检测伐地那非的单克隆抗体的制备方法

为了能够获得检测伐地那非的单克隆抗体,采用戊二醛作为连接剂,将伐地那非连接到载体蛋白上,使伐地那非药效必需基团暴露在人工抗原表面作为主要抗原决定簇。经条件优化,偶联比为6.8:1 的抗原免疫小鼠后产生的抗体滴度最高。通过杂交瘤技术获得了4 株能够同时识别伐地那非及其类似物Piperidenafil 的单克隆抗体。     

同时检测伐地那非及其类似物的免疫学方法

伐地那非是用于治疗阳痿的磷酸二酯酶(phosphodiesterase type-5,PDE-5)抑制剂药物。违法添加到保健品和中成药的伐地那非及其结构类似物对公众健康构成了威胁。单克隆抗体4B9被鉴别为能够同时检测伐地那非及其类似物。以这株抗体建立的间接竞争ELISA方法,对伐地那非的检测限为5.0 ng/mL,线性范围为5.0~40 ng/mL(R2=0.952),IC50值为18.2 ng/mL。对20个中成药进行检测没有发现假阳性,伐地那非最低检出浓度为0.08 mg/g;添加回收率76%~116%,批内差异为9.7%~16.2%。     

高效液相色谱/质谱联用测定保健食品中的伐地那非

为测定保健食品中伐地那非，建立了高效液相色谱质谱联用（HPLC—ES／MS）的测定方法。该方法以紫外定量，质谱定性。色谱条件为RP—C18色谱柱，流动相：0．2％甲酸水溶液＋乙腈=65＋35（体积分数）；流速1ml／min；进样量5μl；检测波长254nm。质谱采用电喷雾正离子模式（ESI＋），扫描范围为：200-700（m/z）。伐地那非在3．6—450μg/ml范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系，定量检出限为18ng，最低检出限为0．9ng（S/N=6）。本方法流动相简单，分析时间短且试样预处理简单，灵敏度高，借助质谱的定性能力，可大大提高方法可靠性和抗干扰能力，能准确快速地测定保健食品中的伐地那非。     

QuEChERS/超高效液相色谱-串联质谱法测定大黄鱼中非法染料硫代黄素

建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定大黄鱼中硫代黄素残留的分析方法.样品中的硫代黄素经乙腈-水溶液提取,QuEChERS方法净化,C18色谱柱分离,以0.1％(体积分数)甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,三重四极杆质谱电喷雾多反应监测模式检测,外标法定量.结果表明,硫代黄素为0.5～50.0 ng/mL时线性关系良...     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定保健品中三种违禁成分

建立固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱/质谱法(SPE-UPLC-MS/MS)测定保健品中伐地那非、西地那非、他达那非的分析方法。试样经甲醇或盐酸溶液提取,HLB固相萃取柱净化后,以乙腈和0.1%甲酸水溶液作为流动相,C18色谱柱分离,采用电喷雾离子源,正离子扫描多反应监测(MRM)模式进行检测。伐地那非、西地那非、他达那非在10~200μg/L浓度范围内呈良好线性关系,相关系数(r2)均大于0.99。空白样品加标回收率均大于75%,相对标准偏差小于8%。胶囊样品中伐地那非、西地那非、他达那非的方法检出限分别为10μg/kg、10μg/kg、20μg/kg;定量限分别为40μg/kg、40μg/kg、80μg/kg。口服液中分别为3μg/L、3μg/L、6μg/L,定量限分别为10μg/L、10μg/L、20μg/L。研究了基质效应的影响,样品基质对伐地那非、西地那非、他达那非的响应表现为抑制作用,伐地那非受到抑制作用最明显。     

高效液相色谱法快速测定大黄鱼中非法染料硫代黄素

试验建立高效液相色法快速准确测定大黄鱼中非法染料硫代黄素的分析方法.样品经乙腈-水溶剂提取,乙腈饱和正己烷除脂,XBridge C18色谱柱分离,以甲醇-0.02％甲酸水为流动相梯度洗脱,二极管阵列检测器检测,外标法定量.对硫代黄素的稳定性进行系统性考察,同时分别考察不同提取溶剂、净化方式等对硫代黄素提取效率的影响.结...     

