磁性固定化纤维素酶的制备及其磁响应性

本研究以磁性壳聚糖微球为载体,采用吸附法制备磁性固定化纤维素酶。以酶活力为考察指标,研究了不同工艺条件对制备固定化酶的影响,及其在外加磁场下的磁响应性的变化。实验结果表明,制备磁性固定化纤维素酶最适条件为:吸附时间10h,pH5.0,离子浓度0.05mol/L,酶用量为150mg。在外加磁场作用下,比较磁性固定化纤维素酶与游离纤维素酶酶活力的变化发现:当磁场强度<500mT与曝磁时间<60min时,游离纤维素酶的酶活随着磁场强度与曝磁时间的增加而增加,但超出此范围,酶活就明显下降;而当磁场强度<300mT与曝磁时间<60min时,磁性固定化纤维素酶酶活与游离纤维素酶的变化趋势相似。     

磁性Fe_3O_4/壳聚糖复合微球的制备及其对苹果汁有机酸的吸附

为分离苹果汁中的有机酸,采用反相悬浮交联法制备磁性Fe_3O_4/壳聚糖复合微球。利用扫描电子显微镜、激光粒度仪、X射线衍射仪、超导量子干涉磁测量系统等对复合微球进行表征。同时测定了特定磁场条件下复合微球在不同时间、不同pH值下的回收率以及对苹果汁中有机酸的重复吸附性能。结果表明:制备的微球呈规则球形,分散性良好,粒径范围22～158μm;Fe_3O_4纳米颗粒约占复合微球总质量的38.66%,壳聚糖包埋过程并没有改变Fe_3O_4的尖晶石结构;复合微球饱和磁化强度35.98 emu/g,磁场作用下2 min回收率可达99.99%以上;连续3次吸附苹果汁中有机酸,平衡吸附量仍可达到109.92 mg/g,有机酸回收率86.86%。综上,壳聚糖与Fe_3O_4纳米颗粒相结合制备的磁性Fe_3O_4/壳聚糖复合微球磁响应强、回收率高,对苹果汁中有机酸具有良好的吸附性能,环保高效,可反复使用。     

磁性壳聚糖微球吸附马铃薯淀粉废水中蛋白的应用研究

利用高分子絮凝结合磁分离技术对从马铃薯淀粉废水中回收蛋白进行初步研究。采用反向悬浮交联法制备得到磁性壳聚糖微球,用扫描电镜对其进行形貌观察,并研究了该微球对马铃薯淀粉废水中蛋白的吸附效果。结果表明:合成的磁性微球外表呈球形,粒径为20～50μm;当马铃薯淀粉废水中磁性壳聚糖用量为2mg/mL(磁性壳聚糖微球:马铃薯蛋白=4:1),吸附时间为30min,温度为45℃,pH为7·0时,吸附率最高,达到80%。该研究为马铃薯淀粉废水的综合处理开辟了新的途径。      

磁性壳聚糖微球吸附马铃薯淀粉废水中蛋白的应用研究

利用高分子絮凝结合磁分离技术对从马铃薯淀粉废水中回收蛋白进行初步研究。采用反向悬浮交联法制备得到磁性壳聚糖微球,用扫描电镜对其进行形貌观察,并研究了该微球对马铃薯淀粉废水中蛋白的吸附效果。结果表明:合成的磁性微球外表呈球形,粒径为20～50μm;当马铃薯淀粉废水中磁性壳聚糖用量为2mg/mL(磁性壳聚糖微球:马铃薯蛋白=4:1),吸附时间为30min,温度为45℃,pH为7·0时,吸附率最高,达到80%。该研究为马铃薯淀粉废水的综合处理开辟了新的途径。     

磁性壳聚糖微球固定化胃蛋白酶的研究

利用反相悬浮交联法制备壳聚糖微球,然后采用化学共转化法制备了磁性壳聚糖微球(magnetic chitosan microspheres,M-CS),并对胃蛋白酶进行固定化研究。结果表明,制备的M-CS呈规则圆球形,有很好的磁响应性,并且在弱酸弱碱环境下能稳定保存。磁性壳聚糖微球对胃蛋白酶的吸附性实验表明,磁性壳聚糖微球能吸附胃蛋白酶,可是吸附胃蛋白酶的量受到载体与酶比例、溶液的离子浓度、溶液的pH值影响很大。胃蛋白酶动力学性质研究表明,相对于游离的胃蛋白酶,固定化后的酶的最适温度有所升高,最适温度在60℃、酸碱稳定性略有改善,最适pH4.0,故固定化后的酶的热稳定性和酸碱稳定性都得到明显改善。     

