腌制食品中降解亚硝酸盐的乳酸菌分离与鉴定

从多种传统腌制蔬菜中分离到12株乳酸菌,对它们的16S核糖体基因进行扩增测序,根据序列的同源性鉴定为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）、沙克乳杆菌（Lactobacillus sakei）和戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）。对其生化特征以及亚硝酸盐耐受性和降解能力进行了研究和比较,最终筛选出1株各项指标优良,且能快速降解亚硝酸盐的植物乳杆菌J-10,该菌降解亚硝酸钠的最适温度为37℃,最适pH值为6．2,在添加0．25mg／mL的亚硝酸钠的培养液中培养24h后,亚硝酸盐降解率为99．2％。     

低盐泡菜中耐酸性乳酸菌的筛选''鉴定及特性研究

目的:筛选出具有潜在益生特性的乳酸菌菌株。方法:从含盐量≤6%的12份低盐泡菜中筛选出5株耐酸性乳酸菌,进行16S rDNA分子鉴定,并对其益生特性进行研究。结果:5株耐酸性乳酸菌分别为肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)J2、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)N6、类植物乳杆菌(Lactobacillu paraplantarum)F8、食窦魏斯氏菌(Weissella cibaria)M1和食窦魏斯氏菌(Weissella cibaria)M12。其中,L.paracasei N6、W.cibaria M1和W.cibaria M12在pH 4.0培养基中相对生长率分别为84.23%,78.32%,76.29%,具有较强的耐酸能力;经pH 3.0胃液和pH 8.0肠液消化后,其存活率分别为79.26%,50.65%,53.37%,具有较强的耐受胃肠液能力;在0.3%胆盐中培养8 h后,其存活率均在30%以上,具有较强的耐胆盐能力;疏水率及自凝集率均在60%以上,具有较强的疏水及自凝集能力。结论:试验筛选得到3株具有益生特性的耐酸性乳酸菌菌株L.paracasei N6、W.cibaria M1和W.cibaria M12,可用于复合益生菌菌剂的研究。     

具有胆盐水解酶活力乳酸菌的筛选及16SrDNA分子生物学鉴定

对分离自内蒙古地区牧民家庭自制的2份酸马奶中的9株乳酸菌,进行胆盐水解酶活力的研究.采用定性和定量两种方法,筛选具有胆盐水解酶活力菌株,并对筛选出的茵株进行16S rDNA分子生物学鉴定.结果表明:9株菌中只有菌株18-1-3有白色颗粒状沉淀生成,其余8株均没产生.游离胆酸的生成量和牛磺胆酸钠的消失量分别为0.8524 mmol/L和0.8520 mmol/L.即游离胆酸钠的生成量和牛磺胆酸钠的消失量成比例.18-1-3菌株鉴定为发酵乳杆菌(Lb.fermentum).     

海南黑山羊瘤胃液中乳酸菌的分离和鉴定

以海南黑山羊瘤胃液为研究对象,对其进行乳酸菌的分离和鉴定,为黑山羊饲料的青贮提供优质的乳酸菌菌株。通过形态学观察及H2O2酶、糖发酵等生理生化试验对所分得菌株进行初步鉴定,并对分离得到的菌株进行16S rDNA基因扩增与测序。结果表明从黑山羊胃液中筛选出15株革兰氏阳性、H2O2酶阴性的乳酸菌疑似菌株,除菌株HBG20不能在pH 3.0条件下生长,其余菌株均能生长;三株代表菌株HBG11、HBG46和HBG86在低温5 ℃和高温55 ℃条件以及pH2.5时均能生长,同时在盐浓度为6.5%时也能生长。16S rDNA基因测序结果表明,菌株HBG11与耐久肠球菌（Enterococcus durans）同源性最高,菌株HBG46与植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）同源性最高,菌株HBG86与干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）同源性最高。     

一株产共轭亚油酸乳酸菌的筛选和鉴定

从酸菜汁中分离到一株具有较高产共轭亚油酸(CLA)能力的乳酸菌菌株9#,在小麦胚芽培养基中发酵CLA产量达到64.28μg/mL.通过菌株菌落形态学特征、菌体形态学特征、菌株生化特征和细菌16S rDNA进行的同源性比对,利用MEGA4软件构建系统发育树,表明菌株9#属于干酪乳杆菌(Lactobacillus casei).     

