新型口服抗凝药的药物基因组学研究进展

新型口服抗凝药（NOAC）达比加群酯、利伐沙班、阿哌沙班和依度沙班因其疗效确切，安全性较优，被广泛应用于临床抗凝。NOAC的药代动力学参数和药物反应存在较大的个体间差异，可能与参与体内过程的转运体和代谢酶的基因多态性有关。本文综述基因多态性对NOAC的药代学和不良反应的影响，为今后的研究提供方向。     

急性冠脉综合征患者接受经皮冠状动脉介入治疗前后抗凝策略

急性冠脉综合征(ACS)是一组由急性心肌缺血引起的临床综合征,包括不稳定型心绞痛(UA)、非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)和ST段抬高型心肌梗死(STEMI)。目前抗血小板治疗和抗凝治疗是ACS患者抗栓治疗的两大重要组成部分。强力抗血小板及抗凝药物的出现,在很大程度上减少了ACS患者缺血事件的发生率,但经皮冠状动脉介入治疗(PCI)围手术期抗血小板及抗凝治疗的联合应用增加了出血风险,而出血风险又增加发生死亡、心肌梗死(MI)或卒中的风险,其原因可能与输血和/或停用抗凝抗血小板药物有关。因此,权衡抗栓效应及出血风险可进一步改善ACS患者临床疗效。本文就ACS患者有关接受PCI前后的抗凝治疗策略的一些大型临床试验及抗凝药物在当今早期侵入性冠状动脉治疗时代中的应用现状作一综述。     

凝血酶抑制剂比伐卢定的临床应用

比伐卢定是2000年被FDA批准上市的抗凝血药物,它通过直接抑制凝血酶发挥抗凝作用,已被批准应用于PCI/PTCA、HIT/HITTS、ACS 等领域。现有研究表明比伐卢定在临床抗凝治疗中有较好的安全性,可以用于常规治疗方案(肝素与糖蛋白IIb/IIIa抑制剂)的替代治疗,而且可以降低出血风险和死亡率。本文主要介绍凝血酶直接抑制剂比伐卢定的药理作用及临床研究,总结分析其安全性及经济效益,并且结合国内临床应用情况,分析其在国内的临床运用前景。     

高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中的达比加群

目的: 建立了一种简单、快速、灵敏的高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定大鼠血浆中达比加群的浓度,进行了系统的方法学验证研究,并应用于达比加群酯大鼠灌胃给药后的药代动力学研究。方法: 血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,通过Ecosil-C₁₈ (150 mm×4.6 mm,5 μm) 色谱柱分离,流动相为甲醇5%甲醇水溶液（含有10 mmol/L甲酸铵及 0.1%甲酸）,梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子化源正离子条件下多反应监测模式,监测反应离子对为达比加群［M+H]⁺ m/z 472.2→289.2,内标苯海拉明［M+H］⁺ m/z 256.1→167.0。结果: 达比加群在 0.25~500 ng/mL 浓度范围内线性关系良好（r =0.9970）,定量下限为 0.25 ng/mL;日内、日间精密度（RSD）均小于 9.57%,准确度（RE）均在±6.5%以内;血浆中无内源性物质干扰,基质效应为108%~112%,提取回收率为 92.6%~94.2%;达比加群的血浆样品经室温放置 4 h、-80 ℃三次冻融循环、-80 ℃冻存三周,处理后的样品在进样器内放置 24 h 均稳定;药物浓度超出曲线范围的样品经空白血浆稀释5倍后,其准确度均在±8.00%以内,精密度小于4.92%。结论:本文建立的LC-MS/MS方法学验证,成功适用于大鼠灌胃20 mg/kg给药达比加群酯药代动力学研究。     

