单核细胞增生李斯特菌的毒力因子

目的单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)属于革兰阳性无芽孢杆菌李斯特菌属,主要通过食物传播。Lm的致病性与毒力因子密切相关,研究其毒力因子对认识致病机理有着重要意义。方法对Lm重要的毒力因子(溶血素、磷脂酶、内化素、肌动蛋白、P60蛋白等)进行综述。结果溶血素是一个多功能的毒力因子,对于Lm逃离吞噬细胞囊是必需的。Lm能产生两种磷脂酶C:磷脂酰肌醇磷脂酶C和磷脂酰胆碱磷脂酶C,协助细菌的细胞内复制。肌动蛋白使得Lm在宿主细胞间能够扩散。内化素与Lm的侵袭力有关。P60蛋白是Lm的主要免疫原性抗原。结论Lm毒力因子研究的深入对李斯特菌病的防治将带来深远的影响。     

食品中单核细胞增生李斯特氏菌的风险评估

微生物风险评估主要评估食品中的微生物性病原可能对人群引起的潜在危害,以指导风险管理者制定相应的管理措施。单核细胞增生李斯特氏菌是一种重要的食源性致病菌,由于该菌引发的疾病致死率较高,且其暴发常出现于工业加工食品中而引起了世界范围内的广泛关注。JEMRA及美国FDA/FSIS分别对即食食品中单核细胞增生李斯特氏菌进行了定量评估并发布了完整的评估报告。各国也有对本国特定食品中单核细胞增生李斯特氏菌进行评估的文献报道。但在数据不足的情况下,也可通过定性/半定量的风险分级工具对不同来源的风险进行分级,并确定优先性。由于各国人群消费模式、消费量的不同,以及食品制作和处理方法上的差异会对暴露评估的结果产生影响,从而影响每份食品风险的大小,因此,各国有必要根据本国的情况对特定食品中的单核细胞增生李斯特氏菌进行相应的评估。     

食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测结果的分析

目的:分析食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测结果,以及时发现食品安全隐患,为食品安全监管提供参考依据。方法:严格按照《2012年食源性致病菌监测工作手册》中的单核细胞增生李斯特氏菌检验标准,对济宁市2019年1—12月定期采样的8类常用食品(生鲜猪肉、生鲜牛肉、生鲜羊肉、生鲜鸡肉、冻虾、冻带鱼、凉拌菜与冰激凌)进行单核细胞增生李斯特氏菌检测,分析其阳性检出率。结果:567份8类常用食品中,检出单核细胞增生李斯特氏菌27份,阳性检出率为4.76%,其中包括生鲜猪肉6份(5.94%)、生鲜羊肉5份(6.02%)、生鲜鸡肉5份(5.10%)、冻虾4份(7.69%)、冻带鱼2份(3.28%)以及凉拌菜5份(11.63%),生鲜牛肉与冰激凌均未检出单核细胞增生李斯特氏菌。结论:食品中存在单核细胞增生李斯特氏菌污染的风险,其中以凉拌菜的污染风险最高,应加强该方面的防控,以确保食品安全。     

食品中李斯特菌污染状况研究

目的了解冷藏冷冻食品中李斯特菌污染状况。方法采用PCR方法对样品中的李斯特菌进行初筛,阳性样品用国标法确证,对6类冷藏冷冻食品共3586份样品进行了李斯特菌带菌状况调查。结果珠海地区李斯特菌污染较为普遍,且存在着多重污染现象,生鲜奶、生肉禽类、蔬菜类样品不仅带李斯特菌率高,且带单增李斯特菌率高。结论应加强冷冻食品的李斯特菌监测与管理。     

食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测分析

目的:分析食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测结果,以及时发现食品安全隐患,为食品安全监管提供参考依据.方法:严格按照《全国食源性致病菌监测工作手册》中的单核细胞增生李斯特氏菌检验标准,对某市2021年1—12月定期采样的10类常用食品进行单核细胞增生李斯特氏菌检测,分析其阳性检出率.结果:897份10类常用食品中,检出...     

食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测能力验证

目的通过能力验证提升食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测能力和实验室质量管理水平。方法依据GB 4789.30-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》进行检测,利用BAX system Q7全自动病原微生物检测系统对能力验证中的3个样品进行快速筛查,采用VITEK2COMPACT全自动细菌鉴定系统、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)和溶血素O基因(hlyA)序列比对分析鉴定可疑菌株。结果编号CODE1和CODE3的样品检出单核细胞增生李斯特氏菌,编号CODE2的样品未检出。结论本实验室参加了中国食品药品检定研究院组织的食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测能力验证测试,取得了满意的实验结果。     