一株具有高效抑菌活性乳酸菌的分离鉴定及生长特性研究

从内蒙古地区家庭自制的酸菜中分离筛选了一株具有高效抑菌活性的乳酸菌,并对其生长特性进行了测定。经菌落形态观察、生理生化鉴定及16S rDNA序列分析,该菌株被鉴定为植物乳杆菌。该菌株对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有良好的抑菌效果,抑菌圈直径分别为15.5,14.5 mm。生长曲线测定结果表明,菌株生长约8 h时,OD_{600 nm}值开始迅速增大,进入对数生长期;8~24 h时,pH值下降速度较快,为产酸的主要时期。综上,从酸菜中分离筛选出的乳酸菌具有高效抑菌作用,在发酵食品的生产和食品防腐保藏等领域具有潜在的应用价值。     

一株具有高效抑菌活性乳酸菌的分离鉴定及生长特性研究

从内蒙古地区家庭自制的酸菜中分离筛选了一株具有高效抑菌活性的乳酸菌,并对其生长特性进行了测定。经菌落形态观察、生理生化鉴定及16S rDNA序列分析,该菌株被鉴定为植物乳杆菌。该菌株对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有良好的抑菌效果,抑菌圈直径分别为15.5,14.5 mm。生长曲线测定结果表明,菌株生长约8 h时,OD 600 nm值开始迅速增大,进入对数生长期;8~24 h时,pH值下降速度较快,为产酸的主要时期。综上,从酸菜中分离筛选出的乳酸菌具有高效抑菌作用,在发酵食品的生产和食品防腐保藏等领域具有潜在的应用价值。     

泡菜中乳酸菌的分离鉴定及体外抗性筛选

从泡菜中分离得到5株乳酸杆菌,经16S rDNA种属分析,其中4株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),编号分别为E-6-1、E-1-2、E-6-3、D-2-3,1株为消化乳杆菌(Lactobacillus alimentarius),编号为C-2-1。通过人工胃液和胆盐试验来确定5株菌的体外抗性。结果表明,D-2-3乳酸菌具有较好的抗人工胃液能力,其在pH 3.0的人工胃液处理3h后的存活率高达95.38%,且在1,2,3g/L胆盐中均能较好的生长。说明该菌株具有益生菌潜质。     

Diversity and screening of lactic acid bacteria in la-baicai made by Korean-Chinese in northeastern China

This study investigated the lactic acid bacteria (LAB) population in la-baicai (spicy cabbage), a traditional fermented food made by the Korean-Chinese community in northeastern China and screened for functional LAB. LAB diversity was analyzed using denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE), and 81 LAB strains were isolated and identified based on 16S rDNA sequencing analysis. Polymerase chain reaction DGGE detected 21 LAB species, belonging to the genera Lactobacillus (Lb.), Leuconostoc (Leu.), Pediococcus and Weissella, in 45 la-baicai samples. Lb. plantarum and Lb. sakei were considered to be dominant in the bacterial community. Among 81 LAB isolated by traditional pure culture methods were Lb. plantarum (25 strains), Lb. brevis (two strains), Lb. casei, (four strains), Lb. pentosus (three strains), Enterococcus faecium (45 strains), and E. durans (two strains). The tolerances of these LAB were investigated. Six LAB with high salt (NaCl)-tolerance were screened from the isolates, and 16% (w/v) was the highest salt-tolerance reached. Among the isolates, strain N1, identified as Lb. pentosus, survived well in a simulated digestive environment. Traditional fermented la-baicai from northeastern China is a rich LAB resource. Further study is needed and would be worthwhile to advance the benefits of these LAB.     

