复合酶法制备大鲵多肽的研究

为了制备具有生物活性的大鲵多肽,本研究以大鲵肌肉为原料,采用单因素实验与响应面分析法,以水解度和多肽得率为指标,对不同蛋白酶及其不同组合、酶添加量、酶解时间、温度、料液比和初始p H对大鲵肌肉酶解的影响进行了研究。结果表明,风味蛋白酶和中性蛋白酶为最佳酶解组合;最佳酶解工艺条件为:风味蛋白酶和中性蛋白酶添加量均为6000 u/g,酶解温度55℃,酶解时间3 h,料液比(w/w)1∶8,初始p H=6.86。优化条件下多肽得率为90.28%。      

核桃雄花多肽酶解法制备工艺

为优化核桃雄花多肽酶解法制备工艺,该试验以响应面法对核桃雄花多肽制备工艺进行研究。对中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和风味蛋白酶进行酶种类筛选及复配,以多肽得率为指标,通过单因素试验及响应面法研究复合酶添加总量、酶解时间、酶解温度、液料比对核桃雄花多肽得率的影响。结果表明,影响核桃雄花蛋白的多肽得率的因素顺序依次为酶解温度>酶解时间>复合酶添加总量>液料比。核桃雄花的最优酶解工艺为液料比8∶1(mL/g)、复合酶添加总量51 500 U/g（木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶质量比为25∶6∶20）、酶解温度45℃、酶解时间3.0 h,实际多肽得率达到30.00%。     

鲮鱼加工下脚料的酶解工艺优化

以鲮鱼糜等加工的下脚料鱼头、鱼骨、鱼尾等为原料,选用中性蛋白酶对其进行水解,通过响应面分析优化酶解条件。以水解度、多肽含量为指标,分别对酶浓度、温度、pH值、料液比、酶解时间等因素对水解效果的影响进行分析。结果表明:中性蛋白酶水解鲮鱼加工下脚料的最佳条件为:酶浓度5.1 mg/g,料液比1∶5(g/m L)、自然pH、温度55.16℃、酶解5.22 h,在此条件下得到的水解度为13.01%,多肽含量为1.07 mg/m L。     

酶法水解卵黄蛋白制备多肽的工艺优化

利用酶法制备卵黄蛋白多肽。比较复合风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶水解卵黄蛋白的效果,确定碱性蛋白酶与复合风味蛋白酶为复合酶解的工艺用酶。采用响应面分析法,以水解度、多肽含量为响应值,研究加酶量、酶用量比、复合酶解时间比、pH值对制备多肽工艺的影响。结果表明：酶法水解卵黄蛋白制备多肽的最佳工艺条件为：卵黄蛋白质量浓度10g/100mL、温度55℃、pH7.2,按0.8g/100mL添加碱性蛋白酶水解2h后,再按0.4g/100mL添加复合风味蛋白酶水解2h,在该条件下水解度和多肽含量分别为(13.31±0.5)%和(1.85±0.5)mg/mL。     

加拿大红参(Parastichopus californicus)基本成分分析及其酶解工艺研究

本文以加拿大红参(Parastichopus californicus)为原料,研究其最优酶解工艺。基本成分测定结果表明加拿大红参的蛋白质含量73.33%,脂肪0.97%,灰分23.85%,粘多糖1.68%。研究以多肽得率为指标确定了加拿大红参的最优酶解工艺,并估算了其酶解液多肽分子量分布。实验使用枯草杆菌中性蛋白酶与风味蛋白酶组成的复合酶对海参进行酶解,最优酶解工艺:酶解温度为55℃、p H为7.5、料液比1∶5(g/m L)、酶解时间为3 h、酶加量为1.05%,最优条件下,酶解液中多肽得率为13.99%,通过Sephadex G-50对加拿大红参酶解液多肽分子量分布范围进行估算,得出分子量分布为1133~129457 u。     

