芝麻林素对皮肤光老化小鼠AQP3表达和Nrf2信号通路活化的影响

研究芝麻林素（Sesamolin,SES）对紫外线B(UVB)诱导的皮肤光老化小鼠的影响。将小鼠随机分为5组（n=12）:Control组、UVB组、低剂量SES组（L-SES）、中剂量SES组（M-SES）和高剂量SES组（H-SES）。其中Control组小鼠不进行UVB照射,其他组小鼠均进行8周UVB照射。此外,照射当天开始,L-SES组、M-SES组和H-SES组小鼠分别灌胃0.5 mL20,40和80 mg/（kg·d）的芝麻林素溶液,共给药8周。给药结束后,分别测定各组小鼠的表皮含水量。通过HE染色评价皮肤组织形态,通过Masson三色染色评价胶原蛋白沉积。测定皮肤组织中氧化应激指标（SOD、CAT、GSH-Px和MDA）水平。通过RT-qPCR和Western blotting检测皮肤组织中MMP-1、Collagen I、Nrf2、Keap1、HO-1、AQP3的mRNA或蛋白水平。结果显示,与UVB组比较,L-SES组、M-SES组和H-SES组小鼠表皮含水量升高,表皮厚度降低,皮肤病变减轻,胶原纤维排列整齐,胶原密度升高,MMP-1 mRNA和蛋白表达水平降低,Co...     

草莓（Fragaria × ananassa）叶水提物对UVB致 皮肤损伤的保护作用

在草莓叶水提物（Strawberry leaf water extract，SLWE）制备基础上，测定SLWE成分，抗氧化活性、抑制非酶糖基化（NEG）能力，及SLWE对正常生长人皮肤成纤维细胞（HFF-1）细胞活率、透明质酸（HA）、人I型胶原蛋白（COL I）、羟脯氨酸（HYP）、基质金属蛋白酶1（MMP-1）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）含量，评价SLWE延缓皮肤衰老功效。在中波紫外线（UVB）致HFF-1损伤模型基础上，测定SLWE对保护组活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、MMP-1和超氧化物歧化酶（SOD）的影响，探讨SLWE对UVB致HFF-1损伤保护机制。结果表明：SLWE富含Vc、槲皮素、绿原酸、没食子酸及儿茶素类物质，其中槲皮素含量12.86 mg/L，表儿茶素含量10.13 mg/L。SLWE自由基清除能力良好，清除不同自由基能力依次为O2-?＞DPPH＞ABTS＞亚铁离子螯和＞?OH；水溶液体积分数为1%的SLWE非酶糖基化抑制率为87.17%；体积分数大于3%的SLWE可提高HFF-1中HA、COL I和HYP含量（p＜0.05），体积分数为6%的SLWE可降低MMP-1含量（p＜0.01），说明SLWE具有提升皮肤含水量，增加胶原含量，抑制胶原降解，实现延缓衰老的功效；在SLWE对UVB致HFF-1损伤保护模型中，SLWE可有效降低因UVB刺激而产生的ROS，体积分数6%的SLWE可显著降MDA，抑制MMP-1表达，提高SOD活力，说明SLWE有助于缓解氧化应激造成的细胞损伤。     

不同来源胶原肽对光老化皮肤成纤维细胞的影响研究

比较研究了海蜇、牛骨和鳕鱼皮3种不同来源胶原肽对光老化皮肤成纤维细胞的修复作用。发现3种胶原肽均可显著提高光老化细胞的细胞增殖活性,经紫外照射后,人皮肤成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白及透明质酸合成量明显降低,表现为差异性极显著(P0.01),同时细胞内抗氧化酶系T-SOD、CAT和GSH-Px的抗氧化酶活力也都降低。当加入3种胶原肽后,光老化细胞的Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白及透明质酸合成量与细胞内T-SOD、CAT和GSH-Px酶活力均有所增加,且改善光老化细胞内抗氧化酶活力与增加细胞胶原分泌效果较好的是海蜇胶原肽。     

