发酵法制备沙光鱼多肽及其抗氧化活性

将米曲霉接种到pH5.0 的沙光鱼匀浆液中进行发酵培养,利用米曲霉产生的蛋白酶水解沙光鱼蛋白。研究发酵过程中蛋白酶的产生及沙光鱼蛋白的水解动态;对发酵液进行超滤,测定不同截留分子质量的发酵液清除自由基的活性及抗氧化活性。结果表明：随着发酵时间的延长,沙光鱼蛋白的水解度和多肽得率不断增加,多肽的平均链长度降低。发酵48h 后,多肽链平均长度为14,水解度为26.6%,多肽得率最高达到8.98%,抗氧化能力较强。不同截留分子质量的多肽液中,平均肽链长度为14 个氨基酸残基的多肽超滤液体外抗氧化能力较强。     

响应面优化鱼鳔胶原肽制备工艺及其抗氧化活性研究

鱼鳔富含胶原蛋白,营养价值高,但目前对鱼鳔的加工利用不足,造成资源浪费、环境污染。以草鱼鱼鳔为原料,以DPPH自由基清除能力为评价指标,通过单因素和响应面实验优化酶解鱼鳔胶原蛋白制备抗氧化活性肽的最佳工艺,并研究其体外抗氧化活性。结果表明:抗氧化活性肽的最佳制备工艺为,以风味蛋白酶为酶制剂,酶解时间79.34 min,料液比为3.09∶100(g∶m L),酶添加量为6 343.43 U/g,在此条件下制备的鱼鳔胶原肽的DPPH自由基清除能力达79.98%。鱼鳔胶原肽清除DPPH自由基、羟自由基的IC50分别为8.05 mg/m L和3.54 mg/m L,并且具有较强的还原力。因此,鱼鳔胶原肽具有较强的抗氧化活性,草鱼鱼鳔是制备抗氧化活性肽的良好原料。     

黄鳝鱼骨多肽制备及其抗氧化活性

以黄鳝鱼骨为原料,选用不同蛋白酶对其进行酶解,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率为指标,得到了具有较高抗氧化活性的黄鳝鱼骨多肽。通过单因素试验和响应面分析优化得到酶解黄鳝鱼骨制备多肽的最佳工艺条件为：选用木瓜蛋白酶,底物质量浓度40 mg/mL、酶添加量8 000 U/g、酶解温度59.2 ℃、pH 5.8、酶解时间4.1 h,在此条件下得到的黄鳝鱼骨多肽DPPH自由基清除率为90.85%。通过不同的体外抗氧化指标对黄鳝鱼骨多肽的抗氧化活性进行测定,结果发现黄鳝鱼骨多肽具有良好的抗氧化活性,随着多肽质量浓度的升高,其抗氧化活性不断增强,表现出良好的量效关系。     

乳酸菌发酵核桃粕制备多肽及其体外抗氧化活性

以核桃粕为原料,乳酸菌作为发酵菌种,通过发酵制备核桃粕多肽并对其抗氧化活性进行研究。首先对发酵时间、发酵温度、接种量3个因素进行单因素试验,在单因素试验的基础上进行响应面优化,得到最佳发酵工艺条件,通过体外抗氧化试验测定多肽的抗氧化能力。结果表明：影响试验的因素大小顺序为接种量>发酵温度>发酵时间。核桃粕多肽产量制备的最佳工艺条件：发酵时间12h,发酵温度37℃,接种量13%,在此条件下,多肽产量达到12.84mg/g,与预测值差异不大,证明该优化工艺可靠,按照优化工艺制备所得核桃粕多肽在质量浓度为10 mg/mL时,DPPH自由基清除率可达82%,具有较强的还原能力。     

弹性蛋白特性及其多肽抗氧化活性研究

通过牛颈韧带制得弹性蛋白,分析弹性蛋白的氨基酸成分。通过SDS-PAGE确定弹性蛋白的难溶性以及弹性蛋白多肽的可溶性。为获得多肽的抗氧化活性,利用邻苯三酚法测定其清除超氧阴离子自由基(O2-·)的能力,结果显示:在pH 7.5时多肽清除超氧阴离子自由基能力最强,达到35%;对多肽还原性的测定结果显示:随着弹性蛋白多肽浓度的升高,样品液的吸光值上升,其还原能力提高。     