房颤患者华法林初始剂量及出血危险因素的调查分析

目的: 比较两种华法林初始剂量在房颤患者中应用的安全性及有效性,并探讨其出血相关危险因素。方法: 采用回顾性调查方法,将某医院服用华法林的住院房颤患者按初始剂量分为超低剂量组(1.25~1.875 mg)和低剂量组(2.5~3.0 mg),比较两组患者抗凝的安全性和有效性指标。同时采用Logistic回归分析主要的出血危险因素。结果: 超低剂量患者各项安全性指标与低剂量组均无统计学差异(P>0.05);但前者首次达到目标国际标准化比值(INR)的时间较后者显著延长(P＜0.05),同时INR低于目标范围的比例显著增加且INR的控制率显著降低(P＜0.001)。年龄>65岁,肝功能不全,出血体质,卒中史,联用胺碘酮会显著增加华法林的出血风险(OR>1且P<0.05)。结论: 房颤患者应用超低初始剂量华法林抗凝的出血风险与低初始剂量相当但血栓风险增加;对于联用胺碘酮的患者,应加强出血风险的监护。     

国产奥美沙坦酯治疗轻中度原发性高血压的单中心疗效和安全性评价

目的: 通过与进口奥美沙坦酯(商品名傲坦)比较,单中心评价国产奥美沙坦酯单药治疗轻、中度原发性高血压的疗效和安全性;验证本药与原研药等效。方法: 采用随机、双盲、双模拟、阳性对照方法进行研究。57例轻、中度原发性高血压患者分为奥美沙坦酯组(27人、国产奥美沙坦酯 20 mg+傲坦模拟片1片 20 mg)和傲坦组(30人、傲坦 20 mg+国产奥美沙坦酯模拟片1片 20 mg),治疗期为8周,每2周随访1次,观察降压效果和不良反应;治疗2周后若患者坐位舒张压≥90 mm Hg (1 mm Hg=0.133 kPa)和(或)收缩压≥140 mm Hg,则将剂量加一倍, 至疗程结束。若坐位舒张压<90 mm Hg,则维持原剂量。结果: 与治疗前比较,治疗8周后奥美沙坦酯组和傲坦组收缩压分别下降( 22.5±9.5) mm Hg 和(21.4±9.5) mm Hg (均P<0.001),舒张压分别下降(16.1±5.5) mm Hg 和(14.7±4.4) mm Hg (均P<0.001),两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。国产奥美沙坦酯组与傲坦组降压总有效率(96.30% vs 92.60%)和不良反应发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论: 国产奥美沙坦酯片20~40 mg,每日1次是治疗轻中度原发性高血压的安全有效药物。     

中药对华法林作用的影响及机制概述

华法林是临床常用的一种香豆素类口服抗凝药,具有蛋白结合率高、依赖细胞色素P450酶代谢及治疗窗窄等特点,易与其他药物发生相互作用,造成患者出血风险增加或抗凝治疗不足等严重后果。中药在治疗心脑血管疾病等方面具有独特的优势,临床应用广泛,与华法林合用的机会较多。本文根据已有的实验研究和临床案例报道,分别对单味中药及中药复方制剂对华法林抗凝作用的影响及相关机制进行了综述和探讨,以期为临床合理用药和相关研究提供参考。     

