天麻糖蛋白的分离纯化及对急性血瘀大鼠血液流变的影响

目的：从天麻中分离纯化得到糖蛋白组分GGE2b,研究其对急性血瘀大鼠血液流变学指标的影响。方法：采用离子交换和快速蛋白液相层析色谱（FPLC）技术分离天麻水溶性提取物,得到组分GGE2b。采用皮下注射盐酸肾上腺素结合冷刺激的方法制造急性血瘀大鼠模型。60只雄性大鼠随机分成6组,每组10只：生理盐水组、模型组、GGE2b（30,60,120mg·kg^-1）药物组、阳性药对照组（复方丹参注射液）。观察GGE2b各剂量组对急性血瘀大鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、红细胞聚集指数和红细胞变形指数的影响。结果：离子交换结合FPLC技术分离纯化得到了一个天麻糖蛋白组分GGE2b。GGE2b60,120mg·kg^-1。能够显著降低急性血瘀模型大鼠高切、中切的全血粘度（P〈0．05或0．01）和血浆粘度（P〈0．01）,降低红细胞聚集指数（P〈0．05或0．01）,增大红细胞变形指数（P〈0．05）。结论：层析技术用于天麻糖复和物的分离纯化是可行的,且得到的糖蛋白组分GGE2b对急性血瘀大鼠异常的血液流变有良好的治疗效果。     

土鳖虫活性肽组分对急性血瘀模型大鼠血液流变学、血脂四项指标及血液因子含量的影响

用胃蛋白酶和胰蛋白酶复合酶系对土鳖虫药材进行仿生酶解,产物经除盐、超滤、纳滤、DA201-C型大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶G-25层析、反相高效液相色谱以及半制备液相色谱分离纯化,获得纤溶活力最强的土鳖虫活性肽组分。并研究其对急性血瘀模型大鼠的血液流变学指标、血脂四项指标和血清内一氧化氮(NO)、超氧化歧化酶(SOD)、组织性纤溶酶原激活物(t-PA)和纤维蛋白(FIB)含量等的影响。结果表明:土鳖虫活性肽组分F2能显著降低血液黏度、红细胞压积、血小板计数(P<0.05);与模型组相比,土鳖虫活性肽组分F2能显著降低大鼠血液内甘油三脂(TG)、胆固醇(T-CHO)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量(P<0.05);大鼠血液中NO、SOD、t-PA含量较模型组明显升高,血清内FIB含量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。土鳖虫经仿生酶解、分离纯化后制备的土鳖虫活性肽组分F2具有改善急性血瘀模型大鼠血液流变学指标,降低血脂四项指标和改变血液因子含量的作用。     

大豆多糖对乳清分离蛋白—乳状液稳定性与流变特性的影响

本文研究了大豆多糖（SSPS）与乳清分离蛋白（WPI）乳状液静电组装,形成乳状液聚集体,考察了不同浓度的SSPS对WPI-乳状液稳定性与流变特性的影响,以期提高体系的粘弹性,形成高流变特性的食品体系。将不同浓度的大豆多糖与2%乳清分离蛋白乳状液（油相为20%）静电组装,分析乳状液的粒径,Zeta-电位,稳定性指数,流变性质和微观结构。结合剪切流变与微流变技术,深入研究了SSPS对乳清分离蛋白（WPI）乳状液流体特性与结构的影响。结果表明:随着SSPS浓度的增加,WPI乳状液的粒径在添加0.25%SSPS时达到峰值（3350±0.35）nm,而后随着SSPS浓度的增加而降低;Zeta-电位绝对值呈递减的趋势,表明SSPS与WPI间产生静电吸附作用;SSPS静电吸附提高WPI乳状液的稳定性;剪切流变结果表明,SSPS浓度为0.5%时,其粘度最大,并在剪切速率为95.8 s-1处其粘度是WPI乳状液粘度的10倍以上;微流变结果表明,0.5%SSPS-WPI乳状液的MSD曲线出现平台区,表明其弹性指数（EI）与宏观粘度指数（MVI）均显著提高达到最大值。微观结构结果表明,0.5%SSPS-WPI乳状液形成均一的乳状液聚集体。本研究将有助于理解大豆多糖与蛋白质乳状液的相互作用,同时为低脂高流变特性的食品（如蛋黄酱、调味汁、巧克力和植脂奶油等）生产提供理论指导。      

