Rcs信号系统对克雷伯氏肺炎杆菌荚膜合成的影响

克雷伯氏肺炎杆菌是一种重要工业微生物,菌细胞表面具有荚膜结构,荚膜对于菌株的生理特性和工业应用具有重要的影响.Rcs磷酸化信号系统是一种对菌株荚膜合成具有调控作用的信号系统.利用Red同源重组技术,分别构建了基因rcsA,rcsB缺失的菌株,还构建了基因rcsA,rcsB单独过表达的菌株.这些菌株的生理特性的研究结果表...     

肺炎克雷伯氏菌生物合成1,3-丙二醇的副产物调控研究

以肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)ATCC 25955为原始菌株,利用代谢工程手段对K.pneumoniae生物合成1,3-丙二醇(1,3-PD)的副产物进行调控.通过敲除副产物合成途径关键酶编码基因,在分批补料发酵条件下,1,3-PD的产量达到83.8 g·L-1,生产强度提至2.79 g...     

肺炎克雷伯菌黏附因子相关研究进展

肺炎克雷伯菌为机会性致病菌,是导致医院获得性尿道感染、肺炎、败血症和伤口感染的重要致病菌。黏附于宿主细胞表面是致病菌感染的第一步,也是关键的一步。本文就肺炎克雷伯菌黏附因子相关研究进展及其前景作一综述。     

鸡源肺炎克雷伯菌菌毛的分型

目的对临床分离的5株鸡源肺炎克雷伯菌进行菌毛类型的鉴定。方法首先利用传统的D-甘露糖血凝特性(MSHA/MRHA)试验对临床分离的5株鸡源肺炎克雷伯菌进行菌毛分型,同时以该菌Ⅰ型和Ⅲ型菌毛的主要结构亚单位(fimA/mrkA)基因序列为靶序列,分别设计一对引物,利用PCR扩增的方法对该5株菌进行菌毛分型。结果MSHA/MRHA方法鉴定其中的4株菌具有Ⅲ型菌毛,另外1株无法鉴别,而PCR方法鉴定5株菌均具有Ⅲ型菌毛。结论该5株鸡源肺炎克雷伯菌均具有Ⅲ型菌毛。MSHA/MRHA具有方便、快速的特点,但不敏感;PCR则具有快速、敏感、准确的优点。研究结果对于肺炎克雷伯菌的流行病学调查及该菌的临床诊断具有指导意义。     

Red重组系统在克雷伯氏肺炎杆菌中的应用研究

通过改造pKD46与pCP20质粒为含四环素抗性标记的pKD46-Tc与pCP20-Tc重组质粒,初步建立了一套能在K.pneumoniae菌株中运用的Red重组系统.以荚膜基因中的高保守基因wzi为敲除对象,导入同源臂为250 bp的打靶片段△wzi::FK,转化后得到6个重组子,初步确定敲除了K.pneumonia...     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性分析

目的分析临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布情况及耐药性。方法收集吉林大学中日联谊医院临床标本中分离的221株大肠埃希菌和152株肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法检测抗菌素的敏感性;双纸片协同试验和纸片表型确证试验筛选并确证产超广谱β-内酰胺酶的菌株;按照美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)2005年版的标准判断结果。结果大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南的敏感性最高,均达100%;对头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦和头孢西丁的敏感性也较高,均大于70%,而对氨苄西林的耐药性均大于90%。共检出产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌118株,检出率为53.4%;肺炎克雷伯菌21株,检出率为13.8%;产超广谱β-内酰胺酶的两种菌株与非产超广谱β-内酰胺酶的同种菌株相比,对抗菌素的耐药性均明显增加。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌仍是产超广谱的β-内酰胺酶的主要菌株,且对常用抗菌素产生了较高的耐药性。     

克雷伯氏菌微氧发酵生产1,3-丙二醇的研究

对克雷伯氏菌在厌氧和通1.2L/min空气的条件下间歇连续发酵生产1,3-丙二醇进行了研究,在两种条件下1,3-丙二醇的转化率接近.在通空气的条件下细胞能够正常代谢,并获得较高菌体密度,但有氧发酵的生产强度高于厌氧发酵;甘油处于限制状态、稀释率为0.1h-1的连续发酵中,有氧发酵1,3-丙二醇的转化率和生产强度均高于厌氧发酵.     