核因子-κB在凝血酶促自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的: 研究凝血酶诱导培养的自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMCs)的增殖作用,探讨其引起VSMCs增殖与NF-κB途径的关系及可能机制。方法: 以0.01、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 Um/L的凝血酶与培养的VSMCs共孵育24h和用0.5 Um/L凝血酶与VSMCs分别孵育1、2、6、12、24、48h;采用WST-1代谢活性和3H-TdR掺入率测定VSMCs细胞增殖率;免疫荧光法和蛋白质印迹技术检测基础状态下和0.5 Um/L凝血酶干预的VSMCs中NF-κB的细胞内定位及其核中NF-κB的蛋白含量;以已知的AngⅡ和PDGF对VSMCs的增殖作用为阳性对照,研究NF-κB途径与凝血酶诱导的VSMCs增殖关系,100 μmol/L PDTC(NF-κB特异性阻断剂)预处理后检测凝血酶引起VSMCs的增殖率。结果: 浓度为0.2～2.0 Um/L的凝血酶对VSMCs分别有明显的促增殖作用(P<0.05和P<0.01);但浓度为0.5～2.0 Um/L的凝血酶作用24h对VSMCs的促增殖作用差异无统计学意义(P>0.05)。0.5 Um/L凝血酶促VSMCs的增殖呈双峰样改变,1h和24h分别达峰值。基础状态下VSMCs的NF-κB主要分布于细胞浆,凝血酶干预后VSMCs的NF-κB主要分布于细胞核。PDTC预处理明显抑制凝血酶促VSMCs增殖的作用(P<0.01)。结论: 浓度0.2～0.5 Um/L范围内的凝血酶呈浓度依赖性方式促进培养SHR的VSMCs增殖;而且在时间上呈双峰样改变,提示凝血酶的促增殖作用存在延迟现象。凝血酶能够激活VSMCs的NF-κB,使其从细胞浆转位至细胞核。凝血酶引起VSMCs增殖与NF-κB途径有关联,NF-κB可能是VSMC增殖的细胞内信号转导的共同通路。     

中国拟青霉对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:研究中国拟青霉(CN-802) 对小鼠免疫性肝损伤的保护作用及其对T 淋巴细胞亚群的影响。方法:小鼠尾静脉注射卡介苗加脂多糖(BCG+LPS) 建立免疫性肝损伤模型, 检测其肝、脾重量和转氨酶活性, 并同时测定血清与肝组织中脂质过氧化物(LPO) 含量及T 淋巴细胞亚群数量。结果:CN-802 连用10 d 后可减轻其增大的肝、脾重量指数, 降低小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT) 水平, 降低其血清与肝组织中LPO 含量, 并增加外周血中T 细胞亚群CD₄ 数量和CD₄/CD₈ 比值。结论:CN-802 对小鼠免疫性肝损伤模型有保护作用, 其作用可能与调节细胞免疫有关。     

肾移植受者硫嘌呤甲基转移酶基因多态性与硫唑嘌呤不良反应关系的研究

目的:探讨硫嘌呤甲基转移酶(thiopurine Smethyltransferase,TPMT ) 表型和基因多态性与硫唑嘌呤(AZA) 所致不良反应的关系。方法:应用高效液相色谱法(HPLC) 测定150 例肾移植患者红细胞TPMT 活性, 采用等位基因特异性的PCR 和限制性片断长度多态性的方法检测TPMT *2、*3A、*3B 和*3C 四种基因型, 分析TPMT 活性和基因多态性与AZA 所致不良反应的关系。结果:30 例(20%) 患者由于发生了不良反应而停用AZA 或减少了AZA 的用量, 其中12 例患者发生了血液毒性, 另外18 例发生了肝脏毒性。将未发生不良反应的患者作为对照组, 其红细胞TPMT 活性范围为16.63～68.25 U, 平均为(38.43±11.59) U 。发生了血液毒性的患者红细胞TPMT 活性平均为(24.16±9.84) U, 明显低于未发生不良反应的患者(P=0.0003) 。另外18 例发生了肝脏毒性的患者TPMT 活性离散度较大, 与对照组比较差异无统计学意义(P=0.145) 。本研究未发现TPMT 活性缺乏者。共发现7 例(4.7%)TPMT *3C 杂合子患者, 这7 例患者均为TPMT 中等活性13.04～19.21 U, 平均为(16.75±2.09) U, 明显低于其他野生型患者(P<0.0001) 。在这7 例患者中有4 例发生了不良反应, 2 例发生了血液毒性, 另外2 例发生了肝脏毒性。结论:TPMT *3C 杂合子个体TPMT 活性下降,AZA 所致的血液毒性与TPMT 活性水平有关, 在治疗之初对患者进行TPMT 活性检测和基因分型, 可减轻或避免该药产生的严重血液毒性。     

