餐厨垃圾发酵产乳酸菌种的筛选、鉴定及应用

从餐厨垃圾有机肥样品中筛选能够发酵餐厨垃圾产乳酸的菌株。经过平板分离纯化、形态观察及生理生化鉴定，获得了6株形态各异的单菌株。通过比较各菌株对温度、盐度和酸碱度的耐受性，最终确定M4、M5和M6为潜力菌株。经过分子生物学鉴定，确定菌株M4、M5和M6分别为乳酸片球菌、干酪乳杆菌和植物乳杆菌。将这3株菌株等比例制成复合菌剂作为菌种与枯草芽孢杆菌混合接种用于餐厨垃圾乳酸发酵实验，发现该复合菌剂能明显提高乳酸产量(约63.6%),且缩短发酵时间(约1/3)。该复合菌剂可用于餐厨垃圾处理工业，具有良好的应用前景和经济价值。     

复合杂粕多菌种发酵工艺研究

以枯草芽孢杆菌、黑曲霉和酿酒酵母为出发菌株,通过对固态发酵工艺条件的优化,获得复合菌种固态发酵生产蛋白质饲料的最佳工艺参数。结果表明:以棉籽粕45%、菜籽粕15%、玉米酒精糟15%、麸皮21%和硫酸铵2%为发酵基质,枯草芽孢杆菌∶酿酒酵母∶黑曲霉为2∶1∶1、接种量12%、发酵基质初始含水率45%、发酵温度34℃和发酵时间60h为发酵条件,发酵后粗蛋白质达42.5%,比发酵前提高15.5%;游离棉酚从1 240mg/kg降至360mg/kg,脱毒率达71%;粗纤维含量下降。     

酶菌协同发酵产青钱柳多糖工艺优化

以青钱柳干燥后叶子为原料,青钱柳多糖的含量为评价指标,采用复合酶（纤维素酶与半纤维素酶质量比1∶1）对原料进行酶解处理,再经过混合菌种（粗糙脉孢菌（Neurospora crassa）和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）质量比1∶1）对酶解液进行发酵,并采用单因素试验及响应面试验对酶菌协同发酵产青钱柳多糖的工艺进行优化。结果表明,最优工艺条件为：料液比8∶100（mg∶mL）、纤维素酶与半纤维素酶质量比1.8∶1.0、复合酶添加量0.8%、酶解时间2.5 h、蔗糖添加量8.0%、粗糙脉孢菌和枯草芽孢杆菌质量比2∶1、混合菌添加量5.0%、发酵时间60 h。在此优化条件下,青钱柳多糖含量达到3.34 mg/mL。     

高温好氧堆肥过程中芽孢杆菌的筛选、鉴定及应用

为解决高温好氧堆肥过程中可用菌剂较少的问题,从完全腐熟的餐厨垃圾有机肥中筛选高效降解有机质的菌株。经过富集培养和分离纯化,实验获得了8株形态各异的单菌株。通过平板透明圈法测定各菌株的产酶能力,得出YB1、YB4-1和YB4-2对淀粉、纤维素、蛋白质及油脂具有更强的分解能力,结合各菌株对温度和盐度的耐受性,最终确定YB1、YB4-1和YB4-2为潜力菌株。经过分子生物学鉴定,确定3株菌株分别为枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。将3株菌株等比例制作成复合菌剂用于餐厨垃圾堆肥实验,发现该复合菌剂不仅能明显缩短堆肥周期(约40%),而且将餐厨垃圾降解率提高了31%。该复合菌剂可用于餐厨垃圾处理工业,具有良好的应用前景和经济价值。     

金银花废渣中绿原酸提取条件优化及抗氧化活性研究

为研究金银花废渣发酵后绿原酸提取率及其抗氧化活性,利用枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和黑曲霉（Aspergillus niger）(1∶1)复配对金银花废渣进行混合发酵,采用单因素结合响应面试验优化其提取条件,并研究发酵前后金银花提取液抗氧化活性变化。结果表明,最佳提取条件为发酵时间71 h,发酵温度32℃,葡萄糖添加量3%,接种量1.5%。在此优化条件下,金银花废渣发酵组绿原酸提取率较未发酵组较由1.12%增加到1.63%。与未发酵组相比,发酵组金银花提取液DPPH自由基清除率由82.96%增长到86.64%,ABTS自由基清除率由82.17%提高到86.34%,Fe3+还原力由1.03增加到1.09。表明枯草芽孢杆菌和黑曲霉混合发酵能有效提高金银花废渣的绿原酸提取率,并能增强金银花废渣抗氧化活性。     

