黑麦草组织的快速繁殖

为加快草坪草无性系的选择、推广和应用,以黑麦草成熟种子为外植体进行组织培养,筛选出较理想的愈伤组织分化、芽分化、增殖和生根培养基,即愈伤组织培养基选用MS+2.0 mg/L2,4-D+0.5 mg/L6-BA,愈伤率可达80.0%;芽分化、增殖培养基为MS+0.1 mg/L 2,4-D+1.0mg/L6-BA,芽分化率可达44.8%;生根培养基为1/2MS+0.5 mg/LNAA,生根时间短,生根率可达到88.2%以上.     

云烟87烤烟品种突变株的离体快繁技术研究

以云烟87烤烟品种突变巨型株的休眠芽为试材,对其进行了打破休眠促使萌芽、愈伤组织诱导、丛生芽增殖和生根培养的研究。结果表明:打破休眠促使其萌芽的最佳培养基配方为MS+2.0mg/L 6-BA+1.0mg/L NAA;诱导产生愈伤组织效果最佳的培养基配方为MS+3.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA;丛生芽增殖效果最佳的培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA;MS+0.6mg/L NAA对根系的生长最为有利。      

烟草愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养体系的建立

以鄂烟1号无菌苗的叶为材料进行愈伤组织的诱导,筛选出生长培养基的最佳激素配比,初步建立了烟草细胞悬浮培养体系。结果表明,愈伤组织诱导的最优基本培养基为MS培养基,以MS NAA1.0mg/L 6-BA0.5mg/L为最佳配方;愈伤组织最佳生长培养基为MS 2,4-D0.1mg/L NAA1.5mg/L 6-BA0.3mg/L,愈伤组织培养第6天进入对数生长期,第14天干重增至最初干重的12.536倍,并以此配方建立了烟草细胞悬浮培养体系。     

祈州漏芦的组织培养与快繁技术研究

目的：对祁州漏芦愈伤组织诱导培养基和生长的培养条件进行研究,构建祁州漏芦快速繁殖体系。方法：通过筛选外植体,添加不同种类及浓度的生长调节剂对祁州漏芦进行愈伤组织诱导、芽增殖培养及生根培养。结果：诱导愈伤组织适宜培养基：MS＋0.3mg/L NAA＋3.0mg/L 6-BA;芽增殖培养以MS＋0.3mg/L NAA＋5.0mg/L 6-BA为宜;生根培养以1/2MS＋0.1mg/L NAA为佳。结论：利用组织培养技术能够实现祁州漏芦快速繁殖。     

紫薯愈伤组织诱导和培养条件优化及绿原酸类化合物的积累

以紫薯叶片为外植体,通过筛选培养基和培养条件建立了紫薯愈伤组织培养体系。研究6-苄基氨基嘌呤(6-BA)及萘乙酸(NAA)不同浓度组合对紫薯愈伤组织诱导的影响,之后分别考察基础培养基MS、1/2MS、B5、WPM、White及NAA、6-BA、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)三种激素对紫薯愈伤组织继代生长的影响。确定最适基础培养基后,对激素进行单因素实验后再做正交实验。结果表明1/2MS基本培养基中添加1.5 mg/L 6-BA和0.4 mg/L NAA适合紫薯愈伤组织诱导,诱导率为81.82%。MS为优选基础培养基,通过正交实验优化的激素配比组合为1.0 mg/L NAA,0.4 mg/L 6-BA,1.0 mg/L 2,4-D。最佳继代培养基为MS+1.0 mg/L NAA+0.4 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D+6 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,此优化激素条件下愈伤组织的生物量增长倍数为23.46倍,3-咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰宁酸、4,5-二咖啡酰宁酸三种绿原酸类化合物含量分别为0.30%、1.91%、1.10%,三者总含量3.31%,因此,通过紫薯愈伤组织培养生产绿原酸类化合物是可行的。     

草珊瑚的组织培养及植株再生研究

目的 草珊瑚茎段离体培养研究,解决草珊瑚人工栽培中种苗短缺问题.方法 用茎段作外植体,以MS,White,N6和B5为基本培养基,附加不同浓度的激素进行培养.结果 MS基本培养基较佳;芽的初代诱导用MS BA 1.0 mg/L,诱导率80%;增殖继代用MS BA 2.0 mg/L NAA0.3 mg/L培养基,增殖系数达6.2;根的诱导用1/2MS IBA1.0 mg/L培养基,生根率100%.结论 本研究得出的方法可为栽培草珊瑚提供大量种苗.     

