HPLC测定海豹油软胶囊中3种多不饱和脂肪酸含量

目的建立测定海豹油软胶囊中有效成分二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、二十二碳五烯酸(DPA)含量的方法。方法以氰基柱色谱柱为分析柱,乙腈-水(90∶10)为流动相,检测波长220 nm。结果 EPA甲酯、DHA甲酯和DPA甲酯线性范围分别为0.6～3.6μg,0.6～3.6μg,0.3～1.8μg,加样回收率分别为99.75%,100.37%,100.35%,RSD分别为1.19%,0.87%,1.22%。结论本方法简便、快速、稳定、重复性好,可用于海豹油软胶囊的质量控制。     

HPLC测定海豹油软胶囊中3种多不饱和脂肪酸含量

目的 建立测定海豹油软胶囊中有效成分二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、二十二碳五烯酸(DPA)含量的方法.方法 以氰基柱色谱柱为分析柱,乙腈,水(90:10)为流动相,检测波长220 nm.结果 EPA甲酯、DHA甲酯和DPA甲酯线性范围分别为0.6～3.6μg,0.6～3.6 μg,0.3～1.8μg,加样回收率分别为99.75％,100.37％,100.35％,RSD分别为1.19％,0.87％,1.22％.结论 本方法简便、快速、稳定、重复性好,可用于海豹油软胶囊的质量控制.     

气相色谱法多重检验海豹油中二十碳五烯酸、 二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸方法研究

目的建立多重检验海豹油中二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)、二十二碳五烯酸(docosapentenoic acid,DPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)的气相色谱法。方法用氢氧化钾甲醇溶液将样品中EPA、DPA和DHA甲酯化,气相色谱程序升温同时分析3个ω-3多不饱和脂肪酸,分别用外标法和内标法进行定量。结果 3个ω-3多不饱和脂肪酸的外标法定量线性范围为50~5000μg/m L,相关系数均0.999,精密度相对标准偏差均10%,回收率均90%;内标法定量的精密度相对标准偏差均10%,回收率均85%;外标法和内标法对3个ω-3多不饱和脂肪酸的结果比较,CV%均小于10%。结论该方法操作简单快捷,适用于进口海豹油中EPA、DPA和DHA的含量简便和准确的测定。     

气相色谱法测定鱼油中的二十碳五烯酸、 二十二碳六烯酸和二十二碳五烯酸

目的通过优化鱼油中二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)、二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)和二十二碳五烯酸(docosapentaenoic acid,DPA)的测定条件,建立鱼油中EPA、DHA和DPA气相色谱定量检测分析方法。方法采用正己烷处理样品,经色谱柱(Agilent,Elite-WAX,30 m×0.25 mm,0.25μm)分离鱼油中的EPA、DHA、DPA甲酯标准品,并进行定量检测。结果 EPA浓度在0.36~3.6 mg/m L、DHA浓度在0.37~3.7 mg/m L、DPA浓度在0.16~1.62 mg/m L的范围内与峰面积的线性良好,相关系数r0.999。在80%、100%、120%添加水平下,EPA、DHA和DPA的检出限分别为0.01%、0.03%、0.009%,EPA、DHA和DPA的回收率分别为96.2%、96.4%、95.7%。结论气相色谱法灵敏度高、准确、重现性好,适用于鱼油中EPA、DHA和DPA的含量测定。     

