枯草芽孢杆菌在鱼片保鲜中的应用

目的:为以生物膜形成能力为筛选依据的枯草芽孢杆菌生物保鲜剂开发提供新思路。方法:测定枯草芽孢杆菌的疏水能力、自凝聚率、共凝聚率及生物膜形成能力,并利用枯草芽孢杆菌对冰鲜罗非鱼片进行保鲜,测定罗非鱼片的鲜度和挥发性风味物质。结果:枯草芽孢杆菌的生物膜形成能力越强,对罗非鱼肉的保鲜效果最佳。枯草芽孢杆菌可显著降低鱼肉中的挥发性盐基氮含量,使鱼肉在贮藏第3天的TVB-N含量为24.43 mg/100 g,低于对照组的34.58 mg/100 g;并且显著抑制鱼肉中醇类、酚类、酯类和酸类,如异戊醇、苯酚、吲哚、乙酸等挥发性风味成分的产生。同时,较生物膜形成能力而言,枯草芽孢杆菌的抑菌能力并未体现出与保鲜能力的相关性。结论:枯草芽孢杆菌的自凝聚和生物膜形成能力与其对罗非鱼片的保鲜能力最为相关,可作为保鲜用枯草芽孢杆菌筛选的快速指标。     

盐胁迫对枯草芽孢杆菌发酵代谢产物的影响

研究了盐胁迫对枯草芽孢杆菌主要代谢产物的影响。利用氨基酸自动分析仪和顶空固相微萃取-气质联用技术,检测盐胁迫条件下主要理化指标、氨基酸和挥发性成分的变化情况。高盐胁迫下停滞期结束后,细胞残糖消耗速率最大但菌体生长缓慢,乳酸含量合成和消耗速率最快;天冬氨酸积累量增加而丝氨酸减少,组氨酸和苯丙氨酸浓度基本不变;中间盐浓度刺激下3-羟基-2-丁酮积累量最大,其次为糠醛等小分子风味成分,乙酸乙烯酯、甲氧基异戊酸乙酯等仅在对照盐浓度发酵过程中检测到,存在周期短且含量较低,2,5-二甲基吡嗪和苯甲醛仅在盐胁迫环境中产生。高盐胁迫下基质消耗主要用来进行产物合成,而不是菌体生长,乳酸在细胞抗高渗胁迫过程中起重要作用;高盐胁迫刺激了草酰乙酸为前体的氨基酸代谢途径;渗透胁迫能够刺激枯草芽孢杆菌生成某些特定化合物的代谢途径的增强,从而深入了解高渗胁迫下细胞内代谢方向的变化。     

GC-MS法分析枯草芽孢杆菌HS8挥发性成分

以分离自黄芪根部的枯草芽孢杆菌HS8为研究对象,利用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对枯草芽孢杆菌HS8的挥发性成分进行分析,在枯草芽孢杆菌HS8发酵液中分离并鉴定了21种挥发性成分;在枯草芽孢杆菌HS8菌丝体中分离并鉴定了18种挥发性成分,经对比分析,枯草芽孢杆菌HS8含有与宿主植物黄芪相同、相似及全新的挥发性成分,上述结果对开发利用枯草芽孢杆菌HS8具有重要意义。     

枯草芽孢杆菌的作用机制及其在动物生产中的应用

枯草芽孢杆菌是市场上应用最广泛的饲用益生菌之一,具有耐酸碱、耐挤压、耐高温等特点,具有促进营养物质消化吸收,提高生产性能、饲料报酬和免疫力的作用。阐述了枯草芽孢杆菌的理化性质、作用及作用机制,并综述了国内外学者在动物生产中应用枯草芽孢杆菌的研究成果,以期为枯草芽孢杆菌更好地应用于动物生产提供参考。     

枯草芽孢杆菌在反刍动物饲料中应用的研究进展

枯草芽孢杆菌是一种耐高温、耐酸碱,可快速生长、繁殖的益生菌,其用途广泛,现已被很多行业广泛应用.综述了枯草芽孢杆菌的定义、特点,在反刍动物生产中的应用效果及其机理,以及影响枯草芽孢杆菌作用效果的因素,以期可以更好地为反刍动物饲养作贡献.     

好氧堆肥用枯草芽孢杆菌GX2产芽孢工艺优化

芽孢杆菌是好氧堆肥微生物菌剂的重要组成部分,为降低菌剂生产成本、改善其品质及应用效果,对芽孢杆菌产芽孢工艺进行研究.首先,在摇瓶上进行枯草芽孢杆菌GX2的培养基及培养条件优化,在此基础上,在3L发酵罐中进行分批补料优化研究,进一步提高细胞浓度,最后,通过单因素及正交试验研究,在3 L发酵罐中对产芽孢工艺进行了优化.结果...     

