青蒿琥酯诱导肿瘤细胞凋亡与抑制存活蛋白表达有关

目的 探讨青蒿琥酯(artesunate, Art)诱导肿瘤细胞凋亡与存活蛋白(survivin protein)表达的关系。 方法 采用细胞荧光染色、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳法和测定细胞浆Caspase-3 的活性等手段检测肿瘤细胞暴露于不同浓度的Art 时, 对肿瘤细胞凋亡的诱导作用;用RT-PCR、Western Blotting 法,检测不同浓度的Art 作用于肿瘤细胞时, 对survivinmRNA 和survivin 蛋白表达的影响。 结果 HL60 细胞暴露于Art 时, 呈现典型细胞凋亡特征, 如:胞核固缩、形成凋亡小体;凋亡细胞的比例呈浓度依赖性增高;琼脂糖电泳出现明显的“ 梯状” 条带;细胞浆Caspase-3 的活性呈浓度依赖性增高等。RT-PCR 检测表明, A549 细胞暴露于Art 10 和50 g·L^-1 72 h后, survivin mRNA 的表达呈浓度依赖性降低, 对照组、10 和50 mg·L^-1 处理组的survivin 条带和内标GAPDH 条带灰度的比值分别为1.745、0.390 和0.023;Western Blotting 法也检测到Art 抑制Survivin蛋白的表达。 结论 Art诱导肿瘤细胞发生凋亡, 激活Caspase-3 途径, 可能与抑制survivin 基因表达有关。     

阿霉素诱导小鼠MCF-7 乳腺癌细胞凋亡和抑制增殖的体内实验研究

目的: 探讨阿霉素对荷瘤鼠MCF-7 乳腺癌细胞凋亡和增殖的影响。方法: 建立小鼠MCF-7 乳腺癌细胞模型, 用TUNEL 法和免疫组化法检测阿霉素作用下MCF-7 乳腺癌细胞的凋亡和PCNA 表达的变化。结果: 1.25 mg·kg^-1 阿霉素的抑瘤率为43 %。MCF-7 乳腺癌细胞的凋亡指数为1.93 %, 较荷瘤对照组的1.11 %明显升高(P <0.05)。增殖指数为35.75 %, 较荷瘤对照组的56.38 %明显下降(P <0.01)。结论: 阿霉素有诱导小鼠MCF-7 乳腺癌细胞凋亡和抑制其增殖的作用。     

LC-APCI-MS/MS法研究维氨酯在大鼠体内的排泄

目的: 建立LC-APCI-MS/MS法测定大鼠胆汁、尿液和粪便中维氨酯的浓度,对该药在大鼠体内的排泄规律进行研究,为临床试验提供依据。方法: 生物样本经处理后,采用Agilent TC C₁₈色谱柱,甲醇-水-甲酸(93∶7∶0.1)为流动相,辛伐他汀为内标,在三重四极杆串联质谱仪上,采用大气压化学离子化(APCI)、正离子方式选择性离子监测模式,维氨酯和内标的检测离子分别为m/z448283和m/z419285,分别测定尿液、胆汁和粪便中原型物的含量。结果: 胆汁、尿样、粪便中维氨酯的回收率均大于89%,日间和日内的变异系数均小于10%。胆汁和尿液中维氨酯在0.0808～40.4ng/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.9972和0.9949),粪便中维氨酯在0.2525～101ng/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.9990),维氨酯的定量下限为0.2pg,方法符合生物样品分析要求。维氨酯在粪便中72h内、在尿液中96h内、在胆汁中24h内原型药的平均累积排泄量分别为12.9%、0.003%、0.0001%。结论: 该方法灵敏度高,专属性强,样品前处理简便,分析速度快,可满足大鼠排泄研究中药物浓度测定的要求,大鼠灌胃给药(5mg/kg)后维氨酯从尿液和胆汁中排泄的原型药物很少。     