海豹油精制及酯化过程中品质和挥发性物质变化规律的研究

海豹油作为功能性油脂的新来源,除富含EPA、DHA外,还含有增效因子DPA,具有较好的保健功能。精制及酯化作为高纯度功能性油脂生产的重要工序,对产品质量具有重要影响,研究精制及酯化过程中海豹油品质的变化对产业化具有指导意义。以海豹油为对象,以理化指标、脂肪酸组成和挥发性物质组成为指标,通过理化分析、气相色谱(GC)及顶空固相微萃取-气质联用(HS-SPME-GC-MS)等技术研究精制及酯化对海豹油品质的影响。结果表明:1)精制可显著(P0.05)降低海豹油中的水分及挥发性物质的含量(1.65%降至0.49%)和酸价(3.11 mg KOH/g降至0.63 mg KOH/g),对海豹油过氧化物值的影响不显著;2)精制及酯化会降低海豹油中MUFA的含量,提高SFA和反式脂肪酸含量(C18:1 trans、C18:2 trans),对EPA、DPA和DHA的含量影响不大;3)从海豹油原油、精制油及酯化油中分别检测出86,50和44种挥发性物质,总峰面积分别为83.16%,60.06%和36.19%,说明精制可显著降低海豹油中挥发性物质的种类和含量,酯化工艺可显著降低海豹油中挥发性物质的含量。     

气相色谱法同时测定保健食品中的5种 不饱和脂肪酸

目的建立气相色谱法同时测定保健食品中亚油酸、α-亚麻酸、二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)、二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)和二十二碳五烯酸(docosapentaenoic acid,DPA)的含量。方法样品先采用氢氧化钾甲醇溶液进行皂化处理,再用三氟化硼甲醇溶液甲酯化,经HP-FFAP色谱柱(30m×0.53 mm,1.0μm)分离测定。结果 EPA甲酯、DHA甲酯、DPA甲酯、亚油酸甲酯、α-亚麻酸甲酯分别在0.03927~1.178、0.04200~1.260、0.03449~1.035、0.08368~1.255、0.08482~4.241 mg/mL的浓度范围内线性关系良好,相关系数r均大于0.999;检出限分别为0.0039、0.0042、0.0034、0.0042、0.0042 mg/mL;加标回收率在91.1%~109.3%之间,相对标准偏差均小于5%。结论该方法操作简单快捷,适用于保健食品中亚油酸、α-亚麻酸、EPA、DPA和DHA的测定。     

HPLC法测定海鲈鱼鱼油中EPA和DHA的含量

设计建立测定海洋鲈鱼鱼油中EPA (二十碳五烯酸)和DHA (二十二碳六烯酸)含量的方法,并测定尿素包合前后鱼油中EPA和DHA含量变化。采用Agilent色谱柱型号XDB (C_(18)),设置柱温38℃、检测波长220 nm、恒定流速1 mL/min,流动相乙腈-水梯度洗脱。结果表明, EPA甲酯和DHA甲酯的检测线性范围分别为0.059～5.9和0.094～9.4μg (R~2_(EPA)=0.999 6, R~2_(DHA)=0.999 9),检出限分别为0.5和0.9μg/mL。在精密度试验中, EPA甲酯和DHA甲酯的RSD分别为0.29%和0.34%。在加样回收率试验中,分别设计了6个加标浓度做检测, EPA甲酯和DHA甲酯的平均回收率分别为99.29%～99.87%(平均99.52%)和99.59%～101.48%(平均100.22%),平均RSD分别为0.24%和0.83%。尿素包合前,原料鱼油中EPA和DHA的含量分别为1.23%和2.52%;尿素包合后,含量分别为5.66%和12.34%。建立的HPLC法稳定、快捷、重复性好,适用于海鲈鱼下脚料鱼油中EPA和DHA含量测定。尿素包合后EPA和DHA的含量显著增长,达到包合前的4.8倍。     

GC-MS测定藻油中DHA、DPA及其他微量成分

目的:采用GC-MS法测定市售藻油中主要成分DHA、DPA及其他微量成分的含量。结果:3种市售藻油的甲酯化产物中,主要成分二十二碳六烯酸(DHA)甲酯含量为24.77~41.20%、二十二碳五烯酸(DPA)甲酯含量为4.00%~5.60%;此外,藻油的甲酯化产物中还含有19种饱和脂肪酸酯、24种不饱和脂肪酸酯,除了脂肪酸外,藻油中还含有少量的烃类、醇类和酮类物质。结论:市售复合型藻油为藻油与亚麻籽油等植物油按一定比例调和而成,且其DHA含量不满足国家标准GB 26400—2011的要求;角鲨烯和亚麻醇这两种微量成分的存在,使藻油比其他市售植物油更具保鲜和保健功能。     