含La医用316L不锈钢的体外抗凝血性能研究

系统研究了在医用316L不锈钢中加入0．05％La后的体外抗凝血性能．结果表明,与传统医用316L不锈钢相比,含La医用316L不锈钢较少地粘附和激活血小板,且动态凝血时间及血浆复钙时间均延长,表明其对内源性凝血因子的激活程度下降,抗凝血性能提高．通过测量材料的接触角,计算了表面张力及材料与血液之间的界面张力,从表面能的角度分析了材料的抗凝血机理．     

云南红药和同类产品对大鼠功血模型子宫内膜修复机制的实验研究

目的: 研究云南红药和5个治疗功血的同类产品对子宫出血模型大鼠子宫组织血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-1(MMP-1)含量的影响,探讨该类药物修复子宫内膜的作用机制。方法: 采用妊娠大鼠灌胃米非司酮和米索前列醇,造成早孕大鼠不完全流产复制功能性子宫出血模型,观察云南红药对子宫出血模型大鼠的治疗作用,并检测子宫组织中VEGF和MMP-1的含量。结果: 与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠在造模后,凝血时间明显延长,而云南红药和5个同类产品能明显缩短子宫出血模型大鼠的凝血时间,与模型组相比有统计学差异(P<0.01)。与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠在造模后,子宫组织的VEGF含量明显降低,而MMP-1的含量明显升高(P<0.01)。云南红药+戊酸雌二醇片组能明显降低子宫出血模型大鼠子宫组织MMP-1的含量,与模型组相比有统计学差异(P<0.05),而云南红药胶囊组、戊酸雌二醇片组、宫血宁胶囊组、云南白药胶囊组、茜芷胶囊组及五加生化胶囊组对子宫组织MMP-1的含量没有明显影响(P>0.05)。云南红药胶囊组、云南红药+戊酸雌二醇片组、宫血宁胶囊组及五加生化胶囊组能明显增加子宫出血模型大鼠子宫组织VEGF的含量,与模型组相比有统计学差异(P<0.01 或 P<0.05),而戊酸雌二醇片组、云南白药胶囊组及茜芷胶囊组对子宫组织VEGF的含量没有明显影响(P>0.05)。结论: 云南红药和5个同类产品对功能性子宫出血有明显的治疗作用,其中云南红药胶囊、宫血宁胶囊及五加生化胶囊对子宫内膜有明显的修复作用,其作用机制可能与上调VEGF有关;云南红药胶囊和戊酸雌二醇片合用可以增强其修复子宫内膜的作用。     

镁及镁合金的生物相容性研究

采用体外试验法对纯镁和AZ31B镁合金及阴性对照材料（316L不锈钢）的凝血酶原时间（PT）、血浆复钙时间（RT）动态凝血时间进行了测定，并对这几种材料的血液相容性进行了对比；将纯镁植入大鼠背部肌肉处，研究镁的骨诱导能力。研究结果表明，以PT为指标的抗凝血性能顺序为：Mg〈AZ31B〈316L；以RT和动态凝血时间为指标的抗凝血性能顺序均为：316L〈Mg〈AZ31B；镁有良好的骨诱导性。     

Structure and blood compatibility of tetrahedral amorphous hydrogenated carbon formed by a magnetic-field-filter plasma stream

Tetrahedral amorphous hydrogenated carbon (ta-C:H) films with various substrate bias voltages were prepared using a magnetic-field-filter plasma stream deposition system. The microstructural and optical properties were studied using ellipsometric spectra. The refractive index n of each sample was obtained by simulating their ellipsometric spectral using Tauc-Lorentz oscillator model, and then the relative sp³ C ratio of each sample was calculated using Bruggeman effective medium approximation. The sp³ C fraction of each sample was quantified by using electron energy-loss spectroscopy (EELS). The blood compatibility of the samples was evaluated by tests of platelet adhesion, kinetic clotting time and thrombin time. The quantity and morphology of the adherent platelets on the surface of these samples were investigated using scanning electron microscopy. Results show that the spectroscopic ellipsometry is a helpful method to evaluate the sp³ carbon fraction of the carbon films. The substrate bias voltage has an obvious effect on sp³ content and blood compatibility of ta-C:H films. The sample prepared with substrate bias voltage of − 20 V showed the best blood compatibility. A simple bio-physical hypothetical model was proposed to explain the experiment results.     

