纳豆激酶的研究进展

纳豆激酶是一种由纳豆芽孢杆菌产生的具有强溶纤作用的碱性丝氨酸蛋白酶,具有安全性好、半衰期长、口服有效等优点。本文就纳豆激酶的基因结构、生化特性、生物学功能及酶活性测定等方面进行了综述。     

纳豆激酶研究进展及其应用

本文概括了纳豆激酶的基本性质,论述了溶血栓的作用机制包括直接溶栓作用;刺激血管内皮细胞产生t-PA;激活体内尿激酶原转变为尿激酶;通过降解和失活纤溶酶原激活剂的抑制剂来调控纤溶作用.此外还介绍了该酶的降血压作用,使用的安全性和有效性以及国内外纳豆激酶相关产品的开发状况和市场情况.     

纳豆、纳豆激酶与人体保健

论述了纳豆与人体保健关系,特别是其中的功能因子－－纳豆激酶特点及溶栓功能,指出利用微生物生产溶栓酶将是未来发展方向。     

纳豆激酶制剂的研究

以选取的纳豆菌-9号为出发菌株，在最佳摇瓶培养条件基础上通过5L发酵罐扩大培养，确定最优发酵培养条件，纳豆激酶活力较摇瓶培养提高2．05倍；发酵液经真空冷冻干燥得到纤溶活性较高的纳豆激酶干粉，并对纳豆激酶干粉的部分酶学性质进行了研究。     

纳豆激酶溶栓功效及开发应用前景

纳豆激酶是日本传统食品纳豆中的活性成分之一,具有强效溶血栓作用,因其分子量小、易吸收且安全,目前是新一代溶栓药物研究关注的热点。本文在介绍纳豆激酶的溶栓作用基础上,简要概括了纳豆激酶的开发应用前景。      

纳豆激酶溶栓功效及开发应用前景

纳豆激酶是日本传统食品纳豆中的活性成分之一,具有强效溶血栓作用,因其分子量小、易吸收且安全,目前是新一代溶栓药物研究关注的热点。本文在介绍纳豆激酶的溶栓作用基础上,简要概括了纳豆激酶的开发应用前景。     

纳豆激酶的纤溶功能研究现状

通过血栓形成和溶解的生理学背景，阐述了纳豆激酶发挥溶栓功能的生理学机理，对纳豆激酶溶栓功能的相关实验研究进行了综述，并对纳豆激酶的开发应用前景进行了展望。     

纳豆激酶的生理学功能研究现状

通过血栓形成和溶解的生理学背景,阐述了纳豆激酶发挥溶栓功能的生理学机理,对纳豆激酶溶栓功能的相关实验研究进行了综述,并对纳豆激酶的开发应用前景进行了展望。     

纳豆激酶溶栓活性的测定方法

简介人体纤维蛋白溶解系统的生理学背景,对以此为依据建立的纳豆激酶溶栓活性测定方法进行了概括总结。     

人参皂苷F2对LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应的改善作用

作为人参的主要生物活性物质,多数人参皂苷已被证实具有良好的抗炎作用,但是其抗炎机制研究较少,尤其是人参皂苷F2。因此,该研究基于脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）刺激RAW264.7细胞产生炎症,构建体外细胞炎症模型,探究人参皂苷F2的抗炎作用。细胞活力实验表明人参皂苷F2在100 μmol/L内对细胞无毒性作用,为安全浓度范围。人参皂苷F2可以显著抑制LPS刺激RAW264.7细胞NO释放,且呈剂量依赖性抑制（0~100 μmol/L）。人参皂苷F2（50、100 μmol/L）也呈剂量依赖性抑制一氧化氮合酶（iNOS）和肿瘤坏死因子（TNF-α）的mRNA表达,100 μmol/L时显著抑制iNOS和TNF-α的mRNA表达。经人参皂苷F2处理可显著下调iNOS蛋白表达,但对COX2蛋白表达无显著促进作用（P>0.05）。此外,经扫描电镜（SEM）观察,100 μmol/L人参皂苷F2处理可以显著改善LPS刺激RAW264.7细胞的细胞形态改变。蛋白印迹表明,人参皂苷F2提高了PDK1、AKT、IκB-α蛋白的表达,降低了AKT蛋白磷酸化、NF-κB的核易位。该文研究结果表明人参皂苷F2具有较好的抗炎作用,并可能通过AKT/IκB-α/NF-κB信号通路发挥其抗炎作用,可为相关天然抗炎药物的开发提供理论支撑。     

纳豆溶栓效应的研究

探讨了纳豆产品的溶栓效应。采用冻干纳豆粉灌胃,在复制的大鼠血栓模型上,通过动态观察血压的变化,比较血栓的大小以及检测纤溶酶原激活物质抑制剂(PAI)、组织型纤溶酶原激活物(tPA)活性等指标,观察冻干纳豆粉对血栓的作用及其机理。将SD大鼠随机分5组(N=40),实验组用不同浓度的冻干纳豆灌胃,同等剂量的蚓激酶设为阳性对照,用Powerlab/4s描记股动脉血压,采用酶联免疫吸附法测定血浆中PAI-I及tPA活性。冻干纳豆组与正常对照组、单纯血栓组相比,复制血栓前血压无显著性差异(P>0.05),血栓复制40min后,冻干纳豆组、阳性对照组与单纯血栓组血压相比有显著性差异(P<0.001);冻干纳豆处理的动物与单纯血栓组动物比较,其血栓的湿重、干重显著性降低(P<0.001);冻干纳豆组、阳性对照组血浆中tPA活性升高,PAI/tPA比值与对照相比显著降低(P<0.001)。冻干纳豆对动脉血栓的形成有抑制作用。     

