羊乳酪蛋白酶解物对秀丽线虫衰老的改善作用

该研究利用秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）模型研究了羊乳酪蛋白酶解物（Goat Milk Casein Hydrolysates,GMCH）的抗衰老及体内外抗氧化作用。通过对比GMCH实验组和大肠杆菌对照组秀丽线虫的寿命、运动能力、脂褐素水平等指标来研究GMCH的抗衰老作用,通过自由基清除实验以及测定线虫体内抗氧化酶活性评价GMCH的体内外抗氧化活力,同时测定秀丽线虫在过氧化氢、百草枯及热应激条件下的寿命。结果表明,与对照组相比,喂食0.1 mg/mL羊乳酪蛋白酶解物的线虫的平均寿命延长9.33%,体内脂褐素水平降低了65.00%,同时GMCH对线虫的生殖能力和运动能力没有负面影响,对线虫氧化应激和热应激有一定的保护作用;GMCH具有一定的体外抗氧化能力并且能够提高线虫体内抗氧化酶活力,与对照组相比,实验组SOD活力提高43.30%、CAT活力提高124.40%、GSH活力提高176.90%、MDA含量降低78.70%。综上所述,GMCH能够延长线虫的寿命,降低线虫体内脂褐素积累,提高线虫在应激条件下的抵抗能力和体内抗氧化酶活力,具有较好的抗衰老活性。     

大豆酸奶对秀丽隐杆线虫体内抗氧化和寿命的影响

该研究旨在利用野生型秀丽隐杆线虫N2对一款富含大豆异黄酮苷元的大豆酸奶进行生物活性评价。采用高效液相色谱法对该大豆酸奶中大豆苷元、黄豆黄素和染料木素的含量进行分析表明,结果表明其苷元含量比未发酵豆乳增加了26.4倍。采用体外抗氧化实验和野生型秀丽隐杆线虫N2对大豆酸奶的抗氧化活性进行评价,发现发酵后的混合豆乳对DPPH自由基、超氧自由基、ABTS+自由基的清除率分别为98.03%、73.77%、83.37%,比发酵前显著提高（P<0.05）。大豆酸奶样液可将秀丽隐杆线虫的平均寿命和最大寿命分别延长21.57%和22.58%;饲喂大豆酸奶样液后,线虫体内超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性显著增强,体内活性氧（ROS）水平显著下降（P<0.05）,线虫抗应激能力显著增加（P<0.05）。说明通过乳酸菌发酵制备高苷元含量的大豆酸奶,可有效提高产品抗氧化活性,并能延长秀丽隐杆线虫寿命。     

虾青素对秀丽隐杆线虫衰老的改善作用及机制研究

通过寿命实验、氧化应激、热应激实验研究虾青素(Astaxanthin)对秀丽隐杆线虫衰老和急性应激效应的改善作用并探究其作用机制。秀丽隐杆线虫分为对照组和虾青素处理组(0.8、1.2和1.6 mmol/L),首先研究不同浓度虾青素对野生型线虫寿命的影响,通过平均与最大寿命确定作用的最佳剂量;选用最佳剂量的虾青素作用于野生型和突变株线虫,采用热应激和氧化应激实验研究其可能机制。结果表明:与对照组相比,采用1.2 mmol/L虾青素饲喂秀丽隐杆线虫,野生型线虫平均寿命延长了41.79%(p0.01),最大寿命延长了32.72%(p0.01)。热应激及氧化应激实验中,采用1.2 mmol/L虾青素饲喂秀丽隐杆线虫,野生型线虫平均生存时间分别延长了22.54%和24.23%(p0.01)。1.2 mmol/L虾青素可显著提高sir-2.1突变株线虫的存活时间,但对daf-2、daf-16和eat-2突变株线虫均无显著影响。综上所述,浓度为1.2 mmol/L的虾青素可显著延长野生型线虫的平均寿命和最大寿命,并显著延长其在氧化应激及热应激条件下的平均生存时间和最大生存时间。虾青素延长线虫寿命的功效可能是通过提高线虫的在热及氧化恶劣环境下的耐受能力而实现的,其作用机制可能与胰岛素信号通路及能量限制通路有关。     