中性和碱性蛋白酶协同酶解大豆分离蛋白研究

采用中性和碱性蛋白酶协同酶解大豆分离蛋白制备大豆多肽,采用茚三酮分析法测定酶解液中氨基氮含量以判断其酶解效率。影响大豆分离蛋白酶解主要因素有中性与碱性蛋白酶用量比、酶解pH值、酶解温度、酶解时间,通过单因素和优化酶解条件正交试验分析,筛选出酶解最适实验条件:中性蛋白酶与碱性蛋白酶用量比为1∶3、温度55℃、pH 8.5、酶解时间6 h;在此条件下酶解,氨基氮含量为15.86 mg/g。     

沙棘叶多肽制备工艺研究

研究利用沙棘叶直接制备沙棘叶多肽的工艺,获得最佳工艺参数。以中性甲醛滴定法测定的水解度为指标,通过酶的筛选以及酶解条件的单因素和正交实验优化得到最适酶解工艺参数。以碱性蛋白酶为酶解剂,酶解条件为酶添加量14000U/g、pH 10.0、料液比(m/V)1∶50、温度45℃,在此条件下酶解效果最好,水解度可达19.88%,多肽得率为7.90%。利用沙棘叶直接酶解制备多肽可行,为沙棘叶多肽制备提供了有效途径。     

沙棘叶多肽制备工艺研究

研究利用沙棘叶直接制备沙棘叶多肽的工艺,获得最佳工艺参数。以中性甲醛滴定法测定的水解度为指标,通过酶的筛选以及酶解条件的单因素和正交实验优化得到最适酶解工艺参数。以碱性蛋白酶为酶解剂,酶解条件为酶添加量14000U/g、pH 10.0、料液比(m/V)1∶50、温度45℃,在此条件下酶解效果最好,水解度可达19.88%,多肽得率为7.90%。利用沙棘叶直接酶解制备多肽可行,为沙棘叶多肽制备提供了有效途径。     

加拿大红参(Parastichopus californicus)基本成分分析及其酶解工艺研究

本文以加拿大红参（Parastichopus californicus）为原料,研究其最优酶解工艺。基本成分测定结果表明加拿大红参的蛋白质含量73.33%,脂肪0.97%,灰分23.85%,粘多糖1.68%。研究以多肽得率为指标确定了加拿大红参的最优酶解工艺,并估算了其酶解液多肽分子量分布。实验使用枯草杆菌中性蛋白酶与风味蛋白酶组成的复合酶对海参进行酶解,最优酶解工艺:酶解温度为55℃、p H为7.5、料液比1∶5（g/m L）、酶解时间为3 h、酶加量为1.05%,最优条件下,酶解液中多肽得率为13.99%,通过Sephadex G-50对加拿大红参酶解液多肽分子量分布范围进行估算,得出分子量分布为1133¹29457 u。      

双酶复配同步提取鸭骨素工艺条件

实验以可溶性固形物含量为测定指标,在鸭骨素提取过程中,研究了碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶复配后同步酶解鸭骨的工艺,优化了复合酶的最佳配比和酶解工艺参数。通过采取双酶(碱性蛋白酶-中性蛋白酶)同步提取的方法,和通过正交试验,优化了双酶添加比例、加酶量、酶解温度、酶解时间和液料比对鸭骨素得率的影响。结果表明,当双酶比例(碱性蛋白酶∶中性蛋白酶)为4∶1,加酶量为2%,酶解温度为60℃,酶解时间为4h,液料比为60g/100g时,在此最佳工艺条件下制得的酶解液中总可溶性固形物含量为32.2%,提取效果最佳。     

