蓝莓多酚对小鼠巨噬细胞中NO、iNOS及COX-2分泌量的影响

RAW264.7细胞用LPS预刺激后,添加从蓝莓中分离、制备的可萃取多酚(EPP)和不可萃取多酚(NEPP),测定EPP和NEPP对细胞NO、iNOS、COX-2分泌量的影响。结果表明:蓝莓EPP和NEPP能抑制RAW264.7细胞中NO、iNOS及COX-2的分泌量,且随着添加浓度的增加,抑制效果明显。在相同浓度下,NEPP的抑制效果优于EPP,并且好于同浓度下的阳性对照组(TP)。这表明从蓝莓中分离、制备的NEPP同EPP一样可通过抑制NO、iNOS及COX-2的分泌表现出明显的抗炎作用。     

蓝莓多酚的提取及功效的研究进展

多酚具有多重功效,逐渐引起了人们的重视。按照多酚的结合方式可分为可萃取多酚（EPP）和不可萃取多酚（NEPP）,本文从提取、功效两个方面综述了国内外对蓝莓中EPP和NEPP的研究概况。     

干燥方式和温度对草莓果粉性质及多酚含量的影响

本文主要研究了冷冻干燥、热风干燥、真空干燥方式及干燥温度对草莓果粉性质及多酚含量的影响。用50%甲醇和70%丙酮两步法提取可萃取多酚（EPP）;甲醇/H2SO4水解残渣获得不可萃取多酚（NEPP）。Folin-phenol试剂法测定多酚的含量;用色差计测定草莓果粉的L*、a*、b*值;在665 nm处测定其上清液的透光率。结果表明冷冻干燥草莓果粉的EPP和原花青素含量最高,随着干燥温度的升高,草莓果粉中EPP的含量降低,而干燥温度对NEPP的含量影响与EPP相反,各处理中TPP的含量变化不显著。干燥方式和温度对草莓果粉的溶解指数影响不明显。干燥温度升高,果粉上清液的透光率以及草莓果粉的L*、a*和b*值明显降低。总之,冷冻干燥方式可很好地保留草莓中EPP和原花青素含量以及原料本身的色泽。      

羊栖菜多酚通过核转录因子-κB/丝裂原活化蛋白激酶通路缓解脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症反应

目的：研究羊栖菜多酚对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7细胞炎症反应的影响。方法：噻唑蓝法测定细胞活力;Griess法测定一氧化氮（NO）水平;实时荧光定量聚合酶链式反应测定白细胞介素（interleukin,IL）-6、IL-1β、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α、环氧合酶2（cyclooxygenase-2,COX-2）和诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）的基因相对表达量;流式细胞术测定细胞吞噬能力;蛋白免疫印迹法测定信号通路丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases,MAPKs）和核转录因子（nuclear factor,NF）-κB信号通路关键蛋白表达水平。结果：羊栖菜多酚对RAW264.7细胞的安全质量浓度范围为0～160 μg/mL。与LPS组相比,羊栖菜多酚剂量依赖性降低巨噬细胞吞噬能力并抑制NO的生成。同时,羊栖菜多酚下调促炎细胞因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）和炎症诱导酶（iNOS、COX-2）的mRNA水平,且作用效果与给药剂量及LPS刺激时间相关。这些炎性介质的表达与羊栖菜多酚抑制p38 MAPK和NF-κB p65的激活有关。结论：羊栖菜多酚可通过减弱p38 MAPK和NF-κB p65信号通路的激活水平,抑制下游炎症介质的转录表达,从而缓解LPS诱导的巨噬细胞炎症反应。     

蓝莓不可萃取多酚的酸法提取工艺优化

研究了蓝莓中不可萃取多酚的提取工艺. 以新鲜蓝莓为实验材料,去除其中的可萃取多酚,制成不含可萃取多酚的原材料,采用酸水解的方法分离不可萃取多酚. 在单因素实验基础上,选择温度、时间、料液比等3个影响因素进行响应面设计. 采用Box-Behnken中心组合实验设计和响应面分析法,建立以蓝莓不可萃取多酚萃取率为响应值的二次回归方程. 结果表明温度、时间、料液比对多酚萃取率的影响显著,最佳萃取条件为温度74℃,时间225h,物料质量浓度1∶21g/mL,在此条件下不可萃取多酚在蓝莓粉中的萃取率为27.25mg/g.     

