蚕蛹蛋白多肽液抗肿瘤作用的实验研究

通过动物及细胞实验研究蚕蛹蛋白多肽液的抗肿瘤作用。蚕蛹蛋白多肽质量浓度增加可使两肿瘤细胞存活率降低;肿瘤细胞总蛋白质含量随多肽浓度的增加逐渐降低(p<0.01),且在0.5～1.5g/L内呈剂量依赖性;对A549和Ketr-3的周期阻滞分别为G2～M期和G0～G1期;蚕蛹蛋白多肽液在150～600mg/g内,对小鼠S180和H22的抑瘤率分别达到28.72%～58.18%和27.64%～63.88%,明显延长EAC小鼠的生存时间。实验结果表明蚕蛹蛋白多肽液有显著的抗肿瘤作用。     

藤本豆多肽对小鼠免疫调节作用的影响

研究藤本豆多肽对正常小鼠和免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。分别以50、100、150 mg/kg剂量的藤本豆多肽给正常小鼠和免疫抑制小鼠灌胃,对照组灌胃等量的生理盐水,每天给药1次,持续10 d后,通过小鼠胸腺系数、脾系数、小鼠碳粒廓清实验、Con A诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验、血清溶血素测定及白介素-2水平来观察藤本豆多肽的免疫调节作用。实验结果表明,与对照组比较,藤本豆多肽中、高剂量组可显著提高正常小鼠的胸腺系数、脾系数、校正碳廓清指数、脾淋巴细胞转化指数、血清溶血素含量及白介素-2的水平;藤本豆多肽对免疫抑制小鼠的免疫指标均有显著提高。因此,藤本豆多肽具有一定的免疫调节作用。     

绿豆蛋白多肽对小鼠缺氧耐受力和免疫力提高的研究

研究绿豆蛋白多肽(Mung bean protein,peptide MBPP)提高小鼠缺氧耐受力和免疫力的作用。采用高压凝胶色谱法测定MBPP均重分子量(Mw);并将小鼠分成3组连续灌胃给药30 d后,分别进行常压耐缺氧、亚硝酸钠中毒存活、和急性耐缺氧试验;采用ConA诱导小鼠淋巴细胞转化实验(MTT法)及迟发性变态反应(DTH)、抗体生成细胞(PFC)检测及半数溶血值(HC50)实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验,检测绿豆蛋白多肽对小鼠免疫功能的影响;其结果:绿豆蛋白多肽的Mw为195~1 000,其中195~510组分占70.2%以上;绿豆蛋白多肽0.82 g/kg.BW和1.23 g/kg.BW剂量组能明显延长小鼠常压缺氧存活时间(P0.05)和延长亚硝酸盐中毒后小鼠存活时间(P0.05);绿豆蛋白多肽能提高小鼠的淋巴细胞增值力、脾脏生成抗体细胞数、半数溶血值及巨噬细胞吞噬能力,绿豆蛋白多肽能提高小鼠缺氧耐受力和免疫力。     

桑叶多糖对小鼠免疫调节作用的影响

目的:研究桑叶多糖对正常小鼠免疫功能的调节作用。方法:桑叶多糖分别以125、250、500mg/(kg.d)小鼠灌胃,空白对照组予以等量生理盐水,连续给药30d后,通过小鼠碳廓清实验、血清溶血素测定、脾淋巴细胞转化实验、脏器指数来观察桑叶多糖的免疫调节作用。结果:在125～500mg/(kg.d)剂量范围内,桑叶多糖可显著提高小鼠碳廓清指数和血清溶血素水平及ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力;低剂量组可显著提高小鼠胸腺指数。结论:桑叶多糖对正常小鼠具有一定的免疫增强作用。     

蚕蛹蛋白抗疲劳作用人群试食实验

选择58名年轻男女性志愿者（其中男18人，女40人）作为受试对象，观察蚕蛹蛋白对人体的抗疲劳作用。31名受试者口服蚕蛹蛋白（0．3g／d），另外27名受试者口服等量的安慰剂。连续服用4w。在整个实验期间，所有受试者均进行运动训练。于实验前、后分别进行运动测试和指标测定。结果表明，蚕蛹蛋白对受试者具有一定的积极作用：（1）食用该蚕蛹蛋白不会明显引起体内尿酸代谢失衡，出现高尿酸血症：（2）食用该蚕蛹蛋白可以降低受试者运动后血乳酸升高，增加机体的抗疲劳能力：（3）食用该蚕蛹蛋白可升高受试者最大耗氧量值，增加机体的运动耐力。结果提示：蚕蛹蛋白对人体具有较好的抗疲劳作用。     