水牛乳中可培养乳酸菌多样性分析

采用传统分离培养方法,从三品杂交生水牛奶混合样品中,分离出105株乳酸菌,通过形态、生理生化、API细菌鉴定系统及16S rDNA基因序列分析方法对各菌株属种进行鉴定。16S rRNA序列分析结果显示,105株菌共分为5个属8个种,呈现较为丰富的乳酸菌多样性,具体数量分布为乳酸乳球菌21株,植物乳杆菌19株,格氏乳球菌17株,乳明串珠菌13株,食窦魏斯氏菌11株,肠膜明串珠菌8株,类肠膜魏斯氏菌6株,嗜热链球菌5株,糊精乳杆菌5株。由此可知,水牛乳中可培养乳酸菌优势菌群的主次关系为：乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）＞植物乳杆菌（Lactobacillus plantaru）＞格氏乳球菌（Lactococcus garvieae）＞乳明串珠菌（Leuconostoc lactis）＞食窦魏斯氏菌（Weissella cibaria）,此为后续开发水牛乳中优势乳酸菌资源提供了良好的理论基础。     

科尔沁地区传统发酵奶豆腐中乳酸菌的鉴定

从科尔沁地区采集到5份传统发酵制作的奶豆腐样中分离出12株供试菌株,将分离的菌株的16S rDNA进行PCR扩增、序列分析并构建系统发育树。结果表明,12株菌株都属于乳酸菌(Lactic Acid Bacteria),其中6株乳杆菌(Lactobacillus),分别是植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)4株、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)1株、戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)1株;6株乳球菌(Lactococcus)分别是乳糖片球菌(Pediococcus acidilactici)5株和戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)1株。鉴定结果与生理生化实验结果一致,且以乳酸片球菌和植物乳杆菌为优势菌群。      

乳酸菌分类鉴定方法的研究进展

对目前使用的乳酸菌表型特征鉴定和基因型特征鉴定方法的优缺点进行了综述。依据表型的常规生理生化特征进行乳酸菌的分类鉴定不仅费时,有时甚至难以完成。随着分子生物技术的发展和基因数据库的建立,将分子标记技术、新兴鉴定技术与常规方法结合使用,将使乳酸菌的分类、鉴定更为准确和便捷。     

啤酒有害乳酸菌PCR引物的设计与验证

根据乳酸菌16SrDNA序列的特征，设计合成了针对啤酒有害乳酸菌的通用引物，在16SrDNA基因水平上采用聚合酶链式反应（PCR）技术鉴定了啤酒中59株有害乳酸菌的种类。同时根据鉴定结果设计了8种乳酸菌的特异引物，PCR技术验证结果表明该8种特异引物能够准确鉴定乳酸菌。     

新疆蒙古族和哈萨克族传统乳制品中乳酸菌多样性的比较

传统发酵乳制品是新疆少数民族不可或缺的一类食品,为了研究同一地区不同民族传统乳制品中乳酸菌种类的差异性,从新疆和布克赛尔县采集了17份哈萨克族酸奶和8份蒙古族酸奶,通过传统培养和16S rDNA基因序列分析方法共分离得到42株乳酸菌,有30株分离自哈萨克族样品,12株分离自蒙古族样品,其中优势菌群均为Pediococcus acidilactici(乳酸片球菌)。除了优势菌群,两种样品中都分离出了Lactobacillus plantarum(植物乳杆菌)和Enterococcus durans(耐久肠球菌)。哈萨克族样品中还分离出了Lactobacillus fermentum(发酵乳杆菌)、Lactobacillus paracasei(类干酪乳杆菌)、Lactobacillus crustorum(面包乳杆菌),而蒙古族样品中分离出了Weissella cibaria(食窦魏斯氏菌)。      

新疆特色干酪中乳酸菌的分离鉴定

从新疆不同牧区采集工艺不同的干酪制品,对其中的乳酸菌进行分离纯化、生理生化性质试验和16S rRNA分析.结果表明,分离、纯化出的104株乳酸菌种,有82株为乳杆菌属(Lactobacillus),12株为肠球菌属(Enterococcus),10株为魏斯氏菌属(Weissella).利用16S rRNA序列同源分析和系统发育树分析对具有不同生理生化特性的代表菌株进行了分子鉴定,鉴定结果为TNM-2与干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、Y5-4与食窦魏斯氏菌(Weissella cibaria)、NS2-2与植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的同源性达到100％,NM-2与瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、Y1-1与马乳酒乳杆菌(Lactobacillus kefiranofaciens)、WG与耐久肠球菌(Enterococcus durans)的同源性达到99％.     

