中华真地鳖酶解短肽的抗氧化作用

目的：研究中华真地鳖酶解短肽的体内外抗氧化作用。方法：测定中华真地鳖酶解短肽体外对?OH、O2－?和DPPH自由基的清除作用;并将中华真地鳖酶解短肽灌胃,颈背部皮下注射D-半乳糖致衰老模型小鼠,以小鼠血浆和肝脏中丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(T-SOD)及清除?OH活性为指标,研究其体内抗氧化活性。结果：中华真地鳖酶解短肽对?OH、O2－?和DPPH自由基有较强的清除作用,其IC50分别为0.40、8.73、1.32mg/mL;并且与模型组相比,中华真地鳖酶解短肽能显著降低模型小鼠血浆和肝脏中MDA含量(P＜0.01),显著提高其CAT活力(P＜0.05)、GSH-Px活力(P＜0.01)及清除?OH(P＜0.05)能力,显著提高小鼠肝脏T-SOD活力(P＜0.05)。结论：中华真地鳖酶解短肽有较强的体内外抗氧化作用。     

中华圆田螺肉抗氧化肽的分离纯化及小鼠体内外活性研究

采用超滤、大孔树脂、凝胶过滤色谱和半制备液相色谱对中华圆田螺肉的酶解液进行分离纯化,以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、铁离子还原能力(FRAP)、氧自由基吸收能力(ORAC)为指标,制备抗氧化肽,并通过小鼠体内抗氧化酶活性及MDA生成量进行测定试验。结果表明:分子质量1kDa部位的抗氧化活性最强,分离出的混合物抗氧化肽纯度达到90%。体外抗氧化活性显示,该抗氧化肽的DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、ORAC均为最高,且ORAC与谷胱甘肽相比效果无显著差异(P0.05),通过小鼠体内抗氧化酶及MDA增加值的测定显示,除GSH-PX外,试验组与谷胱甘肽阳性对照组无显著差异(P0.05),说明试验所获得的抗氧化肽具有和谷胱甘肽相当的抗氧化活性,具有深层的开发利用价值。     

黄粉虫抗氧化活性肽的分离纯化研究

为制备具有抗氧化活性的黄粉虫生物活性肽,采用双酶水解黄粉虫蛋白粉,对酶解产物进行葡聚糖SephadexG-25 凝胶柱层析和阳阴离子交换柱层析分离纯化,并对其各组分分子量分布及其抗氧化性进行研究,对抗氧化活性最佳的肽段进行氨基酸组成分析。结果显示,纯化得到的抗氧化多肽对羟自由基和超氧阴离子自由基具有很强的清除作用,清除率可分别达到74.20% 和87.32%。     

大豆生物活性肽的分离及其抗氧化活性研究

为制各具有抗氧化活性的大豆生物活性肽,本实验采用酶解处理大豆蛋白粉,对酶解产物进行葡聚糖Sephadex G-25凝胶柱层析分离,并对其各组分分子量分布及其抗氧化性进行了研究,对抗氧化活性最佳的肽段进行氨基酸组成分析。结果显示,大豆蛋白酶解物经Sephadex G-25分离后得到了六个肽片段,其中平均链长为4,即含有2～6个氨基酸残基的大豆功能短肽SPP4,对羟自由基具有最佳的清除作用,清除率达到80．13%,氨基酸组成分析发现该组分中缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸含量较高。结果表明,含2～6个氨基酸残基的大豆生理活性短肽具有较好的抗氧化活性。     

克东腐乳中低聚肽的分离及其抗氧化活性研究

为研究克东腐乳中低聚肽的分离、纯化方法,评价其抗氧化活性,分别选取3 000 u及10 000 u超滤膜利用超滤、柱层析等方法从腐乳粗提液中分离、提取低聚肽,并结合硫代巴比妥酸法和DPPH法测定腐乳中低聚肽的抗氧化活性。结果表明:超滤后获得分子质量范围在3 000 u以下的粗提物较分子质量范围在3 000 u~10 000 u粗提物具有较强的抗氧化能力。经Sephadex G-25纯化后获得5个吸收峰,测定其抗氧活性,清除自由基能力最大可达38.68%,脂质体系抗氧化能力最大可达0.397 mg/kg。     

中华绿螂抗氧化肽的提取及其抗氧化性

利用响应面法和超滤法对中华绿螂中抗氧化肽的木瓜蛋白酶水解提取工艺条件进行优化。在单因素试验基础上,利用响应面法分析建立二次回归模型。以酶与底物浓度比值([E]/[S])、酶解温度、酶解p H和酶解时间为自变量,DPPH自由基清除率为响应值,研究各因素及其交互作用对自由基清除率的影响。根据响应曲面图及其等高线图,确认木瓜蛋白酶水解中华绿螂制备抗氧化肽的最优工艺条件:底物浓度6%、pH 4.11、酶解温度40℃、酶解时间3.09 h。在此条件下,中华绿螂抗氧化肽对DPPH自由基清除率为97.64%。所得回归模型高度显著(p<0.0001),与理论预测值基本吻合。根据超滤试验可知,超滤膜截留分子质量3000~1000 Da时抗氧化性最佳,超滤所得可溶性蛋白酶解物的抗氧化性为94.96%。     

