鼠妇粉酶解最佳用酶的初步筛选

用胰蛋白酶、胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶四种酶对鼠妇粉进行酶解并选出最佳用酶。利用四种酶分别酶解鼠妇粉,通过观察乳腺癌MCF-7细胞的抑制率以及蛋白质的水解度,作为实验评价指标,综合评价四种酶对于鼠妇粉的酶解效果,最终甄选出最佳酶解用酶。实验测得胃蛋白酶酶解液水解度为19.36%,胰凝乳蛋白酶酶解液水解度19.97%,胰蛋白酶酶解液水解度为34.70%,弹性蛋白酶水解度分别为34.90%。体外抗肿瘤试验表明,在浓度为0~2 mg·mL~(-1)范围内,胰蛋白酶酶解液对乳腺癌MCF-7细胞抑制效果最佳,胃蛋白酶酶解液抑制效果更低,未酶解的抑制率最低,几乎无效。当浓度低于0.7 mg·mL~(-1)时,弹性蛋白酶水解提取液抑制率高于胰凝乳蛋白酶水解提取液的抑制率,当浓度在0.7~2 mg·mL~(-1)时,两种酶的抑制作用恰好相反。鼠妇粉酶解工艺最佳用酶为胰蛋白酶,胃蛋白酶效果最差,弹性蛋白酶和胰凝乳蛋白酶效果介于二者之间。     

向日葵茎髓提取物的抑菌活性及机制

以向日葵茎髓为原料,制得3种不同极性向日葵茎髓提取物。采用琼脂扩散法测定3种不同极性向日葵茎髓提取物对4种受试菌的抑菌活性;并以其中的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为研究对象,探讨了乙酸乙酯萃取部位(EE)的抑菌机制。结果显示:不同极性萃取部位对4种受试菌均有一定抑制作用。其中,EE处理金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最低抑菌质量浓度(MIC)均为0.78 g/L,半数抑制质量浓度(IC50)分别为(1.11?0.01)和(1.59?0.03)g/L;抑菌作用与其总酚、总黄酮含量呈显著正相关性(P0.05)。通过SEM分析发现,EE处理引起菌体形态变化,破坏菌体的细胞膜结构;EE可增加金黄色葡萄球菌和大肠杆菌细胞膜结构的通透性,使菌体内的电解质、蛋白质、碱性磷酸酶向胞外泄露;应用4?,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色和荧光检测发现,EE能干扰细菌遗传物质(DNA)的复制,最终抑制受试菌增殖。     

荞麦七提取物的体外抑菌活性研究

以铜绿假单胞菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌为受试菌,通过最小抑菌浓度测定、抑菌圈的判断、生长曲线的绘制及菌液电导率的测定等方法,研究了荞麦七的4种提取物(水提物、蒽醌、鞣质、黄酮)的体外抑菌活性。结果表明:荞麦七水提物对枯草芽孢杆菌及铜绿假单胞菌抑制作用较强;荞麦七蒽醌对金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌抑制作用较强;荞麦七鞣质对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌抑制作用较强;荞麦七黄酮对大肠杆菌抑制作用最强。     

半枫荷叶总多酚提取工艺优化及抗菌活性研究

以半枫荷叶为原料,对半枫荷叶总多酚的最佳提取工艺以及抗菌的活性进行研究。通过单因素试验和正交试验优化半枫荷叶总多酚的热回流提取工艺。采用牛津杯法和试管二倍稀释法研究半枫荷叶总多酚对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌活性。结果表明最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数为70%,料液比为80 mL·g~(-1),提取时间60 min,提取温度80℃;在最优条件下提取率为(4.07±0.0149)%,总多酚对金黄色葡萄球菌的抑菌圈(IZ)为(7.25±0.433) mm,最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)均为5.00 mg·mL~(-1)。但对大肠杆菌的抑制效果不明显。研究结果表明,半枫荷叶总多酚热回流提取工艺稳定,对金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用,为开发利用半枫荷叶提供理论依据。     