黄皮果果核挥发油抗UV致小鼠皮肤光老化损伤的实验研究

通过水蒸气蒸馏法和冷冻结晶法对黄皮果果核挥发油进行提取和分离,将所得黄皮果果核挥发油涂于去毛KM小鼠背部,再进行UVA/UVB联合照射,从皮肤表观评价得分及HE染色结果对其抗光老化作用进行评价。结果表明,1.9%的维生素E供试液作为阳性对照药,能起到显著的抗皮肤光老化作用,2.5%,5%和10%的黄皮果果核挥发油供试液可起到抗UV所致真皮病变的作用,5%和10%时可改善UV照射所引起的表皮增厚及皱褶产生等表皮病变。     

重组人源化Ⅲ型胶原蛋白对皮肤功能性相关基因表达的影响

重组人源化Ⅲ型胶原蛋白（RHCⅢ）由人胶原原始基因序列经过优化重组表达所得,与人体天然胶原氨基酸序列高度一致。为探究重组人源化Ⅲ型胶原蛋白应用在化妆品中,对减缓皮肤皱纹的功效作用,通过测试其作用于人皮肤成纤维细胞和角质形成细胞,在皮肤功能性基因层面验证其抗皱功效。结果表明,5 mg/mL RHCⅢ作用于人皮肤成纤维细胞可显著促进胶原合成相关基因CollagenⅠ,CollagenⅢ和Smad3的表达;同时,在UVA刺激条件下可显著抑制胶原降解相关基因MMP-1,MMP-3,c-jun和c-fos的表达。作用于角质形成细胞可显著促进皮肤屏障修复和保湿相关基因LOR,TGM1,IVL,OCLN1,DSG1,FLG,Caspase14和K1的表达。综上所述,样品重组人源化Ⅲ型胶原蛋白在5 mg/mL的给药质量浓度下具有抗皱功效。     

百子莲脱水素蛋白对人皮肤细胞损伤的保护作用

应用角质形成细胞(HaCaT)与成纤维细胞(NHSF)建立脱水、光老化及氧化应激模型评价百子莲Y_2SK_2与SK_3型脱水素蛋白对人皮肤细胞在不同胁迫条件下的保护功能。结果表明:0.01～10μmol/L为两种脱水素的安全作用浓度。光老化与氧化应激模型会造成人皮肤细胞发生氧化损伤与细胞凋亡。10μmol/L ApSK_3可将皮肤细胞超低温冻存后细胞活性提升57%～91%。ApSK_3可明显改善皮肤细胞在脱水处理中的胁迫损伤,两种脱水素在光老化与氧化应激模型中对皮肤细胞均有抗氧化保护作用,可显著降低细胞中MDA含量约10%～36%,提升HaCaT细胞的SOD酶活性;ApSK_3可有效抑制皮肤细胞在氧化胁迫下的casepase-3与casepase-8的酶活性,降低细胞程序性死亡事件发生。该研究发现脱水素蛋白在胁迫伤害中对人皮肤细胞具有保护作用,其机制可能与增强细胞抗氧化性以及参与细胞凋亡过程有关。     

草莓叶水提物对UVB致皮肤损伤的保护作用

为了评价草莓叶水提物(SLWE)延缓皮肤衰老功效,对SLWE成分、抗氧化活性、抑制非酶糖基化(NEG)能力进行了测定;探讨了SLWE对人包皮成纤维细胞(HFF-1)细胞活率、HFF-1中透明质酸(HA)、人Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)、羟脯氨酸(HYP)、人基质金属蛋白酶1(MMP-1)、人基质金属蛋白酶9(MMP-9)含量的影响.在中波紫外线(UVB)致HFF-1损伤模型基础上,考察了SLWE对保护组活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、MMP-1和超氧化物歧化酶(SOD)的影响,探讨SLWE对UVB致HFF-1损伤保护机制.结果表明,SLWE富含VC、槲皮素、绿原酸、没食子酸及儿茶素类物质,其中,槲皮素含量12.86 mg/L,表儿茶素含量10.13 mg/L.SLWE自由基清除能力良好,清除不同自由基能力依次为O2–·>DPPH·>ABTS·>亚铁离子螯合>·OH;体积分数为1％的SLWE水溶液对NEG的抑制率为87.17％;体积分数大于3％的SLWE水溶液可提高HFF-1中HA、COLⅠ和HYP含量(p<0.05),体积分数为6％的SLWE水溶液可降低MMP-1含量(p<0.01),表明SLWE具有提升皮肤含水量,增加胶原含量,抑制胶原降解,实现延缓衰老的功效;SLWE可有效降低因UVB刺激而产生的ROS,体积分数6％的SLWE水溶液可显著降低MDA含量,抑制MMP-1表达,提高SOD活力,说明SLWE有助于缓解氧化应激造成的细胞损伤.     