酱油发酵基料中染料木素的抗氧化活性评价

该实验选化学法和秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）模型，探究酱油发酵基料中染料木素的抗氧化活性。体外实验表明，染料木素能有效清除DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子自由基及羟基自由基，半数清除率（IC50）分别0.35 mg/mL、0.16 mg/mL、0.29 mg/mL及0.72 mg/mL，其具有良好体外抗氧化活性。进一步实验发现，50、100和200 μmol/L染料木素能延长线虫的平均寿命（17.54%、20.88%及17.72%），提高产卵总量（17.96%、27.84%及41.37%），改善线虫运动能力（移动能力、正弦运动及头摆频率），提高热应激条件下线虫平均寿命（15.32%、23.88%及16.65%）。此外，50、100和200 μmol/L染料木素能提高线虫体内过氧化氢酶活性（144.52%、253.87%和295.60%）、超氧化物歧化酶活性（37.32%、31.51%及44.05%）及谷胱甘肽含量（10.39%、36.21%及25.84%），降低活性氧积累量（31.22%、38.57%及41.40%）和丙二醛水平（46.50%、73.52%及62.72%），增强线虫抗氧化防御系统，其中100 μmol/L染料木素抗氧化效果最好。综上，染料木素有效清除自由基、延长线虫的健康寿命，具有良好体内外抗氧化能力。本实验为染料木素的生物活性奠定研究基础，为其作为天然抗氧化剂的推广及应用提供理论依据。     

葡萄籽原花青素对秀丽隐杆线虫抗衰老的影响

以秀丽隐杆线虫作为模型,研究了葡萄籽原花青素(grape seed procyanidins,GSP)对线虫寿命、生殖能力和运动能力的影响,进行了热应激和氧化应激实验,探讨了原花青素影响线虫衰老的方式。结果表明:当原花青素浓度分别为100、200、300μg/mL时,与对照组相比,采用200μg/mL原花青素喂养秀丽隐杆线虫,线虫的平均寿命延长了25.7%(p<0.01),最大寿命延长了24.0%(p<0.01),线虫的运动能力增强,平均每天每分钟爬过的峰数延长了13.2%(p<0.05),可以作为喂养秀丽隐杆线虫的最佳剂量。与对照组相比,采用200μg/mL原花青素饲喂线虫,线虫的产卵高峰期延迟,但对产卵量总数和孵化率无显著影响;热应激胁迫中,线虫的平均生存时间显著延长了27.3%(p<0.01);氧化应激胁迫中,线虫的平均生存时间延长了11.2%(p<0.05)。结论:饲喂葡萄籽原花青素可以改善线虫的平均寿命,且主要是通过提高线虫的压力应激能力来延缓秀丽隐杆线虫的衰老。     

利用线虫模型评价乳酸菌体内抗氧化能力及其与体外抗氧化参数的对比

通过对24株乳酸菌(Lactobacillus)羟自由基清除能力、DPPH自由基清除能力以及还原能力的测定,比较其体外抗氧化能力的大小,而后将乳酸菌喂食秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans),并用质量分数为0. 003%的过氧化氢对线虫进行刺激,比较喂食不同乳酸菌的线虫寿命,分析乳酸菌在线虫体内缓解氧化损伤的能力。结果显示,植物乳杆菌(L. plantarum) Lp11不仅具有较高的体外抗氧化能力,还能有效缓解线虫体内因过氧化氢刺激引起的氧化应激,且缓解效果最好。体外抗氧化指标与线虫LT50值的相关性分析结果显示羟自由基清除能力这一体外抗氧化指标与缓解线虫氧化应激的效果具有较强相关性(P 0. 01),能较好反映乳酸菌在线虫体内的抗氧化效果。     

