合成己酸乙酯脂肪酶产生菌的产酶条件优化及其催化生产香酯液研究

从生产现场分离得到l株具有产己酸乙酯脂肪酶能力的红曲霉(Monascus purpureus)I518,对其产脂肪酶条件进行了初步优化.结果表明,该菌株较理想的产酶发酵条件为:麸皮∶豆粕=2∶3、接种量20％、培养基初始pH值为7、培养温度为32℃、培养时间为5d,该条件下所产的粗酶制剂所催化的香酯液中己酸乙酯的含量达0.38 mg/mL,比未优化条件有明显增加.     

一株产酯化酶菌株的分离鉴定及产酶

从浓香大曲中分离筛选得到一株产酯化酶的菌株,鉴定并研究了其产酯化酶的特性。利用微生物分离技术筛选得到产酯化酶的红曲霉FBKL3.0018,根据形态特征、培养特征、生理生化特征并结合分子生物学方法进行鉴定。结果鉴定菌株FBKL3.0018为红曲属的紫色红曲霉(Monascuspurpureus)。菌株的酯化力较高,可用于生产酯化酶制剂和高酯化大曲等。     

一株产己酸乙酯酯化酶霉菌的分离鉴定及产酶条件研究

从浓香型大曲中分离得到1株产己酸乙酯酯化酶霉菌,经Biolog微生物自动分析系统鉴定为黄曲霉。在液体发酵培养基中,36℃、150r／min恒温振荡培养72h,发酵液酶活可达6．75u／mL。对该菌株产酯化酶的培养条件进行研究,结果表明,以黄豆粉为N源,淀粉为C源,初始pH6．0,36℃下培养72h,酶活可达9．16u／mL。     

合成己酸乙酯酯化酶产生菌的鉴定及产酶条件优化

筛选到1株浓香型酒曲来源且己酸乙酯酯化性能较强的红曲霉并进行菌种鉴定。在形态学鉴定的基础上,通过ITS序列和β-微管蛋白基因序列构建系统发育树,初步鉴定为紫色红曲霉,编号为YJX-8。研究菌株YJX-8最佳产酯化酶条件及酯化酶底物特异性,结果表明,其最适液态培养基组分是:蔗糖90 g/L、黄豆饼粉25g/L、MgSO_41 g/L、NaH_2PO_41 g/L;最适培养条件是:pH 4.5、30℃、180 r/min、6 d;在最优条件下,酯化酶酶活达到(1.177±0.009) U/mL,酶活提高4.56倍。红曲霉酯化酶对己酸具有很强的选择性。     

一株产木糖醇菌株的生理生化及分子生物学鉴定

对一株未经报道的转化木糖为木糖醇的菌株CTD249,采用生理生化及分子生物学方法进行鉴定,同时构建系统发育树进行分析,确定菌株CTD249的种属。结果表明：CTD249与季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)处于同一进化分支中,相似度达99%以上,因此将该菌株鉴定为季也蒙毕赤酵母(GenBank接受号：HM236292)。该菌株在初始木糖质量浓度20g/L的条件下,发酵48h后木糖醇产量为12.0g/L。     

产香酵母的筛选鉴定及产酯条件优化

利用产香酵母提升白酒风味物质含量水平已得到广泛应用。该研究从板栗上分离筛选到一株产香酵母菌株H32,经鉴定为汉逊德巴利酵母（Debaryomyces hansenii）。耐受性测定显示酵母H32菌株能耐受的乳酸质量浓度为25 g/L,耐受酒精度为8%vol。通过单因素和正交试验优化该菌株的最优发酵条件为接种量5%、初始糖度9 °Bx、摇床转速50 r/min、装液量为60%,其产酯量可达1.17 g/L。将酵母H32（接种量1%）应用于豉香型白酒模拟发酵试验后,基酒产酯量达0.94 g/L,是对照组的6.71倍。结果表明,酵母菌株 H32能有效的提升豉香型白酒基酒的产酯量,对改善豉香型白酒的风味品质具有重要的意义。     

一株高产Monacolin K红曲霉菌株的生理特性研究

对实验室保藏的一株高产Monacolin K红曲霉菌株的生理特性进行了研究,结果表明,该菌株菌落较小,成橙红色;菌丝有横隔,分生孢子着生于菌丝体或分支末端;最适生长温度为30~33℃;能耐8%浓度的乙醇;可以利用包括鼠李糖、松三糖、甘露醇等在内的17种碳源,但只能对葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、糊精和乙醇等少数几种碳源进行发酵产气;在利用不同类型的氮源时发酵液色泽差异较大,其中对铵盐的利用较好。     

一株高产己酸乙酯酵母菌株的筛选、鉴定及发酵条件优化

己酸乙酯是浓香型白酒的重要风味物质,提高浓香型基酒中己酸乙酯含量有助于提高其优质酒率。通过传统筛选方法从不同酒曲中筛选出1株高产己酸乙酯酵母,采用形态观察、生理生化分析和分子生物学对其进行鉴定,并通过单因素试验优化发酵条件。从源于不同酒曲的79株酵母中确定了1株高产己酸乙酯酵母,命名为Y9,并鉴定为Hyphopichia burtonii。酵母Y9具有优良的NaCl、葡萄糖、乙醇和己酸乙酯耐受性以及宽广的pH适应性,能够较好地适应浓香型白酒酿造环境。在糖度为14°Brix、初始pH 5.0、诱导温度22℃且静置发酵、乙醇体积分数8%、己酸体积分数0.04%、发酵时间60 h时,酵母Y9所产己酸乙酯质量浓度达到15.0 mg/L。该研究为产香酵母Y9更好地应用于白酒发酵提供了理论基础。     

