乳酸乳球菌富硒及其硒多糖抗氧化活性研究

对乳酸乳球菌富硒工艺进行优化以及对其最优条件下提取的硒多糖抗氧化活性研究,结果表明:接种量、培养时间、亚硒酸钠浓度是影响乳酸乳球菌富硒量的主要因素;当接种量8%,培养时间24h,亚硒酸钠浓度14μg/mL,温度37℃,pH6.6时,乳酸乳球菌的有机硒转化率为59.87%。当最优条件下提取的硒多糖浓度达2mg/mL时,硒多糖对羟自由基和超氧阴离子的清除率为78%和59%,较同等条件下多糖的清除率分别提高了19%和18%。     

植物乳杆菌ST-Ⅲ菌株降胆固醇影响因素的研究

研究发现植物乳杆菌ST-Ⅲ菌株降低胆固醇作用受胆盐和胆固醇影响.在培养基中添加不同的胆盐,能增加ST-Ⅲ菌株降胆固醇能力,依次为牛磺胆酸钠>牛胆盐>胆酸,当牛胆盐的添加浓度为3.0g/L时,降胆固醇率达到最高值38.57%;在培养基中添加不同来源和不同浓度的胆固醇,ST-Ⅲ菌株均具有降低作用,但降低能力有差异,依次为羊血清>鸡蛋黄>卵磷脂-胆固醇胶束溶液,且降低能力受胆固醇的浓度影响较大,当浓度低于0.5mg/mL时,降胆固醇率可维持在40%左右,高于0.5mg/mL时,降胆固醇效果则显著降低;降胆固醇量在胆固醇浓度为1.0mg/mL时达到最高值307μg/mL,这可能是高浓度胆固醇抑制ST-Ⅲ菌株的生长所致.     

去除胆固醇细菌的分离、鉴定及其性能的初步研究

从金华火腿、光明酸奶、光明奶酪、味全乳酸菌饮品及泡菜等样品中分离得到100余株乳酸菌菌株,利用高胆固醇MRS-CHOL培养基测定其体外胆固醇去除能力,从中筛选得到一株高效去除胆固醇的菌株JH-1,去除率达到48.68%。通过形态学特征、生理生化特征和16S rDNA序列同源性分析,鉴定菌株JH-1为短乳杆菌(Lactobacillus brevis)。研究了培养时间、接种量、培养温度、培养基初始pH以及基质中胆固醇胶束质量浓度对胆固醇去除率的影响,发现短乳杆菌JH-1分别在时间为48 h,接种量体积分数为3%,培养温度为37℃,初始pH值为6,胆固醇胶束质量浓度为1 mg/mL时,胆固醇去除率达到最大。     

一株乳酸乳球菌的降胆固醇特性及其作用机制

探讨了乳酸乳球菌乳亚种HUCM 201的降胆固醇特性及其体外去除胆固醇的机制。乳酸乳球菌乳亚种HUCM 201菌株可从培养基中去除33.1%的胆固醇,其中14.3%的胆固醇发生共沉淀并重新溶解在洗涤液中,18.1%的胆固醇被吸收到菌体细胞内。HUCM 201菌株对5种结合型胆酸盐分别表现出了不同的胆盐水解酶活性,其中对甘氨胆酸钠的水解能力最强,总酶活为0.279 U/mL,比酶活为0.076 U/mg。     

降胆固醇乳酸菌的筛选

实验从泡菜中筛选出了13株乳酸菌,并对其胆固醇降解能力进行研究.结果表明:培养时间为3 d、接种量为5%、胆固醇浓度为1 mg/mL时胆固醇降解量最大,其中编号为HLB01具有最高的胆固醇降解量,达到了97.01μg/mL;筛选出的乳酸菌菌株均有降解胆固醇的能力,而其中多数为乳球菌.     

酸菜来源植物乳杆菌S4-5的降胆固醇作用

对酸菜来源植物乳杆菌S4-5的体外降胆固醇作用进行研究。采用单因素试验研究胆盐添加量、胆固醇添加量、培养基初始pH值及培养时间对植物乳杆菌S4-5降胆固醇能力的影响,结果表明:在胆盐质量浓度为1.0mg/mL和胆固醇质量浓度为175.7mg/L时,植物乳杆菌S4-5有最高的胆固醇移除率,分别为67.7%和62.2%;植物乳杆菌S4-5在培养基不同初始pH值条件下对胆固醇的移除率均在71.3%～77.2%之间;培养时间对植物乳杆菌S4-5的降胆固醇作用有显著性影响(P<0.01),在培养2h(延滞期结束)、14h(指数期结束)、24h和48h后植物乳杆菌S4-5对胆固醇的移除率分别为4.8%、66.7%、75.3%和84.0%。     