铁皮石斛叶多糖对秀丽隐杆线虫体内抗衰老作用

目的：基于模式生物秀丽隐杆线虫（以下简称线虫）探究铁皮石斛叶多糖的抗衰老能力。方法：采用含不同质量浓度（0.5、1.0、2.0 mg/mL）铁皮石斛叶多糖的大肠埃希氏菌OP50菌液每天饲喂线虫,以饲喂大肠埃希氏菌OP50菌液组作为空白对照,观察铁皮石斛叶多糖对线虫寿命、生殖能力、运动能力和应激能力的影响,同时测定线虫体内活性氧水平及抗氧化酶的酶活力,分析铁皮石斛叶多糖对线虫体内抗氧化能力的影响。结果：与空白对照组线虫相比,在本实验考察的质量浓度范围内,铁皮石斛叶多糖均可延长线虫的寿命,提高其运动、应激能力,同时不会损害线虫的生殖能力,并且能有效提高过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活力,显著降低线虫体内丙二醛含量（P＜0.05）。结论：铁皮石斛叶多糖可能通过提高线虫抗氧化酶活力及提高线虫抗应激能力,降低线虫体内活性氧水平并减缓细胞氧化损伤,进而发挥延长线虫寿命的功效。     

果蔬发酵液中3株乳杆菌的体外功能特性研究

以果蔬自然发酵液中分离得到的3株乳杆菌（Lactobacillus）为对象,通过测定表面疏水性、自身凝聚率分析乳杆菌的表面特性;以DPPH自由基、ABTS自由基清除能力和铁还原能力为指标,分析3株乳杆菌的体外抗氧化能力差异;以降解胆固醇及亚硝酸盐为指标,评价乳杆菌的功能活性。结果表明:3株菌中,L3的表面疏水性和自身凝聚力均表现良好,分别为57.7%和95.2%（24 h）;3株菌的上清液具有很强的DPPH自由基清除率（>90%）、羟自由基清除率（>68%）及还原能力（>1.0）,其中L1和L3的上清液具有更强羟自由基清除率,近90%,L2则具有较强的抗脂质过氧化能力（>37%）;乳杆菌在48 h内几乎完全降解200 mg/L NaNO₂;3株菌上清液均有较好的胆固醇降解能力（>19%）,其活性物质主要为蛋白质和多糖类物质。综上所述,果蔬发酵液中分离所得的3株乳杆菌表现出了良好的益生特性,可为开发功能性发酵食品奠定坚实的基础。     

榴莲核黄酮的提取及其对秀丽隐杆线虫氧化和衰老的影响

目的：探究榴莲核黄酮的最佳提取工艺以及提取物对秀丽隐杆线虫氧化和衰老的影响,为筛选缓解氧化、延缓衰老的活性物质提供理论依据。方法：在单因素试验的基础上,采用L9（34）正交试验确定榴莲核黄酮最佳提取工艺条件;体外抗氧化能力采用分光光度法、邻二氮菲-Fe2＋氧化法和邻苯三酚自氧化法分别测定1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除率;以秀丽隐杆线虫为模式生物,测定榴莲核黄酮提取物对其寿命、运动能力、生殖能力和瘫痪缓解能力的作用效果,并对其相关抗氧化酶活力进行测定。结果：乙醇体积分数40%、料液比1∶220、超声时间70 min和超声功率400 W为最佳提取工艺条件,黄酮平均提取率可达（9.25±0.05）%;0.5 mg/mL黄酮提取物对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除率分别为92.6%、79.4%和27.0%;黄酮提取物可延长秀丽隐杆线虫寿命,提高其运动能力,不会损害其生殖能力,能够显著降低线虫瘫痪率（P＜0.05）,缓解β淀粉样蛋白毒性作用,并且能够显著提高线虫超氧化物歧化酶活力（P＜0.05）,极显著降低其丙二醛含量（P＜0.01）。结论：榴莲核黄酮提取物在体内外均有一定的抗氧化能力且具有缓解氧化衰老病症的效果。     