蓝莓叶多酚对鱿鱼上清液中氧化三甲胺高温热分解的影响

以鱿鱼上清液为对象,研究蓝莓叶多酚对鱿鱼上清液氧化三甲胺热分解的影响以及氧化三甲胺热分解的反应机制。结果表明:蓝莓叶多酚抑制鱿鱼上清液中氧化三甲胺热分解,显著降低鱿鱼上清液中甲醛、二甲胺和三甲胺含量。蓝莓叶多酚浓度越大,抑制效果越显著。在一定温度范围,蓝莓叶多酚对氧化三甲胺热分解有显著的抑制作用。当加热时间低于60 min时,蓝莓叶多酚对氧化三胺热分解抑制效果显著。在鱿鱼上清液中氧化三甲胺热分解过程中产生了自由基,而蓝莓叶多酚抑制自由基的产生,并且蓝莓叶多酚浓度越高,产生的自由基信号强度越弱,表明蓝莓叶多酚通过抑制自由基来抑制甲醛的形成。     

酱香型白酒中吡嗪类物质体外抗炎作用研究

为研究酱香型白酒中吡嗪类物质的体外抗炎活性及其作用机制,采用脂多糖（LPS）诱导RAW264.7细胞建立炎症模型,并通过酶联免疫吸附试验（ELISA）测定细胞上清液中一氧化氮（NO）、白细胞介素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量,进而检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、环氧化酶-2（COX-2）、血红素氧合酶-1（HO-1）、白细胞介素-1（IL-1）、IL-6、TNF-α的信使核糖核酸（mRNA）的表达及对花生四烯酸代谢通路中与生成前列腺素E2（PGE2）有关的关键酶的影响。结果表明,2,3,5-三甲基吡嗪（BQ-5）可抑制细胞上清液中NO上升,抑制磷脂酶A2（PLA2）及COX-2活性,下调LPS诱导的iNOS、COX-2、IL-1、IL-6及TNF-α的mRNA的表达。由此可见,酱香型白酒中含有的吡嗪类物质具有一定的抗炎活性,其中BQ-5可减少炎症介质（IL-1、IL-6、TNF-α）的表达,抑制iNOS基因的表达从而抑制NO的产生,抑制花生四烯酸代谢途径中PGE2合成的关键酶而发挥抗炎作用。     

乳源酪蛋白糖巨肽对结肠癌HT-29细胞中COX-2、iNOS、GST-π表达的影响

目的:研究乳源酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP)对人结肠癌HT-29细胞增殖及细胞中环氧合酶-2(cyclooxyenase-2,COX-2)、诱导性一氧化氮合酶(induc ible nitric oxide synthase,iNOS)及谷胱甘肽-S-转移酶π(glutathione-S-transferaseπ,GST-π)表达的影响,为探讨CGMP作为功能性食品提供可靠的依据。方法:采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验测定不同剂量CGMP作用12、24、48 h对结肠癌HT-29细胞增殖的抑制情况;在不同剂量CGMP作用HT-29细胞24 h后,通过逆转录聚合酶链反应扩增细胞中提取的COX-2 mRNA、iNOS mRNA、GST-πmRNA,用凝胶成像自动分析系统检测各扩增带COX-2 mRNA、iNOS mRNA、GST-πmRNA水平。结果:1)CGMP组对细胞的增殖均有抑制作用,其中10-4 mg/mL抑制效果最强,且呈现时间依赖性。2)低剂量的CGMP(10-5、10-4、10-3 mg/mL)可显著降低3种基因的表达。结论:CGMP可在一定程度上抑制HT-29细胞的增殖,并呈时间依赖性,同时CGMP能在mRNA水平上抑制COX-2、iNOS、GST-π的表达,进而降低3种基因蛋白的表达,从而进一步改善结直肠癌。     