鸿雁骨胶原多肽制备及其抗氧化活性研究

以鸿雁（Anser cygnoides）骨骼为原料,采用复合酶酶解制备雁骨胶原多肽,在单因素试验的基础上,采用响应面法优化酶解工艺。以水解度为指标,确定木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶为最佳酶组成复合酶,质量比为1∶2∶1,最佳酶解工艺为：酶解温度50℃、pH 7.1、加酶量6 100 U/g、酶解时间5 h,此时水解度为26.34%。通过超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除能力测定,发现雁骨胶原多肽的抗氧化活性与胶原多肽质量浓度成正相关,当底物浓度为6 mg/mL时,超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率分别为59.21%、51.82%。通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）和分子排阻色谱法测定复合酶酶解制备的雁骨胶原多肽分子量为851 Da～11 092 Da。氨基酸组成分析显示雁骨胶原多肽富含甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸及天冬氨酸等,这些特定的氨基酸与胶原多肽的抗氧化活性相关,为雁骨的开发利用提供参考。     

荞麦多肽的制备及其抗氧化活性的研究

本文以荞麦多肽浓度和水解度(DH)为评价指标,分别研究了木瓜蛋白酶、Protamex酶、Alcalase酶、Flavourzyme蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶酶解荞麦复合蛋白的最佳工艺,研究了超声波预处理对酶解效果的影响;并采用亚油酸-硫氰酸铁法对制得的荞麦多肽液在脂类中的抗氧化活性进行了测定。     

复合酶法制备小麦面筋蛋白多肽及其抗氧化活性研究

以小麦面筋蛋白粉为原料,采用复合酶法制备小麦面筋蛋白多肽,以小麦面筋蛋白酶解液的水解度(DH)、DPPH·清除率及Fe3+还原力为指标,对酶比例(碱性蛋白酶∶小麦蛋白水解专用酶)、反应时间、反应温度及反应pH四种因素各取3个水平,进行L9(34)正交试验,确定最优的制备工艺条件。最优工艺条件如下:酶比例为2∶1,反应时间为2 h,反应温度为50℃,反应pH 8.5。在此优化条件下进行验证实验,测得酶解液的DH为29.9%,DPPH·清除率为89.9%,Fe3+还原力为0.150。     

亚麻多肽制备及其抗氧化活性分析

该研究以脱脂亚麻籽粕为原料,比较不同酸性蛋白酶和中性蛋白酶的酶解多肽的得率,评价了酶解多肽的抗氧化活性。结果表明:3.350黑曲酸性蛋白酶的酶解效果最好,多肽得率可达28.52%。通过蛋白酶的单因素和正交试验,确定亚麻多肽制备的最佳工艺条件为:酶解温度60℃、pH2.7、加酶量6 500 U/g,酶解时间2.5 h,此条件下亚麻多肽得率为38.80%。凝胶色谱分析表明,该酶多肽的分子量主要分布在1 000 Da～7 600 Da范围内。酶解后的亚麻多肽具有良好的还原力,当酶解液质量浓度为1.5 mg/mL时,DPPH自由基清除率为89.99%,当酶解液质量浓度为0.6 mg/mL时,超氧阴离子的清除率为85.57%。     

鱼鳔胶原肽抗氧化稳定性研究

以DPPH自由基、OH自由基清除能力和还原力为评价指标,探究pH、温度、食品配料、金属离子、防腐剂以及体外模拟胃、肠道消化对鱼鳔胶原肽抗氧化稳定性的影响。结果表明:鱼鳔胶原肽在酸性环境中抗氧化活性保持得较好,在碱性条件下丧失较快;鱼鳔胶原肽具有较强的耐热性,高温不会降低其抗氧化活性;蔗糖、葡萄糖以及防腐剂(苯甲酸钠和山梨酸钾)对鱼鳔胶原肽的活性影响不明显,但添加高浓度的食盐会降低鱼鳔胶原肽的抗氧化活性;金属离子Zn~(2+)、Cu~(2+)对鱼鳔胶原肽抗氧化活性的影响较大,Ca~(2+)的影响较小,K~+、Mg~(2+)无显著影响;模拟胃肠道消化对鱼鳔胶原肽抗氧化活性无显著影响。     