气相色谱法测定ω-3营养强化鸡蛋蛋黄中 ALA、EPA和DHA含量

建立了一种气相色谱法快速、准确测定ω-3营养强化鸡蛋蛋黄中ALA、EPA和DHA含量的方法。样品经过乙酰氯甲醇甲酯化处理,采用气相色谱法测定,Agilent DB-FastFAME色谱柱分离脂肪酸甲酯,以十一烷酸甘油三酯为内标物进行定量。结果表明：鸡蛋蛋黄中ω-3 PUFA和内标物分离效果良好;ALA甲酯、EPA甲酯和DHA甲酯的色谱峰面积与其质量浓度呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.99;样品的加标回收率为87.2%~101.1%,相对标准偏差为1.1%~2.6%。该方法操作方便、快速准确,适合批量测定ω-3营养强化鸡蛋蛋黄中ω-3 PUFA的含量。     

毛细管气相色谱内标法同时测定奶粉中亚麻酸、ARA、EPA和DHA

建立了以二十一烷酸甲酯为内标物,同时测定奶粉中亚麻酸ARA、EPA和DHA的毛细管气相色谱方法。试样经氢氧化钾-甲醇甲酯化后、生成相应的脂肪酸甲酯,再经气相色谱分析、内标法定量。结果表明,奶粉中亚麻酸、ARA、EPA、DHA和内标物均获得良好的分离;4种被测组分色谱峰面积与其质量浓度有良好线性关系,相关系数均大于0.998;样品加标回收率为95.4%～104.7%,变异系数为2.168%～4.368%,检出限为1.0mg/100 g。该方法操作简便、快速、准确,适合批量奶粉中亚麻酸、ARA、EPA和DHA的测定。     

POSITIONAL DISTRIBUTION OF FATTY ACIDS IN TRIACYLGLYCEROLS OF SEAL BLUBBER OIL

The positional distribution of long-chain ω3 polyunsaturated fatty acids namely eicosapentaenoic acid (EPA), docosapentaenoic acid (DPA), and docosahexaenoic acid (DHA) in the triacylglycerol (TAG) molecules of seal blubber oil was determined and compared with that of commercially available menhaden oil via stereospecific analysis. In seal blubber oil, EPA, DPA and DHA occurred mainly in the sn-1 and sn-3 positions of the TAG molecules. The amounts were EPA, 8.36 and 11.2; DPA, 3.99 and 8.21; and DHA, 10.5 and 17.9%, respectively. In menhaden oil, DPA and DHA occurred mainly in the sn-2 position of the TAG at 3.11 and 17.2%, respectively. However, EPA was equally distributed in the sn-2 and sn-3 positions and was present only in minute amounts in the sn-1 position.     

Different specificity of two types of Pseudomonas lipases for C20 fatty acids with a Delta5 unsaturated double bond and their application for selective concentration of fatty acids

