可发酵三七等中药材的食用菌种筛选和皂苷生物转化产物的分析

研究了保加利亚乳杆菌、凝结芽孢杆菌、鼠李糖乳杆菌和冠突散囊菌等食品工业中常用的微生物菌种对三七之类的中药原料的生物转化,利用HPLC分析了不同菌种直接发酵对人参皂苷组成的影响。通过不同微生物菌种的发酵,三七、人参和西洋参所含的Rb1、Re等常见人参皂苷会分别转化为Rh1、C-K和Rd等稀有人参皂苷,产物中没有检测到Rh2等人参皂苷,说明菌种产生的糖苷酶具有相当的专一性,为进一步对特殊目标皂苷的开发利用提供了基础。     

生物转化三七茎叶皂苷研究进展

三七茎叶资源丰富,研究发现三七茎叶皂苷是其防治疾病的主要生物活性物质,功效日益受到瞩目.近年来,随着生物技术的不断发展,生物技术在中药资源的加工、药理研究以及分离纯化方面取得了突破性进展.本文总结了近年来三七茎叶皂苷生物转化技术的研究成果,为综合利用三七茎叶及其特色食品、保健食品和新药开发等提供新的途径,为中药学与生物...     

人参皂苷生物转化及固体发酵工艺研究进展

研究表明,人参皂苷在体外可以转化成多种稀有皂苷,它们是在生物体内发挥药理活性的关键物质。微生物转化法及固体发酵技术是工业化生产稀有人参皂苷的基础。文中针对皂苷生物转化研究概况进行综述,探讨了固体发酵工艺条件,并对目前人参皂苷生物转化研究中存在的问题及今后的主要发展方向进行了展望。      

HPLC法快速测定三七提取物中皂苷的含量

本文采用Kinetex核-壳技术色谱柱快速测定三七提取物中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和Rb1的含量。样品用甲醇超声波提取法提取,采用Phenomenex Kinetex C18100A(50mm×4.6mm,2.6μm)色谱柱,柱温常温,流动相乙腈:水,梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为203nm,柱温为室温,对R1、Rg1和Rb1进行定量分析。结果表明:R1、Rg1和Rb1的线性良好,重复性试验中R1、Rg1和Rb1的相对标准偏差分别为3.2%、3.8%和2.6%,最低检出限为0.001μg;R1、Rg1和Rb1的加标回收率分别为99.3%、100.4%和100.7%。本方法快速、节省试剂,可用于三七提取物中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和Rb1的测定。     

三七茎叶中皂苷类成分研究进展

三七茎叶与三七为同一植物的不同药用部位,其皂苷类成分与三七有区别.随着检测技术的进步,目前从三七茎叶中鉴别出226种皂苷类成分,本文重点介绍近年来从三七茎叶中发现的皂苷类成分及活性单体皂苷,为三七茎叶的研究与开发提供参考.     

黑曲霉HD9478纤维素酶固体发酵条件的研究

通过激光诱变筛选，获得一株高产纤维素酶的突变株ＨＤ９４７８，在以稻草，麦麸为主要原料的固体培养基上进行发酵培养，所产纤维素酶的固体曲，以羧甲基纤维钠为底物的纤维素Ｃｘ酶活力为３５００Ｕｇ，以滤纸为底物的纤维素ＣＬ的酶活力的２６０Ｕ／ｇ，以水杨素为底物的β－葡萄糖苷酶活力为１２００Ｕ／ｇ，发酵培养的条件是培养基起始ｐＨ６．０～７．０，培养温度２８～３２℃，培养时间７２ｈ。三种酶作用的最适ｐＨ分别为３     

