黑木耳多糖的结构组成及其免疫活性研究

目的:对高温蒸汽浸提法提取得到的黑木耳多糖进行结构解析,并探究其在免疫功能方面的活性。方法:通过气相色谱(GC)、红外光谱(FT-IR)、刚果红实验等对其结构进行分析,建立RAW264.7巨噬细胞的免疫模型以探究其免疫刺激活性。结果:黑木耳多糖主要由鼠李糖、甘露糖和葡萄糖组成,其具有和免疫活性相关的β-构型糖苷键和三股螺旋构象。黑木耳多糖可以促进巨噬细胞的增殖,增强巨噬细胞的吞噬作用,显著诱导RAW264.7细胞中一氧化氮的分泌及细胞因子IL-6、TNF-α的释放。结论:黑木耳多糖具有与免疫相关的多种结构,对巨噬细胞具有强烈的刺激作用,在用作潜在的免疫刺激剂方面具有广阔的前景,黑木耳也可作为调节人类免疫力的功能性食品发挥巨大的应用价值。     

龙胆多糖的结构表征及其体外免疫活性

对龙胆多糖的结构和生物活性进行研究,采用甲基化分析多糖的链接方式。结果表明,龙胆多糖中存在(→1)末端和(1→5)-链接的呋喃阿拉伯糖基、(1→4)-链接的吡喃半乳糖基,同时也存在其他含量比较少的糖基和分支。龙胆多糖中糖醛酸是以(1→4)-链接的半乳糖醛酸方式存在,对龙胆多糖的生物活性起着重要的作用。龙胆多糖可以促进RAW264.7细胞增殖并产生NO,而且NO的产生是通过一氧化氮合成酶mRNA上调实现的,同时龙胆多糖可以上调细胞因子COX-2和TNF-α的mRNA表达水平。     

绣球菌子实体单组分多糖结构表征及其免疫活性

分离纯化绣球菌子实体多糖得到单一组分,研究其结构和免疫活性,探究绣球菌单组分多糖结构与免疫活性之间的关系。以绣球菌子实体粗多糖为原料,经HZ-830大孔树脂、DEAE-52和Sephadex-G 100分离纯化后得到单组分多糖,命名为SlP,采用高效凝胶渗透色谱、红外光谱、离子色谱、核磁共振、原子力显微镜、扫描电镜、刚果红染色等对SlP结构进行鉴定。用MTT法检测SlP对巨噬细胞RAW 264.7增殖的影响,中性红染色测定SlP对巨噬细胞的吞噬能力。取细胞上清液,检测上清液中巨噬细胞NO的生成量。收集细胞,提取总RNA,采用荧光定量RT-PCR测定巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-3、IL-10、IFN-βmRNA的表达量。结果表明SlP是一种由葡萄糖构成的β-葡聚糖,分子质量集中在1.04×104u,具有三螺旋结构,表观呈现大小、形状不一、无规则的碎片状,分子间呈现无规则的线团和岛屿状,链间缠绕并具有分支状结构。SlP在质量浓度1.95～31.25μg/mL范围能促进RAW264.7巨噬细胞增殖;在质量浓度为7.81μg/mL时,促细胞增殖能力最强;在质量浓度1.95～7.81μg/mL范围时,能显著提高巨噬细胞的吞噬能力、NO分泌量,增加细胞内TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-3、IL-10、IFN-β免疫因子mRNA的表达量,且呈剂量效应关系。SlP可作为一种良好的功能食品原料应用于食品工业上。     

盐制巴戟天多糖结构表征及其免疫活性

该研究采用水提醇沉法从盐制巴戟天中提取粗多糖（SMP）,经DEAE-52纤维素柱和葡聚糖凝胶Sephadex G 100柱分离纯化得到多糖（SMP-4）,采用红外光谱、高效凝胶渗透凝胶色谱、气相色谱和核磁共振波对SMP-4进行结构表征,并以RAW264.7巨噬细胞为模型,通过测定其细胞增殖活性和细胞因子分泌水平来评价其免疫活性。多糖结构分析表明,SMP-4是由阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖、核糖、木糖、葡萄糖和甘露糖组成的,摩尔比例为：0.55:0.23:0.16:0.03:0.02:0.01:0.01,分子量为1.32×105 u的多糖。SMP-4具有六种糖苷键,其中→3)-D-Araf-(1→占比最高,为58.35%。在免疫活性评价分析中表明,与对照组相比,在15.625~500.000 μg/mL质量浓度范围内不影响RAW264.7细胞的增殖,同时能显著地促进肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的分泌。SMP-4质量浓度为500 μg/mL时,RAW264.7细胞分泌的TNF-α质量浓度最高,为2 100.00 pg/mL（P<0.001）;在31.25 μg/mL质量浓度下,RAW264.7细胞分泌的IL-1β质量浓度最高,为14.50 pg/mL（P<0.05）。综上,SMP-4表现出良好免疫活性,具有成为一种天然的免疫调节剂的潜力。     