磁性壳聚糖微球对大豆乳清废水中蛋白质的吸附作用

采用磁性壳聚糖微球吸附的方法吸附大豆乳清废水中蛋白质。实验结果表明,当磁性壳聚糖微球投入量为25g/L,接触时间为10min,温度为30℃,pH值5.0的条件下能有效吸附大豆乳清废水中蛋白质,吸附大豆乳清废水中蛋白质去除率最高达95.6%。     

牛血清蛋白磁性壳聚糖微球谷氨酸改性吸附

研究谷氨酸改性磁性壳聚糖微球对于牛血清白蛋白的吸附。采用反相悬浮法制备谷氨酸改性磁性壳聚糖微球(GA-CMNs),利用红外光谱仪检测壳聚糖连接谷氨酸效果、扫描电子显微镜(SEM)观察微球形貌、激光粒度仪检测微球粒径分布;考察不同pH值、NaCl质量分数、BSA质量浓度、吸附时间对谷氨酸改性磁性壳聚糖微球BSA吸附效果的影响,并对吸附行为进行吸附动力学和吸附热力学分析。结果表明:最佳吸附溶液pH值为5,BSA质量浓度、吸附时间与BSA吸附量呈正相关,而NaCl质量分数则相反;谷氨酸改性磁性壳聚糖微球对BSA吸附平衡过程符合动力学准二级方程模型和Langmuir吸附等温线模型,在BSA初始质量浓度为1 mg/mL时有最大平衡吸附值,为83.5 mg/g;经过5次3%NaCl溶液洗脱-吸附操作循环后,洗脱率仍高于90%。谷氨酸改性磁性壳聚糖微球对牛血清蛋白的吸附性能良好。     

磁性壳聚糖微球固定化黄嘌呤氧化酶及其酶学性质的研究

本文利用化学共沉淀法制备Fe_3O_4磁性颗粒,并以此为磁核通过乳化交联法制备磁性壳聚糖微球,以环氧氯丙烷对微球表面进行活化,用于黄嘌呤氧化酶的固定化研究。以微球表面的环氧基密度为活化指标,确定了活化过程的最适工艺条件:环氧氯丙烷体积分数为40%,Na BH4浓度为0.60 g/L,NaOH浓度为1.20 mol/L。对微球进行结构表征,结果表明:壳聚糖成功包裹了Fe_3O_4磁性粒子,且已活化微球的表面具有环氧基活性基团;Fe_3O_4磁性粒子、未活化和已活化磁性壳聚糖微球的中径分别为2.16、20.30和24.69μm。活化结束后,将黄嘌呤氧化酶固定在磁性微球上。以酶活为指标,确定最适固定化工艺为:时间1 h,温度30℃,pH8.0。对固定化黄嘌呤氧化酶的酶学性质研究,结果表明:酶的最适作用温度为48℃,最适作用pH为8.5,酶具有良好的热稳定性、pH稳定性及操作稳定性。     

果胶酶固定化的载体——磁性壳聚糖复合微球的制备与性能表征

通过化学共沉淀法合成纳米Fe_3O_4粒子,再以Fe_3O_4为磁核采用乳化交联法制备可固定果胶酶的载体——磁性壳聚糖复合微球。通过TEM、SEM、FT-IR等对微球的粒径、形貌、结构、粒径分布和磁响应性进行了表征。结果表明:制得的磁性壳聚糖微球的粒径在50nm左右,分布较窄,且呈规则的球形,红外光谱测定微球的特征官能团结构,表明已包覆了Fe_3O_4粒子;分光光度法表明磁性微球具有很强的磁响应性。     

Fe3O4-壳聚糖磁性微球的制备及对Cu2+的吸附性能

用壳聚糖包覆羧基化Fe3O4磁性纳米粒子制备了Fe3O4-壳聚糖磁性微球,分别用X-射线衍射、扫描电镜、热重分析等方法和手段对所制备的样品进行了结构表征.利用原子吸收光谱,探讨了时间、pH值、Cu2+浓度等对Fe3O4-壳聚糖磁性微球吸附溶液中Cu2+量的影响.结果表明:Fe3O4-壳聚糖磁性微球粒径分布较均匀,平均粒径约为110 nm;Fe3O4-壳聚糖磁性微球能够吸附Cu2+,最大吸附量可达21.3 mg/g.随着吸附剂用量的增加、温度的升高,单位吸附量减小,室温下吸附较佳;Cu2+初始浓度、pH对吸附的影响很大,Cu2+初始浓度在120 mg/L,5.0相似文献   

