超聚硒植物堇叶碎米荠研究进展

在发现堇叶碎米荠具有强大聚硒能力后的二十多年中,对其富硒机制、营养品质、食用安全、生物活性的研究取得了较大进展。在人工强化栽培条件下,其硒含量最高可达9741.05mg/kg,有机硒占比达到85.11%,以硒代半胱氨酸为主。多组学研究揭示了一些与硒耐受有关的基因和代谢途径。堇叶碎米荠富含蛋白质、维生素、矿物质等营养成分,经急性和亚慢性毒性试验以及食用历史的大样本调查,证明实际属于无毒物质。体外试验和动物模型试验证实了富硒碎米荠提取物具有抗氧化、抑制肝癌细胞、改善仔猪肠道功能、提高蛋鸡产蛋、缓解疲劳等功能。通过提取工艺研究使硒蛋白提取实现得率75.4%、纯度77%、总硒含量(9097.33±35.66)mg/kg,采用固定酶提取硒肽,其有机硒可达2914 mg/kg。与其他硒源相比,堇叶碎米荠硒以有机硒为主,其清除自由基的能力强于无机硒。堇叶碎米荠硒蛋白能增强小鼠血液中的谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活力,抑制丙二醛的生成。另外,堇叶碎米荠硒肽能改善大鼠D-半乳糖诱导的代谢紊乱、记忆退化、海马体中的神经元损伤、减少神经炎症反应,对高脂食物引起肥胖以及代谢紊乱具有保护效应。     

碎米荠硒肽的制备及其体外抗氧化活性分析

本文以恩施碎米荠为原料,采用酶法制备具有抗氧化活性的碎米荠硒肽.以蛋白提取率为指标,通过单因素实验和正交试验优化了碎米荠蛋白的提取条件;以DPPH·、ABTS+·清除率为考察指标,优化了碎米荠蛋白的酶解参数,利用超滤设备对碎米荠蛋白酶解液进行分级分离,确定了碎米荠硒肽制备的最佳方案;考察了碎米荠硒肽的还原力、Fe2+螯...     

碎米荠蛋白制备工艺及抗氧化活性

以恩施堇叶碎米荠为原料,研究碎米荠硒蛋白的提取工艺,探讨碎米荠蛋白的抗氧化活性,结果表明:提取温度为50℃,料液质量体积比为1 g:40 mL,先后用去离子水和0.1 mol/L的NaOH溶液分别提取8 h。在此工艺条件下蛋白质得率最高,为75.4%,其中水提蛋白质质量分数为26.5%,硒质量分数为1 748μg/g;碱提蛋白质质量分数为52.3%,硒质量分数为1 513μg/g。碎米荠碱提蛋白经Sephadex G-100凝胶层析柱分离得到两个组分,分别为峰1和峰2,硒质量分数分别为668μg/g和650μg/g,通过研究碎米荠蛋白对羟自由基(·OH)和1-1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(·DPPH)的清除能力,发现碎米荠蛋白均有一定的清除自由基的能力。     

小麦低聚肽的结构特征及其体外抗氧化活性

通过扫描电镜、基础理化成分、相对分子质量分布、氨基酸组成、紫外光谱和圆二色光谱对小麦低聚肽结构特征进行分析,从羟基自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和氧自由基吸收能力（ORAC）4个方面对其体外抗氧化活性进行考察。结果表明,小麦低聚肽具有明显的球体颗粒状,表面有不规则褶皱和气孔,蛋白质和肽含量分别为95.86%、83.74%（均以干基计）,分子质量1000 u以下的组分占92.22%,必需氨基酸和疏水性氨基酸含量分别为20.46%、33.38%,在270 nm波长处有最大吸收峰。二级结构以多种构象并存,α-螺旋、平行式β-折叠、反平行式β-折叠、β-转角和无规卷曲含量分别为5.83%、3.14%、37.57%、20.32%和33.14%。小麦低聚肽对羟基自由基和DPPH自由基的半抑制浓度（IC50值）分别为9.62、1.54 mg/mL,ABTS自由基清除能力为3.53 mmol Trolox/g,ORAC值为1035.52 μmol Trolox/g。因此,小麦低聚肽具有较强的抗氧化能力,为其在抗氧化功能食品的开发利用提供一定的理论依据。     