HIV-1 Gag蛋白在重组痘苗病毒中的高效表达及其特性分析

在构建3株人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV－1）Gag基因重组痘苗病毒的基础上,实现了Gag蛋白的高效表达,3株重组病毒在感染细胞中表达量分别为14．7、6．0和4.5μg／106细胞／20h,接近杆状病毒的表达水平。表达的重组蛋白可形成病毒样粒子（VLP）,并可诱导小鼠产生抗HIV抗体。     

细梗蔷薇愈伤组织提取物在人真皮成纤维细胞及3D表皮模型上的护肤功效探究

通过植物组织培养技术得到细梗蔷薇（Rosa graciliflora）愈伤组织，利用纯水超声提取和真空冷冻干燥工艺获得细梗蔷薇愈伤组织提取物（RCE），然后对RCE进行成分检测和体外护肤功效评估。结果表明，RCE含有氨基酸、维生素、有机酸和多酚等多种活性成分。体外护肤检测结果表明，RCE对人真皮成纤维细胞有一定的增殖作用，0.01%和0.05%RCE能促进人真皮成纤维细胞分泌Ⅰ型胶原蛋白，与空白对照对比，其Ⅰ型胶原蛋白分别提高83%和79%，作用效果和阳性对照维生素C相似。此外，在重建的3D表皮模型上，0.01%RCE能够显著促进细胞增殖活性标记物Ki67、皮肤屏障功能标志物丝聚蛋白（Filaggrin）及外膜蛋白（Involucrin）的表达，相比空白对照，其阳性率分别提高308%,853%和349%，具有显著差异性。研究发现RCE具有潜在的延缓皮肤衰老和提高皮肤屏障功能的作用，有望作为一种绿色原料添加在化妆品中使用。     

柚皮苷对紫外线诱导小鼠皮肤屏障损伤的保护作用及机制研究

研究了柚皮苷对紫外线诱导昆明小鼠皮肤屏障损伤的保护作用。将25只SPF级昆明小鼠随机分为5组:空白对照组,模型组(UV照射组),阳性对照组(28.39 mmol/L维生素C),低、高剂量柚皮苷涂抹组(0.35和3.5 mmol/L柚皮苷)。除空白对照组,其他4组小鼠模拟日光紫外线(UVA+UVB)照射,建立小鼠光损伤皮肤模型,每次UV照射前,提前2 h分别涂抹相同剂量(100μL/只)的药物。通过测试小鼠皮肤经表皮失水(TEWL)、HE染色、胶原纤维染色(Masson染色),以及小鼠皮肤组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活力,丙二醛(MDA)的含量,活性氧(ROS)清除能力来探究柚皮苷对皮肤光损伤的作用途径;免疫组化染色(IHC染色)检测丝聚合蛋白(FLG)、内披蛋白(IVL)、水通道蛋白3 (AQP3)以评价柚皮苷对紫外线损伤皮肤的屏障相关功能。与模型组相比,柚皮苷涂抹组小鼠皮肤抑制皮肤表皮厚度增加,给药组胶原量增加;低、高剂量柚皮苷涂抹组可以显著减少光损伤小鼠皮肤中水分的流失(p0.05);柚皮苷显著提高小鼠皮肤组织中SOD、CAT的活力(p0.05),显著降低MDA的含量(p0.05)及清除ROS的含量;IHC染色研究表明柚皮苷涂抹组皮肤中FLG、IVL、AQP3蛋白表达量增加(p0.05)。     

复方精油吸嗅对睡眠剥夺小鼠的清醒维持作用及机制

探讨复方精油经鼻吸入对睡眠剥夺小鼠的清醒维持作用及机制。动物试验结果表明,复方精油不仅能显著提高睡眠剥夺小鼠自主活动（P<0.01）,显著缩短睡眠时间（P<0.01）,具有维持清醒的作用,还能使超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及脑内多巴胺（DA）和谷氨酸（Glu）水平显著升高（P<0.05,P<0.01）,且显著降低5-羟色胺（5-HT）水平（P<0.01）;细胞结果表明,复方精油组多巴胺转运蛋白（DAT）、五羟色胺1A(5-HT1A)蛋白表达极显著降低（P<0.01）,5-羟色胺转运蛋白（SERT）、囊泡谷氨酸转运蛋白1(VGLUT1)蛋白表达显著提高（P<0.05,P<0.01）。     