银耳多糖与大豆分离蛋白的相互作用及流变性能

研究银耳多糖(Tremella fuciformis polysaccharide,TFP)与大豆分离蛋白(soybean protein isolate,SPI)的相互作用,利用浊度、纳米粒度仪、激光共聚焦扫描显微镜、流变仪、荧光光谱法和傅里叶变换红外光谱法等对TFP与SPI的复合凝聚过程进行表征。结果表明：pH值、SPI与TFP质量比和盐离子浓度对凝聚体的形成影响较大,当SPI∶TFP>1时,与复合物形成相关的关键pH值(pH_c和pH_φ1)向高pH值方向移动。当SPI∶TFP<1时,pH_φ1向低pH值方向移动。随着体系中TFP比例的增大,浊度的最大吸收峰逐渐降低(pH_opt逐渐减小)。当SPI∶TFP=1∶1时,两者在pH 3.0处的相互作用最强,此时体系总体的黏度最大(约为1.30 Pa·s),形成的聚集体最多且粒径最大。NaCl浓度较低(<20 mmol/L)时能促进SPI-TFP凝聚体形成,NaCl浓度较高(≥20 mmol/L)时由于屏蔽作用会抑制凝聚体的形成。当剪切频...     

Flavourzyme酶解大豆分离蛋白对酸奶发酵酸度及流变特性的影响研究

采用3个水解度(DH分别为3.12%、5.77%和8.83%)的大豆分离蛋白Flavourzyme酶解液取代不同量的牛奶(取代度分别为5%、7.5%和10%)用于酸奶发酵,探讨酸奶在发酵过程中的酸度变化和表观粘度变化,研究发酵酸奶在不同剪切速率下的切应力、流变指数和粘度系数。研究结果表明:当DH8.83%的大豆分离蛋白酶解产物替代7.5%～10%的牛奶时,其达到发酵终点所需时间最短。在牛奶中添加10%的DH3.12%大豆分离蛋白的水解产物能显著增加发酵酸奶的表观粘度。采用大豆分离蛋白酶解液替代部分牛奶生产酸奶能有效降低酸奶的柔性,其质构特性属于非牛顿流体。用DH3.12%大豆分离蛋白酶解液代替10%牛奶生产的酸奶在高剪切速率下其切应力远大于对照组。     

大豆分离蛋白对肌原纤维蛋白加热过程中结构及流变特性的影响

大豆分离蛋白（soybean protein isolate,SPI）作为优质的植物蛋白常被用于肉制品加工中,以提高产品产量和质地。研究添加SPI对肌原纤维蛋白（myofibrillar protein,MP）凝胶特性及MP加热过程中结构和流变特性的影响。结果表明：添加10%、20% SPI能提升混合凝胶的凝胶强度及保水性（P＜0.05）;加热过程中混合蛋白凝胶二级结构发生改变,但其变化规律尚不明确;添加SPI使混合凝胶储能模量及损耗模量下降;混合凝胶上清液十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱显示,肌球蛋白重链、肌动蛋白、SPI部分亚基均是参与凝胶形成的蛋白质。     