4-甲基哌嗪-1-二硫代甲酸-(3-氰基-3, 3-二苯基)丙酯盐酸盐在小鼠的抗肿瘤作用

目的: 观察4-甲基哌嗪-1-二硫代甲酸-(3-氰基-3, 3-二苯基) 丙酯盐酸盐(Hyd) 对小鼠移植性肿瘤的抑制作用, 以确定该化合物的应用前景。方法: 采用小鼠肉瘤180 和肝癌22 及人胃癌异种移植裸鼠肿瘤模型, 观察Hyd 对小鼠移植性肿瘤生长的影响。结果: 通过口服灌胃给药, 不同浓度Hyd 对小鼠移植性肉瘤S180抑制率可达到46.4 %~ 59.6 %(P<0.01 ~ 0.001);对小鼠移植性肝癌H22抑制率可达到39.3 %~ 51.6 %(P<0.05 ~ 0.001);对裸鼠人胃癌异种移植瘤的抑制率可达到18.1 %~ 59.0 %。结论: Hyd 对小鼠移植性肝癌H22 和小鼠移植性肉瘤S180有明显抑制作用, 对人胃癌裸小鼠异种移植性肿瘤也有明显抑制作用。     

密度泛函理论研究三(2-吡啶基甲基)胺的阴离子键合和识别特性（英文）

采用杂化密度泛函理论B3LYP方法在6-31G(d.p)水平对三(2-吡啶基甲基)胺(TPMA)及其卤素阴离子复合物进行结构优化。在复合物的形成过程中,通过计算几何结构参数、电荷布居、前线轨道和热力学参数,深入研究了主体分子和卤素阴离子(F和C1~-)之间的超分子作用。研究结果表明,TPMA识别卤素阴离子是一个自发反应。在复合物的形成过程中,主体分子的前线轨道与客体阴离子发生了相互作用。电子从卤素阴离子的HOMO轨道转移到主体分子的LUMO轨道。并且,形成的TPMA-F~-复合物比TPMA-C~-更为稳定,这一计算结果与文献报道的TPMA阴离子识别实验结果相一致。     

Combretastatin A4及其磷酸酯二钠在大鼠体内的药代动力学比较研究

目的: 采用LC-MS/MS技术比较研究Combretastatin(CA4)及其磷酸酯二钠(CA4P)前药分别给药于SD大鼠后的药代动力学差异。方法: 12只SD大鼠禁食后分别单次尾静脉给予 50 mg/kg CA4P或 36 mg/kg CA4(等摩尔量),采集不同时间点血样,采用LC-MS/MS方法进行血样药物浓度测定,求算相应的药代动力学参数,并建立CA4P-CA4转化的药动学模型。结果: 大鼠单剂量 i.v. 50 mg/kg CA4P或 36 mg/kg CA4后,CA4P和CA4血浆药物浓度-时间曲线下面积AUC_0-∞分别为(27126±4142)、(7751±801)、(5037±1433) ng·h·mL^-1,消除半衰期t_1/2分别为(0.85±0.35)、(1.27±0.33)和(0.95±0.65) h。CA4P和CA4在SD大鼠体内药动学行为均无性别差异。结论: 大鼠单剂量 i.v. 50 mg/kg CA4P后,CA4P在体内迅速转化为CA4,相比于直接 i.v. 36 mg/kg CA4,CA4在体内的暴露量(AUC_0-∞)显著性提高(P<0.05),消除半衰期t_1/2也有所增加,为前药CA4P的药代动力学优势。     

MRP3、MRP4肿瘤相关研究进展

肿瘤相关分子机制研究受到广泛关注并且在肿瘤的诊断和治疗中的扮演着越来越重要的角色。MRP家族是一种跨膜ATP结合盒(ABC)转运体,对肿瘤分子机制研究有着重要的贡献,MRP3和MRP4作为MRP家族成员,是近年来比较新型的肿瘤分子靶点,具有潜在的临床价值。故本文就MRP3和MRP4的结构以及在肿瘤诊断或治疗作用及相关机制调控做一综述,为未来肿瘤的研究提供新的思路。     