产1，3-丙二醇菌株克雷伯氏肺炎杆菌的诱变与筛选研究

为提高克雷伯氏肺炎杆茵Klebsiella pneumoniae产1,3-丙二醇的能力,尝试使用紫外线和氯化锂对菌种进行复合诱变,利用产酸圈和产物耐受相结合的平板筛选方法,获得可耐受高质量浓度1,3-丙二醇且副产物中乙醇及乳酸含量较少的优良突变菌株2株.与出发茵株相比,2株高产突变菌株Klebsiella pneumoniaw Kc和Klebsiella pneumoniae Kd发酵最终1,3-丙二醇质量浓度分别提高了34.7%和35.2%,达到66.7 g/L和67.1 g/L;乙醇质量浓度分别降低了49.3%和47.1%,降低至8.1 g/L和8.4 g/L;乙酸质量浓度分别提高了61.5%和68.1%,达到14.7 g/L和15.3 g/L.结果表明,该诱变和筛选方法目标明确、易操作、效率高,在1,3-丙二醇工业规模的生物法生产中将具有良好的应用价值,而且对于其它具有工业应用价值的菌株筛选工作也具有一定的借鉴意义.     

固定化克雷伯氏菌降低发酵液中残留甘油浓度

研究了采用海藻酸钠固定化克雷伯氏菌降低发酵液中的残留甘油浓度.与游离细胞相比,固定化细胞有利于固液分离,且对甘油浓度的降低效果也略好.培养16 h的发酵液中残留甘油浓度降低了91%.考察了固定化条件对降低残留甘油浓度的影响,确定了固定化最佳条件为:菌体∶Na-alginate=1∶10(质量体积比),3% Na-alginate,4% CaCl2,固定化24 h;固定化处理后可以提高发酵液中的1,3-丙二醇浓度.室温培养固定化细胞的实验效果与37 ℃培养相差不大.动态培养固定化细胞38 h,残留甘油浓度降低了82.4%,固定化细胞可以重复使用.通过固定化细胞处理可以减小甘油对蒸馏1,3-丙二醇时产生的影响,从而提高1,3-丙二醇的纯度和收率.     

微生物发酵法1,3-丙二醇克雷伯氏菌的诱变育种

克雷伯氏菌是1,3-丙二醇(1,3-PD)生产菌。以产酸克雷伯氏菌2-1为出发菌株,经硫酸二乙酯(DES)诱变处理,运用质子自杀法选育,从含0.2 mol/L NaBr-NaBrO3的初筛平板上选出48株单菌落,然后结合培养基优化后的摇瓶发酵复筛,获得6个产酸突变株,其中Y-37具有较高的1,3-丙二醇转化率。经过初筛、复筛和传代实验,表明其是稳定的突变株。对菌株Y-37在自动发酵罐上进行批式发酵,结果显示:突变株产酸量大幅降低,而1,3-丙二醇的产量则显著增加。Y-37的1,3-丙二醇产量由出发菌株的10.67g/L升至18.23g/L。     

高产1,3-丙二醇菌株的诱变与筛选

为提高克雷伯氏肺炎杆菌产1,3-丙二醇(1,3-PD)的能力,利用紫外线对其进行诱变,建立了一种高效高通量的摇瓶传代连续富集培养筛选抗产物抑制菌株的方法,筛选出了4株抗1,3-PD抑制且高产1,3-PD的菌株,分别命名为KpⅠ、KpⅡ、KpⅢ和KpⅣ,其1,3-PD产量分别为74.80 g.L-1、77.98 g.L-1、76.04 g.L-1、73.50 g.L-1,比出发菌株提高了14.5%、19.4%、16.4%、12.5%。1,3-PD得率分别比出发菌株提高了8.1%、14.8%、11.5%、6.6%。     

膨润土钠化工艺条件研究

本文主要从转速、温度、时间等方面来讨论了钠化膨润土的最佳钠化剂、矿浆浓度、钠化剂浓度以及最佳工艺条件.得出最佳的钠化剂为Na2CO3、最佳浓度为4%以及矿浆浓度为加入300 mL溶剂并得到其最佳工艺条件是在搅拌速度为1.33 m/s、时间为30 min、水浴温度为70 ℃、烘干温度为60 ℃的情况下所得到的钠化膨润土CEC达到最大值,钠化效果最为明显.并通过各种分析手段表明插层物质仅是进入到了层的边缘,并未进入内层深处.     

