PHA-767491联合IL-24基因对肝癌细胞的杀伤研究

利用最新发现的抗癌新药PHA-767491联合肿瘤基因治疗中最常用的杀伤基因IL-24共同处理肝癌细胞Bel-7404,采用20MOI携带IL-24基因的非复制型病毒Ad-IL-24联合不同浓度的PHA-767491对肝癌细胞Bel-7404进行治疗研究。western blot实验结果表明:PHA-767491对IL-24的表达无明显抑制作用;MTT和Ho-ceast33342染色实验表明二者联合对Bel-7404细胞表现出了较高协同杀伤作用。     

二氯乙酸钠对溶瘤腺病毒ZD55-Smac抑制肝癌细胞生长的影响

研究了溶瘤腺病毒ZD55-Smac联合小分子药物二氯乙酸钠(DCA)对人肝癌细胞株的体外抑制效果.首先通过PCR及Western blot鉴定病毒构建正确与否及有无野毒污染,再用MTT 法分别检测DCA、ZD55、ZD55-Smac以及DCA与病毒联合对肝癌细胞株Huh-7、PLC、SMMC-7721及肝正常细胞QSG-7701生长的抑制作用;通过倒置显微镜观察了DCA、ZD55-Smac以及DCA和ZD55-Smac联合使用对肝癌细胞株PLC及肝正常细胞QSG-7701的细胞形态变化的影响;利用Hoechst33342染色观察了所处理细胞的凋亡形态学变化.结果表明DCA联合ZD55对肝癌细胞株Huh-7、PLC和SMMC-7721的抑制效果相比较单药物治疗或单病毒治疗有显著增加,而DCA联合ZD55-Smac对肝癌细胞的抑制效果比单病毒治疗有所减弱.该研究为进一步探究ZD55-Smac联合药物治疗打下基础.     

绿球藻TC品系提取液促进鼠肝癌细胞的生长

以长期热诱导建立了一种绿球藻(Chlorococcum infusioum)的嗜温品系,简称CTCS。在PBS(磷酸缓冲液)中的CTCS细胞提取液明显促进H_4肝癌细胞株在DME培养基和0.5％FSB(胎牛血清)中的生长。当CTCS提取液蛋白质浓度为12.4微克/毫升时,可使H_4肝癌细胞数量在6天中比对照(不加CTCS提取液)增加12.5倍。     

HSV-tk联合GCV自杀系统对肝癌细胞株Huh-7杀伤作用的研究

单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpessimplex virus-thymidine kinase,HSV-tk)基因,是目前研究比较多的自杀基因,其与前体药物丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)构成HSV-tk/GCV自杀基因系统.本实验将携带HSV-tk基因的慢病毒转染Huh-7细胞,通过报告基因反映慢病毒的转染效率;基因组PCR及RT-PCR检测转染Huh-7细胞中的HSV-tk基因的整合及表达;MTT检测不同浓度药物处理后的细胞存活率;最后HSV-tk+与HSV-tk-的Huh-7细胞以不同比例混合,MTT测定GCV作用后细胞的存活率.结果表明,HSV-tk/GCV系统作用于Huh-7细胞后,细胞出现明显的凋亡现象,旁观者效应比较明显.     

含羞草素对肝癌细胞QGY-7703周期同步化的作用

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的疾病之一。肿瘤的发生发展本质上就是细胞无限制的周期性生长、增殖和分化的失调。细胞同步化是研究肿瘤发生发展及治疗的基础。实验以人肝癌QGY-7703细胞株为研究对象,考察含羞草素阻断对周期同步化的作用。并与胸腺嘧啶脱氧核苷阻断法相对照,研究含羞草素阻断去除后对QGY-7703细胞周期的影响。结果显示:QGY-7703细胞在含羞草素阻断后释放的第10h进入S期,第20h进入G2/M期,且最高同步率分别为G1期94.6%,S期86.0%。含羞草素能较好地使肝癌细胞株QGY-7703同步化于G1期和S期。     

羟基磷灰石纳米粒子对肝癌细胞PCNA表达的影响

为了研究羟基磷灰石(HAP)纳米粒子对肝癌细胞增殖细胞核抗原表达的影响,采用均匀沉淀法制备了均匀分散的纳米尺度的HAP纳米粒子。以0.56 mmol/L的HAP纳米粒子与Bel-7402肝癌细胞作用后,采用流式细胞技术检测细胞周期时相的变化,行免疫细胞化学法PCNA染色,形态学观察和定量分析细胞的PCNA表达。结果显示HAP纳米粒子能使Bel-7402细胞的细胞增殖周期阻滞于G1期,PCNA表达降低,与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。HAP纳米粒子可能通过抑制PCNA的表达,起到抑制肝癌细胞增殖的作用。     

纳米羟基磷灰石对肝癌细胞端粒酶基因表达的影响

研究羟基磷灰石（HAP）纳米粒子对Bel-7402人肝癌细胞端粒酶基因表达的影响。采用均相沉淀法制备出稳定单分散的HAP纳米粒子,应用透射电镜、电位粒度仪对其进行表征。HAP纳米粒子作用Bel-7402肝癌细胞4 h后,采用原位杂交技术检测Bel-7402肝癌细胞的端粒酶基因表达。结果表明HAP纳米粒子作用组的Bel-7402肝癌细胞的端粒酶阳性细胞比例为61.38%,而对照组的端粒酶阳性细胞比例为87.89%,2组有显著性差异（P〈0.01）。HAP纳米粒子可使Bel-7402肝癌细胞的端粒酶基因表达下调。     