Folate-conjugated Fe3O4 nanoparticles for in vivo tumor labeling

Highly biocompatible superparamagnetic Fe₃O₄ nanoparticles were synthesized by amide of folic acid (FA) ligands and the NH₂-group onto the surface of Fe₃O₄ nanoparticles. The as-synthesized folate-conjugated Fe₃O₄ nanoparticles were characterized by X-ray diffraction diffractometer, transmission electron microscope, FT-IR spectrometer, vibrating sample magnetometer, and dynamic light scattering instrument. The in vivo labeling effect of folate-conjugated Fe₃O₄ nanoparticles on the hepatoma cells was investigated in tumor-bearing rat. The results demonstrate that the as-prepared nanoparticles have cubic structure of Fe₃O₄ with a particle size of about 8 nm and hydrated diameter of 25.7 nm at a saturation magnetization of 51 A·m²/kg. These nanoparticles possess good physiological stability, low cytotoxicity on human skin fibroblasts and negligible effect on Wistar rats at the concentration as high as 3 mg/kg body mass. The folate-conjugated Fe₃O₄ nanoparticles could be effectively mediated into the human hepatoma Bel 7402 cells through the binding of folate and folic acid receptor, enhancing the signal contrast of tumor tissue and surrounding normal tissue in MRI imaging. It is in favor of the tumor cells labeling, tracing, magnetic resonance imaging (MRI) target detection and magnetic hyperthermia.     

靶向抑制CDK4/6的肿瘤治疗基础研究与临床应用进展

周期蛋白依赖性激酶4/6(cyclin-dependent kinase 4/6,CDK4/6) 是一类丝氨酸/苏氨酸激酶,通过与细胞周期蛋白D（cyclin D）结合,调节视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)的磷酸化状态,Rb磷酸化后与E2F转录因子分离,释放的E2F可以自由激活一系列基因表达,参与DNA复制和细胞分裂,从而介导细胞G1/S期转换,影响细胞周期的进程。近年研究发现CDK4/6在多种肿瘤发生和发展过程中起着核心作用,已成为临床多种肿瘤治疗的重要分子靶点。本文将对CDK4/6与肿瘤的关系以及CDK4/6抑制剂临床应用的最新研究进展做一综述。     

大豆异黄酮对YAC-1 细胞和小鼠ESC艾氏肉瘤生长的抑制作用

目的 观察大豆异黄酮对YAC-1 细胞及小鼠ESC艾氏肉瘤生长的抑制作用及对免疫功能的影响。方法 用MT T 法测定大豆异黄酮对YAC-1 细胞生长的抑制率和小鼠淋巴细胞转化刺激指数;LDH 释放法测定小鼠NK 细胞活性;称重观察肿瘤生长和脾指数和胸腺指数。结果 金雀异黄素和大豆甙元剂量依赖性抑制YAC-1 细胞生长, 并随时间延长作用增强;大豆异黄酮50、100、400 mg·kg^-1 灌胃给药均明显升高雌性小鼠脾指数和淋巴细胞转化的刺激指数, 对雄性小鼠则无明显作用;大豆异黄酮100、400 mg·kg^-1 明显抑制小鼠ESC 艾氏肉瘤生长, 同时50、100、400 mg·kg^-1 均降低异常增高的脾指数, 增加NK 细胞活性。结论 大豆异黄酮明显抑制YAC-1 细胞和小鼠ESC 艾氏肉瘤的生长,同时增强非特异性免疫功能, 并可增强正常雌性小鼠免疫功能。     

种植肿瘤细胞数对小鼠皮下移植瘤生长及抗癌药疗效的影响

目的: 研究种植肿瘤细胞数对小鼠皮下移植瘤生长及抗癌药疗效的影响。方法: 小鼠右前腋窝皮下种植不同数目的小鼠肉瘤S180 细胞、小鼠肝癌H22细胞和小鼠Lewis 肺癌细胞, 观察肿瘤的生长情况, 并观察常用抗癌药阿霉素、卡铂、环磷酰胺和5-氟尿嘧啶在种植不同肿瘤细胞数时作用强度。结果: 种植肿瘤细胞数越多, 肿瘤生长越快, 出瘤时间越早, 抗癌药抑瘤率越低。结论: 种植肿瘤细胞数直接影响小鼠皮下移植瘤的生长速度, 也影响对抗癌药疗效的评价。抗癌药抑瘤率受种植肿瘤细胞数的影响, 在进行抗癌药活性评价时, 应加注意。     