氯化钙处理对速冻蓝莓冻藏期品质的影响

研究不同质量分数氯化钙处理对速冻蓝莓果实于－18 ℃冻藏时品质变化的影响。结果表明：随着冻藏时间延长,速冻蓝莓果实的质量、硬度、可溶性固形物（TSS）、可滴定酸、VC、花色苷和总酚含量均呈下降趋势。浸钙处理可延缓速冻蓝莓果实质量、硬度、TSS、可滴定酸、VC、花色苷和总酚含量的下降,保持果实原有品质。在整个冻藏期多酚氧化酶（PPO）和过氧化物酶（POD）活性不断下降,氯化钙处理组冻藏后期PPO活性明显被抑制,但对POD活性没有显著效果。综合分析各指标,经1.5%氯化钙溶液处理的速冻蓝莓其冻藏期品质最好。     

蓝莓叶多酚对鱿鱼丝加工过程中内源性甲醛产生的抑制作用

本文从鱿鱼丝加工过程中鱿鱼片浸泡和蒸煮方式、蓝莓叶多酚浸泡浓度、浸泡时间及复水方式等研究蓝莓叶多酚对鱿鱼丝加工过程中内源性甲醛产生的抑制作用。结果表明:蓝莓叶多酚浸泡鱿鱼片的最佳浓度为0.1%,最佳浸泡时间为12 h;蓝莓叶多酚浸泡和蒸煮鱿鱼片是最佳浸泡和蒸煮方式,蓝莓叶多酚溶液复水鱿鱼丝中甲醛和二甲胺含量显著低于原复水工艺。蓝莓叶多酚通过抑制氧化三甲胺高温分解和与甲醛发生酚醛缩合反应降低鱿鱼丝中甲醛含量。     

虫茶多酚对乙酰氨基酚致小鼠肝损伤的预防效果

研究虫茶粗多酚（crude polyphenols of Insect tea,CPIT）对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤的预防效果。在诱导肝损伤后,CPIT可以增加小鼠的体质量和减小肝脏质量,降低肝指数。经过CPIT处理后的小鼠较对照组小鼠（肝损伤）血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、甘油三酯、血尿素氮含量均下降,而总胆固醇,白蛋白水平则上升。同时经过CPIT处理后,白细胞介素（interleukin,IL）-6、IL-12、肿瘤坏死因子-α和干扰素-γ的水平也较对照组小鼠降低。CPIT还可以上调肿瘤坏死因子-α、锰超氧化物歧化酶、铜锌超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶mRNA的表达和下调核转录因子（nuclear factor-κB, NF-κB）、一氧化氮合酶异型、环氧化酶的表达。通过结果可以看出,CPIT具有预防动物体内肝损伤效果。     

Nonextractable polyphenols,usually ignored,are the major part of dietary polyphenols: A study on the Spanish diet

Scope: Dietary polyphenols (PP) can be divided into two groups: extractable polyphenols (EPP) or compounds solubilized by aqueous organic solvents, and nonextractable polyphenols (NEPP) or compounds that remain in their corresponding extraction residues. Most studies on food polyphenols and dietary intakes address exclusively EPP. The objective of this work was to determine the actual amount of PP, including NEPP, in food and in a whole diet. Methods and results: HPLC‐MS analyses were performed to identify EPP in methanol–acetone extracts and NEPP in the acidic hydrolyzates of their extraction residues in cereals, fruits, vegetables, nuts, and legumes. NEPP contents, estimated as hydrolyzable PP plus nonextractable proanthocyanidins (PA), ranged from 880 mg/100 g dry weight in fruits to 210 mg/100 g in cereals and were substantially higher than the contents of EPP. NEPP intake (day/person) in the Spanish diet (942 mg) is higher than EPP intake (258 mg) fruits and vegetables (746 mg) are the major contributors to the total PP intake (1201 mg). Conclusion: Non extractable polyphenols are the major part of dietary polyphenols. The knowledge of intakes and physiological properties of NEPP may be useful for a better understanding of the potential health effects of dietary PP.     