带自身启动子的bgaB基因在枯草芽孢杆菌中的表达

将来源于嗜热脂肪芽孢杆菌的启动子连同β-半乳糖苷酶bgaB基因经PCR扩增后,连接在T载体上,再取代枯草杆菌载体pZ01-bgaB的启动子,将其在枯草杆菌宿主WB600中表达.经摇瓶发酵20h,得到乳糖酶活力6.37U/mL,比活力3.814U/mg,SDS-PAGE电泳显示有明显重组蛋白质条带.证明了嗜热脂肪芽孢杆菌来源的启动子在枯草杆菌中是完全适用的.     

产蛋白酶枯草芽孢杆菌的复壮及生产初步研究

对1株产中性蛋白酶的枯草芽孢杆菌进行了复壮,复壮后比复壮前活力提高了26%;在液体深层发酵生产上主要对通气量进行了研究,确定最适通气条件为:前18h通气量240 L/min·m3,18h～24h通气量300 L/min·m3,发酵液活力可达941 1U/mL:对发酵液进行喷雾干燥,所得酶粉中性蛋白酶活力可达139800U/g.     

枯草芽孢杆菌生产胞苷的途径分析

运用METATOOL软件对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtillis) TZM1012由葡萄糖生物合成胞苷的代谢途径进行分析,以确定胞苷合成的最佳途径和最大理论产率.结果表明其最大理论产率为0.28,5-磷酸核糖焦磷酸与草酰乙酸是胞苷合成途径的关键节点,发酵中后期低溶氧控制是胞苷合成的重要前提,溶氧控制在5～10%时胞苷产量可提高15.8%.结论是以途径分析为指导,改变外界环境因子,胞苷的产量可得到显著的提高.     

枯草芽孢杆菌AS1.398基因文库的建立

用SDS(十二烷基硫酸钠)和溶菌酶裂解制革脱毛用酶制剂生产菌—枯草芽孢杆菌AS1.398菌体,提取染色体ONA,并用限制性内切酶Sau3AI对纯化后的染色体DNA进行部分酶切。将所得片段插入大肠杆菌质粒P~(RR_(322))的BamHI位点,经T_4DNA连接酶连接后转化Ecoli DH5α菌株,所获得转化子经Amp~r(抗氨苄青霉素)与T_c~r(抗四环素)抗性平板检测,计算出重组率为82％。用所获得的全部转化子建成枯草芽孢杆菌AS1.398的基因文库,以为蛋白酶基因。以及其它实用性酶的基因筛选所用。     

枯草芽孢杆菌变异菌株的α-淀粉酶分离纯化及酶学性质的研究

从枯草芽胞杆菌变异菌株培养得到的α—淀粉酶,通过硫酸铵沉淀,DEAE-葡聚糖凝胶A-50,葡聚糖凝胶G-100以及超滤浓缩等操作,获得该酶的纯样品,该酶的分子量、等电点分别为52.5KD、pI 4.6。该酶的最适pH和温度分别为pH6.0及65℃,稳定pH范围为pH4.5～7.5,而且在50℃时该酶活力较稳定。Ca~(2 )、Mg~(2 )、Li~ 对酶活有激活作用,而Ag 、Al~(3 )、Cu~(2 )、Fe~(2 )、Zn~(2 )、Mn~(2 )、Ni~(2 )和CO~ 对酶活有抑制作用。另外,该酶对可溶性淀粉的分解限度为42.8％,由此可估计该酶属于糖化型α—淀粉酶。     

α-淀粉酶的耐酸性改造及在枯草芽孢杆菌中的分泌表达

α-淀粉酶基因经改造后,克隆到穿梭质粒pBE2中。在α-淀粉酶基因的上游连接枯草芽孢杆菌sacB基因的启动子-信号肽序列(sacR),构建了含突变α-淀粉酶基因的分泌型诱导表达载体pBSAT,转化蛋白酶三缺陷枯草芽孢杆菌菌株DB403。含有pBSAT的菌株可将突变α-淀粉酶分泌到胞外,表明sacB基因的启动子-信号肽序列(sacR)能很好的将枯草芽孢杆菌中的重组α-淀粉酶引导到胞外,完成分泌表达。分泌的α-淀粉酶具有较高的耐酸性及生物学活性。     

栗蘑挥发性香气成分的研究

利用自动热解析器热脱附和气质联用仪从栗蘑中鉴定出二十一种挥发性香味成分。其中醇类物质主要有2-丁基-1-辛醇、2-丙基-1-戊醇;醛类化合物中含量较高的癸醛、3,5,5-三甲基己醛有很强的果香味;酮类物质中的2,5-二苯基-2,5-环己二烯-1,4-二酮有着浓郁的植物芳香;其他一些化合物如呋喃类、烷烃类、酯类等在栗蘑风味中起着调和和互补的作用。栗蘑的香味不是单一化合物所能够体现出来的,而是组分相互作用、相互平衡的效果。研究结果为进一步认识和了解食用菌的风味价值以及更有效地利用我国食用菌资源提供参考。      

宏基因组学及其在大曲酒微生物研究中的应用

利用宏基因组学技术可以直接从基因水平上研究大曲酒生产微生物群落,研究发酵过程中微生物群落的消长及变化,特别是对大曲酒微生物群落的功能菌及多酶体系的认识,全面了解大曲酒微生物群落的代谢机理和形成大曲酒与众不同的香味组分的构成和风味特征.     