纳米磁性壳聚糖微球固定化Alcalase碱性蛋白酶的制备及酶学性质研究

以自制磁性壳聚糖微球作固定化酶载体,考察给酶量、pH、戊二醛浓度和交联时间对固定酶酶活和酶活回收率的影响,并研究固定化酶的酶学性质及其微观结构。结果表明:给酶量112 000 u/g载体,pH 8.5,戊二醛体积分数8%,交联时间11 h条件下酶活达最高(86 779±119.26)u/g,酶活回收率达(77.48±0.11)%。固定化酶和游离酶最适pH分别为11和10.5,最适温度皆为60℃,且固定酶pH和温度稳定性明显高于游离酶;重复使用5次固定酶酶活保持(80.89±0.20)%;由米氏常数可知固定酶具有更强的底物亲和力;电镜显示Fe3O4磁核和磁性壳聚糖微球皆为表面光滑球形的纳米粒子,高比表面积能提供更多酶结合位点;红外光谱证明Fe3O4已被壳聚糖包埋,振动样品磁强计检测固定化酶具有良好磁响应性。     

磁性壳聚糖固定化转谷氨酰胺酶的研究

本文研究了磁性壳聚糖固定化转谷氨酰胺酶的最佳条件及固定化酶的酶学性质.以Fe3O4为磁性内核,液体石蜡为分散介质,Span-80为乳化剂,采用反相悬浮包埋法制备了磁性壳聚糖微球,并对其形貌的进行观察,结果显示该载体呈规则的球状、表面平滑,平均粒径为5μm,利于磁性微球在反应体系中的分离和酶的固定.以此磁性壳聚糖微球为载...     

肝素-壳聚糖亲和层析纯化猪凝血酶研究

采用反相悬浮交联法制备壳聚糖球珠,壳聚糖球珠经过环氧氯丙烷活化并与肝素耦联制成亲和层析剂分离和纯化猪凝血酶。结果表明制备出几何形态、分散性、溶胀性均良好的壳聚糖球珠的最佳条件是:5%壳聚糖溶液112.5mL、液体石蜡75mL、乙酸乙酯15mL、甲醛10mL、戊二醛2mL、Span808滴、转速2500r/min。壳聚糖球珠用ddH2O溶胀24h,具有明显的多孔性。猪凝血酶活性检测结果表明肝素-壳聚糖亲和层析剂能够用于猪凝血酶的分离和纯化。此研究结果对于亲和层析剂的制备和猪凝血酶的分离和纯化具有一定的参考价值。      

"类乒乓球"状壳聚糖微球对Ag+吸附性能研究

以研究壳聚糖微球对Ag+的吸附性能为目的,采用原子吸收的方法考察不同条件下壳聚糖微球对Ag+的吸附关系.结果发现,pH=7,T=30℃,AgNO3的初始浓度为40 mg/L,壳聚糖微球质量为0.04 g时,60 min的吸附,其吸附率可以达到97.705%,80 mg/L的Ni2+,Cu2+,Pb2+,Zn2+,Cr3+,Al2+虽然可被壳聚糖微球吸附,但不干扰测定.     

免疫磁性壳聚糖微球的制备及对阪崎肠杆菌的分离效果

目的:制备用于特异性分离阪崎肠杆菌的免疫磁性壳聚糖微球以及对阪崎肠杆菌的捕获效果。方法:采用反向悬浮交联法制备磁性壳聚糖微球,并对微球的表面进行氨基化修饰,然后与阪崎肠杆菌多克隆抗体进行偶联,制备免疫磁性壳聚糖微球。优化磁性壳聚糖微球对阪崎肠杆菌多克隆抗体的偶联条件,包括偶联时间、磁性壳聚糖微球用量、偶联体系p H,对抗体的饱和偶联量。通过与显色培养基结合的方法研究免疫磁性壳聚糖微球对阪崎肠杆菌的捕获能力。结果:制备的磁性壳聚糖微球通过表面修饰能连接上大量的活性氨基,在p H 7.4的偶联体系中,10.0 min即可完成对阪崎肠杆菌多克隆抗体的偶联,0.01 g磁性壳聚糖微球对抗体的饱和偶联量为25~50μL。当阪崎肠杆菌浓度较低时,制备的免疫磁性壳聚糖微球对阪崎肠杆菌的捕获率达94.7%,对阪崎肠杆菌的灵敏度为5 cfu/m L。结论:获得阪崎肠杆菌免疫磁性壳聚糖微球,该微球是一种非常有潜力的快速富集、分离阪崎肠杆菌的有效方法。     

