脯氨酰羟化酶对宰后牦牛肉糖酵解及肉品质的影响

为研究脯氨酰羟化酶（prolylhydroxylase,PHD）对宰后牦牛肉低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）、糖酵解及肉品质的影响,以牦牛背最长肌为研究对象,分析二甲基乙二酰氨基乙酸（dimethyloxaloylglycine,DMOG）处理组和生理盐水对照组中HIF-1α表达量、糖酵解关键酶活性、糖酵解程度、肉品质等指标的变化。结果显示,在宰后成熟过程中,HIF-1α表达量随成熟时间的延长呈先升高后降低的趋势,但由于DMOG的作用,HIF-1α表达量在宰后12 h内显著升高（P＜0.05）,说明抑制PHD活性可以上调HIF-1α表达量。己糖激酶（hexokinase,HK）活性、磷酸果糖激酶（phosphofructokinase,PFK）活性和丙酮酸激酶（pyruvate kinase,PK）活性均随成熟时间的延长呈先升高后降低的趋势,同时DMOG组的HK、PFK、PK的活性在3～120 h均显著高于对照组（P＜0.05）;DMOG组的糖原含量和pH值均在3～72 h显著低于对照组（P＜0.05）,而乳酸含量显著高于对照组（P＜0.05）,说明PHD介导HIF-1α上调糖酵解酶活性,加速糖酵解进程。同时,DMOG组的剪切力在宰后成熟3～72 h显著高于对照组（P＜0.05）,L*值在6～168 h显著高于对照组（P＜0.05）,而a*值在成熟过程中始终显著高于对照组（P＜0.05）;DMOG组的肌纤维直径和肌纤维面积均低于对照组,肌纤维间隙高于对照组,但差异不显著。说明PHD介导HIF-1α对宰后肉品质的形成产生影响,其中剪切力与L*值的变化由pH值变化引起,而a*值的变化原因需要进一步探究。结果表明,在宰后成熟过程中,PHD通过上调HIF-1α表达量进而增强糖酵解关键酶活性,加速糖酵解进程,引起肌肉内环境的变化,最终影响宰后肉品质的形成。     

AMPK活性对宰后牛肉糖酵解、肌肉内环境及品质的影响

为探究牛肉宰后成熟过程中单磷酸腺苷活化蛋白激酶（adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK）对糖酵解、肌肉内环境及品质的影响,以0.50 mol/L 5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷（5-amino-4-imidazolecarboxamide,AICAR）处理的西杂牛背最长肌为对象,于4 ℃进行成熟,测定宰后成熟期间肌肉AMPKα基因（PRKAA1、PRKAA2）转录量、P-AMPK表达量、AMPK活性、糖酵解水平及品质指标的变化情况。结果表明：宰后24～120?h,处理组AMPKα基因转录量、P-AMPK表达量及AMPK活力均显著高于对照组（P＜0.05）;72～168?h,处理组pH值和肌糖原含量显著低于对照组（P＜0.05）,乳酸含量显著高于对照组（P＜0.05）;12～168?h,处理组L*、b*值及ATP、ADP、AMP和IMP含量均显著高于对照组（P＜0.05）,a*值显著低于对照组（P＜0.05）;24～120?h,处理组蒸煮损失率和肌原纤维小片化指数显著高于对照组（P＜0.05）,剪切力显著低于对照组（P＜0.05）。AICAR通过激活AMPK并加快宰后糖酵解影响肌肉内环境、肉色、剪切力及肌纤维微观结构变化,加快宰后肌肉成熟进程,说明AMPK活性对宰后肌肉糖酵解及品质变化具有重要影响,且可通过调控宰后肌肉AMPK活性来调节肌肉品质。     