藜麦糠抗氧化肽的超滤分离及其体外抗氧化活性

为了大批量生产抗氧化活性最好的藜麦糠抗氧化肽,采用风味酶与碱性蛋白酶组合对藜麦糠蛋白进行酶解,制备酶解液。利用超滤技术分离纯化藜麦糠抗氧化肽,并评价分离得到的不同分子质量段抗氧化肽的体外抗氧化活性,优选出抗氧化活性最好的抗氧化肽。以膜通量为指标,压力、时间和滤液质量分数为3个工艺参数,通过单因素和正交实验,探究超滤分离截留分子量为10 ku的藜麦糠抗氧化肽的最佳工艺条件。结果表明,不同分子量段的超滤组分具有不同的抗氧化活性,其中分子量为5~10 ku的抗氧化肽较其他分子量范围的超滤组分的抗氧化活性最好。藜麦糠抗氧化肽的最佳超滤条件为压力0.16 MPa,时间20 min,滤液质量分数2%,在此条件下得到膜通量为(41.22±0.50) L/m²·h。由此可实现5~10 ku的抗氧化肽的大量生产。     

鲜马奶乳清蛋白抗氧化肽分离纯化及其活性研究

分离纯化鲜马奶抗氧化活性肽并检测其抗氧化活性。以胰蛋白酶为酶源酶解鲜马奶乳清蛋白,采用3KDa、10KDa、30KDa不同分子量范围超滤膜对水解液进行分离,分子量在3~10KDa段的酶解液还原能力、DPPH清除能力、羟自由基清除能力,超氧阴离子清除能力均较高,分别为0.8949、63.19%、77.13%、70.08%。用SephadexG-50葡聚糖凝胶色谱纯化鲜马奶抗氧化活性肽并检测其抗氧化活性,得到A、B两个组分,B组分的还原能力、DPPH清除能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子清除能力均高于A,分别为0.9814、55.28%、74.25%、56.67%。说明鲜马奶乳清蛋白酶解液具有一定的抗氧化活性,为鲜马奶抗氧化肽进一步纯化、结构鉴定及其生物活性研究提供基础。     

绿豆抗氧化活性肽的分离纯化及其组成分析

采用超滤法和Sephadex G-25凝胶色谱法对绿豆蛋白的酶解产物进行了分离纯化,得到了分子量为3426和1272u的两种绿豆抗氧化活性肽T1和T2,T1的纯度为85.92%,T2的纯度为94.99%,T1和T2均含有16种相同的氨基酸,表现出较强的体外抗氧化能力,T1对羟自由基和DPPH自由基的清除率分别为69.14%和58.62%;T2对羟自由基和DPPH自由基的清除率分别为91.70%和74.68%。      

苏土元及其变种对高血脂小鼠脂肪代谢的比较研究

本实验主要研究了苏土元及其变种--圆柱型土元对高脂血小鼠脂肪代谢的影响.方法:Bal b/C雄性小鼠分别喂食标准饲料、1%胆同醇饲料和含10%土元粉末的1%胆同醇饲料,自由喂食三周后,测定小鼠空腹血脂和肝脏脂肪浓度.结果:圆柱型土元可显著降低高血脂小鼠血液总胆同醇(10%,P<0.05)、甘油三酯浓度(22%,P<0.001)、低密度脂蛋白浓度(16.3%,P<0.05),提高高密度脂蛋白水平(16%,P<0.05)、降低动脉硬化指数(p<0.001).苏土元小影响血清总胆固醇和低密度脂蛋白浓度,但可显著降低血清甘油三酯浓度(57%,P<0.001),提高高密度脂蛋白水平(46%,P<0.001),降低动脉硬化指数(p<0.001).另外,圆柱型土元可明显降低小鼠肝脏总胆固醇浓度(53%,P<0.001),而对甘油三酯浓度无影响,苏土元对小鼠肝脏脂肪浓度均无显著影响.由此可见,苏土元和圆柱型土元的降血脂效果存在明显差异,圆柱型土元降胆固醇效果优于苏土元,而苏土元的降甘油三酯效果则优于圆柱型土元.     

地鳖虫提取物抑制乙酰胆碱酯酶活性的研究

采用乙酰胆碱酯酶抑制剂活性筛选模型对地鳖虫不同提取物进行活性筛选。结果表明,地鳖虫浸提最佳溶剂为乙醇,其对AchE的抑制率为27.7%;地鳖虫醇提物萃取最佳溶剂为乙酸乙酯,其对AchE的抑制率为59.78%;地鳖虫萃取物硅胶柱层析最佳流动相为氯仿:甲醇=91:9,其对AchE的抑制率为59.51%。     