高效液相色谱-质谱联用法快速检测中成药和保健食品中非法添加的12种减肥类药物

目的建立高效液相色谱-离子阱质谱联用法测定保健食品中非法添加的12种化学减肥药物(去甲伪麻黄碱、伪麻黄碱、甲基麻黄碱、咖啡因、安非他明、甲基安非他明、氯卡色林、芬氟拉明、酚酞、比沙可啶、氟西汀、布美他尼)的分析方法。方法采用资生堂CAPCELL-PAK C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm, 5μm),梯度洗脱:流动相A为含0.1%冰乙酸的0.02 mol/L乙酸铵溶液,流动相B为甲醇,流速:0.5 mL/min;扫描方式为正离子扫描;通过与对照品色谱图和质谱图的对比,对样品中非法添加的化学药物进行定性鉴别。结果本法检测上述12种化学物质,各化合物色谱峰之间分离度良好,方法的检出限为0.2～0.5 ng/mL。33批样品中,2批检测出酚酞。结论该方法灵敏、选择性强、快速,可用于中药材和保健食品中非法添加的减肥化学药品的定性检测。     

酶联免疫法与液相质谱联用法检测牛乳中三聚氰胺的比较

对牛乳中三聚氰胺含量的2种检测方法进行了比较,结果表明,酶免疫法灵敏度高,检测时间短,特异性强,操作方便,适合初筛。液相质谱联用法准确,回收率平均值在80％-110％之间,适合确证、定量。     

高效液相色谱-电喷雾质谱联用法检测大豆异黄酮和皂苷

应用高效液相色谱 电喷雾质谱联用法 ,直接对大豆胚芽的 70 %乙醇室温提取液进行检测 .根据各色谱峰的质谱特征 ,在室温提取液中鉴定出 9种异黄酮 ,7种A组皂苷 ,4种B组皂苷和2种E组皂苷 .结果证明对于复杂天然产物的定性定量分析 ,高效液相色谱 电喷雾质谱 (HPLC/ESI MS)联用分析法是一种方便快捷有效的方法 .     

QuEChERS-高效液相色谱-串联质谱法检测蔬菜中二硫代氨基甲酸酯(盐)残留量

文章建立了柱前衍生结合QuEChERS技术测定蔬菜中二硫代氨基甲酸酯(盐)类(Dithiocarbamates, DTCs)农药残留量的分析方法。蔬菜样品中的二硫代氨基甲酸酯(盐)类农药在碱性乙二胺四乙酸二钠溶液中转化为水溶性钠盐,经碘甲烷衍生后用QuEChERS技术提取和净化,以0.05%甲酸水溶液-乙腈作为流动相在C₁₈色谱柱上梯度洗脱与分离,在ESI⁺模式下采用多反应监测(Multiple reaction monitoring,MRM)测定,基质匹配标准曲线外标法定量。结果表明,二硫代氨基甲酸酯(盐)类农药在2.0～500μg/L之间具有良好的线性关系,相关系数均大于0.999。在普通白菜、茄子、黄瓜、豇豆、胡萝卜、韭菜6种不同类别的蔬菜中添加不同水平二硫代氨基甲酸酯(盐)类农药时,回收率范围在79.6%～109.5%,相对标准偏差为0.7%～10.9%。方法的检出限(以CS₂计)为0.3～1.1μg/kg,定量限(以CS₂计)为1.2～2.8μg/kg。该方法简便、快速、准确,可用于蔬菜中...     

五味子中非法添加苋菜红、日落黄、亮蓝的检测

目的建立检测五味子中非法添加色素苋菜红、日落黄、亮蓝的方法。方法采用高效液相色谱法-二极管阵列检测器(HPLC-PDA)法初步鉴定五味子中非法添加色素苋菜红、日落黄、亮蓝,并测定3种色素的含量。结果苋菜红、日落黄、亮蓝的最低检出限为2.0~5.0 ng,线性范围为0.025~0.75μg,加样回收率为94.43%~100.58%,相对标准偏差(RSD)均小于2.0%。结论此法简单、准确,可作为检测五味子中非法添加色素苋菜红、日落黄、亮蓝的有效方法。     

HPLC测定小米中非法添加姜黄素及不确定度分析

采用高效液相色谱法(HPLC)对小米中非法染色姜黄素进行定性定量测定,并对其不确定度进行分析。以乙腈-4%冰乙酸(45+55)为流动相,流速1.0 mL/min,经C18柱分析,检测波长425 nm。采用外标法定量,姜黄素在0.585μg/mL~4.88μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r~2=0.999 9,平均回收率92%,检出限为0.08 mg/kg,整个试验的合成不确定度为1.937%,扩展不确定度为X=(7.15±0.29)mg/kg;k=2。本方法操作简单,重复性好,检出限低,可用于小米中姜黄素非法染色的测定。     

高效液相色谱串联质谱法测定红糖中5-羟甲基糠醛

建立了红糖中5-羟甲基糠醛的高效液相色谱串联质谱检测方法.红糖样品经甲醇-水(V/V=5/95)充分溶解提取,经HLB柱富集净化,氮吹干洗脱液,用乙腈-水(V/V=1/9)复溶,供高效液相色谱串联质谱仪检测.以甲醇和水为流动相梯度洗脱,用Phenomenex Luma Omega C18柱(1.6μm,100 mm×2...     