缺氧诱导因子对滩羊肉宰后初期能量水平及肉色的影响

为研究缺氧诱导因子（hypoxia-inducible factor 1，HIF-1）对滩羊肉宰后成熟48 h内糖酵解关键酶、能量水平、pH值及肉色的影响，本实验以4 ℃成熟2、6、12、24、48 h的滩羊背最长肌为研究对象，测定不同成熟期HIF-1表达量，磷酸丙糖异构酶（triose-phosphate isomerase，TPI）活力，能量物质三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）、二磷酸腺苷（adenosine diphosphate，ADP）、单磷酸腺苷（adenosine monophosphate，AMP）水平，肌肉pH值及肉色的变化，并对HIF-1表达量与TPI活力，ATP、ADP、AMP含量，pH值及肉色进行相关性分析。结果表明，宰后2～24 h内HIF-1表达量迅速升至最高值，24 h后有所下降；TPI活力于宰后6 h升至最高，随后逐渐降低；宰后48 h内能量物质ATP、ADP、AMP水平均随成熟时间延长逐渐降低；宰后48 h内pH值显著降低（P＜0.05）；肉色指标L*、a*值及b*值均随成熟时间延长显著升高（P＜0.05）。宰后成熟2～48 h内滩羊肉HIF-1表达量与TPI活力、能量物质水平、肉色及pH值均显著相关（P＜0.05、P＜0.01），可能是由于受宰后缺氧信号诱导，HIF-1表达量于宰后6 h内迅速升高，HIF-1复合体转移至细胞核与糖酵解基因结合，促进糖酵解相关基因表达，促使糖酵解途径增强，提高了糖酵解相关酶活力，并降低肌肉pH值。综上，HIF-1可能通过调控宰后糖酵解及肌肉pH值影响肉色。     

苏尼特羊宰后成熟过程中单磷酸腺苷活化蛋白激酶活性、糖酵解与肉品质指标的变化分析

本实验选取苏尼特羊背最长肌为研究对象，分析宰后4 ℃下成熟过程中（0、24、48、72、96 h）单磷酸腺苷活化蛋白激酶（adenosine monophosphate-activated protein kinase，AMPK）的质量浓度和活力、糖酵解及肉品质相关指标的变化情况，以探究宰后AMPK的含量和活性对糖酵解和成熟进程的影响，确定苏尼特羊宰后最佳的成熟时间。结果表明：羊肉中磷酸化AMPK的质量浓度和活性都呈现先上升后下降的趋势，在24 h达到最高点。糖酵解指标中，pH值在宰后24 h内显著下降（P＜0.05）；肌糖原和游离葡萄糖的含量随着宰后成熟时间的延长逐渐下降；乳酸含量在宰后24 h到达最大值。肉品质相关指标中，羊肉的剪切力在24 h达到最大值，随后下降，48 h后总体趋于稳定；a*值及b*值在宰后均呈现先升高后趋于平缓的趋势；L*值在宰后96 h达到最大；在不同时间点（0、24、48、72、96 h）挥发性风味物质分别为29、30、41、40、46 种，整体呈现升高的趋势，其中48 h时醛类物质种类最多，有助于提高羊肉的整体风味。综上所述，宰后不同时间点AMPK含量和活性的变化会造成糖酵解指标的改变，进而影响了肉品质指标的变化；在宰后48 h的羊肉具有较好的品质和风味，适宜加工食用。     

