛋白胨,并进行质量分析。方法将鱼糜加工下脚料原料经绞碎、石油醚脱脂,得到鱼糜浆,用0.1%木瓜蛋白酶酶解,离心收集上清(即鱼水解蛋白胨溶液),经300 Da纳滤膜脱盐和浓缩,喷雾干燥后,获得淡黄色粉末,即鱼蛋白胨样品FZU01。对鱼蛋白胨FZU01和鱼粉蛋白的主要理化指标(澄明度、亚硝酸盐和碱性沉淀、酸碱度、含氮量、氨基氮、干燥失重、炽灼残渣)进行检测;在固定酵母提取物、Na Cl浓度、初始p H和接种量的基础上,分别用两种蛋白胨配制LB培养基,接种大肠埃希菌,检测A600值;采用分子筛高效液相色谱法(size-exclusion highperformance liquid chromatography,SEC-HPLC)检测两种蛋白胨的相对分子质量。分别将50、150、300、600、900、1 200和1 500 mg/L组胺以及0.1、0.5、1.0、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0和50.0 mg/L重金属离子(Hg2+、Cd2+、As3+、Cr6+和Pb2+)加至大肠埃希菌中,37℃培养12 h,检测A600值。结果两种蛋白胨理化指标检测结果均符合《中国生物制品主要原辅材料质控标准》规定,酸碱度、含氮量、氨基氮、干燥失重和炽灼残渣之间差异无统计学意义(P0.05),鱼蛋白胨FZU01相对分子质量主要分布在1 000以内,占92.5%,鱼粉蛋白胨相对分子质量主要分布在10 000,小于1 000占56.1%;与鱼粉蛋白胨组相比,鱼蛋白胨FZU01组生长速率明显增加(P0.05)。随着组胺浓度的增加,大肠埃希菌的生长抑制率逐渐增加,与组胺浓度呈正相关,IC50为257.3 mg/L,当组胺浓度大于600 mg/L时,完全抑制大肠埃希菌的生长;大肠埃希菌的生长抑制率与重金属离子浓度呈正相关,Hg~(2+)、Cd~(2+)、As~(3+)、Cr~(6+)和Pb~(2+)对大肠埃希菌的IC50分别为1.35、4.67、7.37、11.04和20.19 mg/L。结论应增加蛋白质相对分子质量、组胺和重金属作为蛋白胨产品重要质量参数,控制一定的浓度限量范围,才能保证蛋白胨产品的稳定性和安全性。     

氨基酸分析在重组蛋白类生物制品质量控制中的应用

氨基酸分析是蛋白质一级结构分析的有力工具,氨基酸分析在重组蛋白类生物制品的质量控制中发挥着重要作用,其应用主要包括:氨基酸含量及组成分析、蛋白精确定量及消光系数计算,为重组蛋白的结构确证及功能研究提供依据。本文就氨基酸分析在重组蛋白类生物制品质量控制中的应用作一综述。     

分装容器对培养基热穿透、灭菌效果及灵敏度的影响

目的分析不同分装容器内培养基的热穿透、灭菌效果、灵敏度差异以及三者之间的相互关系。方法将硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基分装于中试管和血浆瓶,用TMI温度探头比较两种容器的热穿透差异,用灭菌指示剂比较不同容器中培养基灭菌效果,灵敏度试验比较不同容器中培养基灵敏度。结果血浆瓶热穿透力中试管热穿透力;两种容器内培养基灭菌效果和灵敏度结果均无差异。结论 116℃蒸汽灭菌30 min不会破坏硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基的有效营养成分,且能达到灭菌目的;两种培养基的热穿透性因分装容器种类而异,但灭菌效果、灵敏度与分装容器无直接关系。     

肺炎克雷伯氏菌培养工艺的研究

本文研究了肺炎克雷伯氏菌的培养工艺，得到了实验范围内最佳的培养基组成和培养条件；葡萄糖1％（质量分数，下同），大豆胨1．5％，牛肉浸膏0．2％，酵母粉0．2％，蛋白胨0．5％，氯化钠0．5％，K2HPO4 0．35％，KH2PO4 0．15％。2％接种量，转速160r/min和20％的摇瓶装填量是适宜的。     

淋病奈瑟氏菌培养基和保护剂的研究

本文报告了淋病奈瑟氏菌生长培养基、糖发酵生化培养基、保存培养基和真空干燥保护剂的研究。应用27株淋病奈瑟氏菌进行试验表明,全部菌株在特殊蛋白胨血琼脂和多种蛋白胨血琼脂上24小时生长良好;26株菌在NGCM-1生化培养基中发酵葡萄糖产酸(96.3％),保存培养基在27℃可保存菌种30天左右,10％脱脂奶粉作为保护剂真空干燥菌种可保存20个月以上。     

F检验在原料质量控制中的应用

阐述了F检验的概念和原理,通过实例说明了F检验在原料质量控制中的应用是提高原料质量的重要方法;介绍了用Excel办公软件计算F值的步骤;详细说明了F检验在原料质量控制中的判定方法和原则;通过综合样本检验和F检验两种检验结果的对比展示了F检验的优越性。     

生物制品药品通用名称命名的研究进展

生物制品的药品通用名称管理是一项有意义的工作,规范药品的名称对加强药品的监督管理及维护公共健康利益至关重要。我国生物制品虽有其命名原则,但是较为复杂,有待规范化。本文对我国目前生物制品药品通用名称的命名原则、进展及存在的问题作一综述。     

一种枯草芽孢杆菌的计数方法

为了对一株高度黏连的产多种酶的枯草芽孢杆菌进行有效的活菌计数,试验采用普通培养基,蛋白胨添加质量分数1%、0.5%,牛肉粉和牛肉膏添加质量分数0.3%,氯化钠添加质量分数1%、0.5%,琼脂粉添加量1.5%、3.0%,在不同添加量下进行活菌计数及芽孢计数研究分析。试验结果表明:普通培养基平板蛋白胨、牛肉粉和牛肉膏、氯化钠不同添加量条件下,该菌株枯草芽孢杆菌在平板显示菌落个数仍然比较大,菌落黏连在一起,造成计数偏低,难以形成有效的活菌计数,对产品质量无法准确判断。针对这种情况,最终优化出一种合适平板培养基,蛋白胨1%、牛肉膏0.3%、氯化钠0.5%、琼脂粉3.0%(均为质量分数),使本菌能够生长并菌落独立,计数结果准确,重复性好。说明在活菌计数和芽孢计数中,优化培养基是某些特殊菌株(菌落黏连)的理想计数方法。