Two kinds of lipases, AK-lipase and HU-lipase, produced by two different Pseudomonas fluorescens strains, AK102 and HU380, respectively, were evaluated as to fatty acid hydrolysis specificity using six types of oil containing higher amounts of C20 fatty acids such as arachidonic acid (5,8,11,14-eicosatetraenoic acid, AA, or 20:4omega6), dihomo-gamma-linolenic acid (8,11,14-eicosatrienoic acid, DGLA, or 20:3omega6), 5,8,11,14,17-eicosapentaenoic acid (EPA or 20:5omega3), mead acid (5,8,11-eicosatrienoic acid, MA, or 20:3omega9), 8,11-eicosadienoic acid (20:2omega9) and 8,11,14,17-eicosatetraenoic acid (20:4omega3). Although HU-lipase did not show any specificity for C20 fatty acids with respect to the presence or absence of a Delta5 unsaturated bond, it exhibited comparatively low reactivity for 4,7,10,13,16,19-docosahexaenoic acid (DHA or 22:6omega3). In contrast, AK-lipase was less reactive for C20 fatty acids with a Delta5 unsaturated bond. However, the specificity of hydrolysis of AK-lipase gradually decreased as the reaction proceeded. Utilizing this fatty acid specificity, we concentrated either EPA or DHA from fish oils containing both EPA and DHA by means of lipase-catalyzed hydrolysis and urea adduction. Hydrolysis and urea adduction of refined cod oil including 12.2% EPA and 6.9% DHA with HU-lipase provided free fatty acids with 43.1% EPA and 7% DHA, respectively. The resulting yield of concentrated total fatty acids comprised 2.6% of the fatty acids from the cod oil. Thus, EPA was particularly concentrated in the fatty acids derived from refined cod oil on partial hydrolysis with HU-lipase followed by urea adduction. On the other hand, hydrolysis of cuttlefish oil with AK-lipase followed by urea adduction increase slightly the EPA composition from 14.2% to 16.8%, and markedly enhanced the composition of DHA from 16.3% to 44.6% in the hydrolyzed fatty acids. The yield of purified total fatty acids by urea concentrate was 9.4% of the fatty acids from the cuttlefish oil. Thus, DHA was particularly concentrated in the fatty acids derived from on partial hydrolysis with AK-lipase followed by urea adduction. We concluded that EPA and DHA concentrates can be easily and inexpensively obtained using HU-lipase and AK-lipase, respectively. Furthermore, it might be possible to separate and concentrate C20 polyunsaturated fatty acids (PUFAs) with or without a Delta5 double bond from PUFAs rich oils including both fatty acids.     

直接进样串联质谱法快速筛查水产副产物中ω-3脂肪酸链磷脂

建立自下而上快速筛选含二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA）、二十二碳五烯酸（docosapentenoic acid,DPA）和二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）链磷脂的新方法。通过针泵注射进样,以m/z 301、329和327为特征碎片离子峰进行母离子扫描（precursor ion scan,PreIS）,采用去簇电压－100 V和碰撞电压－40 V,质谱扫描范围设定为350～1?150?Da,得到含EPA、DPA和DHA链磷脂质谱全谱图。经结构鉴定和归一法含量计算,结果表明：水产品加工副产物中磷脂种类丰富,共鉴定50?种EPA、DPA及DHA磷脂分子,其sn-1位置的脂肪酸链主要以C16:0、C18:1和C18:0为主,部分磷脂脂肪酸链不饱和度极高,如磷脂酰丝氨酸20:5/22:6和磷脂酰肌醇22:6/22:6等,以水产品加工副产物为原料开发ω-3脂肪酸链磷脂保健功能产品潜力较大。方法经验证,特征磷脂分子相对标准偏差不高于7.3%,PreIS模式下质谱数据稳定性较好。本方法可一步快速筛查样品中含ω-3脂肪酸链磷脂,理论上同样适用于其他生物样品,可为探索与发现磷脂新资源提供一定理论支持。     

基于脂肪酸特征指标的鳕鱼肝油掺假鉴定

通过分析鳕鱼肝油中各脂肪酸的相对含量及特征指标变化规律,建立鳕鱼肝油掺假鱼油的鉴定方法。鳕鱼肝油中所含脂肪酸经柱前衍生转化为甲酯后进行气相色谱测定,采用面积归一化法计算各脂肪酸相对总脂肪酸的相对含量。根据多样本脂肪酸相对含量分析结果,找出能有效识别掺假的特征性指标二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）/二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA）值和鲸蜡烯酸相对含量,并确定其限度范围,DHA/EPA值为1.40～1.68,鲸蜡烯酸相对含量为7.0%～9.4%。当鳕鱼肝油样品中测得的DHA/EPA值和（或）鲸蜡烯酸相对含量超过此限度时,可初步判定该样品掺假鱼油。为进一步有效识别掺假水平,本研究探索建立一种以DHA/EPA值和鲸蜡烯酸相对含量为坐标的掺假模型,并绘制不同掺假水平的识别分析图,46 批样品经鉴定,有2 批样品疑似掺假25%的鱼油。该鉴定方法准确可靠、直观简便,可用于鳕鱼肝油中掺假鱼油的快速鉴定。     