白首乌多糖的免疫活性研究

目的:研究了白首乌多糖(RCBPs)体外对兔子淋巴细胞转化及体内对正常小鼠免疫功能的影响.方法:将RCBPs分为2、4、6g几三个剂量组,分别加入含有兔血的营养瓶内,通过观察T淋巴细胞的转化情况,研究多糖体外免疫功能状况;另将RCBPs分为高、中、低三个剂量组(150、100、50mg/kg·d),连续给小鼠灌胃7d,并进行小鼠体内免疫功能测试.结果:RCBPs各剂量组,均能极显著地(p<0.01)促进PHA诱导的家兔T淋巴细胞在体外的增殖能力;RCBPs能提高小鼠的胸腺和脾脏指数、巨噬细胞的吞噬功能、增强小鼠迟发型超敏反应、加速碳粒的清除.结论: 自首乌多糖具有免疫调节活性.     

白灵菇多糖的提取及其免疫活性研究

通过L18(37)正交试验,研究了物料粒度、料液比、微波功率、微波时间、提取温度、微波提取次数、乙醇与浓缩液比值这7个因素对白灵菇多糖得率的影响。试验结果表明:物料粒度、料液比、微波功率、微波时间、微波提取次数对白灵菇多糖得率均有显著地影响。并确定提取白灵菇多糖的最佳参数为:物料粒度0.150 mm、料液比1∶20(g/m L)、微波功率300 W、微波时间6 min、提取温度90℃、微波提取次数3次、乙醇与浓缩液比值4∶1(体积比)。在最佳条件下,白灵菇多糖提取率可达9.31%。通过小鼠脾淋巴细胞增殖的实验表明,在适当的剂量下,提取到的白灵菇多糖能明显提高小鼠的免疫功能。     

菠萝半纤维素多糖的提取纯化及免疫活性研究

目的：从菠萝皮渣中的分离得到半纤维素多糖,初步研究其结构及免疫学活性。方法：采用EDAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱色谱和Sepharose CL-6B凝胶过滤柱色谱分离纯化,得到菠萝半纤维素多糖PAP4-Ⅱ。高效液相凝胶渗透色谱检测其均一性及分子量,高效液相色谱、紫外光谱、红外光谱对多糖结构进行初步分析,体外T、B淋巴细胞增殖实验研究多糖的生物学活性。结果：菠萝半纤维素多糖PAP4-Ⅱ的分子量为1690kD,由木糖和阿拉伯糖两种单糖组成,含量分别为54.02mg/g和39.32mg/g,不含游离或结合的核酸、蛋白类物质,含有糖醛酸。体外细胞实验显示,PAP4-Ⅱ对T、B淋巴细胞增殖表现出抑制作用。结论：PAP4-Ⅱ是首次从菠萝皮渣中分离得到的酸性杂多糖。     

酶解糖化滇黄精多糖的结构表征及其免疫活性

该论文研究了酶解糖化下的滇黄精多糖结构和免疫活性,以探究酶解糖化下的黄精多糖结构特征及免疫活性的影响。结果表明,酶解糖化黄精多糖（SPKP）的多糖和还原糖含量分别为94.05%、4.1%。多糖结构分析表明,SPKP的红外光谱在1 016~1 147和931 cm-1处有吡喃糖特征吸收峰;单糖组成及摩尔比为阿拉伯糖:半乳糖:葡萄糖:甘露糖:果糖=0.032:0.117:0.419:0.048:0.383,重均分子量（Mw）为3 820 u。甲基化结果表明SPKP主要的糖苷键连接方式为→4)-Glcp-(1→,占比47.1%,分支度为34.1%,结合碘碘化钾和刚果红实验结果可以推测SPKP是一种含有复杂分支的三股螺旋多糖。RAW264.7细胞实验结果表明,酶解糖化黄精多糖在比较广的浓度范围内无毒性,均能促进细胞增殖,且有较高的细胞吞噬能力和NO水平,因此可以推测SPKP具有较好的免疫活性,且与其多糖结构有一定的关系。该研究可以为多糖与免疫活性的构效关系以及黄精新炮制方法的开发提供一定参考。     