水酶法提取北太平洋鱿鱼肝脏油脂及其脂肪酸组成分析

研究了水酶法提取北太平洋鱿鱼肝脏油脂的工艺,考察了蛋白酶种类、料液比、反应温度、提取时间和加酶量对油脂提取率的影响,并采用气相色谱-质谱法（GC-MS）对所提油脂的脂肪酸组成进行分析。通过单因素和正交优化实验得到水酶法提取北太平洋鱿鱼肝脏油脂的最佳条件:中性蛋白酶为水解酶、料液比1∶0（g/m L）、反应温度55℃、提取时间6 h、加酶量1800 U/g;在该优化条件下,油脂提取率为79.21%。北太平洋鱿鱼肝脏油脂脂肪酸主要为C16∶0（16.27%）、C18∶1n-9（11.68%）、C20∶1n-11（12.94%）、EPA（9.81%）和DHA（23.61%）,其中n-3型多不饱和脂肪酸高达35.97%,且∑n-3 PUFA/∑n-6 PUFA为7.99,表明北太平洋鱿鱼肝脏油脂具有很高的营养价值和保健功能,可作为EPA和DHA等功能性脂肪酸的重要食药来源。      

双酶水解四角蛤蜊工艺优化研究

以四角蛤蜊为原料,使用内切-外切两步酶解工艺制备复合氨基酸。选用多种蛋白酶对四角蛤蜊肉进行降解,以酶解液中氨基酸态氮含量和总氮回收率为考察指标,进而确定内-外两步水解的的蛋白酶种类,并在单因素实验的基础上,采用正交实验优化酶解工艺条件。研究结果表明内-外两步酶解制备四角蛤蜊复合氨基酸的最佳工艺为:四角蛤蜊肉加3倍量水匀浆,匀浆液中加中性蛋白酶1500U/g肉,在酶解温度45℃、初始pH7.5下水解6h,灭酶活后改变条件,调pH7.0、温度为45℃,再加入复合蛋白酶4200U/g肉,在此条件下酶解11h。通过实验验证,中性蛋白酶和复合蛋白酶内-外两步酶解具有较好的水解效果,其氨基氮含量为20.78mg/g,总氮回收率为88.19%。      

酶法水解麦胚蛋白及其产物的抗氧化活性研究

选择碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶5种蛋白酶对麦胚蛋白进行水解,并考察其水解产物的抗氧化活性。结果表明,中性蛋白酶为制备麦胚抗氧化肽的最适蛋白酶,其最佳水解条件为:底物质量分数4%,酶添加量6 000U/g,酶解温度50℃,pH值7.5,水解至270min时抗氧化活性最大。     

基于Plackett-Burman设计和响应面法优化羊肝抗氧化肽的制备工艺

以羊肝为原料,分别测定5种蛋白酶酶切羊肝所得的酶解液的羟基自由基清除率和肽得率。结果表明,风味蛋白酶羟自由基清除率（84.50%）和肽得率（22.49%）最好。在单因素试验基础上,以羟基自由基清除率为评价指标,采用响应面法优化最佳酶解条件。结果表明,羊肝抗氧化肽制备的最佳酶解条件为料液比1∶3（g∶mL）、加酶量2 400 U/g、酶解温度50 ℃、pH7.50、酶解时间2.8 h。在此优化条件下,测得实际羟自由基清除率为93.70%,与模型理论值相接近。羊肝酶解产物中总氨基酸含量为57.23 g/100 g,其中疏水性氨基酸和必需氨基酸占总氨基酸含量分别为46.47%和41.63%,表明以风味蛋白酶酶解羊肝产物具有较高的抗氧化活性和营养价值。     

玉米ACE抑制肽水解酶的筛选及酶解条件的优化

酶解玉米蛋白粉(蛋白含量为70%)制备血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽,通过酶的筛选实验确定了AS.1398中性蛋白酶作为最佳水解酶,在此基础上,进行pH、温度、底物浓度、加酶量[E]∶[S]的单因素实验,并且确定4种因素的参数值进行L9(34)正交实验,采用体外检测ACE抑制率和肽得率为指标来确定最佳工艺条件。研究结果表明,选用AS.1398中性蛋白酶作为水解酶,水解时间在2h时,pH7.0,温度50℃,底物浓度5%,加酶量[E]∶[S]为1.5∶100,得到的最大ACE抑制率为85.65%,肽得率为58.64%。     