NO对宰后牛肉成熟过程中AMPK活性、糖酵解及持水力的影响

为研究宰后牛肉中NO对一磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMP-activated proteinkinase，AMPK）活性、糖酵解及肉品持水力的级联调控作用。以NO释放剂二乙烯三胺（diethylenetriamine，DETA）、一氧化氮合成酶抑制剂亚硝基左旋精氨酸甲酯（L-nitro-arginine methyl ester，L-NAME）、DETA＋Compound C（AMPK抑制剂）处理的牛臀股四头肌为研究对象，在成熟0、6、12、24、48、72 h分析NO含量、AMPK活性、糖酵解关键酶活性、蛋白质溶解性以及持水力等指标变化。结果显示，AMPK活性在0、6、12 h L-NAME组显著低于对照组（P＜0.05），DETA组显著高于对照组（P＜0.05）。L-NAME组己糖激酶和磷酸果糖激酶活性在6、12 h显著低于对照组（P＜0.05），pH值在6、12、24 h显著高于对照组（P＜0.05），总蛋白溶解性在6、12、24、48、72 h高于对照组（P＜0.05），离心损失在6、12、24、48、72 h低于对照组（P＜0.05），以上指标在NO促进组和对照组之间没有显著差异（P＞0.05）。然而，NO促进＋AMPK抑制组己糖激酶和磷酸果糖激酶活性在6、12 h显著低于其他3 组（P＜0.05），pH值在6、12、24 h则显著高于另外3 组（P＜0.05），总蛋白溶解性在6、12、24、48、72 h显著高于其他3 组（P＜0.05），离心损失在6、12、24、48、72 h显著低于其他3 组（P＜0.05）。结果表明，牛肉在宰后成熟初期，NO通过激活AMPK进一步增强己糖激酶和磷酸果糖激酶的活性和糖酵解速率，使牛肉pH值、总蛋白溶解性和持水力均降低。该研究结果可为揭示宰后牛肉品质劣变内源因素及后期开展肉品质控制相关研究提供一定理论依据。     

茯苓多糖通过NF-κB和NLRP3信号通路调节脂多糖引起的焦虑和抑郁样行为

目的：探讨茯苓多糖（Poria cocos polysaccharide,PPS）对脂多糖（LPS）引起的焦虑和抑郁样行为的影响,并分析其机制。方法：BV-2细胞分成对照组、LPS组、LPS+氟西汀组、LPS+PPS(PPS分别为4、8、16μmol/L),处理24 h,二氯二氢荧光素二氢乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针检测细胞内活性氧（ROS）水平,Griess法检测培养上清液NO水平,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测培养上清液中TNF-α、IL-1β水平,Western blot实验检测CD206、CD16/32、NF-κB p65水平。动物实验将小鼠分为对照组、模型组、LPS+氟西汀组、LPS+PPS低剂量组（20 mg/kg）、LPS+PPS高剂量组（80 mg/kg）,每组10只,测试抑郁样行为,检测海马组织TNF-α、IL-1β、IL-18的浓度,分析海马组织CD206、CD16/32、NF-κB p65、NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1蛋白水平。结果：与LPS组比较,4、8、16μmol/L PPS能极显著降低ROS荧光相对强度（P<0.01...     

红酵母红素对氧化应激细胞PC12细胞的保护机制

探究红酵母红素对氧化应激细胞的保护机制。PC12细胞（大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞）分为对照组、模型组（200μmol/L H₂O₂）、番茄红素组（20μmol/L番茄红素+200μmol/L H₂O₂,阳性对照组）和红酵母红素组（1μmol/L红酵母红素+200μmol/L H₂O₂、2μmol/L红酵母红素+200μmol/L H₂O₂和3μmol/L红酵母红素+200μmol/L H₂O₂）,分别观察PC12细胞的形态变化,检测细胞凋亡率、半胱氨酸蛋白酶Caspase-3的活性及细胞中促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达含量。结果表明,与模型组相比,3μmol/L的红酵母红素能维持细胞原有形态,降低了11.6%的细胞凋亡率（p<0.05）,抑制了62.92%的Caspase-3活性（p<0.01）,进一步研究发现红酵母红素能够下调Bax的表达（p<0.01）,上调Bcl-2的表达（p<0.01）,从而阻止了凋亡链反应。综上所述,红酵母红素可能通过抑制Caspase-3活性,调节Bax和Bcl-2的表达来发挥对氧化应激细胞的保护作用,且其作用存在剂量依赖性。      