腌菜中细菌多样性研究及乳酸菌分离鉴定

以恩施地区采集的腌菜为研究对象,采用高通量测序技术（HTS）与变性梯度凝胶电泳（DGGE）技术相结合的方法对其中所 含细菌和乳酸菌多样性进行研究,并采用平板稀释涂布法对乳酸菌进行分离鉴定。结果表明,腌菜样品中含量最高的优势细菌门 为硬壁菌门（Firmicutes）,其平均相对含量高达97.09%。优势细菌属为Lactobacillus、Weissella、Leuconostoc、Vibrio、Pseudomonas、 Psychrobacter和Flavobacterium,其中Lactobacillus的平均相对含量高达82.37%;通过变性梯度凝胶电泳技术从样品中检测出的乳酸 菌 有 Lactobacillus sakei、Lactobacillus insicii、Lactobacillus plantarum subsp. argentoratensis、Lactobacillus plantarum subsp. plantarum 和 Lactobacillus acetotolerans;分离鉴定及保藏的乳酸菌中有L. plantarum 7株,L. alimentarius 2株,L. curvatus和L. brevis各1株以及L. sakei 4株。 由此可见,虽然Lactobacillus为腌菜样品中的优势菌,但乳酸杆菌的构成在样品间存在一定的差异。     

分子生物学技术在乳酸菌鉴定中的应用

介绍了几种分子生物学技术在乳酸菌鉴定中的应用,并对这些方法的优缺点进行了简单的阐述,并对该技术今后的发展方向做了明确的讨论。分子生物学技术在乳酸菌的分类鉴定过程中必将成为一种主导因素,也会发挥其快速简便的优点。     

内蒙古传统乳制品中乳酸菌的分离鉴定及耐酸性能研究

目的筛选耐酸能力强、能耐受人体胃肠环境在肠道中存活的乳酸菌菌株。方法对采集自内蒙古地区牧民家庭中45份传统乳制品中的乳酸菌进行分离和和纯化,共分离出104株乳酸菌,并进行形态观察、碳水化合物代谢分析、16S r DNA序列分析、高通量耐酸性优良菌株的筛选和人工胃液耐受性分析等的研究。结果本研究共筛选到8株耐受人工胃液极佳的乳酸菌,经鉴定这些菌株为4株Lactobacillus plantarum(WHH727、WHH730、WHH777和WHH1118)、3株Lactobacillum fermentum(WHH734、WHH778和WHH868)和1株Lactobacillus acidophilus(WHH729)。其中,耐受人工胃液最佳的是L.fermentum WHH734,经p H为1.5的人工胃液处理2 h,存活率在86.32%,经p H为2.5的人工胃液处理2 h后,存活率为96.85%。结论菌株的分离鉴定以及高耐酸性菌株的筛选,对我国益生菌资源的保藏和开发有重要的意义。     

红薯淀粉废水中乳酸菌的筛选及其对食源性致病菌的抑制作用

从采集的红薯淀粉废水中分离出3株乳酸菌SPDJ3、SPEJ7 和SPEJ9。通过培养特征、形态特征,生理生化特征及基于16S rDNA序列的系统发育分析的检测,菌株SPDJ3和SPEJ7被鉴定为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,菌株SPEJ9被鉴定为副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）。3株乳酸菌发酵上清液对供试8株食源性致病菌均有抑菌作用,菌株SPDJ3对福氏志贺氏菌（Shigella flexneri）抑制效果较强,抑菌圈直径为（30.37±0.15） mm,菌株SPEJ7和SPEJ9对蜡样芽胞杆菌（Bacillus cereus）抑制效果较强,抑菌圈直径分别为（29.43±0.21） mm和（28.27±0.25） mm。     

德宏水牛乳饼中乳酸菌的分离鉴定及发酵性能研究

德宏水牛奶乳饼是云南特有的乳制品,微生物资源丰富,是乳酸菌的重要来源,也是分离筛选优良发酵剂的天然基础。本文采用16S rRNA基因序列分析法和纯培养法对15份水牛奶乳饼中乳酸菌种属进行分离鉴定,通过对菌株产酸、产香、发酵乳活菌计数等比较,以筛选出具有优良发酵特性的乳酸菌。结果表明:15份水牛奶乳饼样品中共分离鉴定出57株乳酸菌（3个属,6个种和1个亚种）,其中Lactobacillus fermentum和Lactobacillus oris为优势菌属,占总菌属的36.84%和24.56%。57株乳酸菌发酵特性比较后得到两株优势菌株MGR3-1和MBR1-1。此研究为后续开发和应用优良发酵剂提供理论基础。