响应面法优化固态发酵餐厨垃圾与醋糟生产蛋白饲料

以餐厨垃圾和醋糟为原料,利用平菇、酿酒酵母、产朊假丝酵母和枯草芽孢杆菌进行固态发酵生产蛋白饲料.采用Design-Expert软件设计了Plackett-Burman筛选试验,从6个因素中筛选出3个显著因素分别为接种量、原料比和尿素添加量,再通过爬坡试验和响应面Box-Behnken设计对所选显著因素进行优化,得到最适确定最佳工艺条件为餐厨垃圾和醋糟添加质量比为67：33,接种量为10.46％,尿素添加量为2.9％,发酵产物真蛋白含量为24.04％.     

液态发酵大豆肽分子量分布与酶分布关系研究

大豆肽在食品和保健品领域应用广泛,是一种颇有前途功能性食品,大豆粕含45.0%～55.0%大豆蛋白,经水解可得由3～6个氨基酸组成功能性大豆肽。发酵过程中,低分子量肽百分含量、肽转化率和酶分布与发酵条件有关,利用枯草芽孢杆菌1389、黑曲霉3.350和米曲霉A–9005发酵大豆粕,通过这些微生物所分泌各种蛋白酶对大豆粕蛋白质合适位点切割,及对某些肽基团和疏水性氨基酸末端进行修饰和重排,可达到降低成本、提高利用率和产率目的。该实验研究枯草芽孢杆菌1389分别和黑曲霉3.350、米曲霉A–9005混合发酵大豆粕制备大豆肽动态发酵过程中低分子量肽百分含量、肽转化率和酶分布之间相关性;结果表明,发酵温度30℃,接种量为10%,底物浓度3%,枯草芽孢杆菌1389与黑曲霉3.350菌种混合比3∶2,发酵36h时,低分子量肽百分含量65%以上,肽转化率70%左右,为最佳发酵条件。     

固态发酵玉米黄粉饲料复合菌种的筛选

运用平板点种法、点种刺激圈法和多菌种固体发酵法3种主要方法,筛选发酵玉米黄粉饲料的复合菌株。结果表明,枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）、凝结芽孢杆菌（Bacilluscoagulans）和地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）3种菌株以1∶1∶1的比例混合,按5% 的接种量接入发酵培养基,发酵效果较好,于30 ℃条件下发酵120 h,玉米黄粉饲料中可溶性蛋白含量由3.78%提高到14.26%。     

微生物发酵生产高蛋白多肽菜籽粕的研究

以菜籽粕为原料,以菜籽粕粗蛋白质含量和多肽含量为评价指标,通过植物乳酸菌、黑曲霉菌、枯草芽孢杆菌的单菌发酵和混菌发酵实验,进行最佳菌种组合和发酵条件的研究。结果表明:单菌发酵黑曲霉菌效果最好,菜籽粕粗蛋白质含量和多肽含量分别为38.4%和3.682%;混菌发酵最佳菌种组合为植物乳酸菌、黑曲霉菌、枯草芽孢杆菌,其接种量分别为4%、6%、6%,优化发酵条件为水料比1.7∶1、34℃下发酵48 h。在上述条件下菜籽粕粗蛋白质含量和多肽含量分别为42.5%和7.86%,硫甙含量降至21.637μmol/g、植酸含量为0.27%、单宁含量为0.41 mg/g,得到高蛋白、多肽、低毒的菜籽粕饲料。     

微生物混合发酵提高麸皮营养价值的研究

以普通麸皮为原料,选取黑曲霉、纳豆芽孢杆菌、酿酒酵母和粪链球菌进行混菌固态发酵,研究其对麸皮营养价值的提高.结果表明,最适装料量为1/1;最适料水比为1.0∶0.8;接种比例黑曲霉∶纳豆芽孢杆菌∶酿酒酵母∶粪链球菌=0.5∶2∶10∶4.存37℃发酵48h,发酵麸皮中有益菌总数达到109个/g干物料,粗蛋白含量(绝干)由16.1%提高为20.97%.粗纤维含量由10.5%降低为5.32%,产品有很浓郁的酸香味.     