葡萄籽粗多糖的体内外抗氧化作用

为了研究葡萄籽粗多糖(crude polysaccharides from grape seeds,GSCPs)体外抗氧化作用及对秀丽隐杆线虫的体内抗氧化作用,采用水提醇沉法提取GSCPs,检测GSCPs对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和羟自由基的清除作用及对DNA氧化损伤的抑制作用;建立RAW 264.7巨噬细胞氧化损伤模型,在细胞水平探讨GSCPs的抗氧化能力;同时利用秀丽隐杆线虫研究GSCPs的体内抗氧化功能。体外实验结果表明:GSCPs可有效清除自由基,抑制DNA的氧化损伤,质量浓度为0.4mg/mL的GSCPs对DPPH自由基的清除率达84%,对羟自由基清除率为89%;GSCPs可以下调H₂O₂诱导的RAW 264.7巨噬细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,正向调节细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性,质量浓度为0.2mg/mL的GSCPs处理组可使细胞内SOD活性从H₂O₂处理组的81.1%升至96.3%,GSH-Px活性从H₂O₂处理组的92.1%升至99.6%。此外,GSCPs可延长秀丽隐杆线虫寿命,提高其对抗急性氧化应激的能力,有效清除秀丽隐杆线虫体内的ROS。质量浓度为0.8mg/mL GSCPs处理组秀丽隐杆线虫的平均寿命较对照组延长27.67%,将急性氧化应激的秀丽隐杆线虫平均存活时间延长33.58%,秀丽隐杆线虫体内ROS生成量较对照组可降低56.33%。因此,葡萄籽粗多糖在体内外均表现出良好的抗氧化性,可用于抗氧化功能产品的开发。     

抗幽门螺杆菌乳酸菌的筛选

通过测定干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）的自凝聚、疏水性及抑菌实验来筛选粘附性高、对幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）有强抑制作用的益生菌株,并通过干酪乳杆菌与幽门螺杆菌的交互凝集和对幽门螺杆菌尿素酶活性的抑制进一步探讨其抑菌机制。结果表明,在4株干酪乳杆菌中,菌株JY300-8的自凝聚百分比在24 h达到71.7%,比菌株JY、JY160-15、JY300-10分别高19.7%、28.8%、29.6%（P＜0.05）;疏水性百分比为72.3%,比菌株JY、JY160-15、JY300-10分别高4.1%、8.0%、7.5%（P＜0.05）。同时,菌株JY300-8在24 h时的共凝集百分比为64.4%,较菌株JY提高了5.3%;而且菌株JY300-8对幽门螺杆菌尿素酶活性的抑制率达到62.3%。结果表明,在4株干酪乳杆菌中,菌株JY300-8具有良好的益生性能,对胃癌的生物致病菌具有良好的抑制效果,可用于后续胃癌动物模型的研究和抗胃癌的益生菌制剂的开发。     