异甘草素对3T3-L1前脂肪细胞分化的抑制作用

目的：考察异甘草素对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,探究其作用机制。方法：采用3T3-L1前脂肪细胞,利用磺酰罗丹明B（sulforhodamine B,SRB）法检测异甘草素对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响,采用传统的鸡尾酒法诱导3T3-L1细胞分化为脂肪细胞,利用油红O染色法检测分化细胞脂滴形成;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应方法,检测细胞CCAAT增强子结合蛋白（CCAAT-enhancer-binding proteins,C/EBP）亚型C/EBPα、C/EBPβ、脂肪酸合成酶（fatty acid synthetase,FAS）、脂肪分化相关蛋白adipophilin、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferators activated receptor γ,PPARγ）、腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphateactivated protein kinase,AMPK）的mRNA表达水平,Western blotting法检测AMPK蛋白磷酸化水平。结果：异甘草素可浓度依赖性地抑制3T3-L1细胞增殖,并明显抑制分化细胞内脂滴形成,同时抑制了细胞分化相关基因C/EBPα、C/EBPβ、FAS、adipophilin、PPARγ mRNA的表达,AMPK mRNA的表达未受影响,但异甘草素处理明显上调了AMPK蛋白的磷酸化水平。结论：异甘草素可抑制3T3-L1前脂肪细胞向脂肪细胞分化,其机制可能与活化AMPK信号通路相关。     

大蒜素对脂多糖诱导腹腔巨噬细胞炎症反应的抑制作用及机制

目的:探讨大蒜素对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎症反应的抑制作用及机制。方法:建立LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎症反应细胞模型,并用地塞米松和不同浓度大蒜素处理,MTT法检测细胞活力,中性红吞噬实验检测吞噬能力,Griess法检测一氧化氮(NO)及ELISA法检测COX-2酶活性和IL-6的分泌,qPCR检测环氧合酶2(COX-2)、一氧化氮合酶(iNOS)和IL-6的mRNA表达水平,Western Blot检测COX-2、iNOS和IL-6的蛋白表达以及核转录因子NF-κB p65及其磷酸化产物的相对表达。结果:大蒜素浓度在40~160 μg/mL范围内对腹腔巨噬细胞均无细胞毒性;与LPS组比较,大蒜素处理组能促进腹腔巨噬细胞的吞噬能力,能显著(P<0.05)抑制炎症因子COX-2酶活性、NO和IL-6的分泌,能显著(P<0.05)抑制基因COX-2、iNOS和IL-6 mRNA和蛋白的相对表达,并极显著(P<0.01)抑制NF-κB p65信号通路的磷酸化。结论:大蒜素能显著抑制LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的炎症反应,其机制可能与抑制NF-κB信号通路激活有关。     

蜂王浆对雌性大鼠生长发育的影响

目的：探讨高剂量蜂王浆对雌性大鼠生长发育的影响。方法：实验组大鼠按3 g/（200 g·d）（以体质量计,下同）灌胃新鲜的蜂王浆溶液,对照组按3 mL/（200 g·d）灌胃生理盐水,4 周后,停止灌胃,继续饲养2 周。每两周解剖一批大鼠,称质量计算心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、子宫、卵巢脏器系数,用放射免疫技术检测血清雌二醇（estradiol,E2）、促卵泡素（follicle stimulating hormone,FSH）、促黄体素（luteinizing hormone,LH）、孕激素（progestrone,P）含量,实时定量聚合酶链式反应（real-timepolymerase chain reaction,real-time PCR）检测卵巢和子宫中雌激素受体α（estrogen receptor α,ERα）、雌激素受体β（estrogen receptor β,ERβ）、促卵泡素受体（follicle stimulating hormone receptor,FSHR）、促黄体素受体（luteinizing hormone recepter,LHR）、孕激素受体（progestrone receptor,PR）mRNA表达量。结果：灌胃2 周,实验组大鼠体质量、主要脏器系数、血清主要性激素含量及其卵巢和子宫中受体表达量与对照组相比均无显著差异;灌胃4 周,实验组大鼠体质量显著低于对照组,实验组血清E2显著高于对照组,实验组卵巢PR mRNA表达量显著高于对照组,实验组子宫中ERα、ERβ、PR mRNA表达量显著高于对照组。实验组与对照组脏器系数无显著差异;停止灌胃2 周后,实验组大鼠体质量、主要脏器系数、血清主要性激素含量与对照组相比均无显著差异,实验组卵巢中FSHR、ERβ、PR mRNA表达量显著高于对照组,实验组子宫中ERα、ERβ、FSHR和PR mRNA表达量显著高于对照组。结论：高剂量的蜂王浆在一定程度上影响雌性大鼠的生长发育。     

