熏马肠中生物胺氧化酶菌株的筛选与鉴定

为获得良好的产生物胺氧化酶的肉品发酵剂,本试验以新疆不同地区的44种熏马肠样品为研究对象,对产生物胺氧化酶菌进行筛选和鉴定,利用单层培养、双层显色的方法剔除产生物胺菌株,对分离后得到的菌株进行氧化酶试验、抑菌试验、耐盐和耐亚硝酸盐试验。采用DGGE剔除重复菌株,通过HPLC对所筛选菌株氧化生物胺能力进行验证,最后对筛选出的菌株提取DNA,并对其16S rDNA的V6-V8区段进行PCR扩增后测序。结果表明:本次试验共筛选出6株菌有氧化酶特性,耐盐能力在6%以上,耐亚硝酸盐能力在0.15 g/kg以上,对致病性大肠杆菌,单增李斯特菌,金黄色葡萄球菌三种致病菌有良好的抑制效果,经HPLC验证后氧化生物胺能力较强,分别为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus),枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus),木糖葡萄球菌(Staphylococcus xylosus),戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus),植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。为发酵肉制品的工业化生产和安全性提供了良好的理论依据。     

熏马肠成熟过程中产生物胺氧化酶菌对生物胺作用的研究

该研究以从新疆熏马肠中筛选出来的6株产生物胺氧化酶菌株(鼠李糖乳杆菌、枯草芽孢杆、腐生葡萄球菌、木糖葡萄球菌、戊糖片球菌、植物乳杆菌)作为发酵剂加入熏马肠中,采用PCR-DGGE技术监测菌落动态变化,高效液相色谱法检测熏马肠中生物胺(色胺、腐胺、苯乙胺、组胺、酪胺、尸胺、精胺、亚精胺)含量变化。结果表明,在熏马肠成熟过程中发酵剂对生物胺有一定的抑制作用。其中以腐生葡萄球菌对色胺、腐生葡萄球菌对苯乙胺、木糖葡萄球菌对尸胺、鼠李糖乳杆菌对腐胺、腐生葡萄球菌对组胺和枯草芽孢杆菌对酪胺的抑制作用最为显著,减少程度分别为45.49%、57.54%、40.75%、51.03%、49.28%、64.33%。本研究为熏马肠以及其他发酵肉制品的提高安全性奠定了基础。     

新疆熏马肠中产氨基酸脱羧酶优势细菌的分离及鉴定

本研究从新疆熏马肠中分离鉴定得到32株产氨基酸脱羧酶的优势细菌,并确定了各株菌的产胺能力。试验从新疆多产熏马肠的四个地区采集44个熏马肠样品,利用双层培养基显色法初步分离其中的产胺优势菌。再采用PCR-DGGE技术,剔除重复菌株并通过同源性比对,确认32株产胺菌。最后利用高效液相色谱检测菌液产物,验证其产生物胺的能力。此次研究中,得到的菌株主要高产腐胺、色胺、组胺及苯乙胺,其中4号菌株(气味沙雷氏菌,Serratia odorifera)产生物胺总量(平均值)最高985.14μg/mL,且组胺生成量最高7259.64μg/mL;17号菌株(阴沟肠杆菌,Enterobacter cloacae)产生物胺总量(平均值)次高737.78μg/mL,且色胺生成量最高4507.81μg/mL;11号菌株(克雷伯氏菌,Klebsiella sp.)产腐胺量最高2550.54μg/mL;8号菌株(木糖葡萄球菌,Staphylococcus xylosus)产苯乙胺量最高3831.50μg/mL。     

发酵剂对熏马肠成熟过程中生物胺含量变化的影响

利用从熏马肠中分离出的具有抑菌作用并可以产生物胺氧化酶的菌株,1株表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis),3株模仿葡萄球菌(Staphylococcus simulans)作为发酵剂加入到熏马肠,在熏马肠成熟过程中采用高效液相色谱检测不同发酵剂对生物胺含量变化的影响,进而阐明发酵剂对熏马肠中生物胺累积的控制作用。从研究结果可以看出,在马肠成熟过程中,B组对色胺、苯乙胺、腐胺、组胺、酪胺都有较显著的减少作用;C组对色胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺减少作用显著;D组对色胺、苯乙胺、腐胺、组胺、酪胺的减少作用显著;E组对组胺、苯乙胺、色胺的减少作用显著。添加发酵剂组对精胺、亚精胺的减少作用均不显著。结果表明,上述菌种对熏马肠成熟过程中生物胺产生有较好的抑制作用,具有肉品发酵剂的良好特性,为熏马肠以及其他发酵肉制品的工业化生产和安全性奠定了基础。     

大蒜精油和发酵剂对熏马肠中生物胺及微生物分布的影响

为研究大蒜精油和发酵剂对熏马肠中生物胺的影响,采用高效液相色谱法测定熏马肠中生物胺含量,利用 宏基因组学技术分析熏马肠中微生物多样性和生物胺含量的变化情况。结果表明：将大蒜精油和发酵剂联合使用能 够很好地减少熏马肠中尸胺、腐胺、组胺、酪胺和苯乙胺的产生,对控制生物胺在熏马肠中的含量起到非常显著的 作用;熏马肠中含有丰富的微生物物种,通过样品科分类水平物种分析,得出乳酸菌在熏马肠整个加工过程都是优 势菌种,而葡萄球菌在成熟后期数量较多。     