60Co-γ射线辐照对人参药渣膜剂理化性质及抑菌活性的影响

考察了~(60)Co-γ射线辐照处理对提取皂苷后的人参药渣膜剂理化性质和抑菌活性的影响。采用~(60)Co-γ射线辐照处理人参药渣,通过扫描电镜观察药渣形貌;通过在药渣中加入聚乙烯醇、白芨胶、卡波姆等制备膜剂,测定其透气率、密度、吸水力、抗撕强度、pH值等理化性质;采用滤纸片法测定膜剂对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌活性。结果表明,辐照处理后,药渣颗粒变小,膜剂的透气率、吸水力和抗撕强度均有一定程度提高,膜剂对枯草芽孢杆菌和表皮葡萄球菌的抑菌活性较高,最低抑菌浓度(MIC)分别为10 mg·mL~(-1)和5 mg·mL~(-1)。通过对细菌形态观察,推测辐照人参药渣膜剂的抑菌机理可能是辐照破坏了细菌的细胞壁和细胞膜,导致细胞通透性增加,进而使细胞内容物外泄,抑菌活性提高。     

曼陀罗总生物碱抑菌活性的初步研究

采用MIC和纸片法考查了曼陀罗提取物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌的抑菌性能。结果表明,曼陀罗对4种受试菌株都有抑菌活性;100℃时,水提物对大肠杆菌的抑菌效果最好,最大抑菌圈为14.72 mm;pH值为8时,曼陀罗水提取对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌的抑菌性最好,最大抑菌圈分别为15.46、13.47、12.26和11.22 mm。曼陀罗水提取对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为8、8、4、6 mg/m L。     

铜(Ⅱ)-没食子酸配合物的抑菌活性研究

本文采用试管法和滴板法研究铜-没食子酸配合物的对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的抑菌作用。结果表明,铜(Ⅱ)-没食子酸配合物对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌均有抑制作用,且对前者抑制作用比后者强;对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为0.0313 mg/mL,最小杀菌浓度为0.250 mg/mL;对白色念珠菌的最小抑菌浓度为1.00 mg/mL,最小杀菌浓度为2.00 mg/mL。     

不同酶对巫山淫羊藿中淫羊藿苷和朝藿定C含量的影响及抑菌活性研究

在巫山淫羊藿提取物中分别加入α-淀粉酶、果胶酶、纤维素酶进行酶解,经大孔树脂纯化后采用HPLC法测定巫山淫羊藿中淫羊藿苷和朝藿定C含量;并初步研究了巫山淫羊藿提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌活性.结果表明,巫山淫羊藿提取物在经过酶解和纯化后,淫羊藿苷和朝藿定C的含量均明显增加,其中果胶酶对两者含量的影响最大,巫山淫羊藿提取物在经过果胶酶酶解和大孔树脂纯化后,淫羊藿苷和朝藿定C的含量分别增至11.65％、31.79％;巫山淫羊藿提取物及果胶酶酶解物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有较好的抑菌效果,但未酶解的巫山淫羊藿提取物的抑菌活性优于酶解物和纯化物.     

多棘海盘车多肽的抑菌活性研究

采用木瓜蛋白酶酶解法制备多棘海盘车多肽,并对多肽分级纯化,获得不同分子量分布范围的样品Pe1、Pe3、Pe5、Pe8、Pr14。选取金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、大肠杆菌4种供试菌种采用滤纸片扩散法测定5种样品的抑菌活性,采用微量琼脂稀释法测定样品对每种供试菌种的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:Pe1、Pe3、Pe5、Pe8、Pr14对供试菌种均具有抑制作用,Pr14对金黄色葡萄球菌的抑菌活性表现最佳,最低抑菌浓度为0.156 mg/m L;Pe1对枯草芽孢杆菌和白色念珠菌抑菌活性表现最佳,最低抑菌浓度分别为0.312,0.625 mg/m L;Pe8对大肠杆菌抑菌活性表现最佳,最低抑菌浓度为0.625 mg/m L。     

多棘海盘车多肽的抑菌活性研究

采用木瓜蛋白酶酶解法制备多棘海盘车多肽,并对多肽分级纯化,获得不同分子量分布范围的样品Pe1、Pe3、Pe5、Pe8、Pr14。选取金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、大肠杆菌4种供试菌种采用滤纸片扩散法测定5种样品的抑菌活性,采用微量琼脂稀释法测定样品对每种供试菌种的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:Pe1、Pe3、Pe5、Pe8、Pr14对供试菌种均具有抑制作用,Pr14对金黄色葡萄球菌的抑菌活性表现最佳,最低抑菌浓度为0.156 mg/m L;Pe1对枯草芽孢杆菌和白色念珠菌抑菌活性表现最佳,最低抑菌浓度分别为0.312,0.625 mg/m L;Pe8对大肠杆菌抑菌活性表现最佳,最低抑菌浓度为0.625 mg/m L。     