2种蛋白酶酶解曲拉干酪素条件优化及抗氧化性比较

以曲拉干酪素为原料、水解度为指标,在酶解时间、酶解温度、pH值、曲拉干酪素质量浓度、酶添加量单因素试验基础上,采用响应面试验对碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解工艺条件进行优化,并对2 种酶解液的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基清除率,Fe2＋、Cu2＋螯合能力和还原力等抗氧化性指标进行比较。结果表明,碱性蛋白酶和胰蛋白酶分别在酶解时间3.8、2.5 h,酶解温度49.8、47.8 ℃,曲拉干酪素质量浓度60、35 g/L,pH 8.5、7.5,酶添加量140、2 900 U/g时水解度最大,为24.25%和13.57%。碱性蛋白酶解液超氧阴离子自由基清除率、Fe2＋螯合能力显著低于胰蛋白酶解液（P＜0.01）;羟自由基清除能力高于胰蛋白酶解液（P＞0.05）;2 种蛋白酶酶解液在酶解液质量浓度1～5 mg/mL时,Cu2＋螯合能力、DPPH自由基清除率和还原力随质量浓度均呈上升趋势,Cu2＋螯合能力低于Fe2＋螯合能力（P＞0.05）,DPPH自由基清除率和还原力二者差异显著（P＜0.01）。2 种蛋白酶对酶解物抗氧化性指标影响不同,碱性蛋白酶酶解物抗氧化性相对较优。     

发酵祛湿汤体外抗氧化活性及对秀丽隐杆线虫抗衰老作用

利用自由基清除能力评价发酵祛湿汤（Fermented Qushi Decoction,FQD）的体外抗氧化活性;结果显示,与未发酵祛湿汤（Qushi Decoction,QD）相比,高剂量FQD组的总抗氧化能力显著提高,其中1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除率、羟自由基清除率和总还原能力分别提高了24.38%、11.98%、11.76%。FQD对线虫总产卵量无显著影响,并能促进线虫的运动;与QD相比,FQD干预后线虫平均寿命延长了8.02%～26.36%;在热应激条件下,FQD组最长存活时间提高了25%,在氧化应激下,FQD组线虫的生存时间较QD提高了16.67%。此外,FQD作用后,线虫体内抗氧化酶活性显著增强（P<0.05）,脂褐质的堆积水平降低。综上,FQD通过提高体外抗氧化能力,延长线虫寿命,提升抵抗应激能力和抗氧化酶活性来延缓线虫的抗衰老作用。该研究初步表明发酵祛湿汤具有抗衰老作用,为保健品开发和利用提供理论基础。     

响应面法优化坛紫菜抗氧化肽酶法制备工艺

以坛紫菜为原料,通过酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶和纤维素酶酶解制备活性肽,以DPPH自由基清除率和多肽得率为评价指标,研究坛紫菜水解肽的抗氧化能力。结果表明:5种酶的酶解产物都具有抗氧化能力,中性蛋白酶酶解产物DPPH自由基清除率最高,选择它为最佳工具酶。通过单因素和响应面试验优化酶解工艺,得到最佳酶解工艺:酶解时间3.6 h、酶解温度47℃、酶用量16362 U/g、底物浓度3.0%、pH7.0。此条件下制备得到的水解肽具有较强抗氧化能力,DPPH自由基清除率可达(91.83±0.81)%。     

Adhesion abilities of dairy Lactobacillus plantarum strains showing an aggregation phenotype

Bacterial aggregation phenotype and cell surface hydrophobicity of dairy Lactobacillus plantarum strains were screened in order to assess a correlation with their adhesion and pathogen competitive exclusion abilities. Lactobacilli strains showing an aggregation phenotype, L. plantarum IFPL33, IFPL81, IFPL150, IFPL156 and IFPL162, also exhibited the highest percentages of autoaggregation (> 50%) at 24 h. In addition, autoaggregation abilities of the lactobacilli were highly correlated with their percentages of co-aggregation with all the pathogens tested, although co-aggregation properties were pathogen specific. Nevertheless, none of the autoaggregation and co-aggregation abilities correlated with the affinity to xylene (hydrophobicity) and the ability of adhesion to Caco-2 cells. Furthermore, these properties are not fully correlated with the ability of the lactobacilli strains for inhibiting pathogen adhesion. Aggregation abilities and cell surface hydrophobicity may not be the only components responsible for adhesion but some of the criteria to bear in mind of a complex mechanism that enables microorganisms to interact with the host and exert its beneficial effect. Further research is needed to identify remaining attributes related to adhesion and pathogen exclusion properties of potential probiotic strains.