乳酸乳球菌的单菌包埋技术及在胃肠道环境中的性能评价

由于益生菌对消化系统的强酸和高浓度胆汁盐环境较为敏感,并且在肠道中定殖能力较低,因此开发新颖有效的益生菌包埋体系用于解决上述问题很有必要。本研究使用羧甲基化β-葡聚糖(mGN),通过金属-酚醛网络结构(Fe-TA)的桥联作用,将其黏附在乳酸乳球菌(LL)表面,构建乳酸乳球菌的包埋体系LL@Fe-TA@mGN,并评价LL@Fe-TA@mGN对胃液与胆盐的抗性及其在体内的滞留能力。结果表明:当mGN的质量浓度为0.12 mg/mL时,LL@Fe-TA@mGN体系的粒径和zeta-电位都达到峰值,表明该质量浓度为mGN包埋单个乳酸乳球菌的最佳质量浓度。在MRS液体培养基中,LL@Fe-TA@mGN的生长曲线与LL的生长曲线没有显著性差异,说明mGN的毒性可以忽略不计。在扫描电镜与透射电镜分析中均可清晰地看到一层“膜”完整地包覆在乳酸乳球菌表面。经2 h模拟胃液与胆盐的孵育,mGN包埋后的LL抗胃液能力与抗胆盐能力相比于未包埋的LL分别提升14.63倍与1.94倍。体内荧光成像实验证实LL@Fe-TA@mGN具有更强的肠道滞留能力。综上,本研究开发的乳酸乳球菌单菌包埋技术能够显著提升乳酸乳球菌的胃肠道抗性与体内滞留能力。研究结果可为益生菌包埋系统的开发与利用提供新的思路和策略。     

镉胁迫下泡菜乳酸乳球菌的形态变化

通过扫描电镜和透射电镜分别观察不同质量浓度水平的Cd2+对泡菜乳酸乳球菌（Lactococcus lactis subsp.lactis）细胞的影响,扫描电镜结果显示：Cd2+质量浓度在0、10 mg/L时,泡菜乳酸乳球菌呈椭圆形、表面光滑、菌体生长繁殖旺盛,随着Cd2+质量浓度的增加菌体细胞表面产生白色颗粒状物质、菌体细胞存活数量大幅下降（OD600 nm值由1.336下降到0.515）。当添加200 mg/L Cd2+时,几乎没有见到明显的菌体、显示有少量棱形晶状物。透射电镜结果显示：当Cd2+质量浓度为0～50 mg/L时泡菜乳酸乳球菌结构完整、细胞内容物分布均、菌体生长较为正常,当菌体暴露于100、200 mg/L Cd2+时菌体细胞出现异常现象,如细胞破裂、内容物从薄膜穿孔中释放、质壁分离等。两类电镜结果均表明：在低质量浓度Cd2+（≤50 mg/L）胁迫下,对泡菜乳酸乳球菌的生长几乎不产生影响,添加Cd2+质量浓度上升到100、200 mg/L时泡菜乳酸乳球菌正常生长受到抑制。     

乳酸菌MR25的筛选、鉴定及降胆固醇益生特性

通过气相色谱法,从萝卜干中共分离到31株具有清除培养基中胆固醇能力的乳酸菌,其中乳酸菌MR25的胆固醇清除率最高(42.48％).通过形态观察、生理生化试验、糖发酵试验等,鉴定MR25为米酒乳杆菌.乳酸菌MR25具有酸耐受性、胆盐耐受性和一定的胆固醇降低能力.在pH 2.0、培养2h条件下菌株浓度仍能达到106 cfu/mL.加胆盐(0.3％～0.4％)对菌株生长量(OD值)的影响很小.热杀死和休眠的细胞能去除很少的胆固醇,分别是3.26 mg/mL和8.42 mg/mL,而生长的细胞去除的胆固醇达到44.06 mg/mL.胆固醇去除与菌体的生长有一定的相关性.乳酸菌MR25去除胆固醇的机理是菌体对胆固醇的吸附作用,以及菌体在生长过程中对胆固醇的吸收利用.     