小麦多肽酒酿造及其抗氧化性研究

以小麦蛋白粉为原料,用中性蛋白酶酶解、酒精发酵制得小麦多肽酒,并对其抗氧化性进行研究。结果表明：小麦多肽酒的最佳酿造工艺为：多肽含量0.5%、加糖量17%、酵母添加量0.9‰,25℃下发酵9d 后采用3500r/min 离心10min 后得小麦多肽酒为淡黄色,有光泽,澄清透明,无明显沉淀和悬浮物,小麦多肽酒的透光率为95.45%,多肽含量为5.20mg/ml,羟自由基清除率为30.63%,DPPH·清除率为64.47%,总还原力为1.35,超氧阴离子自由基(O2·)清除率为42.13%,溶血抑制率为49.92%。     

鳙鱼抗氧化肽延缓衰老的研究

为研究鳙鱼抗氧化肽是否有延缓衰老的作用,利用果蝇寿命实验和D-半乳糖致衰小鼠模型,观察了鳙鱼抗氧化肽对雌雄分养果蝇最高寿命和平均寿命的影响以及对衰老模型小鼠血清、肝脑组织中MDA、GSH-Px、SOD、MAO-B及线粒体中Ca2+泵和Na+泵等指标的影响。结果表明:鳙鱼抗氧化肽可显著延长果蝇的平均寿命和最高寿命,降低致衰小鼠肝脑组织中MDA的含量及脑组织中MAO-B的活性(p<0.01),提高抗氧化酶SOD和GSH-Px的活性,对线粒体中Na+泵和Ca2+泵的活力也有显著影响,从而证明了鳙鱼抗氧化肽具有延缓衰老的作用。     

草鱼鱼鳔胶原性质的研究

为了有效利用鱼类废弃物,从草鱼鳔中提取酸溶性胶原(ASC)和酶溶性胶原(PSC)并对其部分性质进行研究。ASC 和PSC 的提取得率以干基计分别为4.7% 和11.1%;ASC 和PSC 的紫外光谱表明,最大吸收峰都接近于230nm;氨基酸组成分析表明,ASC 和PSC 中羟脯氨酸和羟赖氨酸的总含量分别为16.87% 和17.55%;十二烷基硫酸钠- 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)图谱显示草鱼鳔胶原至少由两条不同的α链(α1 和α2)组成,与I 型胶原相似;ASC 和PSC 热变性温度(Td)分别为33.0、34.8℃,比猪皮胶原的热变性温度(37℃)低3～4℃。结果表明,草鱼鳔胶原有可能替代或作为补充陆生动物胶原广泛应用于工业领域。     

鲢鱼鱼鳞胶原蛋白肽抗氧化作用研究

研究鲢鱼鱼鳞胶原蛋白肽-SCSCP-的抗氧化活性. 依次采用截留分子量为5, 3, 1ku的超滤膜对鲢鱼鱼鳞胶原蛋白肽进行分离分级,通过6种体外抗氧化指标评价各超滤组分抗氧化活性的强弱,分子量小于1ku的SCSCP-IV体外抗氧化活性最强-P＜005- ;氨基酸组成分析表明,SCSCP-IV中总疏水性氨基酸和精氨酸含量均较高,推测可能与其较高的抗氧化活性有关;建立高脂动物模型,考察SCSCP-IV在大鼠体内的抗氧化作用,结果显示SCSCP-IV能显著提高大鼠血清中抗氧化酶超氧化物歧化酶与谷胱甘肽过氧化物酶活力以及降低丙二醛含量-P＜0 05- ,表明SCSCP-IV在大鼠体内具有较好的抗氧化作用;结果表明SCSCP在体外和体内均具有良好的抗氧化活性.     