蚕蛹蛋白对小鼠免疫作用的研究

目的:研究蚕蛹蛋白对小鼠免疫功能的影响。方法:测定蚕蛹蛋白对小鼠淋巴细胞增殖、巨噬细胞吞噬活力及溶血素生成的影响。结果:蚕蛹蛋白明显增强B淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖,促进小鼠巨噬细胞的吞噬活力和溶血素抗体生成。结论:蚕蛹蛋白明显增强小鼠的细胞免疫和体液免疫功能。     

酶法水解蚕蛹蛋白制备免疫活性肽工艺的研究

利用复合酶水解蚕蛹蛋白制备小分子多肽,通过正交实验得到水解工艺的优化组合为:木-Fla复合酶,酶用量为0.5%,底物含量为4%(1:25),酶解pH为7.0,反应温度为60℃,酶解时间为3h,在此条件下水解,小分子多肽得率为32.16%,同时建立了毛细管凝胶电泳测定蚕蛹多肽分子的检测方法.碳粒廓清实验表明:蚕蛹蛋白酶水解液中小分子多肽可增强小鼠网状内皮系统吞噬功能.     

蚕蛹多肽提高D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化及免疫能力

目的:研究蚕蛹多肽对D-半乳糖衰老模型小鼠抗氧化、提高免疫作用.方法:将昆明小鼠随机分为9组,包括空白组,衰老模型组,蚕蛹多肽(SPP)低、中、高剂量组,蚕蛹蛋白组,Vc组,谷胱甘肽组和鱼胶原蛋白肽组.除空白组外,其余8组腹腔注射D-半乳糖建立衰老模型,42d后眼球取血,颈椎脱臼处死小鼠,测定脑、肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量,测定胸腺指数,脾指数,血清中白细胞数(WBC).结果:与衰老模型组相比,Spp中、高剂量组肝和脑中CAT、SOD、GSH-Px和T-AOC活力提高显著(p＜0.05或p＜0.01),同时SPP组肝和脑中MDA含量均有不同程度降低(p＜0.05或p＜0.01).此外,SPP能提高胸腺指数、脾指数与WBC,可以缓解小鼠衰老导致的免疫低下症状.与阳性对照蚕蛹蛋白组和鱼胶原蛋白肽组相比,SPP表现出更强的减缓小鼠衰老的作用,相当于等体外抗氧化效果的谷胱甘肽组.结论:SPP有较强的体内抗氧化活性和提高免疫功能,也为蚕蛹资源的回收利用提供思路.     

驴骨蛋白多肽对小白鼠抗疲劳作用的研究

研究驴骨酶解产物蛋白多肽对小鼠的抗疲劳作用,对利用废弃驴骨蛋白资源来开发其深加工产品具有重要意义。通过对小鼠灌胃不同剂量的驴骨蛋白多肽粉（专利申请号：201010198758.2）,经30d后测定小鼠体重、负重游泳力竭时间、肝糖原和血乳酸的含量,研究驴骨蛋白多肽的抗疲劳生理活性。结果表明：驴骨蛋白多肽粉对小鼠体重增长无明显影响,但是能明显延长小鼠负重游泳时间,降低血乳酸含量,增加肝糖原含量。说明驴骨蛋白多肽粉具有缓解小鼠疲劳反应、增加小鼠抗疲劳的作用,为利用驴骨资源提供科学的理论依据。     

灵芝咖啡对小鼠免疫功能影响的研究

探讨灵芝咖啡对小鼠免疫功能的影响。分别以1.75、3.50、10.5 g/kg bw剂量和蒸馏水经口给予小鼠连续30 d后,测定小鼠胸腺指数、脾指数,进行脾淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应实验、抗体生成细胞检测、小鼠碳廓清能力检测、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力实验及自然杀伤细胞(Natural killer cell,NK)活性检测。结果表明,10.5 g/kg bw剂量组能明显增强刀豆蛋白A(Concanavalin A,Con A)诱导的小鼠脾淋巴细胞增值能力、迟发型变态反应、抗体生成能力、碳廓清能力及NK细胞活性,并能升高小鼠血清溶血素水平。结论证明灵芝咖啡具有增强免疫力作用。     