壶瓶碎米荠多糖的提取、分离及抗氧化活性研究

研究壶瓶碎米荠多糖的提取、分离纯化方法,并分析其体外抗氧化活性。试验结果表明,通过超声波、酶辅助提取壶瓶碎米荠多糖的最佳工艺条件:液料比30 ∶ 1,超声时间25 min,纤维素酶添加量2%,提取温度90 ℃,提取时间120 min,测得实际值为48.53 mg/g。采用Svage法脱蛋白7次,多糖的损耗率较小。经DEAE-52纤维素层析得到4种组分多糖。体外抗氧化活性分析表明,壶瓶碎米荠粗多糖具有一定的还原能力,对ABTS自由基、羟基自由基的清除能力较强。     

壶瓶碎米荠多糖硫酸化结构修饰及抗氧化活性研究

为探索壶瓶碎米荠多糖结构修饰以及修饰后多糖的生物活性变化规律,利用三氧化硫-吡啶法对壶瓶碎米荠多糖进行了硫酸化结构修饰,得到了五种不同取代度的硫酸化壶瓶碎米荠多糖,取代度分别为0.46、0.55、0.69、0.72、0.80.通过傅里叶变红外光谱初步对其改性效果进行了分析.在此基础上研究了改性壶瓶碎米荠多糖的水溶性和抗...     

富硒碎米荠不同提取物抗氧化性能研究

为进一步开发利用恩施堇叶碎米荠,通过比较测定3种碎米荠提取物:碎米荠碱提物(CE)、碎米荠富硒蛋白(SPR)和碎米荠富硒多肽(SPI)对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(OH·)、2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸自由基(ABTS+·)和超氧阴离子自由基(O_2~-·)的清除能力,考察3种富硒碎米荠提取物的体外抗氧化性能,并与富硒酵母(SY)、无机硒(IS)和非富硒多肽与无机硒混合物(SPIS)进行比较。结果表明:SPI清除4种自由基能力最强,其对DPPH·、OH·、ABTS~+·和O_2~-·的清除率分别为87.5%,50.3%,99.7%,45.7%,IS清除4种自由基能力最弱,均不超过14%。通过比较SPR、SPI、CE、SY、IS和SPIS对4种自由基的清除率及半抑制浓度(IC_(50)),发现有机硒清除自由基的能力强于无机硒。     

响应面试验优化复合酶法提取碎米荠多糖工艺及其抗氧化活性

利用人工种植的碎米荠为原料,研究其粗多糖的提取工艺参数及抗氧化活性。首先对提取条件的单因素进行优化,在单因素试验基础上,进行提取条件的响应面优化。单因素优化条件为:质量分数2%复合酶(m(纤维素酶)∶m(果胶酶)=2∶1)、酶解时间90 min、酶解温度60℃、酶解pH 4.0。响应面优化结果为:酶解时间91.8 min、酶解温度57.1℃、酶解pH 4.17。在此条件下,碎米荠粗多糖提取率最高,粗多糖提取率预测值为4.14%,验证实验得到实际粗多糖的平均提取率为4.07%;与理论预测值相比,其相对误差约为1.62%。抗氧化活性研究结果显示,碎米荠多糖具有抗氧化活性,且效果优于VC。该实验结果为碎米荠多糖的提取以及多糖的性质研究提供理论依据。     

壶瓶碎米荠粗黄酮产品的抗氧化研究

以DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基和总还原力为指标,测定体外抗氧化能力;以小鼠血清中SOD、CAT、GSH-Px活性和MDA含量为测定指标,测定体内抗氧化能力。结果显示：壶瓶碎米荠含硒粗黄酮对自由基具有一定的清除作用,在实验考察的自由基中,除超氧阴离子外其余均显示出良好的抗氧化效果且随着剂量的增加呈现出良好的线性;动物实验中壶瓶碎米荠两种粗黄酮均能提高小鼠SOD、CAT、GSH-Px活性,降低MDA含量并呈现出良好的线性效果,含硒粗黄酮抗氧化效果显著高于普通粗黄酮,与阳性对照VC效果相似。当壶瓶碎米荠含硒粗黄酮剂量达到100 mg/kg时,芦丁实验组、粗黄酮实验组小鼠体重降低,出现轻微毒害作用,而含硒粗黄酮处理组体重差异不显著,从侧面说明硒具有一定增强免疫力的效果。     