活性氧激活缺氧诱导因子-1α加速宰后成熟初期牛肉能量代谢

为探究活性氧（reactive oxygen species,ROS）在宰后成熟初期调控牛肉缺氧诱导因子-1α(hypoxiainduciblefactor-1α,HIF-1α)对能量代谢的影响。牛肉样品分别用H2O2、N-乙酰半胱氨酸（N-acetyl-L-cysteine,NAC）和生理盐水（对照）处理。在低温成熟0.5、6、12、24、48 h分别测定ROS含量、脯氨酰羟化酶（proline hydroxylase,PHD）活力、磷酸肌醇-3激酶（phosphatidylinositol3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B(proteinkinase B,AKT)和HIF-1α蛋白质表达水平、能量代谢水平以及pH值的变化。结果发现：H2O2处理组初始（0.5 h）ROS含量显著高于其他2组（P<0.05）,且在48 h内始终处于显著较高水平（P<0.05）,NAC处理能够在短期内（0.5～12 h）抑制ROS积累;H2O2处理组PHD活力在0.5～48 h内显著低于其他2组（P<0.05）,同时,在0.5～12 h和0.5～6 h内PI3K和磷酸化AKT表达...     

玉米蛋白粉中叶黄素和玉米黄素对小鼠巨噬细胞免疫调节活性的研究

采用体外细胞培养方法,研究小鼠腹腔巨噬细胞在LPS刺激的情况下,从玉米蛋白粉中提取的叶黄素和玉米黄素对其生成NO的影响作用.噻唑蓝（MTT）法检测淋巴细胞及巨噬细胞增殖,比色分析检测巨噬细胞吞噬中性红的能力,生物法测定肿瘤坏死因子α（TNF-α）活性,Griess法测定NO含量.结果表明：叶黄素和玉米黄素对小鼠腹腔巨噬细胞的生长有一定的促进作用,当叶黄素、玉米黄素分别为5μmol/L和2.5μmol/L时对小鼠腹腔巨噬细胞产生NO表现为抑制作用,而当叶黄素的浓度在10～40μmol/L、玉米黄素的浓度在5～30μmol/L时巨噬细胞NO的生成水平表现为能显著提高正常小鼠腹腔巨噬细胞产生NO,且呈现剂量效应关系.叶黄素在20～50μ mol/L,玉米黄素在10～40 μ mol/L的浓度范围内,能够促进巨噬细胞吞噬中性红的能力,并能诱导其分泌TNF-α.     

虫草素对脂多糖诱导巨噬细胞过度活化的抑制作用研究

目的:研究虫草素对脂多糖（LPS）诱导巨噬细胞过度活化的抑制作用。方法:培养RAW264.7小鼠巨噬细胞,采用LPS（1μg/m L）激活巨噬细胞,同时给予0.1¹0μmol/L的虫草素处理细胞,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定细胞存活率,Griess法检测细胞一氧化氮（NO）释放量,酶联免疫吸附分析实验（ELISA）分别检测三种细胞炎症因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）和白介素-6（IL-6）的释放水平,采用Fluo-3/AM染色法以流式细胞仪测定胞浆游离钙离子浓度([Ca²⁺]i)的变化,采用水杨酸法考察虫草素对羟自由基（·OH）清除作用,L-酪氨酸法检测其对过氧亚硝酸根离子自由基（ONOO-）清除作用,邻苯三酚自氧化法检测其对超氧阴离子自由基（O₂^-·）清除作用。结果:虫草素在0.1¹0μmol/L浓度范围内可显著抑制LPS激活的RAW264.7巨噬细胞释放NO及3种炎症因子（IL-1β、IL-6和TNF-α）,同时对细胞存活率无显著影响;虫草素（10μmol/L）可显著抑制LPS诱导的巨噬细胞内[Ca²⁺]i水平异常升高;此外,虫草素对·OH、ONOO-和O₂^-·自由基具有显著清除作用。结论:虫草素可抑制LPS激活的RAW264.7巨噬细胞释放NO及炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6,这可能与其抑制了细胞内[Ca²⁺]i的增高及清除·OH、ONOO-和O₂^-·自由基有关。虫草素可能对巨噬细胞过度激活引起的炎症相关疾病具有一定的防治作用。      