磁变性淀粉、多糖微球固定化酶技术

变性淀粉是天然增稠剂中发展活跃的品种,其中磁性淀粉微球是一类性能优良的磁变性淀粉,它以淀粉类物质为载体,包埋金属或金属氧化物,或者在磁流体上共价吸附或聚合淀粉类物质形成的具有磁性的功能高分子材料.以金属或金属氧化物为磁变性淀粉、多糖的核时,磁核通常是具有尖晶石铁氧体结构的过渡金属氧化物的晶体或结晶簇合物,如四氧化三铁、r-Fe2O3或过渡金属与铁的氧化物等.目前在固定化酶中使用磁核以四氧化三铁最为常见.且当磁性粒子晶体直径小于30nm时,则具有超顺磁性.磁性淀粉微球的直径一般在微米级或纳米级,因此其具有超顺磁性,在外加磁场的作用下快速分离,容易被磁力控制、定向、定位移动和测定,此外,还具有表面效应、体积效应、量子尺寸效应和功能基特性等纳米材料微粒子的特性,通过磁性淀粉微球表面的高分子壳层,可在其表面可引入一些功能基团(如-OH,-COOH,-NH2等),通过这些功能基可将一些生物活性物质(如核酸、酶等)修饰于磁性微粒表面,也可以偶联特异性生物大分子(如特异性配体、抗体、抗原等),作为一种新的变性淀粉材料,磁性淀粉材料不但具备无毒、材料来源广、价格低廉、制备方便、可生物降解等优点,而且还具有良好的生物相容性,因此其在磁性材料、生物工程和生物医药等领域展现了广泛的应用前景.文章着重介绍了磁性淀粉微球的性能及其在在固定化酶中使用等领域的应用前景.     

化学共转化法制备磁性壳聚糖微球及表征

对化学共转化法制备磁性壳聚糖微球的最佳条件进行了研究,并对其产物进行了性能表征。结果表明,适宜操作条件为:在壳聚糖微球中加入摩尔比为1:1的Fe2+和Fe3+的混合溶液,60℃下浸泡40min,然后加入2mol/L的NaOH溶液,60℃转化40min,所得的磁性壳聚糖微球外观为球形、颗粒大小均匀,具有强磁响应性。     

磁性壳聚糖微球固定化脂肪酶的研究

目的:制备具有高活性的固定化脂肪酶;方法:以磁性壳聚糖微为载体,用物理吸附法固定化脂肪酶,对影响固定化的各种因素进行考察,确定最优条件,并比较游离酶和固定化酶的pH和热稳定性,研究固定化酶的使用稳定性;结果:固定化的适宜条件为采用加酶量600 U/g,温度5℃.pH 7.0,固定时间2 h,固定化酶的pH和热稳定性都优于游离酶,固定化酶连续使用5次,其相对酶活仍为使用前的57.8%,具有较好的操作稳定性;结论:磁性壳聚糖微球是固定脂肪酶的良好载体.     

壳聚糖/明胶微球吸附脱色剂的制备

以壳聚糖和明胶为原料,戊二醛为交联剂,采用反相悬浮乳液聚合法制备壳聚糖/明胶微球,可作为染液废水吸附剂.扫描电镜显示,微球粒径均匀,平均约20 μm;红外光谱数据则证明壳聚糖、明胶与戊二醛之间发生了交联.复合微球对染液中酸性红337的吸附性能试验表明,当染料质量浓度0.5 g/L,复合微球质量浓度0.5 g/L时,吸附率可达到98%;复合微球吸附的最佳条件是:pH值2～3,吸附时间100 min,温度30℃.     

肝素-壳聚糖亲和层析纯化猪凝血酶研究

采用反相悬浮交联法制备壳聚糖球珠,壳聚糖球珠经过环氧氯丙烷活化并与肝素耦联制成亲和层析剂分离和纯化猪凝血酶.结果表明制备出几何形态、分散性、溶胀性均良好的壳聚糖球珠的最佳条件是:5％壳聚糖溶液112.5mL、液体石蜡75mL、乙酸乙酯15mL、甲醛10mL、戊二醛2mL、Span80 8滴、转速2500r/min.壳聚糖球珠用ddH2O溶胀24h,具有明显的多孔性.猪凝血酶活性检测结果表明肝素-壳聚糖亲和层析剂能够用于猪凝血酶的分离和纯化.此研究结果对于亲和层析剂的制备和猪凝血酶的分离和纯化具有一定的参考价值.