不同产地黄芩体外抑菌作用研究

为考察不同产地黄芩提取物的体外抑菌效果差异。分别称取五个不同产地的黄芩粗粉10 g, 75%乙醇超声提取,浓缩成浸膏。分光光度法测定黄芩苷含量。管碟法测定黄芩提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,五个不同产地的黄芩提取物对三种菌均有显著的抑菌效果。河北、内蒙黄芩提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌抑菌效果最强,内蒙、甘肃黄芩提取物对白色念珠菌抑菌效果最强。     

高地芽胞杆菌CQC1抗菌肽抑制金黄色葡萄球菌的生物活性研究

高地芽胞杆菌CQC1是从车前草中分离获得的对金黄色葡萄球菌具有显著抑制作用的菌株。研究了菌株CQC1发酵液上清液中抗菌肽成分的最佳提取方式、抗菌效果及其稳定性;通过检测胞内大分子物质（核酸和蛋白质）释放量和β-半乳糖苷酶活力,考查抗菌肽类成分对金黄色葡萄球细胞膜通透性的影响来探究其抗菌机制。结果显示,通过不同方式提取的菌株CQC1抗菌肽类成分对金黄色葡萄球菌抑制效果存在差异性,其中正丁醇提取的抗菌肽类成分抗菌效果最好,抑菌圈直径为（28.6±0.2）mm;稳定性测试结果表明,正丁醇提取抗菌肽提取物经不同pH、温度和3种酶（胃蛋白酶、胰蛋白酶和蜗牛酶）处理后组间相比差异具有统计学意义（F分别为29.073,40.466,34.028,P<0.05）,121℃处理30 min活性仅降低了14.3%;抗菌肽类成分处理金黄色葡萄球菌后菌液中大分子物质释放量增加,β-半乳糖苷酶出现泄漏,表明抗菌类成分可能通过改变金黄色葡萄球菌细胞膜通透性增加而达到抑菌作用。综上所述,高地芽胞杆菌CQC1正丁醇提取的抗菌肽提取物对金黄色葡萄球菌具有明显的抑制活性,且较稳定,具有一定的市场开发潜力。     

阿尔泰金莲花提取物抑制变异链球菌乳酸脱氢酶活性及抗氧化活性研究

采用微量稀释法测定了阿尔泰金莲花提取物对变异链球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),研究了阿尔泰金莲花提取物对变异链球菌的抑制作用,考察了阿尔泰金莲花提取物对变异链球菌产酸及乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响,并通过测定阿尔泰金莲花提取物、牡荆素、荭草苷、抗坏血酸(VC)对DPPH自由基、ABTS自由基和·O~-_2的清除率来评价阿尔泰金莲花提取物的抗氧化活性。结果表明,阿尔泰金莲花提取物的MIC为12.5 mg·mL~(-1),MBC为25 mg·mL~(-1);阿尔泰金莲花提取物浓度越大,对变异链球菌的抑制作用就越强;当阿尔泰金莲花提取物浓度在1/8MIC～MIC范围内时,随着阿尔泰金莲花提取物浓度的增大,培养18 h后菌悬液的ΔpH值越小,LDH活性也越低,与空白对照组相比有显著性差异(P0.05);阿尔泰金莲花提取物对DPPH自由基、ABTS自由基和·O~-_2均具有一定的清除作用,且在一定浓度范围内存在量效关系。初步探讨其抑菌作用机制可能是,通过抑制LDH活性从而抑制变异链球菌产酸,影响其代谢及生长。     

桑叶乙醇提取物的体外抗氧化与抑菌活性

采用索氏提取法对干桑叶进行提取,得到乙醇提取物,并对提取物的组分以及体外抗氧化活性和抑菌活性进行了测定。研究结果表明：桑叶乙醇提取物中含有多种有机物,主要包括酯类(82.85%)、烷烃类(6.31%)、芳烃类(1.62%)和醇类(0.21%)。桑叶乙醇提取物总还原力与浓度有显著的线性关系;对DPPH自由基和OH自由基都有良好的清除能力,半数抑制浓度(IC₅₀)分别为73.07和104.52 mg/L。桑叶乙醇提取物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均具有一定的抑制作用,抑制效果为枯草芽孢杆菌＞金黄色葡萄球菌＞大肠杆菌,IC₅₀分别为4.824、6.806和14.382 g/L。桑叶乙醇提取物的抗氧化活性和抑菌活性随样品浓度的增大而增大。     