食品中单核细胞增生李斯特氏菌能力验证结果分析与讨论

目的:通过检验食品中单增李斯特氏菌了解实验室关于食品中微生物的检验和检测水平,通过检验技术的更新和检测方法的不断优化,增强实验室整体竞争能力,提升食品检验检测机构检验能力,使微生物实验室外部质控水平得以维护和巩固。方法:利用BAX Q7对能力验证中的3个样品进行快速筛查,严格依据《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》(GB 4789.30—2016),对疑似菌进行鉴定。结果:编号为270的样品检出为单增李斯特氏菌,编号为318和159的这两个样品中均未检出该致病菌,经过进一步实验,发现这两个样品中的致病菌为英诺克李斯特氏菌。结论:本实验室顺利完成本次能力验证,结果较满意。综上表明本实验室具备检验检测单增李斯特氏菌的能力,且检测方法和结果具有一定的准确性。     

食品中单核细胞增生李斯特氏菌的污染概况及防制

本文归纳了单核细胞增生李斯特氏菌在水产品、奶与奶制品、肉类食品中污染情况及对人体造成的危害，提出防制措施。     

单核细胞增生性李斯特菌毒力基因检测及DNA随机扩增多态性分型

为了解在昌平地区分离的单核细胞增生性李斯特菌（Lm）携带毒力基因的状况和DNA随机扩增多态性（RAPD）分型情况，采用聚合酶链反应（PCR）对28株加进行了溶血素基因（hfy）、与侵袭性有关的卸和prfA基因的测定及RAPD分型。结果3个毒力基因PCR全部呈阳性反应，两株无害加为阴性反应。用RAPD分型，28株加分为12型．A、B两型共9株菌全部来自某肉联厂；C、D两型共10株来自某肉鸡公司；另外9株加有8个RAPD型．分别来自熟肉制品及零售市场。此次实验发现昌平地区在不同时间、不同地点分离的加其RAPD型别变化较大。有多种型别的细菌存在。根据RAPD分型看出肉联厂与肉鸡公司可能存在着内部污染问题。     

云南省牛乳中单核细胞增生李斯特氏菌的分布特征、耐药性及毒力研究

目的 分析云南省牛乳中单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)的分布特征、耐药性及毒力现状.方法 采集云南省主要奶产区牛乳样本,按照GB 4789.30—2016方法分离单核细胞增生李斯特氏菌疑似菌株,采用飞行时间质谱技术结合16S rDNA测序对疑似菌株进行鉴定;采用微量肉汤稀释法对分离...     

广州市市售食品中单核细胞增生李斯特氏菌监测结果分析

目的 分析广州市市售食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染分布情况.方法 2013—2019年共采集16类共4905份食品样品,开展单核细胞增生李斯特氏菌监测分析.按照GB 4789.30—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》中规定的食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验方法开展检测.结果 单核...     

数字PCR定量检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌方法的研究

目的建立微滴式数字PCR技术(droplet digital PCR,ddPCR)定量检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌的分析方法。方法选择基因hly A为靶序列,设计PCR扩增引物和Taq Man探针,优化反应条件和反应体系,通过细菌分离和dd PCR方法对靶标基因的检测特异性、灵敏度和重复性进行实验,并对定量结果进行分析。结果 ddPCR反应中的最佳探针浓度为5 pmol/μL,特异性好,检出限为(3.6±0.1)copies/20μL,重复性实验良好,标准偏差为0.067%。ddPCR的拷贝数(copy number)与细菌密度(colony forming units,CFU/mL)形成了较好的线性关系。结论本研究建立dd PCR的拷贝数和菌液密度或菌落数的线性关系,可以为单核细胞增生李斯特氏菌的快速定量检测提供参考。     

单核细胞增生李斯特氏菌的PCR检测方法

研究比较了裂解法、热煮沸法、试验盒法提取单增李斯特氏菌DNA的效果 ,认为Promega试剂盒法提取的DNA ,得率高、纯度好。同时根据单增李斯特氏菌的毒力相关基因的 5对引物 ,进行了引物的特异性研究 ,结果发现inlA引物、inlB引物、plcA引物特异性好 ,可以用于食品中单增李斯特氏菌的检测     

Growth of Listeria monocytogenes in refrigerated ready-to-eat foods in Japan

The ability of L. monocytogenes to grow in a series of Japanese ready-to-eat (RTE) foods, including boiled baby sardine and Japanese pickle, was tested at two different refrigeration temperatures. In RTE foods in which L. monocytogenes can grow, growth was significantly higher at 10°C than that at 4°C during their shelf lives and growth patterns varied extensively among the different types of foods. However, growth did not occur at 4°C within the shelf life of certain RTE foods, such as broiled squid. The patterns of growth were varied extensively with different sample types. These results suggest that some types of traditional Japanese RTE foods stored at 10°C may be potential sources of listeriosis. To reduce the risk of food-borne listeriosis, studies to determine the contamination levels in RTE foods and the effects of storage temperature on their shelf lives are needed.     