12-氨基十二酸精制工艺条件的研究

采用1,1'-过氧化双环已胺(PXA)法制备尼龙-12,需要对含有其单体-12-氨基十二酸(12-ADA)的11-氰基十一酸加氢产物予以精制.以12-ADA的产品纯度与收率为目标函数,用有机溶剂重结晶法进行精制,考察了结晶工艺条件对精制效果的影响.实验结果表明,优化工艺条件为:结晶介质为异丙醇-水-浓氨水(质量比3:3:1)的混合溶液、初次结晶温度为15℃、重结晶温度为40℃、重结晶母液重复利用1次,在此条件下,精制的12-ADA晶体纯度和收率分别可达99.6%和92.3%.     

12-氨基十二酸精制工艺条件的研究

采用1,1'-过氧化双环已胺(PXA)法制备尼龙-12,需要对含有其单体-12-氨基十二酸(12-ADA)的11-氰基十一酸加氢产物予以精制.以12-ADA的产品纯度与收率为目标函数,用有机溶剂重结晶法进行精制,考察了结晶工艺条件对精制效果的影响.实验结果表明,优化工艺条件为:结晶介质为异丙醇-水-浓氨水(质量比3:3:1)的混合溶液、初次结晶温度为15℃、重结晶温度为40℃、重结晶母液重复利用1次,在此条件下,精制的12-ADA晶体纯度和收率分别可达99.6%和92.3%.     

壬基酚生产工艺条件研究

研究了以苯酚、壬烯为原料 ,酸性阳离子交换树脂为催化剂 ,进行烷基化反应生产壬基酚的工艺条件。最佳反应条件是 :反应温度在催化剂使用初期为 90～ 95℃ ,原料酚烯物质的量比为 (15～ 2 0 )∶1,反应循环比为 (8～ 10 )∶1,反应压力对反应基本没有影响。     

产1,3-丙二醇克雷伯氏菌诱变菌株的发酵动力学研究

克雷伯氏菌是1,3-丙二醇(1,3-PD)生产菌。根据产酸克雷伯氏菌的诱变菌株Y-37的发酵过程曲线,对克雷伯氏菌生产1,3-PD的发酵动力学特性进行研究,提出了发酵过程中菌体生长、1,3-PD生物合成、甘油消耗的动力学模型,并应用matlab数值应用软件对实验数据进行拟合。该模型基本上能够描述克雷伯氏菌的发酵过程,模型的计算值与实验测定值能够比较好地拟合。     

若干因素对发酵法生产1,3-丙二醇的调控作用

利用一株新筛选的克雷伯氏肺炎杆菌(Klebsiella pneumoniae ZJU 5205)对发酵法生产1,3-丙二醇进行了研究,考察了 pH、溶氧及添加辅助底物葡萄糖对发酵过程的调控作用。实验结果表明,相比于未调控 pH 发酵,恒定 pH 值发酵得到的菌体浓度明显增高,甘油消耗加快,1,3-丙二醇的最终浓度以及甘油到丙二醇的转化率(Y_(P/S))明显提高,分别达16.39g/L和0.51mol/mol;厌氧发酵时的菌体浓度和甘油消耗速率均高于微氧发酵,但1,3-丙二醇最终浓度和转化率低于微氧发酵;添加葡萄糖为辅助底物能够有效促进菌体生长,但1,3-丙二醇最终浓度和转化率却低于以甘油为单一底物时的发酵结果。     

苯羟化合成苯酚最佳反应条件的研究

在单因子实验基础上采用正交设计及极差分析方法,确定了以双氧水为氧化剂,以Ｆｅ３＋－７３２阳离子交换树脂为催化剂,苯直接羟化合成苯酚的最佳反应条件。     

利用肺炎克雷伯氏菌以葡萄糖和磷酸铵盐为底物生产2,3-丁二醇

1 INTRODUCTION Interest in microbial production of 2,3-butanediol has been increasing recently due to the extensive indus-trial application of this product. This colorless and odorless liquid with a high boiling point and a low freezing point is a potential valuable fuel additive. Its heating value is 27.198kJ·g-1, which is quite near the value of ethanol (29.055kJ·g-1). Besides, condensation of diol to methyl ethyl ketone (MEK) coupled with subsequent hydrogenation yields octane isom…