诺必擂停抗肿瘤作用的实验研究

目的: 观察诺必擂停体内外的抗肿瘤作用。方法: 体内实验采用3 种移植性肿瘤模型(S180、BGC-823、EAC), 计算各用药组抑瘤率、EAC 小鼠生命延长率;体外实验采用2 种肿瘤细胞株(K562、HL-60), MTT 法检测抑制率。结果: 诺必擂停对S180、BGC-823 具有抑制作用, 抑瘤率分别为39.11% ~55.67%、36%~ 58%, EAC 的生命延长率为15.38%~ 24.61%;体外, 诺必擂停可抑制K562、HL-60 的生长, 浓度在2.5 ~ 10 μg·ml^-1时, 抑制率随浓度与时间的增加而升高。结论: 诺必擂停对S180、BGC-823移植性肿瘤及K562、HL-60 肿瘤细胞株具有明显的抑制作用, 对EAC 小鼠具有一定的生命延长作用。     

葛根素对胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4的影响

目的: 探讨葛根素对高糖高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达水平及其转位机制的影响。方法: 实验大鼠随机分为正常组、模型组和葛根素组,每组10只。模型组和葛根素组大鼠喂以高糖高脂饲料,4周后葛根素组大鼠予以葛根素100 mg·kg^-1·d^-1腹腔注射。以Western blot 法检测各组大鼠脂肪细胞GLUT4 的含量,定期检测实验大鼠的体质量、血甘油三酯和胆固醇、空腹血糖及血浆胰岛素水平,并计算胰岛素敏感指数。结果: 模型组大鼠脂肪细胞内膜GLUT4含量较正常组减少38.72 %(P<0.05),细胞外膜减少21.91 %(P<0.05)。给予葛根素治疗6周后,大鼠脂肪细胞内膜GLUT4 的含量与模型组相比无明显变化,而细胞外膜GLUT4含量增加21.46 %(P<0.05)。结论: 葛根素可提高胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞GLUT4蛋白表达水平,且能够改善其转位机制,从而加强葡萄糖的摄取和利用。     

IFNγ在抗肿瘤新生血管形成中潜在的作用及机制研究

目的: 探讨干扰素-γ(IFNγ)在抗肿瘤新生血管形成中可能的作用及机制。方法: 建立人脐静脉内皮细胞(human umbilical cord vascular endothelial cell,HUVEC)的体外培养体系,MTT 法检测IFNγ(10、100、1 000 U·ml^-1)对HUVEC 生长的直接影响;应用流式细胞术观察IFNγ对HUVEC 凋亡和细胞周期的影响;半定量逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测IFNγ对HUVEC 凋亡相关基因Bcl-2 和Bax mRNA的表达的影响。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测缺氧状态下IFNγ(30、300、3 000 U·ml^-1)对人肺癌PG细胞分泌到培养上清中VEGF 的影响。结果: IFNγ(10、100、1 000 U·ml^-1)可抑制体外培养的HUVEC的生长(P<0.01);流式细胞术检测IFNγ(10、100、1 000 U·ml^-1)作用的HUVEC,无亚二倍体峰出现,但细胞周期分析显示,IFNγ各给药组均可减少G₂-M期的细胞比例(P<0.05 或P<0.01)。IFNγ(100、1 000 U·ml^-1)对抑凋亡基因Bcl-2 和促凋亡基因Bax 的mRNA 的表达与对照组相比无显著的统计学意义(P>0.05)。缺氧状态下IFNγ3 000 U·ml^-1可抑制人肺癌PG 细胞培养上清中VEGF 的含量,与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。结论: IFNγ可能通过直接抑制肿瘤血管内皮细胞的生长或间接下调肿瘤血管生成刺激因子释放的机制,最终抑制肿瘤新生血管的形成。     

泛影葡胺对糖尿病肾病大鼠心肌细胞内皮素受体A 表达的影响

目的: 观察造影剂泛影葡胺对糖尿病肾病大鼠心肌细胞内皮素受体A (endothelin receptor A,ETAR) 表达的影响。方法: 应用链脲佐菌素(STZ) 腹腔注射建立SD 大鼠糖尿病肾病模型。设对照组、模型组、泛影葡胺组, BQ123 +泛影葡胺组, 利用RT-PCR 和western blot 方法检测心肌组织ETAR 表达的变化。结果: 与对照组比较, 各组糖尿病大鼠心肌ETAR 表达上调, CM 组上调尤为明显(P<0.05),注射BQ123 后, 可见其表达下调。结论: 有糖尿病肾病基础病史时, 泛影葡胺可引起心肌组织ETAR表达变化, 从而影响心脏功能;预防性使用选择性ETAR 拮抗剂BQ123, 可下调ETAR 蛋白表达, 改善心脏功能。