固态发酵菜籽粕生产多肽及降解硫苷菌种的筛选

以两种细菌（Bacillus subtilis W1-3、Bacillus subtilis 10160）和三种真菌（毕赤酵母、酿酒酵母和黑曲霉）为出发菌种,菜籽粕为原料,硫代葡萄糖苷（硫苷）降解率和菜籽多肽得率为发酵菜籽粕品质的评价指标,进行单菌、混菌固态发酵实验。结果表明:最优的单菌发酵菌种为枯草芽孢杆菌W1-3;比较枯草芽孢杆菌W1-3的单菌及与其他菌种的双菌和三菌发酵方式,单菌发酵优于混菌发酵。由枯草芽孢杆菌W1-3发酵所得的菜籽粕,其中多肽、粗蛋白、氨基酸含量有益物质含量分别增加453.47%、10.39%、17.76%,硫苷和植酸两种抗营养物质含量分别降低62.14%和31.58%。      

微生物固态发酵菜籽粕营养特性的研究

以普通菜籽粕为原料,选用枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌、啤酒酵母、季也蒙毕赤酵母及黑曲霉等菌种,通过单菌株与混菌株发酵试验,研究发酵对菜籽粕中粗蛋白和抗营养因子含量的影响。结果表明,芽孢杆菌的蛋白酶活性高于其他菌株;混菌株发酵效果明显优于单菌株发酵;混菌株发酵中枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和啤酒酵母三菌种组合发酵能较好地提高菜籽粕作为饲料蛋白的品质,此时其粗蛋白质增加率和硫代葡萄糖苷(硫苷)、唑烷硫酮(OZT)、单宁、植酸降解率分别为5.37、93.44、99.99、34.86、18.15%(干基)。     

微生物固态发酵和酶解工艺处理棉粕的研究

研究了微生物和蛋白酶共同作用下棉粕中毒性因子和营养成分的变化。在枯草芽孢杆菌GJ00141、酿酒酵母GJ00079和中性蛋白酶等参与的固态发酵和酶解体系中,检测棉粕中游离棉酚、粗蛋白质、酸溶蛋白质、粗纤维、氨基酸组成、益生菌活菌数等指标。结果发现,相比原棉粕,60 h的固态发酵与酶解后,棉粕中游离棉酚含量降低40%以上,酸溶蛋白质提高了108.7%,粗纤维降低约12.7%,枯草芽孢杆菌和酿酒酵母活菌数分别为7.75、7.00 lg(CFU/g),粗蛋白质、氨基酸总量基本没有变化。由此可见,经过发酵和酶解后棉粕的营养价值和饲料品质有所提高。     

不同处理方式复合菌固体发酵野生构树叶制备蛋白饲料的工艺优化

为降低构树叶中单宁含量,采用蒸汽爆破、球磨等方式对构树叶进行预处理,以抗营养因子单宁含量为考察指标,通过响应面分析法确定枯草芽孢杆菌、乳酸菌和酿酒酵母菌的复合菌固态发酵构树叶制备蛋白饲料的最佳工艺。结果表明:最佳工艺条件为汽爆压强1.4 MPa,维压时间90 s;球磨时间20 min;发酵时间4 d,含水量60%,发酵温度32.50 ℃,酿酒酵母菌:乳酸菌:枯草芽孢杆菌=1:1:1。构树叶经发酵、汽爆后发酵和球磨发酵后发酵单宁含量分别降低了36.2%、39.5%和60.5%;粗蛋白含量分别增加了23.59%、10.28%和7.84%;粗灰分含量分别增加了16.7%、31.80%和24.23%;粗纤维含量分别降低了15.33%、12.32%和7.85%。构树叶的钙含量为2.70%,经发酵后钙含量无明显变化,经汽爆发酵后和球磨发酵后分别增加了23.33%和22.22%（P<0.05）,预处理和发酵对磷和粗脂肪的含量几乎无影响,磷含量约为0.3%,粗脂肪含量约为2.4%。原料发酵、汽爆发酵和球磨发酵的酶活力分别高达41.43、44.77和65.10 U。球磨发酵降单宁效果要远远优于汽爆发酵和原料发酵,原料发酵的蛋白增加效果最佳。     

油茶籽粕固态发酵生产菌体蛋白饲料的研究

以油茶籽粕为原料,选用热带假丝酵母∶枯草芽孢杆菌∶黑曲霉=2∶1∶1为供试菌种,对油茶籽粕进行固态发酵生产菌体蛋白饲料.优化的固态发酵工艺条件为:尿素添加量6％,培养基含水量60％,发酵温度37℃,发酵时间4d.油茶籽粕经发酵后,粗蛋白质质量分数由16.96％上升到35.82％,粗纤维质量分数由20.12％下降到10.96％,营养价值得到提高.     