肽核酸荧光原位杂交技术快速检测食品中的李斯特菌属及单增李斯特菌

目的建立利用肽核酸荧光原位杂交技术(PNA-FISH)快速检测食品中李斯特菌属及单增李斯特菌的方法。方法针对李斯特菌属、单增李斯特菌分别设计合成2份PNA探针lis-16S-1、lm-16S-2,并建立荧光原位杂交技术,优化杂交条件,对选取的13株李斯特菌和其他9株非李斯特菌进行检测,验证探针的特异性和灵敏度,并对118份食品样品用LB肉汤2次增菌培养后进行PNA-FISH检测。结果探针灵敏度和特异性均为100%,从118份食品中检出14株李斯特菌和8株单增李斯特菌,结果与API方法和VITEK方法鉴定结果一致。结论 PNA-FISH方法可靠易行,对从食品中检测致病性单增李斯特菌有较高的实用性。     

单核细胞增生李斯特菌的毒力基因检测及PFGE分型的研究

目的了解福建省食品中单核细胞增生李斯特菌携带hly、plcA、plcB和prfA毒力基因的情况及脉冲场凝胶电泳(PFGE)的分型情况。方法将hly、plcA、plcB和prfA基因作为靶序列选取4对引物,通过聚合酶链反应(PCR)检测61株单核细胞增生李斯特菌和2株可疑单核细胞增生李斯特菌的毒力基因,用PulseNet单核细胞增生李斯特菌标准方法进行7株单核细胞增生李斯特菌的PFGE分子分型。结果61株单核细胞增生李斯特菌毒力基因为hly 、plcA 、plcB 和prfA ,2株可疑单核细胞增生李斯特菌的毒力基因分别为hly-、plcA 、plcB-、prfA-和hly-、plcA-、plcB-、prfA-。7株单核细胞增生李斯特菌的PFGE分为5个型。结论实验结果表明福建省食品中分离到的单核细胞增生李斯特菌均含有hly、plcA、plcB和prfA基因,属于致病株。对2株可疑单核细胞增生李斯特菌进行了进一步的鉴定,排除了单核细胞增生李斯特菌,该毒力基因检测方法可用于可疑单核细胞增生李斯特菌的进一步鉴别。7株菌中有两对2株PFGE型别一致,一致的菌株来自不同年份不同销售地点的同一品牌,应用PFGE方法可以进一步调查该厂冻鸡肉中单核细胞增生李斯特菌的传播途径和污染源。     

食品中单核细胞增生性李斯特菌的快速分离鉴定

单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,简称单增李斯特菌)是一种重要的食源性致病菌,能引起人畜共患李斯杆菌病。本文采用两种不同的增菌分离方法从散装牛奶和猪肉中共分离得到8株单增李斯特菌。通过革兰氏染色、生化鉴定、PCR扩增hlyA基因、16SrDNA测序、血清分型等一系列实验对可疑菌株进行分析鉴定。综合实验结果和其他单增李斯特菌分离标准,探讨开发了一种快速分离鉴定单增李斯特菌的方法,该方法可在4～5d内完成单增李斯特菌的分离检测过程。     

Occurrence of Listeria monocytogenes in fresh and processed foods in Navarra (Spain)

The presence of Listeria spp. was investigated in a total of 3685 food samples obtained from different industries and markets of Northern Spain in the last 4 years. The samples analyzed include fresh raw products (meat, milk and poultry) and treated products (cooked and cured meats, frozen vegetables and smoked salmon). Occurrence of Listeria spp. varied from 8.1% in soft cheese to 76.3% in raw poultry samples. The highest incidence of L. monocytogenes also occurred in raw poultry (36.1% positive samples). Despite this high incidence of contamination, these kinds of products carry a low risk of listeriosis transmission because of the heat treatment prior to consumption. On the other hand, the ready-to-eat products (RTE) tested in this study showed incidences that could pose serious health problems, taking into account that the storage conditions may allow for rapid growth of the pathogen. It was also found that up to 75.5% of the L. monocytogenes strains isolated in this study belonged to serogroup 1, mainly serotype 1/2a, while the clinical cases observed in Navarra in the same period of time belonged mainly to serotype 4b/4bx.     

2011~2019年吉林省市售食品中单增李斯特菌污染情况分析

目的 了解吉林省市售餐饮食品中单增李斯特菌的污染情况,为食品安全管理、食源性疾病的监测提供科学依据。方法 对2011年-2019年从吉林省9个监测地区采集到的8279件市售食品样本进行单增李斯特菌的分离鉴定。结果 2011年 -2019年从吉林省市售食品中共检测出单增李斯特菌阳性菌株352株,总检出率4.25%；各检测地区间长春市阳性检出率最高(7.63%),其次为四平市(6.03%)；12类市售食品中肉及肉质品阳性检出率最高(9.41%),其次为速冻米面食品(6.72%)；各类采样地点中超市的阳性检出率最高(6.89%),其次为农贸市场(5.64%)和快餐店(5.08%)；散装食品的阳性检出率明显高于预包装食品。结论 2019年吉林省的单增李斯特菌阳性检出率较临近三年呈回升态势；长春市与四平市单增李斯特菌污染情况较其他地区严重；肉与肉制品单增李斯特菌的污染情况最为严重,其次为速冻米面食品；流通环节中单增李斯特菌阳性检出率较高；散装食品的单增李斯特菌污染情况较预包装食品严重。有关部门应针对地区现状、食品类型和包装类型的不同加强管理力度。