木犀草素与叶酸对黄曲霉毒素B1致食管上皮细胞毒性及MTHFR基因高甲基化的影响

目的：研究木犀草素（luteolin,LUT）与叶酸（folic acid,FA）对黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）诱导损伤的人正常食管上皮细胞（human normal esophageal epithelial cells,HEEC）MTHFR基因甲基化的影响。方法：不同浓度（0、13、25、50、100、200 μmol/L）AFB1染毒HEEC 24、48、72 h,CCK-8法检测细胞活力;将HEEC分为空白对照组、AFB1染毒组（200 μmol/L）、LUT干预组（160 μmol/L）、FA干预组（20、200 μmol/L）以及联合干预组（160 μmol/L LUT＋20 μmol/L FA、160 μmol/L LUT＋200 μmol/L FA）,处理24 h后CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,Western blot检测MTHFR蛋白的表达水平,MassARRAY甲基化检测MTHFR基因启动子区甲基化的情况。结果：不同浓度的AFB1染毒HEEC 24、48、72 h均可以抑制细胞增殖,而经LUT和FA干预后,与AFB1染毒组相比,LUT及联合干预组细胞周期阻滞显著减少（P＜0.05）,细胞抑制率及凋亡率显著降低（P＜0.05）,MTHFR蛋白表达上调有所改善（P＜0.05）。且LUT与FA及二者联合对MTHFR基因启动子区高甲基化水平均有降低作用（P＜0.05）。结论：AFB1对HEEC有毒性作用,表现在增殖抑制、周期阻滞,促进凋亡,上调了MTHFR蛋白的表达,LUT干预可减弱这些损伤,对AFB1所致毒性起到一定的保护作用。AFB1提高了MTHFR基因启动子区甲基化水平,导致表观遗传的改变。LUT与FA及联合作用可以降低该甲基化水平,改善该表观遗传的改变。     

基于微流控技术的橙黄决明素对HepG2细胞的体外安全性评估

目的 本研究将微流控技术运用到HepG2细胞模型构建及对橙黄决明素的潜在体外安全性评估中。方法 以鼠尾胶原Ⅰ型（1.3 mg/mL）+明胶（7.5%）构建仿真人体微环境,对乙酰氨基酚（APAP）作为阳性对照组,通过不同浓度橙黄决明素对HepG2细胞的增殖活性、活/死细胞染色和功能性生化指标进行体外安全性评估。结果 该平台实现了HepG2细胞的稳定培养与应用,经72 h培养,细胞成团增殖。橙黄决明素连续处理48 h后计算细胞存活率,结果表明随着橙黄决明素浓度的增加,0、50、100和200μmol/L细胞存活率分别为100.0%、95.3%、90.3%和81.6%,与空白对照组比较,尤以200μmol/L差异最为显著（P<0.05）;红色标记的死细胞数量随橙黄决明素浓度增加逐渐增多,绿色标记的活细胞数量则逐渐减少;尿素氮（BUN）含量随着浓度的增加而显著降低,与空白对照组（0μmol/L）比较,50～200μmol/L组差异具有显著性（P<0.05）,且200μmol/L与APAP组BUN含量接近;谷丙转氨酶、谷草转氨酶和乳酸脱氢酶活性之间随着浓度的变化均无显著性差异。结论 ...     