柠檬酸镧对肝癌细胞HepG2抗失巢凋亡的影响

研究柠檬酸镧对肝癌细胞HepG2失巢凋亡的影响.采用聚羟乙基异丁烯酸阻断细胞与胞外基质联系的方法,建立体外细胞失巢生长模型.在贴壁和失巢条件下,用浓度0.1、0.01和0.001 mmol/L的柠檬酸镧溶液处理细胞.对于贴壁细胞,用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色检测细胞周期和凋亡率.对于失巢细胞,运用AnnexinV FITC-PI双染法检测失巢凋亡,用线粒体膜电位检测试剂盒JC-1(5,5′,6,6′-tetrachloro-1,1′,3,3′-tetraethyl-imidacarbocyanine iodide)荧光显微镜法检测线粒体膜电位.结果表明,在贴壁条件下,柠檬酸镧处理组的周期和凋亡率与对照组相比,不存在明显差异.而在失巢条件下,柠檬酸镧促进HepG2细胞失巢凋亡,降低了线粒体膜电位.结果显示,稀土元素可能具有作为新的抗癌药物的潜力.     

凋亡因子（TRAIL）对癌细胞凋亡的机制研究

凋亡因子TRAIL（Tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand）能诱导肿瘤和转化细胞凋亡而不伤害正常细胞.TRAIL与细胞膜上死亡受体（death receptors,DR）结合,引发受体蛋白构象变化,经胞膜内受体死亡域（death domain,DD）募集接头蛋白FADD（Fas associateddeath domain）,再经过FADD的死亡效应域（death effector domain,DED）与凋亡蛋白解酶原-8/10（procaspase-8/10）的DED相互结合,形成DISC（death-inducing signaling complex）,引起凋亡蛋白解酶（caspase）级联反应,促使癌细胞凋亡.目前,可溶性重组人性化TRAIL（rhTRAIL）和抗DR4/5单克隆抗体已进入临床Ⅰ/Ⅱ期实验阶段.但绝大部分癌细胞对TRAIL有耐受或引起耐受,耐受机制主要是由于IAP（Inhibitor of Apoptosis Protein）,Bcl-2（B-cell lymphoma-2）及cFLIP（cellular FLICE/caspase 8-like inhibitory protein,胞质凋亡抑制蛋白）家族蛋白的过表达而产生.因此,为了克服TRAIL的耐受,已有多种小分子IAP和Bcl-2拮抗剂在研发并进行临床实验.至今尚无cFLIP拮抗剂的报导.     

磷灰石超微粉对癌细胞作用的初步研究

磷灰石超微粉由于其特殊的物理化学特性,对癌细胞的生长、增殖有一定的抑制作用。实验中采用磷庆石处理7种癌细胞发现经磷灰石超微粉处理的癌细胞的形态.数量发生了明显的变化,癌细胞的生长,增殖受到明显的抑制。     

双基因溶瘤腺病毒联合5-FU抑制肺癌细胞增殖的研究

研究携带TRAIL和Smac的双基因溶瘤腺病毒（ZD55-TRAIL-IETD-Smac）联合化疗药物5-氟尿嘧啶（5-FU）对肺癌细胞的体外杀伤作用。通过MTT法检测细胞抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western Blot检测杀伤性基因表达与凋亡相关蛋白表达。结果显示ZD55-TRAIL-IETD-Smac与5-FU联合应用能有效地抑制肺癌细胞的增殖,并通过激活Caspase通路诱导肺癌细胞产生凋亡,表明,5-FU能够显著增强携带TRAIL和Smac的双基因溶瘤腺病毒对肺癌细胞的杀伤作用,为肺癌的临床应用提供了参考。     

乳酸菌分批培养的菌体增殖动力学研究

选用Logistic equation作为菌体细胞生长的动力学模型，研究得出德氏乳杆菌保加利亚亚种菌体分批培养的动力学方程及乳酸乳球菌乳酸亚种菌体分批培养的动力学方程，为进一步放大试验和工业化生产以及优化培养工艺提供了理论模型．     

连云港条斑紫菜叶状体的细胞发育特性研究

实验观察了连云港条斑紫菜叶状体各部位的营养细胞形态特征及营养细胞向生殖细胞——果胞及果孢子囊的转化特性。结果表明,条斑紫菜叶状体从基部到中部再到梢部,其细胞越来越小,细胞颜色由浅绿色渐变为黄褐色再渐变成紫褐色,细胞形态由蝌蚪形或椭圆形变为多边形又渐变为近圆形,细胞壁厚度逐渐变薄。并且不同部位的营养细胞分化发育成生殖细胞——果胞及果孢子囊的潜能存在差异：营养细胞向生殖细胞转化多数发生于叶状体的梢部,并且是靠近边缘的部位先开始逐渐向中央部位发展。     

燃焰法CVD金刚石薄膜生长过程的实验研究

采用燃焰法在硅基片表面进行了金刚石薄膜沉积实验．介绍了用金刚石微粉研磨基片表面对金刚石成核及生长的影响．根据不同沉积时间基片表面的扫描电子显微照片，分析了金刚石薄膜的生长过程，得出了金刚石薄膜的生长过程是以岛状生长模式形成连续膜的结论．     

海洋放线菌发酵产物的乙酰胆碱酯酶抑制活性研究

利用海洋高氏一号培养基对36株海洋放线菌进行培养。发酵处理4 d天后发酵液用乙酸乙酯进行提取。用Ellman法检测发酵产物的乙酰胆碱酯酶抑制活性。21株海洋放线菌的发酵产物对乙酰胆碱酯酶具有显著的抑制活性,其中,放线菌LYG22对乙酰胆碱酯酶的抑制活性最好,对AChE的抑制率达到48.58%。