三七中高产人参皂苷Rd真菌的鉴定

从云南文山三七根茎上分离得到具有转化人参皂苷活性的真菌。采用的方法是:利用平板划线分离法,从三七根茎中分离纯化得到2株真菌,用该菌株对三七进行液态发酵。通过HPLC检测,对发酵前后皂苷变化进行分析,对两株真菌进行形态显微鉴定及ITS序列分析。结果表明,菌株形态及显微特征和产孢结构与木霉属一致,利用ITS序列与相关类群构建聚类树,确定实验2菌株ITS总长度为550bp,与长枝木霉Trichodermalongibrachiatum Rifai株菌(ATCC18648T、ATCC208859、DAOM167674、DAOM231259)仅在全ITS第134位点上发生间或缺失突变,鉴定2株真菌均为长枝木霉T.longibrachiatum。HPLC分析显示,菌株能够将三七中量多的大极性皂苷转化为小极性皂苷,并高产人参皂苷Rd。结论由此可以证明长枝木霉具有转化三七中皂苷的活性。     

黑曲霉固体发酵产菊粉酶的研究

利用黑曲霉固体发酵获得了菊粉酶的粗酶液,并采用单因素试验和正交试验相结合的方法对酶的发酵条件进行了研究。结果表明,菊粉酶的最适发酵条件：pH值为6．5,培养6d,装样量为20g,氮源为酵母膏,基质为麦麸,可达到内切酶56．31U／g（干重）,外切酶137．24U／g（干重）。     

三七总皂苷安全性的实验研究

目的 研究三七总皂苷对大鼠的亚慢性毒性作用.方法 以正常大鼠为研究对象,连续灌胃13周,以其体重、血液生化学、血液学、脏器相对重量、组织病理学检查为指标,全面评价其毒性作用.结果 三七总皂苷1.6 g/kg组大鼠体重增长明显延缓,肝肾功能指标(BUN、CR、AST、A LT)明显增加,心脏、肝脏、肾脏、肾上腺、睾丸、卵巢、脑等脏器系数明显增加,组织病理学检查表明肝脏和肾脏发生病变.结论 口服三七总皂苷1.6 g/kg对大鼠有明显的心、肝、肾、脑、肾上腺及生殖系统毒性.     

三七总皂苷安全性的实验研究

目的研究三七总皂苷对大鼠的亚慢性毒性作用。方法以正常大鼠为研究对象,连续灌胃13周,以其体重、血液生化学、血液学、脏器相对重量、组织病理学检查为指标,全面评价其毒性作用。结果三七总皂苷1.6 g/kg组大鼠体重增长明显延缓,肝肾功能指标(BUN、CR、AST、ALT)明显增加,心脏、肝脏、肾脏、肾上腺、睾丸、卵巢、脑等脏器系数明显增加,组织病理学检查表明肝脏和肾脏发生病变。结论口服三七总皂苷1.6 g/kg对大鼠有明显的心、肝、肾、脑、肾上腺及生殖系统毒性。     

单宁酶产生菌的发酵培养基优化

用响应面试验对一株单宁酶产生菌黑曲霉的固体发酵培养基进行优化,优化后的最佳发酵培养基组成为:在250mL三角瓶中装入5g麸皮和5mL由(蔗糖12g/L,KNO325b/L、玉米浆22.4g/L、五倍子65.1g/L、MgSO4 13.6g/L,CoCl2 0.2g/L、柠檬酸钠3g/L、NaCl2.5g/L)组成的盐溶液,在此条件下,发酵单宁酶酶活为13.54U/g,比优化前提高了1.82倍.     

RP-HPLC法分析测定人参、西洋参、三七中的皂苷类化合物

利用反相高效液相色谱(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)技术对人参、西洋参和三七不同方法提取物中的8种皂苷进行定量分析。采用乙醇回流、温浸法和超声辅助提取法提取3种药材中的有效成分,并结合高效液相色谱技术进行分析。结果表明:不同提取方法比较,超声辅助法所提取的3种药材中皂苷含量较高;3种五加科人参属的药材中,三七提取物中主要皂苷含量较高,人参提取物中的皂苷种类较多。     