莲藕渣多糖通过MAPK/NF-κB途径调节小鼠腹腔巨噬细胞的免疫应答

揭示莲藕渣多糖（Lotus Root Residue Polysaccharide,LRP）对BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞的体外免疫调节作用,探讨LRP刺激腹腔巨噬细胞产生免疫应答的信号通路。利用MTT法测定不同浓度LRP对细胞活力影响;选用不同浓度梯度及同一浓度不同时间点的LRP刺激细胞,Griess法检测细胞NO释放量;半定量PCR检测细胞TLR4、TLR2受体及免疫关联因子（TNF-α、IL-6、iNOS、1L-1β、COX-2、Nfkbia）mRNA的表达,蛋白印迹法检测其MAPK通路（ERK1/2、JNK、p38）及Akt的磷酸化,同时研究了LRP对和蛋白AP-1及NF-κB的影响,对LRP对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节活性及其信号机制进行评估。研究表明,LRP对小鼠腹腔巨噬细胞无毒作用,25~50 μg/mL LRP促进细胞生长,细胞存活率为104.82%和102.53%（p<0.05）;NO浓度随LRP浓度提高而显著提高（p<0.05）,200 μg/mL LRP刺激细胞产生一氧化氮（NO）为36.47 μmol/L,200 μg/mL的LRP处理细胞,NO产量随培养时间延长而增多（p<0.05）,24 h时NO浓度为44.18 μmol/L;mRNA基因表达研究显示,LRP调控TLR4、TLR2受体,并调节免疫基因的表达;此外,LRP促进核蛋白c-Jun、p65由核外转向核内,增强ERK1/2、JNK、p38蛋白的磷酸化水平,但对于Akt的磷酸化没有显著影响。因此,莲藕渣多糖（LRP）可通过MAPK/NF-κB途径增强BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞免疫应答。     

活性氧对宰后牦牛肉成熟过程中腺苷一磷酸活化蛋白激酶通路、糖酵解及肉品质的影响

为研究活性氧(reactive oxygen species,ROS)诱导腺苷一磷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)通路对宰后牦牛肉成熟过程中糖酵解及肉品质的影响,以H2O2、活性氧清除剂N-乙酰基-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)、H2O2+Compound C(AMPK抑制剂)处理的牦牛背最长肌为研究对象,测定了成熟过程中AMPK级联反应相关指标、糖酵解代谢指标及肉品质指标的变化。结果表明,宰后初期,活性氧诱发胞浆Ca2+浓度显著升高(P<0. 05);在6～24 h,牦牛肉钙/钙调素依赖性蛋白激酶激酶β(calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase Beta,CaMKKβ)活力及AMPK活力H2O2组均显著(P<0. 05)高于NAC组;在12～48 h,丙酮酸激酶活力H2O2组显著(P<0. 05)高于其他组,致使H2O2组乳酸积累量显著(P<0.05)高于NAC组及AMPK抑制剂...     

N-乙酰-半胱氨酸干预壬基酚对小鼠Sertoli TM4细胞的损伤作用

目的：研究N-乙酰-半胱氨酸（N-acetyl-cysteine,NAC）对壬基酚（nonylphenol,NP）诱导的小鼠Sertoli TM4细胞氧化损伤及凋亡的干预作用。方法：以Sertoli TM4细胞为对象,实验分为对照组、NP组（20 μmol/L NP处理）、NP＋NAC组（5 mmol/L NAC预处理4 h后20 μmol/L NP处理24 h）、NAC组（5 mmol/L NAC处理4 h后换正常培养基培养）,采用噻唑蓝法检测细胞存活率;流式细胞术检测活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量和细胞凋亡情况;试剂盒法检测超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力、过氧化氢酶（catalase,CAT）活力、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量及Caspase-3相对活力;Western blot法检测细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）和c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）磷酸化情况。结果：与对照组相比,20 μmol/L NP处理24 h能显著降低细胞存活率（P＜0.05）,同时诱导细胞内ROS生成,下调SOD和CAT活力,增加MDA含量,诱导Sertoli TM4细胞凋亡,增加Caspase-3相对活力,促进ERK、JNK蛋白磷酸化激活;与NP组相比,NAC预处理能够明显削弱NP引起的细胞内ROS生成,使SOD、CAT活力下调,MDA含量增加,Sertoli TM4细胞凋亡,Caspase-3相对活力增强,激活ERK、JNK信号通路。结论：NAC具有干预NP对小鼠Sertoli TM4细胞损伤的作用,这可能与NAC抑制NP诱导的细胞氧化应激和凋亡以及阻断ERK、JNK信号通路的激活相关。     