蓝莓酒渣、果、酒中花色苷成分鉴定及酒渣与果中花色苷抗氧化活性比较

采用XAD-7HP大孔树脂对蓝莓果及蓝莓酒渣花色苷进行纯化,用固相微萃取小柱对蓝莓酒花色苷进行纯化浓缩。通过高效液相色谱-二极管阵列-电喷雾-串联质谱法鉴定了蓝莓果、酒渣、酒中花色苷的组成,并对蓝莓果和蓝莓酒渣花色苷的抗氧化性进行了评价。结果表明：通过XAD-7HP大孔树脂纯化所得的蓝莓果、蓝莓酒渣及利用固相微萃取小柱纯化所得的蓝莓酒中花色苷含量分别为（210.52±5.74）、（151.12±0.88）、（8.93±0.14）mg/g。蓝莓果中鉴定出11 种花色苷;蓝莓酒渣中鉴定出12 种花色苷,其中包括3 种酰化花色苷;蓝莓酒中鉴定出9 种花色苷,其中包含1 种酰化花色苷。蓝莓果和蓝莓酒渣花色苷抗氧化性实验结果表明,蓝莓果和蓝莓酒渣花色苷清除2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐自由基IC50值分别为（1.43±0.02）、（1.19±0.03）μg/mL,清除1,1-二苯基-2-苦基肼自由基IC50值分别为（3.28±0.03）、（2.41±0.01）μg/mL;蓝莓果和蓝莓酒渣花色苷清除自由基能力及还原力均显著优于VC,蓝莓酒渣花色苷抗氧化性显著强于蓝莓果花色苷。     

藤黄果提取物对雄性大鼠脂代谢的影响及降脂机理

以雄性大鼠为研究对象,探讨日粮中添加不同剂量的藤黄果提取物对大鼠脂代谢常规生化指标及相关基因表达的影响。结果表明：日粮中添加不同剂量的藤黄果提取物均可显著降低大鼠血清中甘油三酯的含量（P＜0.05）,高剂量藤黄果提取物则可显著降低肝脏组织中甘油三酯的含量（P＜0.05）;不同剂量藤黄果提取物处理对血清和肝脏组织中总胆固醇含量均无显著影响（P＞0.05）。脂肪代谢相关基因分析结果表明：高剂量藤黄果提取物处理可显著抑制SREBP1c（P＜0.01）和ACL（P＜0.05）基因表达水平,同时显著提高ACO和ATGL基因表达水平（P＜0.05）;MCD和PPARα基因表达水平在中剂量（P＜0.05）和高剂量（P＜0.01）藤黄果提取物处理组显著高于对照组;高剂量藤黄果提取物处理可显著促进AMPKα1和AdipoR-1基因表达水平（P＜0.05）,但对脂联素基因表达水平没有影响。以上结果提示,藤黄果提取物处理可通过激活Adipo-AMPK信号通路,进而抑制脂肪酸合成途径中的关键因子、增强脂肪酸氧化途径中的关键因子基因的表达,最终降低雄性大鼠体内脂肪的沉积。