纳豆芽孢杆菌固态发酵小米糠产抗氧化肽工艺优化

为提高小米糠蛋白资源的利用率,为小米糠的深加工提供参考,采用纳豆芽孢杆菌对小米糠进行固态发酵以获得小米糠抗氧化肽。在单因素试验的基础上以小米糠发酵后水提液的总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)为指标,使用Plackett-Burman试验对发酵条件进行筛选,然后使用响应面法对发酵条件进行优化,并测定优化后小米糠水提液的多肽含量和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力。结果显示最适发酵条件为:小米糠平均粒径0.22 mm(60~80目)、菌液接种量0.4 mL(约108 CFU/mL)、初始pH 6.7、发酵时间26 h、发酵温度35℃。此条件下小米糠固态发酵后提取液的T-AOC实际值为(344.51±8.02)U/g小米糠,多肽提取量为(68.37±0.92)mg/g小米糠,清除DPPH自由基IC50为0.12 mg/mL。该研究表明,小米糠固态发酵条件经过优化后能够获得具有较高抗氧化能力的生物活性肽。     

植物抗氧化(活性)肽的研究进展

详细阐述了植物抗氧化(活性)肽抗氧化的作用机理、检测评价方法、应用领域等研究进展。     

兼具抗氧化及抗菌活性的玉米醇溶蛋白肽制备及其乳化特性

采用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶分别水解玉米醇溶蛋白,对其水解产物进行抗氧化、抗菌及乳化活性分析。针对具有较好双抗活性及乳化性能的木瓜蛋白酶水解组分,进一步采用?KTA蛋白纯化系统及反相高效液相色谱分离得到纯化组分。通过基质辅助激光解析电离四极杆飞行时间质谱对纯化所得肽进行氨基酸序列分析,得出其氨基酸序列为LLAH。玉米醇溶蛋白水解所得LLAH和化学合成LLAH表现出相当的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、2,2’-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid),ABTS）阳离子自由基清除活性以及铁离子还原能力和乳化能力。两种LLAH均能抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和单核细胞增生李斯特菌的生长。LLAH稳定的乳液平均粒径为（263.4±3.5）nm,低于吐温-80稳定的乳液平均粒径（（286.8±3.5）nm）,前者的贮藏稳定性和氧化稳定性均高于吐温-80稳定的乳液,且对上述4 种受试菌株均表现出抑菌效果。LLAH的抗菌和抗氧化活性对其稳定乳液的稳定性具有积极贡献。研究结果对于开发新型玉米醇溶蛋白肽基功能性食品配料具有一定的参考价值。     

大黄鱼内脏抗氧化肽的稳定性研究

本文旨在研究大黄鱼抗氧化肽在不同条件下的抗氧化稳定性。通过凝胶排阻色谱选择抗氧化活性较强的组分,并采用DPPH自由基清除率以及Fe2+螯合力来评价大黄鱼抗氧化肽的抗氧化活性。在中性p H、常温、低浓度Na Cl以及适量K+,Ca2+,Al3+条件下,大黄鱼抗氧化肽抗氧化活性基本保持稳定,DPPH自由基清除率和Fe2+螯合力分别维持在88.5%和66.7%左右。在高浓度盐、高温、Fe2+,Fe3+,Cu2+等离子的引入和长时间紫外辐照下,大黄鱼抗氧化肽抗氧化活性下降超过30%。另外,酸性p H、70℃下加入葡萄糖、果糖、乳糖分别将大黄鱼抗氧化肽DPPH·的清除活性提高至90%左右,相反,碱性条件有利于大黄鱼抗氧化肽螯合Fe2+活性,说明处理过程对不同抗氧化指标的影响有所差异。此外,胃蛋白酶消化处理对大黄鱼抗氧化肽抗氧化活性影响不显著,而进一步的糜蛋白酶消化却显著降低了多肽的抗氧化稳定性。因此,合理的加工、贮藏工艺有利于维持大黄鱼抗氧化肽的稳定性。     

固态发酵菜籽肽功能特性研究

研究固态发酵制备菜籽多肽的功能特性,同时与菜籽蛋白功能特性进行比较。结果表明,发酵菜籽肽具有良好溶解性,在pH2.0～12.0 范围内,保持较高的氮溶解指数(NSI ＞ 85%),而菜籽蛋白在pH8.0 以下会凝聚沉淀;在20～80℃温度范围内,菜籽蛋白的吸水力和吸油力变化不大,而发酵菜籽肽的吸水力和吸油力则随着温度的升高而降低;在2～5g/100mL 质量浓度范围内,菜籽肽的乳化性优于菜籽蛋白;发酵菜籽肽也具有良好的起泡性和泡沫稳定性,但是不具有凝胶性;另外,在0～500μg/mL 质量浓度范围内,菜籽肽对DPPH 自由基的清除能力与其质量浓度成线性相关(R2=0.9912),IC50 为328μg/mL。