水酶法提取火麻籽油工艺研究

以火麻籽为原料,利用水酶法提取火麻籽油。通过单因素实验及中心组合实验研究酶的种类、料液比、加酶量、酶解时间等因素对火麻籽提油率的影响。结果表明,酸性蛋白酶和纤维素酶按1∶1进行复配且先加酸性蛋白酶作为提取酶时,提取效果最好;在此基础上,通过响应面优化得到水酶法提取火麻籽油的最佳工艺条件为:复合酶添加量1.10%(w/w)、料液比1∶3.6g/mL、酶解时间3.8h,火麻籽油的提油率为75.64%。      

嗜碱性芽孢杆菌产高碱碱性蛋白酶发酵培养基及发酵条件的研究

对一株高产高碱碱性蛋白酶的嗜碱性芽孢杆菌的发酵培养基及发酵工艺进行了优化。确定了发酵培养基所采用的棉籽饼粉最适粒度为 80目 ,麦芽糊精的最佳DE值为 3 0 %。并确定了该菌株的最适发酵培养基配方为 ( g/1 0 0mL) :棉籽饼粉 3 ,酵母浸粉 1 75 ,麦芽糊精 1 0 ,柠檬酸钠 0 3 ,CaCl2 0 3。K2 HPO4 1 ;最适摇瓶发酵条件为 :种龄 1 2h ,接种量 2 %,装液量 5 0mL/2 5 0mL ,摇床转速 2 0 0r/min ,3 4℃ ,发酵 5 4h ,碱性蛋白酶的发酵单位可达 3 3 985u/mL ,比优化前提高了5 4 48%。此外 ,还进行了 5L罐放大实验 ,在 5L罐所确定的最适工艺条件下 ,发酵单位可达3 65 79u/mL。     

酶法提取绿豆淀粉工艺研究

以绿豆为原料,对酶法提取绿豆淀粉工艺进行研究。通过单因素试验,研究酶解温度、酶解时间、蛋白酶添加量、料液比对淀粉提取率影响;通过四因素三水平正交试验确定酶法提取绿豆淀粉工艺最佳参数为:酶解温度46℃、酶解时间4.5 h、蛋白酶添加量700 U/g、料液比1∶3;在此条件下,绿豆淀粉提取率为96.97%。     

芽孢杆菌配伍发酵菜籽粕产中性蛋白酶条件研究

为了提高中性蛋白酶的产量,采用响应曲面法研究了微生物配伍发酵菜籽粕产中性蛋白酶的条件。确定了微生物配伍菌种为Bacillus subtilis UV-7+UN-11（1∶1）;在单因素实验基础上,以中性蛋白酶活力为指标,进行BoxBehnken设计,获得最佳发酵条件为:发酵温度35.7℃,转速193r/min,接种量为7.58%,该条件下中性蛋白酶活力的理论值为2709.9U/m L,在最佳条件下进行3次验证,中性蛋白酶活力为（2714.5±2.4）U/m L,与理论预测值基本一致,比未优化前的2602.7U/m L提高了4.3%。      

扇贝贝肉抗氧化肽制备及体外抗氧化实验研究

以海湾扇贝和虾夷扇贝的贝肉为原料,研究扇贝品种、蛋白酶种类、加酶量、固液比、酶解温度对水解度及体外自由基清除率的影响。在单因素实验的基础上采用L9(34)正交实验,对酶解条件进行优化研究。结果表明,最佳酶解条件为:以海湾扇贝为原料,选用中性蛋白酶,加酶量3.25%([E]/[S]),酶解温度40℃,固液比1∶2.5(W/V),此时水解度可达45.91%,DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为91.90%和79.72%。