不同发酵条件下熏马肠中高产生物胺肠杆菌生长预测模型的研究

为了研究高产生物胺肠杆菌在不同发酵条件下的动态变化情况,将高产生物胺肠杆菌(阴沟肠杆菌和气味沙雷氏菌)接种到无污染的马肉中,并制作成熏马肠,置于20、25、30和35℃发酵条件下发酵,建立肠杆菌在熏马肠中的生长预测模型,并对模型进行验证。采用Origin 8.0统计软件拟合不同温度下肠杆菌的生长情况,研究结果表明,所选取的修正的Gompertz模型对不同发酵温度下肠杆菌在熏马肠中的生长曲线拟合效果较好,相关系数都在0.980之上。利用平方根模型反应温度与最大比生长速率和延滞时间的关系,结果呈良好的线性关系,相关系数(R2)分别为0.951 8和0.987 8,其残差的绝对值均在0.1左右浮动,表明所建立的二级模型平方根模型拟合效果较好,也说明建立的20—35℃发酵温度下熏马肠中高产生物胺肠杆菌的生长预测模型有比较好的预测效果。     

不同啤酒生物胺含量的比较

使用反相高效液相色谱法,测定啤酒中8种常见生物胺含量。以苯甲酰氯为衍生试剂,Agilent EclipseXDB-C18为固定相,乙腈和乙酸铵溶液为流动相,紫外检测波长设置为254 nm,梯度洗脱。本文首先对国内市售啤酒生物胺种类及含量范围进行研究,检测结果表明国内啤酒中8种生物胺均有存在,但不同样品所含种类不同,且有个别胺含量偏低无法定量。不同厂家的产品在种类和含量上存在差别,但整体含量接近,生物胺总量为4.21～10.59 mg/L,不足以对人类健康产生危害。原麦汁浓度、酒精度与生物胺含量的关系显示,二者与生物胺有一定联系,但非主要因素,相对于生产厂家和发酵情况,原麦汁浓度、酒精度对生物胺含量的影响较小。     

新疆伊犁传统熏马肠中葡萄球菌的分离及生长特性研究

本研究利用微生物选择培养分离方法获取伊犁哈萨克自治州熏马肠中优势菌种葡萄球菌(Staphylococcus),并研究其在不同pH值、不同盐浓度、不同亚硝酸浓度等条件下的生长特性。结果表明,熏马肠中分离得到的葡萄球菌,在pH值为6的情况下生长情况较好;葡萄球菌的生长随着盐浓度的增加而受到抑制,盐浓度5.50%下生长较好;在亚硝酸盐浓度为150 mg·L^-1时,葡萄球菌生长情况较好。本实验结果表明,熏马肠中优势菌种葡萄球菌具有优良微生物发酵剂的生长特性,为进一步研究本地熏马肠中的发酵剂提供理论基础。     

中国市售酱腌菜中生物胺含量分析

为研究我国酱腌菜中生物胺的积累,采用柱前衍生化高效液相色谱法分析299个不同工艺酱腌菜中8种生物胺含量。结果表明,发酵程度越深,产生物胺含量越高。强发酵类的东北酸菜和现代工业泡菜半成品生物胺平均含量分别为(613.4±163.1)、(800.4±370.9) mg/kg;传统四川泡菜、辣白菜、冬菜、芽菜等弱发酵类生物胺平均含量为100～200 mg/kg;不发酵类的调味海带生物胺平均含量为(36.2±27.9) mg/kg。腐胺、尸胺、组胺和酪胺是酱腌菜中主要的生物胺,尸胺是强发酵酱腌菜中最常见、最多的生物胺。加工工艺是影响生物胺产生的最重要因索,蔬菜种类和卫生状况也会影响酱腌菜中生物胺的积累。参考国际食品中生物胺限量标准,我国酱腌菜总体是安全的。研究结果对酱腌菜生物胺防控及标准制定具有指导意义。     

乌鲁木齐市部分市售熏马肠卫生状况

熏马肠是新疆少数民族喜食的一种传统食品 ,主要原料为马肉 ,有浓厚的地方风味特色 ,生产工艺具有独特性 ,不加发色剂 (亚硝酸盐 )以及其它添加剂。其传统的主要生产工艺过程为 :选肉修割切条浸泡　　添加料 :皮牙孜、大蒜、食盐等。滚揉灌肠蒸或煮熏制入库　　以前该类食品一般冬季家制自食为主 ,少批量销售。随着人民市场意识的提高 ,近几年该类食品逐步进入市场 ,打破以前的季节性及小规模生产的局面。为了保证我市广大消费者的安全 ,也为了便于熏马肠的监督管理 ,我们对熏马肠的卫生状况、销售摊点及销售人员的办证情况等进行了一次较全…     