刺五加黑木耳酸性多糖化学组成及免疫活性研究

利用离子交换色谱与凝胶色谱纯化获得刺五加黑木耳酸性多糖（EAP）,使用高效液相色谱（HPLC）、傅里叶红外光谱（FT-IR）等方法分析其组成结构;通过噻唑蓝（MTT）实验、Griess法及酶联免疫吸附法测定一氧化氮（NO）释放量和IL-6、IL-10、TNF-α等细胞因子含量,评价EAP对小鼠巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用。结果表明:EAP是一种分子量为925.9 k Da的β型酸性杂多糖,主要由甘露糖、葡萄糖醛酸、木糖、葡萄糖及半乳糖以摩尔比例64.8∶14.7∶14.2∶3.2∶2.0组成。EAP在50²50μg/m L浓度下对小鼠巨噬细胞RAW264.7未产生明显毒性,且可极显著提高巨噬细胞的活性（p<0.01）;在EAP处理浓度为50μg/m L时,巨噬细胞的NO释放量和细胞因子IL-10分泌量极显著提高（p<0.01）,分别为17.2μmol/L和171.5 pg/m L;当浓度200μg/m L时,EAP可极显著提高TNF-α和IL-6的分泌量（p<0.01）。结论:刺五加黑木耳酸性多糖具有增强免疫活性的潜力。      

染料木黄酮抑制3T3-L1细胞成脂分化机制

目的：研究染料木黄酮是否通过雌激素受体介导影响3T3-L1前脂肪细胞成脂分化,并探讨其可能的机制。方法：以不同浓度染料木黄酮处理3T3-L1细胞,四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法测定细胞存活率;在3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中分别加入不同浓度染料木黄酮、染料木黄酮和ICI182780（一种雌激素受体抑制剂）混合物及不同浓度雌二醇,油红染色观察分化结果,测定细胞甘油三酯（triglyceride,TG）含量;染料木黄酮、染料木黄酮和ICI182780混合物及不同浓度雌二醇处理诱导成熟后的脂肪细胞,测定培养液甘油含量;分别用染料木黄酮（30 μmol/L）、染料木黄酮（30 μmol/L）和ICI182780混合物干预细胞成脂分化,Western blotting法检测细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）、p-ERK、腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK）、p-AMPK、激素敏感性脂肪酶（hormone sensitive lipase,HSL）、脂肪酸合成酶（fatty acid synthetase,FAS）蛋白表达量。结果：3T3-L1细胞存活率随染料木黄酮浓度的升高而降低,50～200 μmol/L染料木黄酮能抑制细胞生长（P＜0.01）;染料木黄酮能负向调节成脂分化后细胞胞浆内TG含量,在0～50 μmol/L浓度范围内呈剂量依赖关系,高剂量雌二醇（100 nmol/L）能下调TG含量;染料木黄酮能促进成熟脂肪细胞脂解,提高细胞培养液甘油浓度;染料木黄酮（30 μmol/L）能上调p-AMPK、HSL蛋白表达,下调FAS蛋白表达（P＜0.01）,对ERK、p-ERK、AMPK表达量无明显影响（P＞0.05）。ICI182780（1 μmol/L）能部分阻断染料木黄酮（30 μmol/L）对p-AMPK的调节作用（P＜0.05）。结论：染料木黄酮能抑制3T3-L1细胞成脂分化,其机制可能是染料木黄酮一方面下调FAS蛋白表达,抑制脂肪合成,另一方面激活AMPK-HSL途径促进脂肪分解;染料木黄酮还可能通过非雌激素受体途径抑制3T3-L1细胞成脂分化。     