pH值处理对黑豆分离蛋白结构、流变特性及乳化性能的影响

以黑豆为原料,将碱溶酸沉得到的黑豆分离蛋白(black bean protein isolate,BBPI)用不同pH值条件(2.0～11.0)处理2 h,然后恢复到中性条件,测定处理后BBPI的表面疏水性、溶解度、二级结构、三级结构、乳化稳定性及流变学性质。结果表明:pH 5.0处理的蛋白质具有最低的溶解度和乳化稳定性,远离pH 5.0处理的样品溶解度、乳化稳定性均呈现上升趋势且碱性处理条件下溶解度、乳化稳定性更好;随酸碱度的增加,蛋白质三级结构展开程度加大,二级结构发生β-折叠向α-螺旋的转变,高溶解性的蛋白质表面疏水性低且表面疏水性与β-折叠含量正相关,与β-转角负相关。在剪切速率0.1～100 s^-1的范围内表观黏度随着剪切速率的增加逐渐下降,乳液呈剪切稀释,随着pH值的增加,表观黏度先减少后增大;动态流变学分析结果表明,不同pH值处理的BBPI乳液在角频率为0～70 rad/s时,弹性模量G’随角频率的增加而呈现上升趋势,pH 3.0时蛋白质具有更强的界面黏弹性,形成的乳液界面流变学性质更好,pH 11.0时蛋白质有利于更好的与油水界面结合,乳化性能最好...     

乳清蛋白对脱脂发酵乳的流变特性及贮存稳定性的影响

研究了乳清蛋白对脱脂发酵乳流变学特性及贮存稳定性的影响，在VAYC-370为发酵剂的情况下，分别以质量分数为10％，20％，30％和40％的乳清蛋白替代脱脂奶粉进行发酵，结果表明，乳清蛋白会降低发酵乳凝胶的硬度、提高发酵乳的内聚性，同时发现乳清蛋白可提高搅拌型发酵乳的贮存稳定性．表明发酵乳凝胶的内聚性与贮存稳定性呈正相关关系。     

黄原胶对大豆分离蛋白凝胶流变特性和微观结构的影响

以黄原胶(XG)和大豆分离蛋白(SPI)为试验原料,通过超声波预处理和葡萄糖酸内酯诱导的方式制备XG-SPI复合凝胶,采用流变测试和扫描电镜等方式研究不同浓度XG对SPI凝胶粘弹性能、自修复能力、热稳定性以及微观结构的影响.结果 表明,SPI凝胶是典型的粘弹材料,具有较强的频率依赖性.随着XG浓度(1％～5％)的增加,...     

大米镉结合蛋白的分离纯化及纯度鉴定

采用石墨炉原子吸收光谱法（graphite furnace atomic absorption spectrometry,GFAAS）测定不同品种、不同加工精度大米及大米4 种蛋白质中的镉含量。选用镉含量较高的大米为实验原料,采用Osborne分级法提取大米中的4 种蛋白质（清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白）,以及超滤、离子交换色谱从镉含量较高的大米蛋白中分离纯化出均一纯度的大米镉结合蛋白（rice Cd-binding protein,RCBP）,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）鉴定RCBP的纯度及测定分子质量。结果表明：籼米中镉含量高于糯米及粳米;随着加工精度的增加,同种大米中的镉含量依次降低。4 种大米蛋白中的镉含量分别为0.66、0.31、0.63、0.23 μg/g,清蛋白中镉含量最高。超滤分离大米清蛋白（rice albumin,RA）得到大米超滤清蛋白（rice ultrafiltration albumin,RUA）,离子交换色谱纯化RUA得到目标镉结合蛋白（组分c）,SDS-PAGE鉴定组分c为单一条带,分子质量为14 kD。     

2014~2018年不同年份间云南地区天麻中天麻素含量的比较分析

目的 通过调查云南地区天麻中天麻素的含量水平, 为天麻特色产业提供基础数据。 方法 2014~2018年在云南省天麻主产区采集天麻样品199份, 采用《中华人民共和国药典》一部(2015年版), 用高效液相色谱法测定天麻素的含量, 并按相关标准评价天麻中天麻素的含量水平。结果 云南省昭通市天麻中天麻素含量范围为0.02%~1.26%, 平均含量为0.45%; 天麻中天麻素含量达到中华人民共和国国家标准GB/T 19776-2008《地理标志产品 昭通天麻》的合格率为70.4%, 达到《中华人民共和国药典》一部(2015年版)的合格率为88.4%。结论 云南地区天麻中合格率较高, 天麻质量较优。     