抗凝治疗对中晚期胃癌改善高凝状态、抗肿瘤转移的临床研究

目的:分析胃癌患者凝血指标与临床病理特征的关系,观察抗凝治疗对高凝状态、肿瘤转移、生存期的影响及安全性评价。方法:选取140例胃癌患者,分析凝血指标与临床病理特征的关系。选取III期胃癌患者172例,分为治疗组（抗凝治疗联合化疗）116例,对照组56例（单用化疗）,观察抗凝治疗对高凝状态、肿瘤转移、生存期的影响及安全性评价。结果:淋巴结转移N1-3组较N0组D-二聚体升高（P<0.05）,III、IV期较I、II期血浆纤维蛋白原（FIB）、D-二聚体升高,部分活化凝血活酶时间（APTT）数值降低（P<0.05）。治疗组抗凝治疗后,血浆凝血酶原时间（PT）、APTT延长,D-二聚体、FIB降低（P<0.05）。治疗组的12月、24月、36月腹腔淋巴结、肝脏转移率较对照组降低（P<0.05）。治疗组2年、3年生存率高于对照组（P<0.05）,中位生存期及无病生存期较对照组延长。两组牙龈出血、血小板减少、皮肤瘀点瘀斑发生率无统计学差异（P>0.05）。结论:胃癌高凝状态影响因素为淋巴结转移、TNM分期偏晚。抗凝治疗可改善高凝状态,降低腹腔淋巴结及肝脏转移率,延长生存期,未增加上述不良反应发生率。     

Hemocompatibility evaluation of plasma-nitrided austenitic stainless steels at low temperature

In this study, plasma-nitrided austenitic stainless steel was prepared using a microwave system as a function of the nitriding duration. The nitride layers were characterized via scanning electron microscopy, transmission electron microscopy (TEM), X-ray diffraction (XRD), X-ray photoelectron spectroscopy, atomic force microscopy and a Vickers micro-hardness tester. The effects of plasma nitriding on the compatibility of blood with the austenitic stainless steel were also investigated. Based on the XRD and TEM observations, it was inferred that only a single γ_N phase was detected in the whole process of experiments. The γ_N layer, which was formed on austenitic stainless steel, exhibited lower platelet adhesion and activation than the untreated specimens. The clotting time of the PN specimens was prolonged and increased with the treatment time. This work suggested that the blood-compatible manner of plasma nitriding by controlling surface characteristic on austenitic stainless steel improved the anticoagulant properties, and made austenitic stainless steel suitable candidates in the field of surgical and medical instruments.     

中药方剂鸡鸣散的时间药理学实验研究

目的:研究鸡鸣散(Ji-Ming-San,JMS)对动物模型的镇静、利尿、抗凝作用;探讨鸡鸣散药理作用的昼夜节律性差异,验证前人关于鸡鸣散择时用药的科学性。方法:以小鼠走动时间、前肢上举次数和自主活动为指标观察鸡鸣散镇静作用及其昼夜差异;用代谢笼法观察鸡鸣散利尿作用及其昼夜差异;用玻片法观察鸡鸣散抗凝作用及其昼夜差异。结果:鸡鸣散对小鼠有明显的镇静作用,使小鼠走动时间、举上肢次数及活动次数均明显减少,用药后小鼠原有活动昼夜节律消失;鸡鸣散有良好的利尿作用,用药后明显增加排尿量,且作用呈昼夜差异,夜间用药效果明显优于白昼;鸡鸣散有明显的抗凝作用,用药后明显延长小鼠凝血时间(CT),且作用呈昼夜差异,白昼用药CT延长显著长于夜间。结论:鸡鸣散具有良好的镇静、利尿及抗凝作用,且利尿、抗凝作用呈昼夜节律性差异,在动物休息期末、活动期初用药疗效较好。