鹰嘴豆低聚肽抗疲劳活性研究

目的：开发鹰嘴豆低聚肽抗疲劳产品。方法：检测鹰嘴豆低聚肽灌胃小鼠的生理生化指标和体外抗氧化能力,综合评价鹰嘴豆低聚肽抗疲劳能力。结果：鹰嘴豆低聚肽的超氧阴离子自由基清除能力(IC50为4.26 mg/mL)和还原力显著高于谷胱甘肽阳性对照组(P＜0.05);低、中、高剂量鹰嘴豆低聚肽均提高了小鼠肌糖原和肝糖原的含量,降低了血清尿素氮、丙二醛和乳酸的浓度;增加了小鼠过氧化氢酶、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶的酶活。结论：鹰嘴豆低聚肽具有显著的抗疲劳作用。     

乳清低聚肽的制备及其抗氧化活性

利用两步酶解法制备出乳清低聚肽,对其基础理化成分、氨基酸组成和分子量分布进行了分析,从羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基清除能力以及还原能力四个方面评价其抗氧化活性。组成分析结果表明:总蛋白质含量为86.83%,氨基酸组成丰富,富含抗氧化性氨基酸,其中亮氨酸、缬氨酸、脯氨酸含量较高;分子量小于1000u的组分高达85.78%,132~576u范围内组分占59.55%。抗氧化实验结果显示:乳清低聚肽具有较强的抗氧化活性,并且呈量效关系,对羟基自由基和DPPH自由基的半抑制浓度(IC50值)分别为:2.3、4.2mg/mL,浓度为2.5mg/mL时的还原能力与0.012mg/mL的抗坏血酸相当。      

模拟胃肠消化对牡蛎低聚肽抗氧化活性的影响

以去壳牡蛎肉为原料通过酶解法制备牡蛎低聚肽,并通过体外模拟消化试验,对比消化前后牡蛎低聚肽分子量分布、DPPH自由基清除能力、羟自由基(·OH)清除能力、ABTS自由基清除能力、氧自由基吸收能力(ORAC)变化,探究牡蛎低聚肽经模拟胃、肠道消化后抗氧化活性的变化。试验结果显示,牡蛎低聚肽的相对分子量主要在1 000 Da以下,胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后重均分子量下降不超过8.2%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,DPPH自由基清除率降低分别不超过7.9%,8.7%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,·OH清除率降低分别不超过9.3%,3.8%;胃蛋白酶消化后,ABTS自由基清除率降低9.2%,胰蛋白酶消化后,ABTS自由基清除率提高3.6%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,ORAC值分别提高11.5%,1.3%。胃肠消化对牡蛎低聚肽的抗氧化活性评价各指标均无显著性影响(P＞0.05)。说明牡蛎低聚肽具有较好的综合抗氧化活性和稳定性。     

大豆低聚肽中抗氧化肽的分离纯化及结构鉴定

为考察大豆低聚肽中抗氧化肽的活性和结构,以大豆分离蛋白为原料,采用两步酶解法制备出大豆低聚肽,在对其理化成分进行分析的基础上,以DPPH自由基清除能力为指标对其抗氧化活性进行了评价。结果表明:大豆低聚肽的DPPH自由基清除活性的IC50值约为2.6 mg/m L。利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对大豆低聚肽进行分离纯化,收集6个组分峰,对其DPPH自由基清除能力进行了测定。结果表明,6个组分的活性均比大豆低聚肽高。最后利用Q-TOF质谱仪对活性最高的组分5#进行了结构鉴定,并对鉴定出的6个肽段的DPPH自由基清除活性进行了评价。结果表明,6个肽段均有一定的DPPH自由基清除能力,其中Leu-Tyr(LY)、Leu-Ala-Gly-Arg(LAGR)、Phe-Ser-Arg(FSR)的清除率比大豆低聚肽高,是具有较高抗氧化活性的肽段。     