酒曲中生香酵母的分离及生理生化鉴定

从酒曲中筛选出11株生香酵母,并对其形态及生理生化特性进行研究,确定其种属。筛出菌后进行发酵测发酵液中总酯含量,选出高产优质菌株。在11株产酯酵母中,产酯最高的菌株是X7,其发酵液总酯含量达到1.78 g/L。     

一株酯化功能菌分离鉴定及酶学特性研究

从国家级重点文物遗产\     

浓香型白酒生产中"增己降乳"科学、合理性的研究

本文对浓香型白酒乳酸乙酯过量产生的原因进行了分析,客观地评价了乳酸乙酯在浓香型白酒中作用的两面性,阐述了“增己”和“降乳”二者的辩证关系,围绕“增己”为主,“降乳”为辅这一论断,结合作者39年的实践经验,从生产的各个环节较为详尽地论述了为实现这一目标所采取的工艺措施,对指导生产具有一定的现实意义。     

泸型曲酒"增己降乙"方法的探讨

当基酒中乙酸乙酯组分偏高,会使香气不正、不协调、典型性差,影响酒质。找出了发酵产物中乙酸乙酯偏高的原因,并制定了降低乙酸乙酯的工艺措施：（1）优选原料配比,提高制曲温度;（2）降低窖内材料氧气分压;（3）回醅（酒）发酵;（4）入窖条件遵循“二高一低”,即高酸度、高淀粉、低水分,并采用“原出原入”的方法;（5）科学分馏;（6）黄水回用;（7）加强老窖养护。（陶然）     

以红曲霉酯化酶催化合成乳酸乙酯

利用自汾酒大曲中分离获得的产酯能力较高的红曲霉菌株,采用正交试验法,以酯化酶活性为检测指标,优化了发酵培养基配方和培养条件,确定了最佳发酵培养基成分质量配比为麸皮:水=1:1;最佳发酵条件为:红曲霉接种量为1%,发酵温度为30℃,发酵4 d,制得酯化酶酶制剂。在此基础上,采用响应面优化法对其酯化酶的催化条件进行了优化,确定了最佳催化条件为:乙醇和乳酸的摩尔比为6,加酶量1.5%,反应时间60h,反应温度30℃,乳酸乙酯生成量可达到3.38 g/L。     

有机介质中酶催化合成己酸乙酯的研究

本实验研究了有机介质中CRL 脂肪酶催化己酸与无水乙醇合成己酸乙酯的酯化反应条件,并利用红外光谱、GC-MS、气相色谱等现代方法对合成的产物进行了表征。结果显示,合成的产物为己酸乙酯,其纯度为96.91%,分子量144。酯化反应在以正庚烷为反应介质,反应温度为311K,己酸与无水乙醇的摩尔比为1:1.3,己酸浓度为0.2mol/L 的条件下,反应24h 后,转化率达到94.6%。     

一株有氧条件下高产乙醇酵母的筛选、鉴定及其生物学特性研究

采用平板涂布法从老白干香型大曲中获得一株有氧条件下高产乙醇酵母菌株,命名为YF1914。通过菌落形态、细胞显微结构、生理生化特性和26S rDNA D1/D2区方法对其进行鉴定,借助液体培养方式考察其乙醇耐受性、葡萄糖耐受性、乙酸耐受性、生长温度和pH等生物学特性。结果表明,该菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)属于乙醇高耐受性酵母,耐受乙醇最高体积分数为18%,同时还具有较高的NaCl和葡萄糖耐受性,最高耐受质量分数分别为15%和80%,在温度为20~50 ℃和pH1~10能够生长,具有宽广的温度和pH适应性。综上,该酵母这些优良特性有利于其在未来白酒酿造方式变化中发挥作用。     

柚苷酶产生菌的分离筛选及鉴定

利用柚苷酶平板透明圈筛选方法,加大透明层与未分解层的颜色对比,提高菌种筛选的效率,改进柚苷酶产生菌的选育模型。筛选出1株柚苷酶生产菌株A13。对该菌株进行摇瓶发酵,测定酶活力达到365.31U/mL。通过对该菌株形态特征、培养特征的观察,对照《真菌鉴定手册》,初步判定该菌株为黑曲霉(Aspergillus niger)。     

纳米复合杂多酸催化合成己酸乙酯的研究

以纳米型H3PW12O40／SiO2为催化剂,己酸和无水乙醇为原料,合成曲酒香料己酸乙酯,实验结果表明,纳米复合磷钨杂多酸是合成己酸乙酯的良好催化剂,适宜的工艺条件为：酸醇物质的量比为1：1．8,催化剂用量5％,带水剂甲苯为5mL,反应时间2h,酯化率可达97．1％。     

白酒中己酸乙酯测定的不确定度评定

参照国家标准GB/T 10345—2007,采用气相色谱内标法测定白酒己酸乙酯含量,对整个测量过程的不确定度来源进行了分析,并用Excel表格对不确定度各个分量进行了评定和合成。