乳酸菌XHR-2的发酵特性及糖苷酶活性分析

以夏黑葡萄自然发酵中分离的乳酸菌XHR-2为研究对象，对其发酵特性和糖苷酶活性进行研究。结果表明，乳酸菌XHR-2在模拟葡萄酒培养基中发酵192 h可使L-苹果酸降解完全，该菌株可耐受14%vol酒精度、60 mg/L SO2、pH值3.6和温度16℃。乳酸菌XHR-2具有β-D-葡萄糖苷酶活和α-L-阿拉伯糖苷酶活，其细胞破碎液、完整细胞的β-D-葡萄糖苷酶活分别为8.31μmol/（g·min）、4.52μmol/（g·min）,α-L-阿拉伯糖苷酶活分别为3.30μmol/（g·min）、3.01μmol/（g·min）。     

基于黄嘌呤氧化酶活性抑制和斑马鱼高尿酸血症模型的降尿酸功效食药材筛选

结合体外（黄嘌呤氧化酶活性抑制）和体内（斑马鱼高尿酸血症模型）方法,对15种食药材乙醇粗提物的降尿酸活性进行筛选。体外实验设置空白组、酶反应组、抑制剂组、对照组,酶标仪295 nm测定吸光度,计算15种食药材对黄嘌呤氧化酶（XOD）活性的抑制率;体内实验随机选取受精后第5 d（5dpf）的斑马鱼,设置空白组、模型组（200 μmol/L PO+10 μmol/L XSS）、食药材给药组（200 μmol/L PO+10 μmol/L XSS+不同浓度提取物）、阳性对照组（200 μmol/L PO+10 μmol/L XSS+APL 2 mmol/L）,水溶浸泡,28.5 ℃培养箱中孵育24 h,测定尿酸含量,对具有良好XOD抑制活性的食药材做进一步降尿酸活性验证。体外试验结果表明,15种乙醇粗提物均具有XOD抑制活性,其中8种在400 μg/mL时抑制率达到50%以上,分别为:红景天、兔耳草、牡丹皮、败酱草、黄柏、绿萝花、决明子、雪菊。体内试验结果表明,8种处理组尿酸水平与模型组相比显著降低（P<0.05或P<0.01）,均显示出降尿酸活性。     

牛磺酸降低高胆固醇HepG2细胞内胆固醇的作用机制研究

目的:探讨牛磺酸对高胆固醇Hep G2细胞胆固醇降解作用及其机制。方法:以0.02 mmol/L胆固醇加入培养液中建立高胆固醇细胞模型后,分别加入1、10、20 mmol/L牛磺酸培养48 h,测定细胞内总胆固醇（TC）、游离胆固醇（FC）、胆固醇酯（EC）及细胞内总胆汁酸（TBAc）和培养液总胆汁酸（TBAm）水平;并检测20 mmol/L牛磺酸作用24 h后细胞CYP7A1及其调控分子的蛋白表达水平。结果:10 mmol/L和20 mmol/L牛磺酸作用48 h可显著降低细胞内TC、FC和EC（p<0.01）,同时升高了TBAc和TBAm（p<0.05或p<0.01）;20 mmol/L牛磺酸作用24 h时使CYP7A1显著增加（p<0.05）;20 mmol/L牛磺酸作用24 h后MAPK、ERK、JNK、c-jun和p-c-jun表达明显降低（p<0.05）,而对HNF4α则无显著影响。结论:牛磺酸可抑制高胆固醇Hep G2细胞MAPK/ERK和MAPK/JNK表达水平,降低c-jun蛋白表达及c-jun磷酸化水平,促进CYP7A1蛋白表达升高,从而加速胆固醇转化为胆汁酸。