马尾藻多糖的提取及其免疫活性

目的:研究马尾藻多糖(SP)的提取纯化和免疫活性。方法:采用超声波破碎法从马尾藻中提取制备马尾藻多糖(SP),破壁时间15min,破壁功率为108W,80℃水浴8h,过滤,离心,浓缩,用酒精沉淀出粗多糖,40℃真空干燥,Sevage法除蛋白,DE-52纯化除色素,透析,得到马尾藻细多糖(SP)并进行免疫实验。结果:多糖剂量20、40、60mg/kg·d时对小鼠脾的重量显著增加,p<0.05;当多糖剂量为40、60mg/kg·d时对小鼠腋下淋巴结的重量显著增加,p<0.05,对单核巨噬细胞的吞噬功能加强有显著影响,能明显提高小鼠碳粒廓清速率,提高吞噬指数α,p<0.05,并对巨噬细胞增生以及淋巴小结形成有明显作用;当多糖剂量为60mg/kg·d时对肝增重也达到显著水平,p<0.05。结论:马尾藻多糖有免疫促进作用。     

紫贻贝粗多糖免疫活性研究

对紫贻贝粗多糖的免疫活性进行了研究。建立免疫抑制模型,分析紫贻贝粗多糖对小鼠血清IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α、SOD、MDA、GSH水平影响。结果表明,小鼠血清IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α随着多糖含量的增加而增加。由此可见,紫贻贝粗多糖具有免疫调节作用。     

新疆昆仑雪菊多糖的分离纯化及其结构的初步鉴定

以新疆昆仑雪菊为原料,采用超声波辅助法提取雪菊多糖（KSCP）,经脱蛋白、脱色、透析、DEAE-52层析柱和SephadexG-100凝胶层析柱纯化后,获得两个多糖组分（KSCP1和KSCP2）;将分离纯化后的多糖组分经紫外光谱分析法、冻融分析法、SephadexG-100凝胶柱层析法对其纯度进行鉴定;采用凝胶渗透色谱法和气质联用法（GC-MS）对KSCP分子质量范围和单糖组成进行分析。结果表明,KSCP1和KSCP2均为单一组分;KSCP1是由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖4种单糖组成,其摩尔比为10.53∶5.02∶4.96∶1,分子质量范围为8 200～8 700 u;KSCP2主要由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖3种单糖组成,其摩尔比为1∶2.78∶5.07,分子质量范围为6 100～6 500 u。     

多糖的结构测定及应用

多糖是由醛糖或酮糖通过脱水形成糖苷键,并以糖苷键线性或分枝连接而成的链状聚合物.本文就多糖的初级结构和高级结构测定及应用做了综述,初级级结构常用的测定方法有化学分析法、仪器分析法、生物学分析法,高级结构常用的测定方法有X射线衍射法(XRD)、原子力显微镜法(AFM)、电子显微镜(EM)、扫描隧道显微镜( STM)、核磁共振(NMR)、圆二色谱(CD).目前多糖在医药、食品、动物生产、烟草、化妆品、环境治理等领域应用广泛.     

多糖的硫酸酯化及其对结构和功能活性的影响研究进展

硫酸酯化是近年来常见的多糖分子修饰方法,通过对多糖进行硫酸酯化修饰可以极大的改善多糖的功能特性。因此,本文首先综述了近年来常见的多糖硫酸酯化方法,然后从结构和功能两个方面,深入阐述了硫酸酯化对多糖分子结构和功能活性的影响,旨在为多糖硫酸酯的进一步研究提供参考。      

滁菊粉对面团特性和面包风味及其抗氧化活性的影响

为探究将滁菊粉应用至面包加工中,对面团特性以及面包风味、抗氧化活性的影响,采用Mixolab 2混合试验仪对面团热机械学特性进行测定,并利用气相色谱-离子迁移谱法检测及分析面包中的挥发性风味物质,同时测定面包对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二胺盐（2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS）阳离子自由基的清除能力以及面包中的总黄酮含量。结果显示,滁菊粉的加入显著增加了面团的吸水率同时降低了淀粉的峰值黏度和回生值,与对照面包相比,滁菊面包的风味物质含量更加丰富,其中d-樟脑为滁菊的特征风味成分,通过主成分分析得到2种样品的挥发性风味成分存在明显差异。在抗氧化活性方面,滁菊面包的总黄酮含量为260.47 mg/100 g,明显高于对照面包,且对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基的清除率均大于对照组。综上可知,面包中添加滁菊粉能够丰富面包的风味成分同时提高面包的抗氧化活性,为滁菊在面包类焙烤食品...     