红宝石无核和SO4单芽茎段的增殖与成苗培养

以葡萄栽培品种红宝石无核和砧木SO4的单芽茎段为材料,研究葡萄的初代培养与增殖培养.结果表明,升汞的最佳消毒时间为12min、13min;红宝石无核最适初代培养基为1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,砧木SO4的最适培养基为1/2MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L;红宝石无核继代增殖的最适培养基为MS+6-BA0.8mg/L+IBA0.2mg/L,砧木SO4为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L.两品种最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.4mg/L,红宝石无核生根率达98%,而SO4则达100%.     

银杏愈伤组织培养及其黄酮生物合成的初步探讨

本文采用银杏果实和植株诱发的茎尖和叶尖为原料，筛选银杏愈伤组织生长和继代培养的最佳条件和激素组合；利用继代培养愈伤组织进行细胞悬浮培养并检测黄酮的生物合成量。结果表明：（1）银杏愈伤组织的诱导及继代培养以附加NAA3.0mg/L和BA1.0mg/L的MS培养基效果最好；（2）采用0.1%浓度的植酸可以抑制褐变，并对愈伤组织的生长有促进作用；（3）在培养基中添加5％的蔗糖时愈伤组织增长倍数最高；愈伤组织继代培养40－45d时增长倍数达到最大值；（4）银杏愈伤组织细胞悬浮培养时，细胞生长速度可达6.8倍，黄酮生物合成量为68.76mg/L。     

EMS诱变甘蔗愈伤组织的初步研究

为了探索EMS对甘蔗愈伤组织进行化学诱变的合适浓度和时间组合,以ROC22和粤糖93-159甘蔗愈伤组织为材料,研究了不同浓度(8、24、40μmol/L)、不同时间(2、4、6 h)诱变处理对愈伤组织的每克鲜重相对增重量和相对分化率的影响。并通过分化试验选择适合诱变后愈伤组织分化的培养基。结果表明,适合诱变处理后愈伤组织分化的培养基为:MS基本培养基+2 mg/L KT+2 mg/L NAA+3.0%蔗糖(W/V)+0.8%琼脂(W/V)。适合EMS诱变甘蔗的处理为:24μmol/L诱变处理2 h或8μmol/L诱变处理6 h。     

甘蔗居间分生组织腋芽的诱导研究

通过分析并解决甘蔗桂南亚08-186居间腋芽诱导的问题,为其他甘蔗品种提供理论基础;试验使用了MS基本培养基(蔗糖30 g/L+6-BA 0.1mg/L;pH 6.0)作为基础培养基添加不同浓度NAA(吲哚乙酸)和GA3(赤霉素),以找出最佳诱导组合;在培养至15天后,除了处理A1B1外其余均有腋芽冒出,2个处理A2B2、A2B3重复出芽瓶数分别为654和652;通过方差分析获MS+0.1mg/L NAA+0.05mg/L GA以及MS+0.1mg/L NAA+0.01mg/L GA较为理想的诱导桂南亚08-186居间分生组织腋芽培养基。本试验结果表明较低浓度的NAA配合较高浓度的GA3对桂南亚08-186居间分生组织具有较强的诱导分化作用。NAA可以打破分化居间分生组织的休眠,而GA3辅助促进了腋芽伸长和增高,二者相结合的方式可以打破休眠诱导分化居间分生组织长出腋芽。     

杜仲疏松愈伤组织诱导条件的优化筛选

杜仲愈伤组织生长过于致密从而导致难以实现悬浮培养,因此获得疏松、生长快速愈伤组织是实现杜仲细胞悬浮培养的前提.本文研究了不同外植体、激素和培养基对杜仲愈伤组织诱导率、疏松程度以及褐化率的影响,结果表明：上胚轴和子叶更容易被诱导为疏松愈伤组织,MS培养基是最适诱导培养基;适当增加6-BA浓度有助于褐化的减轻且提高愈伤组织疏松程度,杜仲疏松愈伤组织诱导最适激素配比为1.0mg/L 2,4-D＋1.0mg/L NAA＋1.0mg/L 6-BA.     