菜籽多糖对S180小鼠肉瘤及其免疫能力的影响

研究菜籽多糖的抑瘤作用及其机理。通过接种S180细胞复制荷S180瘤小鼠模型,分别腹膜注射生理盐水、环磷酰胺、菜籽多糖,测定各组小鼠肿瘤重量与脏器指数、免疫能力、抗氧化能力、乳酸脱氢酶活力等指标。结果表明:50～200mg/kg·d的RSPS抑瘤率在20．66%～34．710%之间;RSPS能显著提高荷瘤小鼠脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率与吞噬指数、迟发性超敏反应、小鼠血清溶血素含量与脾细胞抗体形成等指标,显著抑制荷S?小鼠血清LDH的活性,提高红细胞CAT活性,降低血清中MDA含量。以上结果表明RSPS在小鼠体内具有抑制S180肉瘤的作用,能增进荷瘤小鼠免疫力、清除自由基与抑制LDH活性可能是其抑制肿瘤的机理。     

藤茶多糖抗肿瘤及免疫调节作用的研究

研究藤茶多糖的体内抑瘤作用及免疫调节活性。通过制备S180荷瘤小鼠动物模型,随机分组,分别腹膜注射生理盐水、环磷酰胺和藤茶多糖,连续9d,然后测定小鼠瘤重、脏器指数、免疫能力、血清LDH活性等。结果表明,25～100mg/kg·d的藤茶多糖(AGP)抑瘤率为5.81%～32.56%;与模型对照组比较,50、100mg/kg·d的AGP能显著提高荷瘤小鼠迟发性超敏反应、腹腔巨噬细胞吞噬率与吞噬指数、小鼠血清溶血素含量与脾细胞抗体形成等指标,并显著抑制S180小鼠血清LDH活性和提高红细胞CAT活性(p<0.05,p<0.01)。说明,藤茶多糖具有体内抑制S180小鼠肿瘤生长的作用,其机理可能是通过增强荷瘤小鼠免疫力和抗氧化能力。     

大豆多肽对小鼠急性肝损伤保护作用的研究

采用CCl4 灌胃造成小鼠急性肝损伤模型,将大豆多肽分为高、中、低剂量组,分别为3、1.8、0.6g/kg·d喂饲小鼠30d,观察其对血清GPT、GOT 和ALP 及肝脏TG、TC、MDA 和GSH 的影响。实验结果表明：成功建立小鼠急性肝损伤模型,与模型组比较,大豆多肽可显著降低血清中GOT、GPT 和ALP 活性和肝脏TG、TC和MDA 含量,提高肝脏中GSH 含量,以高剂量组效果最佳,呈明显的剂量依赖性。大豆多肽对CCl4 引起的小鼠急性肝损伤具有保护作用。     

牛磺酸对顺铂所致H22荷瘤小鼠免疫器官及淋巴细胞损伤的保护作用

目的：研究牛磺酸对顺铂化疗荷瘤小鼠免疫器官和淋巴细胞损伤的保护作用。方法：H22荷瘤小鼠随机分为5 组：模型对照组、顺铂（1.5 mg/（kg·d））化疗组、顺铂＋高剂量（640 mg/（kg·d））牛磺酸组、顺铂＋中剂量（320 mg/（kg·d））牛磺酸组和顺铂＋低剂量（160 mg/（kg·d））牛磺酸组,末次用药24 h后眼球放血处死小鼠,测定小鼠体质量、瘤质量、脾脏指数、胸腺指数以及血清白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）水平,胸腺依赖性淋巴细胞（thymusdependent lymphocyte,T细胞）、骨髓依赖性淋巴细胞（bone marrow dependent lymphocyte,B细胞）增殖能力的变化情况。结果：顺铂化疗组小鼠体质量和瘤质量均明显低于模型对照组,抑瘤率为36%,顺铂＋中、高剂量牛磺酸组小鼠的体质量显著高于顺铂化疗组,抑瘤率分别达到51%和68%;顺铂化疗组小鼠的脾脏质量和脾脏指数明显低于模型对照组,而顺铂＋各剂量牛磺酸组小鼠的脾脏质量和脾脏指数均高于顺铂化疗组;顺铂化疗组小鼠的胸腺质量和胸腺指数明显低于模型对照组,顺铂＋高剂量牛磺酸组小鼠的胸腺质量和胸腺指数明显高于顺铂化疗组;顺铂化疗组小鼠血清IL-2、IFN-γ和TNF-α的分泌水平明显低于模型对照组（P＜0.01）;而顺铂＋各剂量牛磺酸组血清IL-2、IFN-γ和TNF-α的水平均高于顺铂化疗组;顺铂可明显抑制荷瘤小鼠对丝裂原刺激的T细胞和B细胞的增殖,顺铂＋高剂量牛磺酸组小鼠的T细胞刺激指数明显高于顺铂化疗组（P＜0.05）;而顺铂＋低、中剂量牛磺酸组小鼠的B细胞刺激指数则高于顺铂化疗组。结论：牛磺酸可协同顺铂发挥抑制肿瘤的作用,其机制与保护顺铂导致的动物免疫器官和淋巴细胞功能损伤有关。     