发酵香肠中生物胺的研究

本文采用RP-HPLC法测定了发酵香肠中的生物胺(苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺、精胺)的含量。样品经0.4mol/L高氯酸溶液提取,丹磺酰氯衍生,流动相为乙腈和水,采用梯度洗脱,流速为1mL/min,紫外检测波长为254nm。该方法检测限为:腐胺、尸胺、亚精胺、酪胺和精胺为0.1μg/mL,组胺0.5μg/mL,苯乙胺0.05μg/mL。回收率分别为苯乙胺86.71%、腐胺88.88%、尸胺94.55%、组胺87.57%、酪胺83.67%、亚精胺88.55%、精胺94.91%。结果表明发酵香肠中生物胺的种类及含量因香肠的品种而异,7种生物胺平均总量为13.40mg/100g,变异范围为7.83~19.13mg/100g。本法简便、快速、灵敏、可靠。     

高效液相色谱法测定黄酒中生物胺的含量

本文建立了测定酿造酒(黄酒)中生物胺含量的高效液相色谱法,优化的测定条件为:样品经0.4mol/L高氯酸提取后用丹磺酰氯柱前衍生,流动相为乙腈和水,采用梯度洗脱,流速为0.8ml/min,二极管阵列检测器,检测波长为254nm。该方法检测限为:尸胺、组胺和亚精胺为0.05μg/ml,酪胺为0.1μg/ml,精胺为0.25μg/ml。线性范围为2.0～40.0μg/ml(R>0.99),回收率分别为尸胺96.6%、组胺101.94%、酪胺101.90%、亚精胺98.65%、精胺107.4%。首次采用该法测定了黄酒中的生物胺,结果表明黄酒中生物胺的种类及含量因酒的品种而异,5种生物胺平均总量为114.45μg/ml,变异范围为39.27～241.07μg/ml。     

腐乳前酵过程中生物胺含量变化

采用丹磺酰氯柱前衍生、HPLC检测腐乳前酵过程中生物胺含量变化;同时,检测多肽、氨基态氮含量的变化。结果表明:在前酵过程中,多肽和氨基态氮的含量均呈增长趋势,生物胺总量的上升趋势与氨基态氮一致,总胺含量分别达到971.1mg/kg和782.0 mg/kg,但两种菌种发酵产物中,各种生物胺含量的变化趋势不尽相同,雅致放射毛霉发酵产物中,尸胺和酪胺含量分别达到460.1 mg/kg、318.5 mg/kg,两者共占生物胺总量的80.2%,其余6种生物胺含量均低于100 mg/kg;少孢根霉发酵产物中,尸胺含量为668.0 mg/kg,占生物胺总量的85.4%,其余7种生物胺含量均低于50 mg/kg。     

传统中式香肠成熟过程中生物胺的生物控制

以传统中式香肠成熟过程中生物胺含量的变化为研究对象,重点介绍了色胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺的变化。在香肠加工过程中添加发酵剂和复合植物提取物来控制香肠中生物胺的积累,利用高效液相色谱仪检测成熟过程中生物胺的变化。结果表明,添加发酵剂可有效地抑制色胺、腐胺、尸胺、酪胺的生成;复合植物提取物只是在抑制酪胺含量的增加上有显著效果;同时加入发酵剂和复合植物提取物对色胺、尸胺、组胺和酪胺的抑制效果更显著,特别是组胺,在生产结束时含量为0。发酵剂和复合植物提取物对精胺和亚精胺基本没有影响。     

咸鱼中生物胺的研究进展

生物胺是广泛存在于食品中的具有生物活性的低分子量含氮有机化合物的总称,主要由氨基酸脱羧酶作用于氨基酸产生。咸鱼作为传统的腌制水产品,味道鲜美,富含大量游离氨基酸,是产胺微生物生长繁殖及生物胺形成与积累的良好载体,过量摄入则对人体健康构成潜在风险。本文结合近年来国内外相关研究报道,介绍了咸鱼制品中生物胺种类、作用和产生机理,分析了影响生物胺合成的因素,归纳了咸鱼制品加工中生物胺的控制方法,并对调控咸鱼制品中生物胺合成的研究方向和热点进行展望。     

发酵香肠中生物胺含量影响因素的研究进展

介绍生物胺的种类、危害及在发酵香肠中存在的可能,重点分析了原料肉、发酵剂、工艺条件(温度、pH值、香肠直径、辅助配料、贮藏条件)等因子对发酵香肠中生物胺含量的影响,并提出了通过控制原料肉的卫生质量、使用优良的发酵剂、控制蛋白质的水解程度、使用添加剂等措施降低发酵香肠中生物胺含量。     

食品中生物胺的研究进展

生物胺普遍存在于生物体中,有许多重要的生理功能。生物胺天然存在于许多食品种类中,如水果、蔬菜、肉类、鱼类、巧克力和牛奶等;也可以由氨基酸脱羧酶对游离氨基酸的脱羧作用产生。人体摄入大量生物胺会引起身体不适,严重的还可能危及生命。文中综述了有关生物胺的化学结构、毒性和测定的研究进展,并展望了其研究前景。