苯乙酸对烟草单倍体植株叶脉组织培养一步成苗的效应研究

本研究探明了苯乙酸(PAA)对烟草单倍体植株叶脉切段培养一步成苗的效应,发现PAA与NAA、6-BA配合使用能有效促进一步成苗的发生。试验证明PAA对一步成苗的促进效应与各种激素浓度配比和基本培养基的种类有关,与基因型的关系不明显。烟草单倍体植株叶脉切段培养一步成苗的最佳培养基配方为MS+PAA 20 mg/L+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+谷氨酰胺50 mg/L+麦芽糖30 g/L。试验还证明,与2,4-D诱导产生愈伤组织途径的多级成苗培养相比,本研究建立的PAA一步成苗培养具有以下优点:1)显著提高愈伤组织的诱导率;2)显著提高愈伤组织的质量,有效提高愈伤组织分化率;3)成苗率显著高于多级成苗;4)再生植株具有更好的幼苗素质;5)再生植株的染色体数目变异率也显著低于多级成苗;6)获得双单倍体植株的频率显著高于多级成苗;7)能有效缩短培养周期、节约成本。      

固定化银杏克隆细胞悬浮培养产生黄酮的研究

采用银杏果实为原料诱导得到颗粒状愈伤组织,在MS培养液中筛选克隆细胞,单细胞在MS+3·0mg/LNAA+1·0mg/LKT中培养。细胞悬浮液与3%的海藻酸钠混合后滴入2%CaCl2MS,制成小球凝胶。固定化细胞在MS+3·0mg/LNAA+1·0mg/LKT+10mg/L肌醇的培养基中悬浮培养25d,黄酮生物合成量为85·63mg/L,克隆细胞增长速度提高24·45倍。     

An Efficient Regeneration System and Optimization of the Transformation from the Cotyledonary Node of Jute (Corchorus capsularis L.)

The purpose of this study was to use cotyledonary nodes as explants to establish an efficient regeneration protocol for jute (Corchorus capsularis L.) on Murashige and Skoog (MS) basal medium. Research into the different growth regulators using the orthogonal design L16 (4⁵) revealed that the best shoot induction medium is MS medium containing 8% (w/v) agar and 3% (w/v) sucrose supplemented with 1.0 mg/L 6BA and 0.25 mg/L NAA. The average number of shoots per explant and the explant induction rate were 9.8 and 100%. After 3 weeks, 2–3 cm shoots were rooting on 1/2 MS medium containing 8% (w/v) agar and 3% (w/v) sucrose supplemented with 1.0 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA. Moreover, we optimized Agrobacterium-mediated transformation using the GUS gene transient expression system. The best condition for obtaining higher transformation rate consisted of the use of fresh explants to which 100 μM acetosyringone was added for a co-culture time of 10 min, the OD value of Agrobacterium liquid is 0.5 at 600 nm. These data provide an important basis for the application of other trait gene in the improvement of jute fiber quality.     

紫苏细胞悬浮培养生产迷迭香酸条件研究

通过诱导紫苏下胚轴和子叶外植体产生愈伤组织,建立细胞悬浮培养体系,以提高细胞产量及细胞中迷迭香酸含量。结果表明,在MS液体培养上添加3.0mg/L 6-芐氨基嘌呤(6-BA)＋0.3mg/L萘乙酸(NAA)培养基上,下胚轴愈伤组织呈嫩黄色松散状态,出愈时间短,出愈率可达100%。紫苏细胞悬浮培养产生迷迭香酸的最佳条件为培养时间7d、接种量鲜质量浓度20g/L、摇床转速110r/min、蔗糖30g/L、L-苯丙氨酸0.15g/L,此条件下可获得高达2.283mg/g的迷迭香酸。     

外源激素对紫苏愈伤组织诱导及迷迭香酸积累的影响

以紫苏叶片为外植体,通过向B5培养基中添加不同浓度的激素组合,进行正交实验,研究其对紫苏叶片愈伤组织诱导率的影响。结果表明,在B5培养基中,添加2,4-D1.0 mg/L+KT0.4 mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA1.5mg/L时,愈伤组织诱导率最高。通过高效液相色谱法测定,紫苏叶片中迷迭香酸含量为0.25%,而在最佳培养基中培养40 d的愈伤组织中的含量为3.85%,有了显著的提高。研究为紫苏迷迭香酸高产细胞系的建立提供了理论依据。     

不同培养条件对银杏愈伤组织生长及黄酮含量的影响

以胚为外植体,通过固体培养,研究了培养基,激素和光照对银杏愈伤组织诱导的影响,以及继代培养中激1素和活性炭对愈伤组织生长和产黄酮的影响,结果表明:愈伤组织的诱导的最佳条件为DCR培养基+1.0mg/L2,4-D+0.5mg/LBA+完全暗条件培养。继代培养过程中既能促进愈伤组织生长又使黄酮含量最高的处理为0.3mg/LBA+2.0mg/L2,4-D,活性炭抑制愈伤组织生长但能促进黄酮的积累。