Lipase-Assisted Concentration of n-3 Polyunsaturated Fatty Acids from Viscera of Farmed Atlantic Salmon (Salmo salar L.)

ABSTRACT: In fish processing, viscera are generally considered waste products and often discarded. Our research objective was to use Atlantic salmon ( Salmo salar L.) viscera as a source of fish oil and to increase its concentration of eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoic acid (DHA) by lipase-assisted hydrolysis. Lipids from fillets and viscera had similar fatty acid compositions. After the enzymatic hydrolysis, acylglycerols were isolated from free fatty acids, therefore increasing the concentrations of EPA and DHA in the acylglycerols. Among the 6 commercial lipases investigated, lipases from Pseudomonas cepacia and Candida rugosa were the most effective following incubation of viscera oil at 35 °C for 20 h. Salmon viscera were a good source for fish oil, and the concentration of DHA and EPA was doubled by using microbial lipases.     

富含n-3LC-PUFA调和油的家庭烹饪氧化稳定性研究

通过对DHA和EPA质量分数分别为0.23%、0.45%、0.90%、1.80%的调和油进行家庭炒菜试验的研究,考察了富含n-3长碳链多不饱和脂肪酸(Long chain polyunsaturated fatty acid,LC-PUFA)的调和油的家庭烹饪氧化稳定性。结果表明:炒土豆丝后,上述油样中DHA和EPA的损失分别为1.2%、2.9%、2.4%、1.4%;炒青椒肉片后其损失分别为:3.0%、2.2%、2.4%、4.5%。炒菜前后调和油的各项指标包括羰基价、总氧化值(TOTOX)、硫代巴比妥酸值(TBA)、酸价和聚合物含量与大豆油(对照样1)以及不含DHA和EPA的调和油(对照样2)相比,油样的氧化程度以及油脂品质与两个对照样接近。不同DHA和EPA含量的调和油炒菜之后其多不饱和脂肪酸保留率在95%以上,氧化稳定性和豆油接近,适合家庭烹饪。     

利用生物技术生产廿碳五烯酸和廿二碳六烯酸

根据现在的了解，能产生有意义含量的廿碳五烯酸（ＥＰＡ）和廿二碳六烯酸（ＤＨＡ）的微生物有真菌和藻类。在微生物中，多不饱和脂肪酸的合成通常是以单不饱和脂肪酸、油酸为底物。合成途径中，有两个主要的反应，即碳链的增长和去饱和作用。ＥＰＡ和ＤＨＡ的生成通过ω－３代谢途径。微生物脂肪酸构成的质量和数量都受培养基的组分，通气、光照强度、温度和培养时间等环境因素的影响。大多数用于提取鱼油中的ＥＰＡ的方法也可用于微生物脂质中的ＥＰＡ的提取。几种方法被提出来生产高含量的ＥＰＡ和ＤＨＡ。它们一般是基于下列技术的结合：溶剂提取、尿素包合法、分子蒸馏、分馏、液相色谱法和超临界二氧化碳提取。     

利用微藻培养生产多不饱和脂肪酸研究进展

多不饱和脂肪酸(PUFA),尤其是二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)在营养和医学领域有着重要作用。目前PUFA主要从鱼油中提取,工艺复杂,价格昂贵。微藻中含有丰富的多不饱和脂肪酸,利用微藻生产多不饱和脂肪酸具有广阔的前景。本文综述了微藻培养生产PUFA的研究进展,包括生理作用、合成途径、来源分布及培养方式等。