固态发酵三七渣产红曲红色素的工艺条件研究

通过单因素及正交试验考察了装样量、接种量、培养温度、预处理时间、发酵时间对固态发酵三七渣产红曲红色素的影响。结果表明,发酵过程受工艺条件的影响较大,其中接种量、装样量、培养温度对发酵结果的影响均极显著（P＜0.01）,这3个因素以及它们之间的交互作用对发酵结果影响程度的排序为交互作用＞培养温度＞装样量＞接种量。最佳发酵工艺条件为接种量15%、装样量12.5 g、培养温度34 ℃、预处理时间40 min、培养时间12 d,在此优化条件下,红曲红色素色价可达14.53 U/g。     

3种拟青霉发酵三七及其产物检测

采用3种拟青霉:蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali)、蛹草拟青霉(Paecilomyces militaris)和蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae)分别发酵三七药材,并检测发酵产物的功效成分。结果显示,蝙蝠蛾拟青霉和蛹草拟青霉能有效地将人参皂苷Rb1转化为Rd,从而高产稀有人参皂苷Rd,同时合成甘露醇、虫草素和腺苷。表明药用微生物与植物药相互作用可获得丰富的、新的药用资源。     

黑曲霉ATCC16404固体发酵豆皮产生木聚糖酶的研究

以豆皮为原料,用黑曲霉ATCC16404固体发酵产木聚糖酶,采用DNS测定酶活,研究了最佳产酶培养基配比,优化产酶最佳条件。单因素实验结果表明,最佳培养基配方为：以硫酸铵为氮源,矿质元素添加硫酸镁,添加量均为2%（w/w以豆皮干重计）,豆皮颗粒大小为25～50目,不外加碳源,不加表面活性剂。选择料液比、初始pH、培养时间、接重量优化产酶条件,正交实验结果表明,最佳产酶条件为：料液比1∶1.00（w/v）、初始pH5.5,培养时间3d,1.0×107/mL浓度孢子悬浮液接种0.3mL/10g,在此条件下酶活为366.29U/g。     

灵芝固态发酵三七渣产漆酶的培养基配方优化

该试验通过单因素试验考察了酵母浸出粉添加量、硫酸铜添加量、培养基初始水含量、磷酸二氢钾添加量、硫酸镁添加量对灵芝固态发酵三七渣产漆酶的影响,并采用正交试验对培养基配方进行了优化。研究结果表明,优化的培养基配方为采用过60目筛的三七渣10 g,酵母浸出粉添加量3%,磷酸二氢钠添加量0.15%,硫酸铜添加量0.02%,硫酸镁添加量0.2%,培养基初始水含量60%,pH自然。在此优化条件下,灵芝固态发酵三七渣产生的漆酶活性可达8.69 U/g。     

黑曲霉固态发酵生产亚麻脱胶用复合酶的研究

以麸皮为培养基主要原料,采用单因子和正交试验对黑曲霉HYA4固态发酵生产亚麻脱胶用复合酶的培养基以及培养条件进行了优化,结果表明,最适培养基组成为麸皮10g、豆粕添加量2.5%、NaNO33.5%、(NH4)2SO41.0%、加水量10mL;最适发酵条件为:250mL三角瓶装料10g、起始pH值5.0～5.5、培养温度32℃、培养时间为96h。工艺优化后果胶酶和木聚糖酶活力分别可达2215.48U/g干曲,99.68U/g干曲。     

紫色红曲霉固态发酵三七渣生产红色素的动力学研究

该实验在紫色红曲霉固态发酵三七渣生产红色素过程中考察了生物量、淀粉含量、总糖含量、还原糖含量、红色素色价和pH等参数随时间的变化情况,并建立了菌体生长、基质降解和产物生成的动力学模型。结果表明,菌体生长、基质降解和产物生成动力学分别适合采用对数模型、四参数对数模型、Boltzmann模型进行描述。最大菌体生物量Xm为0.241 6 g/g发酵培养物（干基）,比生长速率常数μ为0.457 4 d-1。最大红色素色价B2为14.63 U/g发酵培养物（干基）,红色素色价达到最大值一半时需要的发酵时间t0=4.21 d。发酵末期发酵培养物（干基）中总糖含量D2为28.84%,总糖降解的半衰期t50%为3.536 d。