高温堆积工艺在浓香型白酒生产中的应用

将高温堆积发酵工艺应用在浓香型白酒生产中,对堆积过程中糟醅的温度、理化指标、微生物生长规律及风味物质变化进行探究.结果表明,高温堆积发酵工艺有利于增加白酒中的香味成分,起到提高酒质的目的.     

酯化红曲在浓香型白酒生产中的应用

红曲霉胞外脂酶具有较强催化己酸乙酯合成的能力,为了更进一步探讨多维发酵的有效途径,重庆诗仙太白酒业在普通窖、双轮窖、半年窖发酵粮糟中加入酯化红曲,进行生产应用试验研究。结果表明,酯化红曲的应用使基酒中己酸乙酯的含量提高0.35～0.58 g/L,综合优级品率提高21%～25%,提高优质酒率效果明显,其经济效益显著。     

杀菌前后即食扇贝柱挥发性成分变化的研究

为了研究杀菌前后即食扇贝柱香气成分的变化,利用顶空固相微萃取(HS-SPME)和气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术,对杀菌前后即食扇贝柱香气成分进行分离鉴定。结果表明:杀菌前后分别鉴定出117种和119种挥发性成分。杀菌前的即食扇贝中,醇、醛、酯、酮、酸、芳香族、呋喃、酚类、烃和其他的含量分别为3.21%、4.78%、2.06%、0.47%、0.25%、8.38%、0.03%、0.72%、32.58%、47.52%,数量分别为7、9、9、4、2、22、1、1、33和29种。杀菌后的即食贝柱中,醇、醛、酯、酮、酸、芳香族、呋喃、酚类、烃和其他的含量分别为2.85%、4.48%、11.54%、0.90%、0.49%、7.81%、0.86%、0.55%、28.20%、42.32%,数量分别为9、11、11、6、5、15、5、3、32和22种,杀菌前后有67种成分相同。杀菌后的即食扇贝柱中酯类和呋喃等挥发性成分的含量显著多于杀菌前。因此杀菌过程对即食扇贝柱的挥发性成分具有一定的保留和增香作用,使即食扇贝柱的风味更加浓郁,香气协调。     

枯草芽孢杆菌生产抗菌物质的食品级发酵培养基优化

为得到安全可靠的新型生物防腐剂,用枯草芽孢杆菌发酵食品同时提高其抗菌活性。采用单因素试验和Plackett-Burman试验设计筛选出4 个关键因子为脱脂奶粉、番茄汁、发酵时间和发酵温度;使用Box-Behnken原理设计进行响应面试验确定出最佳培养基配方和发酵条件：小麦粉16.0 g/L、脱脂奶粉20.0 g/L、黄豆粉酶解液200.0 mL/L、番茄汁40.0 mL/L、NaCl 10.0 g/L,装液量50.0 mL、发酵温度32.14 ℃、发酵时间60.0 h。拟合实验模型结果显示：优化后发酵液对荧光假单孢的抑菌圈直径较优化前提高42%,对短小芽孢杆菌的抑菌圈直径较优化前提高47%。     

核黄素操纵子在B.subtilis 24R7染色体上整合对核黄素合成的影响

构建含有 B.subtilis 24 核黄素操纵子的整合型核黄素质粒 pRB40、pRB61 和 pRB63,研究了核黄素操纵子分别在B.subtilis 24R7染色体的 rib、amyE和thrC 位点整合对核黄素合成的影响.结果表明,核黄素操纵子通过单交换重组方式整合在上述位点可使核黄素合成量增加14%~19%,而通过双交换重组方式整合在 amyE 或 thrC 位点可使核黄素合成量增加 40% ~44%.增强核黄素操纵子在B.subtilis 24R7染色体上的稳定性可以提高核黄素的合成量.     

B族维生素对枯草芽孢杆菌发酵生产腺苷的影响

为了进一步提高发酵法生产腺苷的效率,该研究以枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）XGL为供试菌株,通过单因素试验及正交试验探究VB1、VB3、VB5、VB7、VB12几种关键B族维生素对菌体生长及菌体产苷能力的影响。结果表明,VB1、VB3、VB5、VB7、VB12的最佳添加量分别为6.0 mg/L、5.2 mg/L、6.0 mg/L、2.4 mg/L、5.6 mg/L。此时的菌体生物量（OD600 nm值）、腺苷产量和糖苷转化率分别为74.84、53.66 g/L、33.10%,较原始培养基分别增长了8.00%、19.35%和12.59%,说明B族维生素的这种复合添加量能够较好的提高腺苷的发酵生产能力,为枯草芽孢杆菌发酵法生产核苷类物质的培养基改良提供了一定的依据。