昭通彝良小草坝新鲜天麻营养成分分析评价

目的利用电感耦合等离子体质谱仪(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)检测新鲜天麻的营养元素并进行对比分析研究,为新鲜天麻的开发利用提供数据。方法用电感耦合等离子体质谱仪对昭通彝良小草坝新鲜天麻中钙、铁、钾、镁、钠、硼、铝、铬、锰、钴、镍、铜、蛋白质等营养成分进行测试分析。结果无论新鲜春麻和冬麻,尽管各营养成分略有差异,均含有丰富的人体必需微量营养元素。结论通过对各营养成分的检测结果进行分析评价,为进一步开发利用天麻提供基础信息。     

天麻多糖PGEB-3-H对大鼠肠道内短链脂肪酸的影响

研究天麻多糖PGEB-3-H对大鼠肠道内短链脂肪酸(SCFA)的影响.以SD大鼠为实验模型,进行分组喂养,分别以高剂量(400mg/(kg·d))、中剂量(200mg/(kg·d))、低剂量(100mg/(kg·d))的天麻多糖PGEB-3-H灌胃,为期4周,定期收集大鼠粪便样.粪便处理后通过气相色谱法测定其中SCFA...     

鲜天麻内生菌分离鉴定及功能活性探究

目的:明确天麻内生菌及其代谢产物的活性。方法:采用组织匀浆法和划线法从秦巴地区鲜天麻中分离纯化内生菌,测定其抗菌、抗氧化及抗肿瘤活性,并对高活性菌株进行分子生物学鉴定。结果:从鲜天麻内部分离得到4株菌,其中内生菌B1、B2对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有良好的抗菌活性,内生菌B2对金黄色葡萄球菌抑菌圈直径达26.33 mm。4株菌均有一定的抗氧化活性,其中,内生菌B1对DPPH自由基的清除能力为69.13%。内生菌B2、B3、B4对HEK293T细胞有一定的抑制作用,其中内生菌B2的最高抑制率可达40.40%。分子生物学方法鉴定结果表明,内生菌B1、B2为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),内生菌B3为Lelliottia sp.,内生菌B4为水生拉恩菌(Rahnella aquatilis)。结论:分离纯化的鲜天麻内生菌具有抑菌和抗氧化活性。     

彝良小草坝天麻急性毒性和诱变毒性作用的研究

目的研究彝良小草坝天麻的急性毒性和诱变毒性作用。方法通过小鼠急性经口毒性实验、Ames实验、小鼠骨髓细胞微核实验、小鼠精子畸形实验,测定其急性毒性和遗传毒性作用。结果小鼠急性经口毒性实验LD_(50)10000 mg/kg·BW。Ames实验中,各剂量组回复突变菌落数均未见明显增加(P0.05),亦无剂量-反应关系。小鼠骨髓细胞微核实验中,各剂量组微核细胞率与阴性对照组比较差异无显著性(P0.05)。小鼠精子畸变实验中,各剂量组精子畸变率与阴性对照组比较差异无显著性(P0.05)。结论该彝良小草坝天麻对昆明种小鼠属实际无毒,在Ames实验中未呈现致突变作用,未见诱导小鼠骨髓细胞微核形成的能力,未见致小鼠精子畸变的能力。     