海藻植物多糖的化学结构及抗氧化活性研究进展

海洋蕴藏着丰富的生物资源。近年来,从海洋生物中分离得到大量结构新颖、活性多样的生物多糖,其中最引人注目的是海藻植物多糖。目前,已从海洋褐藻门、红藻门、蓝藻门和绿藻门等多种海洋植物中分离提取结构各异的海藻多糖,如岩藻聚糖、琼胶糖、卡拉胶、螺旋藻多糖和石莼多糖等。研究发现,这些海藻多糖不仅具有显著的抗氧化活性,能够清除多种活性氧(reactive oxygen species, ROS)自由基;而且还能通过调节抗氧化系统及相关信号通路等治疗氧化应激介导的疾病,如糖尿病、癌症、肝损伤等。本文主要对近十年来海藻植物多糖的来源、类型、化学组成、结构特征、抗氧化活性以及氧化应激介导的疾病的保护作用等方面的研究进展进行综述,以期为海洋糖类药物和功能性食品的研究和开发奠定基础,并具有重要的指导意义。     

米糠多糖及硫酸酯化米糠多糖的体外免疫应答和抗肿瘤活性研究

以小鼠黑色素瘤细胞(B16)为抗肿瘤模型,通过MTT比色法评价米糠多糖及硫酸酯化米糠多糖对B16增殖抑制能力。以小鼠巨噬细胞Raw264.7细胞系为免疫模型,通过MTT比色法评价Raw264.7增殖能力,中性红吞噬试验评价巨噬细胞活性,Griess方法检测一氧化氮(NO)释放量,以及酶联免疫(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF-α)分泌量,考察米糠多糖及硫酸酯化米糠多糖的免疫活性。研究发现:米糠粗多糖(RBP)和米糠多糖纯化组分(RBP2a)主要通过增强机体的免疫功能而间接抑制肿瘤细胞。质量浓度为250μg/m L时,RBP和RBP2a样品组的NO释放量分别为对照组的4.67、6.36倍,TNF-α分泌量为对照组的441.1、465.5倍;RBP直接组和间接组的B16抑制率分别为8.16%、45.55%,间接组的B16抑制率比直接组增长458%。硫酸酯化米糠多糖(SRBP-B,SRBP-D,SRBP2a-B)一方面可以直接抑制B16增殖,质量浓度为1 000μg/m L时,对B16抑制率达73.65%、65.53%、78.43%,另一方面也可通过免疫途径提高NO和TNF-α等细胞因子释放,进一步提高抗肿瘤活性。但高浓度SRBP-B,SRBP-D,SRBP2a-B能抑制Raw264.7增殖,在500μg/m L时,Raw264.7存活率仅为83.26%、81.8%、79.78%。     

加压辅助碱法提取蝉花子实体多糖工艺优化及体外免疫活性研究

目的 优化加压辅助碱法提取蝉花子实体（人工培植）多糖的工艺,并对其免疫活性进行研究。方法 以多糖提取率为指标,在单因素基础上,经正交试验优化其提取工艺。同时以测定小鼠体重增长率、脏器指数,血清中TNF-α、IL-2、IL-6的含量、免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的含量以及小鼠脾淋巴细胞增殖刺激指数来评价免疫活性。结果 最佳提取工艺条件为：氢氧化钠浓度0.2 mol/L,提取压力1.2 MPa,提取温度70℃,提取时间30 min,在此条件下多糖提取率为8.69%,该方法提取效果优于单一提取法。体外免疫活性试验表明,蝉花子实体（人工种植）多糖能有效增加模型小鼠的体重增长率及脏器指数,细胞因子TNF-α、IL-2和IL-6的含量,免疫球蛋白IgA、IgG和IgM的含量和脾淋巴细胞增殖刺激指数,表明其具有明显的提高免疫力作用。结论 优化后的提取条件能够有效提取蝉花子实体（人工种植）多糖,得到的蝉花子实体（人工种植）多糖具有明显的提高免疫力作用。该研究可为蝉花子实体（人工种植）多糖的提取及开发应用提供科学依据。     

青钱柳多糖抑菌活性及及作用机理

为研究青钱柳多糖的抑菌活性和作用机制，用不同质量浓度的青钱柳多糖处理细菌，通过最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC）、抑菌生长曲线分析青钱柳多糖对细菌的抑菌效果，并从抑制效果最佳的受试菌菌体电导率、细胞蛋白和核酸含量、还原糖的释放、呼吸链脱氢酶活性、脂质过氧化程度、细胞内ATP含量、细胞外碱性磷酸酶活力的角度来揭示其抑菌机理。结果表明，青钱柳多糖对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coil）、单增李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）和鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）有明显的抑制作用，MIC分别为2、4、6、6 mg/mL，对枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的抑菌性不明显；对指示菌的电导率、蛋白质和核酸渗漏、还原糖释放、呼吸链脱氢酶活性、细菌脂质过氧化程度、菌体胞内ATP和胞外碱性磷酸酶（AKP）含量均有影响。以上现象表明，青钱柳多糖的抑菌性主要是破坏菌体细胞壁和细胞膜完整性，改变其通透性，使得胞内大小分子物质外泄，抑制了细胞的呼吸代谢和引起氧化损失，进而影响细胞的生长代谢或造成细胞死亡，达到抑菌效果。