酶解玉米醇溶蛋白-叶黄素纳米粒的制备、结构表征及体外抗氧化和释放特性研究

本研究采用中性蛋白酶（Neutral protease, NPT）对玉米醇溶蛋白（Zein）进行酶解改性,通过反溶剂法构建玉米醇溶蛋白酶解物（Corn protein hydrolysate,CPH）负载叶黄素（CPH-LUT）纳米体系,研究了其结构表征、体外抗氧化活性及溶解释放特性。研究结果表明,最佳酶解条件为：酶用量 2.7%,酶解时间60 min,酶解温度50℃,酶解pH 6.0,在此条件下,对叶黄素的包封率最高可达92.1 ± 1.5%：制备的CPH-LUT纳米粒的平均粒径为173.7 nm,多分散系数为0.077,Zeta电位为-18.1 mV;抗氧化和体外释放实验表明,CPH-LUT纳米粒中叶黄素的溶解性以及抗氧化活性显著提高,叶黄素在胃液和肠液中的释放皆符合一级动力学模型,且CPH对叶黄素具有一定的缓释作用。NPT酶解改性的玉米蛋白可作为叶黄素类功能成分保护和输送的有效载体。     

高纯度大豆和花生低聚肽的体外抗氧化活性

为了比较高纯度大豆低聚肽和花生低聚肽的抗氧化活性,在分析蛋白质含量、氨基酸组成和分子量分布等理化性质的基础上测定清除自由基能力和还原力.结果表明:大豆低聚肽和花生低聚肽的蛋白质含量高达95%,谷氨酸、天门冬氨酸和亮氨酸的总量均在47%以上,相对分子质量分布在423.57和364.92;大豆低聚肽使0.2 mmol/L的DPPH自由基减少50%时的浓度SC50是52.85 mg/mL,约为抗坏血酸的1/2000,而花生低聚肽在上述条件下未达到50%的DPPH自由基清除率;在2.73～27.3 mg/mL浓度范围内,大豆低聚肽的还原能力约为花生低聚肽的1.51～1.83倍.大豆低聚肽的抗氧化效果优于花生低聚肽.     

腐乳中低聚肽氨基酸组成及抗氧化活性研究

采用水溶法制备腐乳低聚肽,对其进行理化及氨基酸组成分析,通过与抗坏血酸对比·OH、DPPH·和O_2~-·的清除能力,评价腐乳低聚肽抗氧化活性。结果表明:腐乳低聚肽总蛋白质含量为85.47%,氨基酸组成丰富,富含抗氧化性氨基酸,必需氨基酸含量为34.43%,具有抗氧化活性的氨基酸总量为30.5%;抗氧化试验结果显示,腐乳低聚肽具有一定的自由基清除能力,对·OH、DPPH·和O_2~-·的半抑制浓度IC50值分别为5.8,6.1,9.7mg/mL。因此,腐乳中低聚肽具有较强的抗氧化活性。     

醒酒玉米低聚肽的分离制备及其氨基酸序列分析

以脱淀粉玉米蛋白粉为原料,用Alcalase 2.4L在优化酶解条件下制得玉米低聚肽产品COP。通过体外醒酒活性及动物试验表明:COP具有较高体内外醒酒活性,同时发现COP的剂量与小鼠血醇含量的降低呈明显的剂量—效应关系。经凝胶过滤色谱和反相色谱分离分级及醒酒活性筛选,得到醒酒活性较强的玉米低聚肽级分COPⅢ-17。该级分通过超高效液相色谱—四级杆—飞行时间串联质谱联用分析,得到其氨基酸序列为:P-Y-L-P-L-L-P-S。     

五味子糖蛋白的纯化及其抗氧化活性

本文研究了五味子糖蛋白Sevage法除游离蛋白的最佳工艺条件,采用碱提酸沉法提取得到五味子糖蛋白,以蛋白质清除率和多糖损失率作为考察指标,分别考察氯仿与正丁醇的比例、样液与Sevage试剂的比例、振摇时间、脱蛋白次数对除蛋白效果的影响,在单因素实验的基础上采用正交及响应面实验优化工艺条件,得到响应面优化后结果最佳,即氯仿与正丁醇的比例为3:1,样液与Sevage试剂的比例为3:1,振摇时间为14 min,脱蛋白次数为3次,此条件下的蛋白质平均清除率为30.09%,多糖平均损失率为4.71%,综合评分平均值为88.11。体外抗氧化活性结果表明,五味子糖蛋白对于DPPH自由基和超氧阴离子清除能力较强(IC₅₀为1.08 mg/mL和0.80 mg/mL),并具有一定的还原能力。研究表明响应面法优选工艺简便高效;五味子糖蛋白具有体外抗氧化活性,值得进一步研究。