不同季节玉兰花及叶挥发油化学成分的GC-MS分析

用水蒸气蒸馏法提取了春季及夏季产玉兰叶和花的挥发油,用气相色谱-质谱联用技术对挥发油进行了成分分析。分别从夏季及春季产玉兰花和叶的挥发油中鉴定出了24、25、50和33种化合物。用面积归一法测定了4种挥发油中各种成分的相对质量分数,各占总峰面积的96.14%、99.63%、91.30%和96.78%。玉兰叶油和花油具有相同的主要成分,它们分别是芳樟醇、β-榄香烯、丁香烯、橙花叔醇和丁香烯环氧化物。     

朱蕉叶挥发油的GC-MS分析

采用水蒸气蒸馏法提取朱蕉叶的挥发油,运用气质谱联用（GC-MS）技术对挥发油成分进行分析,并采用峰面积归一化法确定各成分的相对百分含量。结果表明,共鉴定出67种成分,占总离子流出峰面积的89.48%。朱蕉叶挥发油主要有1-辛烯-3-醇（22.98%）,甜没药醇（5.21%）,7-（1,1-二甲基乙基）-2,3-二氢-3,3-二甲基-1H-茚-1-酮（4.60%）,棕榈酸（3.51%）和乙酸叶醇酯（3.17%）。     

龙脑樟挥发油化学成分、抗烟草花叶病毒及抑菌活性研究

采用水蒸气蒸馏法从龙脑樟的叶和茎中提取挥发油,通过气相色谱-氢火焰离子化法(GC-FID)和气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对其化学成分进行鉴定,用归一化法测定挥发油中各组分的相对百分含量,并评价其抗烟草花叶病毒(TMV)和抗菌活性。从龙脑樟叶的挥发油中共分离鉴定了28种挥发性化合物,其中d-冰片含量最高,达到68.45%,其他主要成分为樟脑(14.22%)、异丁香烯(4.65%)和(E)-β-石竹烯(2.00%)等;茎挥发油分离鉴定了17种成分,主要成分是d-冰片(64.02%)、樟脑(17.60%)和异丁香烯(5.39%)等。龙脑樟挥发油对TMV有抑制作用,在100μg/mL时抑制率达56.9%;对金黄色葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌、大肠杆菌、烟曲霉和白色念珠菌均有较强的抑制作用,对烟曲霉的抑制能力最强,MIC值为31.3μg/mL。     

低剂量蓖麻毒素吸入诱导的小鼠肺损伤及修复

目的分析雾化吸入低剂量蓖麻毒素(ricin toxin,RT)对小鼠肺组织损伤修复的影响。方法采用改良寇氏法检测小鼠雾化吸入不同剂量RT(1. 312、2. 2、3. 704、6. 2、10. 44μg/kg)的LC_(50),确定RT雾化染毒剂量。小鼠雾化吸入1/30 LC_(50)剂量RT后,分别在第0. 5、1、2、3、4、5、6、7天,分离肺组织,HE染色观察小鼠肺组织病理学变化,免疫组化方法检测肺组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结果小鼠雾化吸入RT的LC_(50)为(4. 95±0. 14)μg/kg;雾化染毒后,小鼠肺组织损伤程度及MMP-2、MMP-9蛋白的表达趋势一致。第1、2天时,肺组织血管周围弥漫性水肿,MMP-2、MMP-9蛋白的表达高于空白对照组,差异有统计学意义(P 0. 05);第3、4天时,肺泡结构完全破坏,第3天MMP-2蛋白的表达达到最高,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P 0. 01),第4天MMP-9蛋白的表达达到最高,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P 0. 01);至第7天时,肺损伤程度基本恢复至正常状态,MMP-2、MMP-9蛋白的表达也呈下降趋势。结论雾化吸入1/30 LC_(50)剂量RT后,可引起小鼠肺组织损伤,且损伤可在7 d内修复。     