番茄红素的安全性评价及对小鼠免疫功能的影响

目的：研究番茄红素的食品安全性及对小鼠免疫功能的影响。方法：进行大鼠30 d喂养实验,小鼠急性毒性实验,测定小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能及NK细胞活性。结果：雌、雄小鼠的番茄红素急性经口毒性＞2 666.64 mg/kg,属实际无毒级;番茄红素200、433.33、666.67 mg/（kg•d）剂量（以体质量计,下同）在30 d喂养实验中没有对大鼠的血液常规和血清生化指标产生影响,且Ames实验、小鼠骨髓细胞微核实验、小鼠精子畸形实验结果呈阴性;以33.33、66.67、200 mg/（kg•d）3 个剂量进行小鼠免疫功能实验,200 mg/（kg•d）剂量组的鸡红细胞吞噬指数、自然杀伤（natural killer,NK）细胞活性高于阴性对照组,且差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：番茄红素食品安全性良好,高剂量番茄红素作为食品添加剂在小型啮齿类动物实验中具有增强免疫力的功能。     

野生蝉花多糖抗肿瘤活性及其作用机制

目的：研究野生蝉花多糖（wild Cordyceps sobolifera polysaccharide,CSP）体内外抗肿瘤活性。方法：以3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT）法考察不同剂量蝉花多糖体外对HeLa细胞的抑制作用,并以移植性S180实体荷瘤小鼠为模型检测体内抗肿瘤活性,通过机体免疫系统各项生化指标的测定,初步探讨其抗肿瘤作用机制。结果：当蝉花多糖质量浓度为400～800 μg/mL时,对体外培养的HeLa细胞具有抑制作用,并呈量效关系,当作用质量浓度为800 μg/mL时,抑制率达到61%。体内实验表明,蝉花多糖高剂量组（200 mg/（kg·d））、低剂量组（100 mg/（kg·d））均有一定抗肿瘤活性。当多糖给药剂量为200 mg/（kg·d）（以体质量计）时,对S180荷瘤小鼠抑瘤率达到42.9%;同时,荷瘤小鼠免疫器官指数显著增大（P＜0.01）,并激活淋巴细胞的增殖分化,对抗氧化应激系统具有较好的保护作用。结论：野生蝉花多糖在体内、外均有明显的抗肿瘤活性,其原因可能与增强免疫调节能力及抗氧化活性有关。     

亚麻籽油对小鼠免疫功能的影响

分别以0.15、0.05、0.025 g/mL的亚麻籽油作为高、中、低剂量组,按10 mL/（kg·d）给予小鼠30 d灌胃试验,分析测定小鼠体重、脏体比（胸腺指数、脾指数）、细胞免疫功能（小鼠淋巴细胞转化试验,迟发型变态反应试验）、体液免疫功能（抗体生成细胞试验,血清溶血素测定试验）、单核-巨噬细胞功能（碳廓清试验,腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验）和NK细胞活性,以考察亚麻籽油对小鼠免疫功能的影响。结果表明：亚麻籽油对小鼠的体重、脏体比、血清溶血素以及单核-巨噬细胞功能无显著影响（P＞0.05）;与对照组比较,中剂量组和高剂量组能够显著提高小鼠的细胞免疫功能（淋巴细胞转化,迟发型变态反应）和NK细胞活性（P＜0.05）。研究结果说明亚麻籽油对小鼠具有增强免疫力的功能。     

