胃蛋白酶中性蛋白酶水解酪蛋白的研究

本实验主要研究双蛋白酶(胃蛋白酶-中性蛋白酶)催化酪蛋白水解的反应过程。实验中首先设计正交试验确定了中性蛋白酶和胃蛋白酶各自单独水解酪蛋白的最佳反应条件,分别为酶浓度0.6%、温度55℃、pH 8.0、底物浓度2%和酶浓度1.5%、温度55℃、pH 1.6、底物浓度10%。在此基础上以双蛋白酶作为催化剂水解酪蛋白的反应过程进行研究,并利用层析分离技术和液相色谱初步验证了水解产物中含有β-啡肽-7等多肽类物质。     

脱脂蛋黄蛋白粉酶水解实验研究

蛋黄蛋白粉是提取药用卵磷脂生产的副产物,用酶解方法将蛋黄蛋白转化为氨基酸或寡肽是回收利用脱脂蛋黄蛋白粉的重要途径之一.从研究水解反应入手,通过单因素试验和正交优化试验研究胃蛋白酶的最佳水解条件,考察了底物浓度、水解时间、反应温度、pH、酶浓度对脱脂蛋黄蛋白粉水解度的影响,然后根据正交试验结果对胃蛋白酶胰蛋白酶组合水解进行研究.研究结果表明,胃蛋白酶水解的最佳工艺条件是:温度为38 ℃,pH为2.0,底物浓度为5％,酶浓度为2％,水解时间为4h,此条件下水解度为15.76％.胃蛋白酶-胰蛋白酶组合酶水解的最佳工艺条件是:先加胃蛋白酶水解4h,而后调节pH为7.5,温度55℃,再加入浓度为0.5％的胰蛋白酶水解4h,此时水解度高达20.41％,明显高于胃蛋白酶单酶水解.     

双酶水解乳清蛋白ACE抑制肽的制备工艺优化

以乳清蛋白为原料,采用胃蛋白酶和胰蛋白酶双酶先后水解乳清蛋白,通过单因素试验和正交试验优化胃蛋白酶和胰蛋白酶水解乳清蛋白制备血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的工艺,将水解物以3 kDa超滤膜过滤,研究表明,胃蛋白酶水解乳清蛋白最佳酶解工艺条件为水解温度37℃、底物质量浓度6 g/100 mL、酶与底物比3 728 U/g,此时乳清蛋白ACE抑制率为86%;胰蛋白酶水解乳清蛋白最佳酶解条件为温度55℃、底物质量浓度6 g/100 mL、酶与底物比3 480 U/g,此时ACE抑制率为72%。利用超滤离心管获得分子量小于3 kDa的乳清蛋白ACE抑制率96%。     

螺旋藻蛋白水解产物对ACE抑制活性的研究

采用胃蛋白酶和胰蛋白酶水解螺旋藻藻胆蛋白制备ACE 抑制肽,通过体外实验测定其ACE 抑制率,以ACE 抑制率为指标确定两种蛋白酶的水解条件。结果表明：胃蛋白酶水解条件为：水解温度37℃,酶与底物比1:50,pH3.0,底物质量分数5%,水解产物的ACE 抑制率为82.16%,其IC50 值为0.104mg/ml;胰蛋白酶水解条件为：水解温度42℃,酶与底物1:50,pH8.0,底物质量分数6%,水解产物的ACE 抑制率为93.54%,其IC50值为0.017mg/ml。此外,胃蛋白酶水解产物再用胰蛋白酶水解,其产物的IC50 值为0.087mg/ml。     

东海海参胶原蛋白酶解工艺研究

主要研究从东海海参中提取胶原蛋白的工艺以及胶原蛋白酶解的条件优化.以干东海海参为原料,采用酸碱溶液浸泡除去东海海参表面的钙质及非胶原物质,然后在酸性条件下用1%胃蛋白酶进行水解,提取胶原蛋白;分别探讨木瓜蛋白酶、风味蛋白酶和胰蛋白酶酶解胶原蛋白的最佳条件.结果表明:木瓜蛋白酶最适条件:底物含量30 g/g酶.温度40℃,pH 7.5;风味蛋白酶最适条件:底物含量40 g/g酶,温度40℃,pH 7.5;胰蛋白酶最适条件:底物含量40 g/g酶,温度55℃,pH 9.0.复合酶水解的最佳工艺:风味蛋白酶与木瓜蛋白酶的质量比1:1,木瓜蛋白酶与胰蛋白酶的质量比3:1,风味蛋白酶与胰蛋白酶的质量比1:1.     