植物乳杆菌NDC 75017的降胆固醇作用

植物乳杆菌NDC 75017分离自中国内蒙古传统发酵乳制品。本实验对其体外环境耐受性及其降胆固醇作用进行研究。采用活菌计数法检测植物乳杆菌NDC 75017在pH 2.0～3.0的酸性环境、胆盐质量浓度0.3g/100mL、NaCl质量浓度0～7g/100mL以及模拟人工消化液环境下的耐受情况;同时以邻苯二甲醛法测定其体外降胆固醇能力。结果表明:植物乳杆菌NDC 75017可耐受pH3.0及0.3g/100mL胆盐环境;在7g/100mL的高盐质量浓度条件活菌数仍可达108CFU/mL;可以通过胃进入肠道而保持活性,在肠道处理8h后存活率为58.73%。体外降胆固醇实验测得细菌发酵上清液、菌体洗涤液和细胞破碎液中的胆固醇脱除率分别为16.43%、26.35%和32.87%。植物乳杆菌NDC 75017环境耐受能力良好,具有体外降胆固醇作用,该菌株可以作为降胆固醇的潜在益生菌。     

一株降胆固醇乳酸菌的筛选及其降解条件的研究

从酸奶中筛选得到高效降解胆固醇的乳酸菌株La-3,并对其胆固醇降解能力进行研究。通过单因素和正交实验,得到胆固醇降解最佳条件为培养时间72 h、胆固醇浓度1.5 mg/mL、接种量4%,胆固醇降解率达到51.2%。     

牛乳铁蛋白抗菌活性及其影响因素的研究

乳铁蛋白具有广谱的抗菌性 ,它通过直接性的“铁剥夺”和间接性的“膜渗透”2种机制发挥抗菌作用。文中开展了牛乳铁蛋白抗菌活性的研究 ,研究表明 ,牛乳铁蛋白对大肠杆菌的最小抑菌浓度为 2mg/mL ,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为 1 6mg/mL。葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、牛血清白蛋白 (BSA)、尿素、硫酸铵在 0～ 1 0mg/mL ,乳糖、可溶性淀粉在 0～ 4mg/mL ,酪蛋白在 0～ 1 2mg/mL的质量浓度范围内 ,对牛乳铁蛋白的抗菌活性影响不大。当NaCl或KCl的浓度为2 5～ 1 0 0mmol/L ,MgCl2 或CaCl2 的浓度为 1 0～ 5 0mmol/L时 ,牛乳铁蛋白的抗菌活性就会大大降低。随着缓冲盐浓度和有机酸浓度 (2 5～ 1 0 0mmol/L)的增大 ,牛乳铁蛋白的抗菌活性呈下降趋势 ,且在微碱性pH环境下牛乳铁蛋白表现出较强的抗菌活力。     

降胆固醇乳酸菌的筛选及其在内蒙古发酵香肠中的应用

通过对乳酸菌降胆固醇生物学特性及对发酵肉制品中胆固醇降解作用进行研究,结果表明,从内蒙古传统肉肠中分离筛选得到的8 株乳酸菌中,菌株X3-2B有较强的胆固醇降解能力。且在MRS培养基中添加3 g/L胆盐、20 g/L胆固醇和 20 g/L葡萄糖时菌株X3-2B的胆固醇降解能力最大,在不同培养基中发酵不同时间菌株X3-2B对胆固醇的降解能力显著高于标准菌株。在以菌株X3-2B为发酵剂的发酵香肠中,其胆固醇含量显著低于对照组。故菌株X3-2B可作为一株降胆固醇性能较好的肉制品发酵剂。     

桑叶茯砖茶多糖的响应面提取工艺优化及其体外抗氧化降血脂作用

以桑叶茯砖茶为原料,研究水提取法对其中的多糖提取效果的影响以及桑叶茯砖茶多糖的抗氧化和降血脂作用。通过单因素实验考察了提取时间、提取温度、液料比以及提取次数等对多糖得率的影响,在此基础上,采用响应面分析法优化提取工艺,确定了桑叶茯砖茶多糖最佳提取工艺为:提取时间1.6 h,液料比16:1 mL/g,提取温度51 ℃,提取次数1次,在该最佳条件下,桑叶茯砖茶多糖得率为10.43%,与模型预测值基本吻合,表明该提取工艺稳定可行。体外抗氧化和降血脂实验发现,当桑叶茯砖茶多糖质量浓度为80 μg/mL时,对DPPH自由基的清除率达84.35%,当质量浓度达到130 μg/mL时,其对ABTS+·的清除率可达72.30%,当桑叶茯砖茶多糖浓度为1.75 mg/mL时,对·OH的清除率为74.08%,表明抗氧化效果较好。当桑叶茯砖茶多糖质量浓度为3.50 mg/mL时,其对牛磺胆酸盐和甘氨胆酸盐的结合率分别达到59.96%和41.97%,表明具有较好的降血脂作用。     