夏橙皮渣产单细胞蛋白菌种筛选和发酵条件的优化

以夏橙加工果汁的下脚料皮渣为原料,筛选生产SCP(单细胞蛋白)的适宜菌种和发酵条件。试验中共选用了10种酵母和霉菌,以发酵产物蛋白质含量为指标,首先进行单菌和混合菌筛选,然后采用4因素3水平正交试验研究适宜的发酵条件。适宜的菌株配伍为:产朊假丝酵母1807-黑曲霉2281-里氏木霉56765。正交试验结果表明:含水量、发酵时间对发酵后粗或真蛋白质含量均有极显著(P<0.01)影响,适宜发酵条件为:时间3～4d,接种比例2:1:1或3:2:1,接种量10%左右,含水量65%;经过发酵,夏橙皮渣粗蛋白质含量为发酵前的3倍,由10%左右增加到30%以上,真蛋白含量增加45%左右。     

太空诱变复合菌剂发酵苹果渣生产菌体蛋白的研究

试验利用太空诱变获得的优良菌种一黑曲霉ZM-8和啤酒酵母、热带假丝酵母以及白地霉复配制成复合菌剂,固体发酵苹果渣,得到的菌体蛋白中纤维素含量降低,粗蛋白含量显著提高,营养价值增加.通过正交试验获得了最适的培养基配方和复合菌剂的最佳配方.试验确定的最适培养基配方为白糖4g,硫铵7g,尿素1g,食盐2g,产物中粗蛋白的含量达26.4%,提高了306.3%.复合菌剂的最佳配方为黑曲霉突变株ZM-8(Asp.niger ZM-8)1.5g,酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)0.5g,热带假丝酵母(Candida tropicalis)1.0g,白地霉菌(Gcotrichum candidum)0.5g,产物中粗蛋白的含量达27.9%,提高了337.5%.     

生物技术法处理对花生粕饲用品质影响的研究

花生粕存在黄曲霉毒素B_1(AFB_1)易超标、非淀粉多糖含量高和蛋白质品质不佳等缺陷,利用微生物(枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、乳酸片球菌)发酵结合复合酶制剂处理花生粕,可以综合改善其饲用品质。研究表明:处理后花生粕中AFB_1的去除率为94.6%,非淀粉多糖含量由30%降低至10.5%,蛋白质含量由47.8%提高至61.5%,大分子蛋白明显降解为小分子蛋白,小肽含量由5.36%提高至25.21%,必需氨基酸总量提高了19.67%,乳酸含量由0.7%提高至2.8%。经过生物技术法处理,花生粕的饲用品质得到了明显改善。     

利用鱼白豆粕混合发酵制备水溶性蛋白粉

实验研究了以鱼白和豆粕为原料,利用枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）N-2固态发酵制备水溶性蛋白粉的发酵工艺。通过单因素实验研究了发酵时间,接菌量,料水比,发酵温度和初始p H对鱼白-豆粕发酵制备的蛋白粉水溶性物质溶出率、水溶蛋白提取率、酸溶蛋白提取率、游离氨基酸含量和核酸含量的影响;在单因素实验的基础上,应用响应面法设计,进一步优化发酵工艺对蛋白粉中水溶蛋白提取率的影响。结果表明,最佳发酵工艺为发酵时间60h,料水比1∶1.4,发酵初始p H7.2,发酵温度36℃,接菌量8%。在此发酵工艺下,得到水溶性物质溶出率为80.25%,水溶蛋白提取率为91.86%,酸溶蛋白提取率为57.25%,游离氨基酸含量为25.9%,核酸含量为11.2%。最佳工艺条件下制备的蛋白粉中人体必需氨基酸在氨基酸总量中占的比例明显增多。