龟甲粉对小鼠免疫功能的作用研究

目的研究龟甲粉对昆明种小鼠免疫功能的作用。方法利用40只昆明种小鼠进行龟甲粉抗体生成细胞测定、对昆明种小鼠HC_(50)的影响、碳廓清能力以及鸡红细胞吞噬率及吞噬指数的影响实验。实验设4组,灌胃的龟甲超微细粉分别为生理盐水组与不同剂量组,连续灌胃30 d后测定各项指标。结果 0.3g/(kg·bw)及0.45 g/(kg·bw)组龟甲超粉可以显著促进小鼠B细胞分泌抗体的能力(P0.05),0.45 g/(kg·bw)组龟甲粉能显著增加小鼠半数溶血值(HC_(50))(P0.01),0.15 g/(kg·bw)及0.45 g/(kg·bw)组龟甲粉可以显著提高小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力及小鼠腹腔巨噬细胞鸡红细胞吞噬率及吞噬指数(P0.01)。结论龟甲粉可以增强小鼠体液免疫功能和单核-巨噬细胞功能的作用。     

蓝莓叶多酚对高脂小鼠血脂及肝脏组织的影响

目的：通过给小鼠灌胃不同剂量的蓝莓叶多酚,研究蓝莓叶多酚对小鼠血脂及肝脏组织的影响。方法：60 只健康昆明小鼠随机分为6 组,基础组、高脂模型组、蓝莓叶多酚低剂量组（50 mg/（kg·d））、蓝莓叶多酚中剂量组（150 mg/（kg·d））、蓝莓叶多酚高剂量组（300 mg/（kg·d））、立普妥阳性对照组（3 mg/（kg·d））,连续灌胃30 d,眼球取血,取出肝脏,测定血脂及肝脏指标。结果：灌胃50 mg/（kg·d）的蓝莓叶多酚,小鼠血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）水平较高脂模型组显著降低（P＜0.05）,且肝脏中谷草转氨酶（glutamic oxalacetic transaminase,AST）活力较高脂模型组的（329.57±15.06） U/g pro下降了26.7%;当蓝莓叶多酚的剂量增加至150 mg/（kg·d）时,小鼠血清总胆固醇、甘油三酯（triglyceride,TG）、LDL-C水平显著低于高脂模型组（P＜0.05）,高密度脂蛋白胆固醇水平（high densitylipoprotein cholesterol,HDL-C）显著高于高脂模型组（P＜0.05）,且肝脏中谷草转氨酶的含量较高脂模型组显著降低（P＜0.05）;当蓝莓叶多酚的剂量增加至300 mg/（kg·d）时,小鼠血清总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇水平较高脂模型组显著降低（P＜0.05）,高密度脂蛋白胆固醇水平较高脂模型组显著升高（P＜0.05）,且肝脏指数由高脂模型组的（4.98±0.33）%降至（4.19±0.14）%,肝脏中的谷草转氨酶及谷丙转氨酶（alaninetransaminase,ALT）的活力分别比高脂模型组的（329.57±15.06）、（354.31±23.31） U/g pro下降了32.15%和22.96%。结论：实验结果表明蓝莓叶多酚具有调节血脂及保护肝脏的功效。     

富硒大麦苗对小鼠免疫功能的调节

目的：通过测定小鼠细胞免疫与体液免疫,来研究富硒大麦苗对小鼠免疫功能的调节作用。方法：用不同剂量富硒大麦苗(0.1、0.5、1g/ml)对小鼠进行灌胃,同时设正常大麦苗组(1g/ml)、生理盐水组对照组,各组灌胃量为每天0.2ml。测小鼠的白细胞总数、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、抗体效价、抗体生成细胞数量以及免疫器官重量等指标,并对其进行统计分析。结果：富硒大麦苗组与生理盐水组比较能显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力(P ＜ 0.01),能明显提高抗鸡红细胞抗体的效价(P ＜ 0.05),明显提高脾脏指数(P ＜ 0.05),明显提高小鼠白细胞总数(P ＜ 0.05)。结论：富硒大麦苗有显著提高小鼠细胞免疫与体液免疫的功能,并与其剂量呈正相关。