酶解法制备琼胶寡糖的抑菌性证明

利用产琼胶酶菌株ZQM2017(Vibrio sp.)发酵所得琼胶酶,在不同底物浓度、反应时间下,与底物琼胶反应制备琼胶寡糖,通过抑菌圈出现的频率验证其抑菌性并探究不同水解程度的琼胶寡糖抑菌性的差异。研究表明,琼胶寡糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的生长具有不同程度抑制作用;琼胶寡糖的含量随着底物浓度、反应时间的增加而增加,呈正相关关系,而其抑菌性与寡糖的含量没有直接关系,底物浓度对其有显著性影响,2 g/L的底物浓度抑菌性较强。     

丙酮提取菠萝皮抑菌物的条件研究

采用正交试验法研究丙酮提取菠萝皮抑菌物质的工艺条件。实验结果表明,提取物对大肠杆菌、黑曲霉、金黄色葡萄球菌具有明显的抑制作用,对桔青霉则无抑制作用。对大肠杆菌和黑曲霉的抑菌效果最佳的提取工艺条件为：料液比1∶30,丙酮浓度75%,提取时间40 min,提取温度70℃。对金黄色葡萄球菌最佳的提取工艺条件为：料液比1∶10,丙酮浓度65%,提取时间40 min,提取温度50℃。在优化条件下,菠萝皮的丙酮提取物对大肠杆菌、黑曲霉、金黄色葡萄球菌的MIC分别为60、100、250mg·m L^-1。     

对甲氧基肉桂酸乙酯的制备及其抑菌活性测定

采用水蒸气蒸馏法提取沙姜挥发油,然后以溶剂结晶法制得对甲氧基肉桂酸乙酯。通过气-质联用色谱法对其进行了结构鉴定,通过体外抑菌实验,利用纸片法和试管法分别测定了其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌和黑曲霉菌的抑菌活性和最低抑菌浓度(M IC)。结果表明,对甲氧基肉桂酸乙酯对这5种常见皮肤致病菌均有良好的抑菌活性,对绿脓杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉菌和白色念珠菌的最低抑菌浓度分别为0.625,1.25,2.5,2.5和10.0 mg/mL。     

新型吲哚类防污剂抑菌性能评价

对6种含TBG衍生结构的N-取代吲哚衍生物进行了抑菌活性检测。结果表明,各吲哚衍生物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌两种供试菌株均有一定的生长抑制作用,对金黄色葡萄球菌的作用明显优于对大肠杆菌的作用。其中ClG-BP抑菌效果最好,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌最小抑菌质量浓度分别为0.12 mg/mL、0.01 mg/mL。各化合物抑菌性能相对大小为:ClG-BP>ClG>BrG-BP>ClG-MP>BrG>BrG-MP。     

黄蜀葵花提取物中总黄酮与总多酚含量测定及体外抑菌与抗氧化活性研究

采用比色法测定了不同产地黄蜀葵花提取物(Abelmoschi corolla extracts, ACE)中的总黄酮和总多酚含量,通过琼脂打孔法和微量稀释法研究了ACE的体外抑菌活性,并通过DPPH法、ABTS法和FRAP法评价了ACE的抗氧化活性。结果表明：不同产地ACE中总黄酮和总多酚含量差别不大,安徽ACE中的总黄酮含量最高,为(4.68±0.37)mg·g^-1,陕西ACE中的总多酚含量最高,为(1.48±0.11) mg·g^-1;ACE具有一定的体外抑菌活性,能显著抑制变异链球菌的生长,且呈浓度依赖性,最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)分别为3 mg·mL^-1和6 mg·mL^-1;ACE具有一定的抗氧化活性,能够清除DPPH、ABTS等自由基,且在一定浓度范围内呈量效关系。     

家蝇抗菌肽抑菌活性及其稳定性研究

通过体外抑菌实验,采用纸片扩散法对家蝇抗菌肽的抑菌性进行定性研究。试验用菌有金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌和黑曲霉菌。在对家蝇抗菌肽抗菌谱研究的基础上,进一步用肉汤稀释法（试管法）定量测定其最低抑菌浓度（MIC）,并对其稳定性进行研究。结果表明,家蝇抗菌肽对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和大肠杆菌3种细菌有较好的抑制作用,而对白色念珠菌和黑曲霉没有明显的抑制作用,对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和大肠杆菌最低抑菌浓度（MIC）分别为0.156 mg/mL、0.312 5 mg/mL和6.25 mg/mL。另外,对其稳定性进行讨论,结果表明,家蝇抗菌肽的稳定性良好。