地鳖虫抗氧化物提取工艺的研究

动脉粥样硬化(Atherosderosis,AS)发生的主要学说之一是血浆中低密度脂蛋白发生氧化,抑制血浆中低密度脂蛋白的氧化可预防动脉粥样硬化的发生。以地鳖虫为原料,以抗血浆氧化活性为指标,提取抗血浆氧化活性物质,并对其工艺进行优化。研究了不同的提取溶剂、溶剂浓度、提取时间、提取温度、料液比等因素对地鳖虫提取物抗血浆氧化活性的影响,利用正交实验对提取工艺进行优化。结果表明,乙醇提取物的抗氧化效果最好,并且在其浓度为75%,提取时间24h,提取温度45℃,料液比1∶10的条件下,抗血浆氧化活性达74.5%。     

地鳖虫中抑制AchE活性物质的提取工艺优化

在浸提时间、浸提温度、料液比等单因素实验基础上,运用响应面法优化了地鳖虫中抑制AchE活性物质的提取条件,最终得出其最佳提取工艺为:浸提时间5.1h、浸提温度61.1℃、浸提料液比1∶20.3,在此条件下获得的粗提物对AchE酶活力的抑制率最高可达27.7%。     

玉米抗氧化肽的分离制备及其体外抗氧化活性的研究

本实验以2709碱性蛋白酶水解玉米蛋白粉制备玉米抗氧化肽，SephadexG-25、DEAE52纤维素纯化玉米抗氧化肽，并用几种不同的实验体系研究其体外抗氧化活性。结果表明，玉米抗氧化肽制备的最佳酶解条件为：pH=9．5，[E]／[S]=10％，时间4h，温度55℃。该条件下制备的玉米抗氧化肽对超氧阴离子自由基和羟基自由基有强烈的清除作用，并能显著地抑制细胞和组织脂质过氧化反应的发生（P〈0．01）。氨基酸组成分析表明其富含丙氨酸和亮氨酸，摩尔分数分别为17．39％和13．04％，并且含有5种人体必需的氨基酸，占玉米抗氧化肽氨基酸总含量的39．13％，因此在具有较高生物学活性的同时也具有较高的营养价值。     

发酵芝麻粕中芝麻小肽的分离纯化及其体外抗氧化活性

研究芝麻粕固态发酵过程中产生的小肽的抗氧化活性。从发酵芝麻粕中提取活性小肽,通过SephadexG-15分离纯化,得到3个分子质量不同的小肽,经测定分别是三肽、四肽、六肽。分别测定其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的活性、用水杨酸法测定其清除羟自由基(·OH)的活性、用铁离子还原法测定其的总还原力。1mg/mL小肽粗提液、三肽和四肽的DPPH自由基清除率为90%,六肽为80%;0.6mg/mL三肽和四肽的·OH清除率均达到100%,而小肽粗提液和六肽为90%;4mg/mL的小肽粗提液、四肽、六肽和2mg/mL三肽的总还原力相当于0.5mg/mL谷胱甘肽。结果表明:固态发酵芝麻粕中的小肽具有较强的还原力,对DPPH自由基和·OH均具有较强的清除作用,且抗氧化性随着小肽分子质量的降低而增强。     

地鳖虫酶解液体外抗氧化作用的研究

通过正交试验得出Arazyme蛋白酶酶解地鳖虫的最佳工艺条件为加酶量300 U,酶解时间5 h,料水比1:20.并分析了其酶解液对羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)、二苯代苦味酰基自由基(DPPH)的清除作用以及对亚油酸自氧化反应的抑制作用.结果表明:地鳖虫酶解液对·OH、O2-·、DPPH三种自由基的最高清除率分别为75.15%(浓度为50 g/L)、31.72%(浓度为2.5 g/L)、74.88%(浓度为80 mg/L);在肽含量为2.0 mg时,对亚油酸自氧化反应的抑制率为95%.     

不同处理条件对花生抗氧化肽抗氧化活性的影响

以花生蛋白粉为原料,采用Viscozyme L预水解,Alcalase水解法制备花生抗氧化肽。通过7种不同的处理条件(加热、食品添加剂、防腐剂、金属离子、杀菌、调pH值、低温)对花生抗氧化肽的4种体外抗氧化指标(清除DPPH自由基、还原力、铁离子螯合力、抗脂质体过氧化能力)进行研究。结果显示：加热处理和添加食品防腐剂有利于提高抗氧化肽的抗氧化活性;添加酒石酸、柠檬酸对抗氧化活性有较大影响,而添加氯化钠和蔗糖后对抗氧化活性影响小;添加铜离子对抗氧化活性影响较大;各种杀菌工艺有利于清除DPPH自由基、还原力、铁离子螯合力,但却降低脂质过氧化抑制率;碱性pH值条件有利于提高抗氧化肽的还原力、铁离子螯合力和脂质过氧化抑制力,酸性pH值条件不利于铁离子螯合力和脂质过氧化抑制力;低温处理降低抗氧化肽抗氧化活性。     

体外化学模拟体系中米糠肽抗氧化活性的研究

通过测定米糠肽对DPPH自由基、亚硝酸盐、过氧化氢的清除能力。对Fe~(2+)的螯合能力以及对亚油酸自氧化的抑制作用等进行实验,研究了它的体外抗氧化活性。实验结果表明,米糠肽对DPPH自由基、亚硝酸盐和过氧化氢具有不同效果的清除活性,对Fe~(2+)有较强的螯合能力,对亚油酸的自氧化具有一定的抑制作用。