小鼠载脂蛋白A-Ⅰ的原核表达及抗血清的制备

目的原核表达小鼠载脂蛋白A-Ⅰ(ApoA-Ⅰ),并制备抗血清。方法应用RT-PCR方法从小鼠肝脏中扩增ApoA-Ⅰ基因,亚克隆至原核表达载体pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的融合蛋白经Ni2+-NTA柱纯化后,免疫家兔,制备抗血清。结果扩增的ApoA-Ⅰ基因经测序,表明与GenBank中报道的序列(NM_009692)完全相同。重组表达质粒经酶切鉴定,证明构建正确。表达的ApoA-Ⅰ融合蛋白相对分子质量约为32000,表达量占菌体总蛋白的17%。纯化的融合蛋白纯度达90.7%,可与抗His·Tag单抗发生特异性反应。制备的抗血清可识别ApoA-Ⅰ融合蛋白,效价可达1∶105。结论已在大肠杆菌中表达了小鼠ApoA-Ⅰ,并制备了较高效价的抗血清。     

羟基富勒烯在抵抗皮肤光老化中发挥的功效

目的：制备可溶于水的羟基富勒烯,测试其抵抗光老化功效。方法：利用UVA照射构建人皮肤成纤维细胞光老化模型,通过检测ROS、胶原蛋白含量、细胞凋亡率等验证羟基富勒烯的抗光老化功效。结果显示,羟基富勒烯能够显著降低细胞ROS阳性率和细胞凋亡率,对Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白具有很强的保护作用。结论：羟基富勒烯在抵抗光老化方面具有显著功效,可开发为化妆品的抗老化功效原料。     

假臭草花挥发油的GC-MS分析

采用水蒸气蒸馏法提取新鲜假臭草花的挥发油,利用气相色谱-质谱（GC-MS）联用技术分析该挥发油的化学成分。GC-MS共鉴定出35个化合物,占挥发油总量的81.82%。其主要成分为：1-甲基-5-亚甲基-8-（1-甲基乙基）-[s-（E,E）]-1,6-环癸二烯（31.98%）、石竹烯（11.75%）、己酸（6.25%）、3-甲基戊酸（6.10%）、α-毕澄茄醇（4.37%）、二叔丁基对羟基甲苯（3.98%）、4-乙烯基-2-甲氧基苯酚（3.48%）。     

羟丙基四氢吡喃三醇的体外紧致、抗皱功效评价

本文使用UVR辐照人离体皮肤组织建立的体外光老化模型,主要靶向的是成纤维细胞和角质形成细胞。通过供试样品羟丙基四氢吡喃三醇的作用,观测辐照受损以及加样培养前后离体皮肤的组织形态与胶原纤维含量变化和弹力蛋白与透明质酸（HA）含量变化,并进一步评价羟丙基四氢吡喃三醇对人体皮肤的抗皱和紧致功效。结果显示,经30 mg/m L的羟丙基四氢吡喃三醇表面给药培养离体皮肤组织：表皮活细胞层明显增厚,组织形态得以改善;胶原纤维含量显著升高,提升率为394.44%;弹力蛋白含量显著上升,提升率为386.67%;透明质酸（HA）含量显著上升,提升率为62.5%。实验表明,羟丙基四氢吡喃三醇能通过改善组织形态和提升胶原纤维含量,且能提升弹力蛋白和透明质酸（HA）的含量,从而对皮肤起到一定的抗皱和紧致功效。     

食凉茶中挥发油成分分析

采用超临界CO2萃取技术提取食凉茶[柳叶蜡梅（Chi monanthus salicifolius）]中挥发油成分,经毛细管气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）分析,鉴定了68个挥发性化合物。其挥发性化合物主要是烯烃类和有机酸类,分别占提取出挥发油总量的39.90%和4.24%。用该法提取出的挥发性成分含量最高的是3-（4,8-二甲基-3,7-壬二烯）-呋喃（黑蚁素）（19.33%）,其次为4-（3,7-二甲基-3-乙烯基-1,6-辛二烯）-苯酚（5.09%）、喇叭烯氧化物（4.94%）、α-松油醇乙酸酯（2.88%）、n-十六烷酸（2.09%）、白菖烯环氧化物（2.04%）、异香橙烯环氧化物（1.75%）、亚麻酸（1.44%）等。