Anti-inflammatory effect of the hexane fraction from Orostachys japonicus in RAW 264.7 cells by suppression of NF-κB and PI3K-Akt signaling

We investigated the anti-inflammatory effect of the hexane fraction from Orostachys japonicus (OJH) in LPS (lipopolysaccharide)-stimulated RAW 264.7 cells. Pretreatment with OJH dose-dependently reduced the cellular NO (nitric oxide) concentration and also inhibited expression of iNOS (inducible nitric oxide synthase) protein and mRNA. By the prevention of IκBα (inhibitory factor kappa B alpha) phosphorylation and degradation, OJH inhibited LPS-induced NF-κB (nuclear factor-kappa B) activation. OJH had no effect on the LPS-induced phosphorylation of ERK (extracellular signal-regulated kinase), JNK (c-Jun N-terminal kinase), or p38, whereas it attenuated the phosphorylation of Akt in a dose-dependent manner. In addition, OJH suppressed the LPS-induced expression of LPS receptors CD14 and TLR4 (toll like receptor 4). These results suggest that OJH may interrupt LPS-induced pro-inflammatory cascades through inhibition of NF-κB and Akt activation.     

芋头水溶性多糖的分离纯化及其对巨噬细胞免疫活性功能的影响

为探究芋头水溶性多糖的免疫活性功能,本文用DEAE-52纤维素阴离子交换柱层析对由水提醇沉的方法得到芋头水溶性粗多糖进行分离纯化,并利用Sephadex G-200凝胶柱层析、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和傅里叶红外光谱分析其组成结构。再通过CCK-8试剂法、中性红吞噬实验、Griess法和酶联免疫吸附法测定其对巨噬细胞RAW264.7的增殖活性、吞噬能力以及分泌NO和细胞因子能力的影响。结果表明,得到的两种芋头水溶性多糖TPS₁和TPS₂纯度分别为87.4%和81.5%。TPS₁主要成分为含有甘露糖的α型中性多糖,TPS₂主要成分为含有硫酸基团的β型吡喃酸性多糖。细胞实验表明TPS₁和TPS₂在25~400 μg/mL浓度范围内对RAW264.7无毒害作用。其中,TPS₁能够显著提高该细胞的中性红吞噬能力(P<0.05),吞噬指数最大可达到空白对照组的2.07倍;TPS₂则具有更强的促进NO、细胞因子分泌的作用。TPS₁和TPS₂作用下的NO分泌量分别为空白对照组的3.07倍和4.57倍,TNF-α的分泌量为空白对照组的3.04倍和3.76倍,IL-1β的分泌量为空白对照组的1.37和1.54倍。以上结果表明,TPS₁和TPS₂均具有免疫调节的功能,有望进一步开发作为免疫调节剂添加到食品中。     

不消化性葡聚糖体外酵解液对RAW 264.7巨噬细胞的免疫调节作用

为探究不消化性葡聚糖（indigestible glucans,IGs）体外肠道菌酵解液的免疫调节活性,采用厌氧发酵模型利用健康人体粪便菌群分别对6 种IGs（大麦β-葡聚糖、海带多糖、酵母β-葡聚糖、茯苓多糖、抗性淀粉和聚葡萄糖）进行24 h 体外酵解,除菌过滤获得IGs 酵解液,对pH 值和短链脂肪酸含量进行测定。并以RAW 264.7巨噬细胞为研究对象,分为正常组、阳性组和IGs 酵解液组,采用CCK-8 试剂盒测定细胞活力,一氧化氮（nitric oxide,NO）检测试剂盒测定细胞NO 释放量,流式细胞仪检测细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量,酶联免疫吸附测定法测定细胞因子分泌量。结果表明,相比于正常组,6 种IGs 的24 h 酵解液均显著提高了RAW 264.7巨噬细胞活力、NO释放量、ROS 产生量和小鼠肿瘤坏死因子α 分泌量。各IGs 24 h 肠道菌酵解液对RAW 264.7巨噬细胞均具有免疫调节的作用。     

鳕鱼蛋白酶解肽不同分子量组分抗炎活性的比较研究

本研究比较了鳕鱼蛋白酶解肽（Cop protein hydrolytic peptide,CPHP）不同分子量组分对细胞炎症因子释放的抑制作用。鳕鱼蛋白经复合蛋白酶酶解制备得到鳕鱼蛋白酶解肽（CPHP）,并进一步超滤得到三个不同分子量组分CPHP1（>5000 u）、CPHP2（<3000 u）和CPHP3（3000⁵000 u）。用LPS诱导RAW264.7细胞炎症因子释放为模型,分别采用Griess法和ELISA分析NO和TNF-α、IL-1β、IL-6等细胞炎症因子的含量。结果表明,CPHP不同分子量组分对LPS（500μg/m L）所致的RAW264.7细胞生长抑制均有显著保护作用（p<0.05）,其保护作用随CPHP不同分子量组分的浓度升高而逐渐增强;CPHP和CPHP1的保护作用强于CPHP2和CPHP3。CPHP不同分子量组分对LPS（1μg/m L）诱导RAW264.7细胞NO、IL-1β、IL-6和TNF-α等炎症因子释放均有显著的抑制作用（p<0.05）,其抑制作用随CPHP不同分子量组分的浓度升高而逐渐增强;CPHP和CPHP1的抑制作用强于CPHP2和CPHP3。总之,CPHP不同分子量组分对LPS所致的细胞生长抑制均有显著的保护作用（p<0.05）,对LPS诱导的细胞炎症因子的释放均有显著抑制作用（p<0.05）;CPHP和CPHP1的细胞保护作用和炎症因子释放抑制作用均强于CPHP2和CPHP3的。