天麻中天麻素RH-HPLC测定及提取工艺研究

通过考察不同检测波长、流动相和溶剂对天麻素出峰效果的影响,改进了2005 年版《中国药典》收载的天麻药材中天麻素含量测定的RP-HPLC 方法,并探讨了提取溶剂、提取温度、料液比、提取时间对天麻素提取工艺的影响。结果表明：采用Diamonsil C18 柱(150mm × 4.6mm,5μm),乙腈- 水(3:97,V/V))溶液为流动相,流速1ml/min,柱温为室温,检测波长220nm,并用乙腈-0.05% 磷酸溶液(3:97,V/V))作为溶剂,天麻素在10～80μg/ml 浓度范围内呈现良好的线性关系,其回归方程和相关系数分别为：y ＝ 4.0264x+0.6311,R2 ＝ 0.9992,最低检测限为2ng。精密度RSD 为0.41%(n ＝ 6),重现性实验RSD 为0.86%(n ＝ 6),回收率为98.4%,RSD 为0.84%(n ＝ 6);天麻素最佳提取工艺条件为：提取溶剂50% 乙醇,提取温度70℃,料液比1:10 (g/ml),提取时间6h。     

微粉化对天麻（Gastrodia elata Bl.）粉理化性质和吸收的影响

研究了微粉化处理对天麻(Gastrodia elata Bl.)粉的理化性质及在大鼠体内吸收的影响。对天麻普通粉和超微粉进行粒径大小、分布、微观形貌、休止角、滑角、膨胀力、松密度、水溶性和主要成分等理化指标的测定,以及天麻活性成分天麻素的生物利用度研究。结果表明:微粉化处理使天麻粉平均粒径由121.50μm减小到34.09μm,粒径分布范围变窄,粉体更加均匀;天麻微粉膨胀力、松密度和水溶性较之细粉均有不同程度的提高,粉体的流动性降低;红外光谱显示天麻经超微粉碎后其主要成分未发生变化。普通粉和微粉的天麻素绝对生物利用度分别是34.18%和45.49%。研究结果表明微粉化处理对天麻粉物理特性的改善有助于营养成分溶出,显著提高天麻有效成分的吸收率,为指导天麻微粉的应用生产提供理论依据。     

Identification,characterisation and inhibition of Geotrichum pseudocandidum spoilage microbe in Gastrodia elata tuber

Gastrodia elata tuber is vulnerable to spoilage after harvested. A fungal strain Geotrichum pseudocandidum causing the spoilage was isolated from Gastrodia elata tuber and identified in this study. The log phase of the strain growth during incubation at 28 °C was from 24 to 48 h. The pH for highest spore production and largest colony formation were 5–6 and 7–9, respectively, while the temperature for them was 20–30 °C. Antifungal natamycin and tea polyphenols extract inhibited the stain at minimum inhibitory concentration of 0.25 and 0.5 mg mL⁻¹, respectively. A short-time heating treatment at temperature at 65 °C for 10 min also effectively prevented the strain growth. As tea extract is a GRAS (generally recognised as safe) food ingredient, the tea extract treatment could be a safe and non-thermal treatment to prevent the spoilage of Gastrodia elata tuber with less loss of heat-sensitive bioactives and other nutrients.     

天麻提取物对灰树花深层发酵胞外蛋白合成的影响

在灰树花深层发酵系统中加入天麻提取物,以灰树花生物量和胞外蛋白合成量为指标,对天麻提取物添加量进行优选;利用HPLC对天麻提取物成分进行分析,研究天麻提取物灭菌前后主要成分(天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛及巴利森甙)含量的变化,并研究其促进灰树花生物量和胞外蛋白合成的关键成分在灰树花发酵体系中的含量变化。结果发现,7%(体积分数)天麻提取物可以促进灰树花菌丝体生长和胞外蛋白的合成,生物量和胞外蛋白合成量在发酵第11天时达到最大值;在天麻提取物灭菌后,巴利森甙含量明显减少,天麻素含量明显增加;天麻提取物加入灰树花发酵体系14d后,天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛含量均降低,但巴利森甙含量增加了161.11%。