Gossypol disrupts embryo development in heifers

Our objectives were to determine the effects of dietary free gossypol (FG) intake on plasma and uterine gossypol concentrations and embryo development and viability before and after culture with gossypol. Fifty postpubertal Holstein heifers weighing (±SD) 406 ± 34.5 kg at 11.5 mo of age were blocked by age and body weight (BW) and randomly assigned to 1 of 3 isocaloric and isonitrogenous diets differing in their FG content: control (0 mg of FG/kg of BW), moderate (17.8 mg of FG/kg of BW), and high (36.8 mg of FG/kg of BW). Heifers were fed the diets for 70 d before superovulation and embryo collection. Superovulated heifers were flushed on d 5 after induction of ovulation, and early morulae were either stained, to determine the number and proportion of live and dead cells, or randomly assigned to an in vitro culture for 96 h in media containing either 0 or 10 μg/mL of gossypol acetic acid. Plasma and uterine gossypol concentrations increased with increasing gossypol intake. The number of low-quality embryos-ova was greater for the high than for the moderate and control diets. Embryos collected from the high diet had the least number of cells because of fewer live cells, and were smaller in diameter. Greater dietary gossypol reduced blastocyst development and extended the time to reach the blastocyst stage. Similarly, gossypol concentration at 10 μg/mL compromised in vitro development and increased the proportion of degenerated embryos at 96 h in culture. These findings provide in vivo and in vitro evidence that intake of 36.8 mg of FG/kg of BW per d and gossypol concentrations >7 μg/mL in plasma, in uterine flush, or in vitro compromise early embryo development, which might explain some of the negative effects of gossypol on the fertility of dairy cows.     

CONTINUOUS PROPIONIC ACID FERMENTATION OF HYDROLYZED COD (GADUS MORHUA) GURRY

Hydrolyzed cod gurry to which 4.0% glucose was added yielded a final pH of 4.5 after 96 h of incubation at 32C following inoculation with a 1.0% (v/v) inoculum (～10⁸ cells/mL) of a propionic acid producing bacterial culture. The use of a 90% (v/v) inoculum still resulted in a prolonged incubation time of 72 h to reach a pH of 4.5. A continuous propionic acid fermentation was successfully achieved for a period of 18 days with the addition of 2.5% to 4.0% glucose and a nutrient feed rate of 30 mL/h using a 500 mL fermentation vessel. A constant pH of 4.5 with an accompanying propionic acid concentration of 1.4% was maintained. Extrapolation of experimental data indicated that a glucose concentration of 2.2% is optimum.     

牛磺酸对HepG2细胞胆固醇水平的影响

目的：探讨牛磺酸对人肝癌细胞HepG2总胆固醇（total cholesterol,TC）、游离胆固醇（free cholesterol,FC）、胆固醇酯（cholesterol ester,EC）水平及对胆固醇代谢限速酶--胆固醇7α-羟化酶（cholesterol7α-hydroxylase,CYP7A1）蛋白表达的影响。方法：在培养液中添加终浓度为0.1、1、10、20 mmol/L的牛磺酸,分别在培养24、48 h后测定细胞内TC、FC及EC水平;在培养液中添加终浓度为20 mmol/L的牛磺酸,分别培养12、24、48、72 h后检测CYP7A1蛋白表达水平。结果：1、10、20 mmol/L的牛磺酸均可使HepG2细胞内TC、FC水平明显下降,且与牛磺酸浓度呈正比,但EC水平在牛磺酸浓度达1 mmol/L后即不随牛磺酸浓度的增加而进一步降低;培养48 h后HepG2细胞TC、FC水平的降低幅度大于24 h时;20 mmol/L牛磺酸使FC含量减少的作用强于对EC减少的作用;培养24 h后HepG2细胞中CYP7A1蛋白表达最强。结论：牛磺酸可增强CYP7A1蛋白表达,促进HepG2细胞内的胆固醇代谢,胆固醇降低程度与牛磺酸浓度及作用时间相关,作用48 h的效果明显优于24 h,且牛磺酸主要是降低了细胞内的FC水平。     

蚕豆蛋白酶解物分离纯化及降胆固醇活性

采用凝胶过滤色谱对经过大孔吸附树脂纯化的蚕豆蛋白酶解物进行分离纯化,以期得到高降胆固醇活性的酶解物组分。结果表明:单因素试验得到蚕豆蛋白酶解物凝胶过滤色谱最佳分离纯化工艺条件为Sep G-10、G-25葡聚糖凝胶为柱填充材料,10 mg/m L的酶解液上样量4 m L,洗脱剂为去离子水,洗脱流速1 m L/min。凝胶过滤色谱分离纯化后得到F1~F6 6个蚕豆蛋白酶解物组分;与10 mg/m L考来烯胺散阳性对照比较,F3、F6组分对3种胆酸盐(胆酸钠、甘氨胆钠酸、牛磺胆酸钠)抑制率均高于阳性对照,其中F6组分的相对抑制率最高,分别为(274.98±0.19)%、(140.22±0.20)%、(130.99±0.22)%。