高效液相色谱-串联质谱检测保健酒中非法添加物艾地那非

目的：采用高效液相色谱-串联质谱（high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS）法,建立保健酒中非法添加物艾地那非的检测方法。方法：使用Agilent RRDH Eclipse-plus C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8 μm）,以0.1%甲酸-乙腈溶液为流动相A、0.1%乙酸-20 mmol/L乙酸铵溶液为流动相B进行梯度洗脱。通过HPLC-MS/MS系统中全扫描模式对艾地那非进行定性分析,多反应监测模式对艾地那非进行定量分析。结果：该方法线性r2大于0.99,精密度相对标准偏差小于3%,不同质量浓度样品平均回收率为97.31%～100.66%,检出限为0.6 ng/mL,定量限为1.6 ng/mL。结论：此方法测定准确、灵敏度高、分离度高,可用于保健酒中非法添加物艾地那非的筛选和检测。     

HPLC-MS/MS法测定玩具中V6阻燃剂

建立了玩具中V6阻燃剂的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）测定方法。该方法以甲醇为提取溶剂进行超声提取,提取液经净化后进行HPLC-MS/MS测定,外标法定量。采用阳性样品,对提取方式、提取溶剂等前处理条件进行选择优化。试验结果表明：V6在5～800μg/L质量浓度范围内线性相关系数0.9999,线性关系良好;在本方法的试验条件下,检出限为0.04 mg/kg,回收率在95%～105%范围内,相对标准偏差在1%～3%之间。该方法可用于玩具中V6阻燃剂的测定。     

液相色谱-质谱联用测定大蒜中的蒜氨酸

介绍了液相色谱-质谱测定大蒜中蒜氨酸的方法.最佳工作条件下,该方法的线性范围为10.0～320.0ng/mL,加标回收率为94.0%～99.1%,且精密度、准确度较好,可满足大蒜中蒜氨酸的检测要求.     

脱脂大豆中B组大豆皂甙Ⅳ的HPLC-MS检测

采用乙醇浸提、正丁醇萃取、丙酮沉淀的方法从脱脂大豆中提取大豆皂甙,并利用树脂柱层析分离得到B组大豆皂甙,进而通过HPLC-MS法对B组大豆皂甙Ⅳ进行了检测。     

禽畜肉中氯霉素残留量的液质联用分析方法

研究一种针对禽畜肉中氯霉素残留量的液质联用分析方法。采用乙酸乙酯萃取样品中的氯霉素,氮吹后用水溶解样品残渣,然后用正己烷除去样品溶液中的脂肪,对样品中的目标物进行净化前处理。以乙腈- 体积分数0.1%醋酸溶液作流动相,C18色谱柱对食品中的氯霉素残留进行分离,然后用电喷雾质谱负离子选择离子模式[ESI(-)-SIM]对氯霉素进行检测。本方法缩短了色谱分离时间,提高了检测灵敏度和分析结果可靠性,具有准确、快速以及灵敏度高的特点,能够适应大规模样品的快速分析要求。     

高效液相色谱—质谱法测定对虾组织中磺胺类药物残留

利用高效液相色谱-质谱联用技术,建立了对虾组织中磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲氧嘧啶、磺胺喹恶啉残留的分析方法。样品加入无水硫酸钠和乙腈后,进行匀质和提取,再用乙腈饱和的正己烷脱脂净化。通过优化色谱条件,以选择离子方式进行定量。选择离子分别为m/z 300.9,280.8,278.8,250.8。磺胺检测的线性范围是0.05～0.50mg/Kg,检测限为5μg/Kg,回收率为74.2～99.8%,RSD小于6.1%。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定保健食品中78种非法添加化学药物

建立了超高效液相色谱-串联质谱法快速筛查减肥、抗疲劳和增强免疫力类保健食品中非法添加78种化学药物的方法。保健食品样品经甲醇溶剂提取、QuEChERS净化,试样以C18柱分离,多反应监测（MRM）模式进行定量与定性分析,采用外标法定量。采用ACQUITY UPLC HSS T3柱（2.1×100 mm,1.7 μm）进行分离,以乙腈和乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）作为流动相,进行梯度洗脱,质谱采用正离子和负离子同时扫描分析。在优化的色谱、质谱条件下,78种化学药物能够得到较好分离,在线性范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9991,检出限（LOQ）为0.5 μg/kg~420 μg/kg。各组分在三个不同加标水平下平均回收率为59.9%~120.7%,相对标准偏差（RSD）为1.3%~16.2%。运用本方法对57批次保健食品进行快速筛查,检出41批次样品含有一种或多种非法添加药物,被检出的药物为西布曲明、苄基西布曲明、氯代西布曲明、酚酞、伪麻黄碱、麻黄碱、二甲双胍、咖啡因、茶碱、番泻苷A、番泻苷B、呋塞米、大黄素和西地那非。本方法样品处理过程简单,分析时间短,准确可靠,灵敏度高,适用于保健食品中非法添加化学药物的定性与定量检测及快速筛查。