酪蛋白抗菌肽的酶法制备

对胃蛋白酶水解酪蛋白制备酪蛋白抗菌肽进行研究.结果表明:酪蛋白水解物中,分子量3386 Da的组分具有最强的抑菌活性和良好的热稳定性,胃蛋白酶水解酪蛋白释放抗菌肽的适宜条件为:干酪素浓度10 mg/mL、酶浓度2.0%、温度40 ℃、pH 1.5、水解时间3.5 h.     

鮰鱼皮明胶抗氧化肽的制备工艺研究

通过测定鮰鱼皮明胶蛋白酶解物对Fenton 体系产生的羟自由基的清除效果,筛选得出胰蛋白酶和胃蛋白酶酶解物具有较高的清除羟自由基(·OH)的活性;用正交试验L9(34)对胰蛋白酶的水解条件进行优化,确定最佳的水解条件为温度40℃、pH7.5、酶与底物质量浓度比(E/S)3.5%、底物质量浓度2.5g/100mL、酶解时间3h。此外,本研究还采用胰蛋白酶和胃蛋白酶进行了复合酶解试验,确定复合酶解的最佳水解条件为先用胰蛋白酶酶解3h,然后用胃蛋白酶酶解3h,此时得到的酶解液自由基清除率最高,达到47.38%。     

胃蛋白酶水解酪蛋白制备ACE抑制肽的条件

研究胃蛋白酶水解酪蛋白制备ACE 抑制肽的工艺条件。采用胃蛋白酶水解酪蛋白制备ACE 抑制肽,检测其水解产物的ACE 抑制率,以ACE 抑制率为指标,通过正交试验设计法,确定最终水解条件为水解温度37℃、pH3.0、酶与底物质量比1:100、底物质量分数7%,水解产物ACE 抑制率为92.5%,其IC50 值为0.24mg/mL。酪蛋白的水解度与ACE 抑制率之间并非简单的相关性。     

消化道酶连续水解制备苦荞球蛋白多肽及其抗氧化活性研究

采用胃蛋白酶、胰蛋白酶对苦荞球蛋白进行连续水解,以水解度(DH%)为指标,采用单因素分析底物浓度、酶底比、pH值、水解时间对苦荞球蛋白的酶解效果,并通过正交实验对胃-胰蛋白酶连续作用的酶解工艺进行优化;检测酶解产物的体外抗氧化活性。结果表明:苦荞球蛋白经胃蛋白酶酶解的最佳条件为:底物浓度30 g/L、酶底比为10%、pH值为2.0、反应时间为2.0 h;胰蛋白酶酶解的最佳条件为:底物浓度30 g/L、酶底比为5%、pH值为8、反应时间为2.5 h;胃-胰蛋白酶连续酶解最佳条件:经胃蛋白酶先水解1 h后再继续用胰蛋白酶水解1.5h,水解度为25.18%。和苦荞球蛋白相比,苦荞球蛋白酶解物的抗超氧阴离子能力及羟自由基清除能力均增强(p0.05)。     

反应条件对酪蛋白水解度的影响

通过单因素实验和正交实验研究了用胰蛋白酶水解牛乳酪蛋白的工艺条件。研究结果表明：胰蛋白酶水解酪蛋白的最佳工艺条件是：pH7．5，温度60℃。底物浓度5％，酶添加量62．44U／g，水解时间140mino在此条件下酪蛋白的水解度达到16．8％。