甘草多糖对腹腔巨噬细胞分泌TNF-α及mRNA表达的影响

研究了甘草多糖(GP)对巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌及mRNA表达的影响.结果表明:GP能剂量依赖性地增加活化的巨噬细胞TNF-α的分泌量,当GP的添加量为200μg/mL时,TNF-a的分泌量和TNF-α mRNA表达达到峰值.在GP添加量为100μg/mL,培养时间为12 h时,TNF-α的分泌量和TNF-α mRNA表达量最大.     

甘草多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的激活作用

用含不同浓度甘草多糖(GPS)的培养液体外培养小鼠腹腔巨噬细胞,测定GPS对巨噬细胞吞噬能力、能量代谢水平和IL-1、IL-6、IL-12含量的影响。结果表明,添加GPS对巨噬细胞的吞噬能力、能量代谢水平和IL-1、IL-6、IL-12的含量具有显著影响,添加GPS的各组均显著高于空白对照组(p<0.01),在添加浓度为600μg/ml时,测定的结果除了IL-12,其余各指标的测定值基本上高于阳性对照组。表明GPS能激活巨噬细胞,提高其吞噬能力和能量代谢水平,同时可分泌多种的具有杀瘤作用的活性因子。综合各指标的测定值,GPS的添加浓度为600μg/ml。     

甘草多糖对小鼠腹腔巨噬细胞化学成分及胞内酶的影响

体外培养巨噬细胞,测定不同剂量的甘草多糖(GP)对巨噬细胞中细胞化学成分及胞内超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LSZ)的活性影响,初探对巨噬细胞的作用机理.试验显示,GP能活化巨噬细胞,使其体积明显增大,细胞内的糖原、酸性磷酸酶、酸性ATP酶、酸性酯酶、琥珀酸脱氢酶颗粒的颜色明显加深,酶的活性显著增强.用显微分光光度计进行单个细胞化学成分定量测定,药物添加组明显高于空白对照组.GP能显著增强SOD、LSZ活性,提高了机体的抗氧化能力.     

蓝莓多酚对巨噬细胞中iNOS、COX-2基因表达的影响

RAW264.7巨噬细胞被脂多糖预刺激后,添加从蓝莓中分离制备的不同质量浓度的可萃取多酚（extractablepolyphenols,EPP）和不可萃取多酚（non-extractable polyphenols,NEPP）,培养不同的时间,研究不同质量浓度及培养时间对诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、环氧合酶（cyclooxygenase-2,COX-2）基因相对表达量的影响。结果表明：从蓝莓中分离的EPP和NEPP均能抑制iNOS、COX-2基因表达,在12 h培养时间内,2 种多酚的抑制效果较好,且EPP的抑制效果明显好于NEPP。这证明蓝莓中的NEPP同EPP一样,可通过抑制iNOS、COX-2 mRNA的表达表现出明显的抗炎活性。     

菜籽多糖WPS-1对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响

采用MTT法检测细胞的活性,菜籽多糖WPS-1能促进巨噬细胞增殖,并表现出明显的剂量-效果关系,WPS-1促进巨噬细胞增殖的最佳质量浓度为40μg/mL。采用半定量RT-PCR进一步研究不同作用时间下40μg/mL WPS-1对腹腔巨噬细胞IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)这两种细胞因子以及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的影响。WPS-1促进腹腔巨噬细胞IL-6、TNF-α和iNOS mRNA表达的最佳时间为24 h。菜籽多糖对巨噬细胞的免疫功能具有调节作用。     

蓝莓多酚对小鼠巨噬细胞中NO、iNOS及COX-2分泌量的影响

RAW264.7细胞用LPS预刺激后,添加从蓝莓中分离、制备的可萃取多酚(EPP)和不可萃取多酚(NEPP),测定EPP和NEPP对细胞NO、iNOS、COX-2分泌量的影响。结果表明:蓝莓EPP和NEPP能抑制RAW264.7细胞中NO、iNOS及COX-2的分泌量,且随着添加浓度的增加,抑制效果明显。在相同浓度下,NEPP的抑制效果优于EPP,并且好于同浓度下的阳性对照组(TP)。这表明从蓝莓中分离、制备的NEPP同EPP一样可通过抑制NO、iNOS及COX-2的分泌表现出明显的抗炎作用。     

金雀异黄素对iNOS表达影响与抑制胃癌细胞增殖作用研究

为研究金雀异黄素对人胃腺癌细胞SGC 790 1增殖、DNA合成、一氧化氮产生量、一氧化氮合酶活性及其对诱导型一氧化氮合酶 (inducednitricoxidesynthase ,iNOS)基因表达的影响 ,应用MTT、3 H TdR掺入、DNA琼脂糖电泳、分光光度法、免疫组化及RT PCR方法 ,研究Gen抑制癌细胞生长的机制。结果表明Gen抑制SGC 790 1细胞的增殖、DNA合成 ,诱导细胞凋亡 ,并可显著诱导iNOSmRNA转录、增加iNOS蛋白表达 ,促进一氧化氮产生 ,提高一氧化氮合酶活性。为将Gen应用于胃腺癌的化学防治提供了实验依据     

黑木耳多糖提取工艺优化及其对小鼠巨噬细胞功能的影响

采用单因素试验及正交试验,考察液料比、搅拌转速、提取时间、提取温度和原料颗粒大小（目数）对黑木耳多糖提取得率的影响,并对黑木耳多糖提取工艺进行优化。通过灌胃法给药,采用小鼠碳廓清实验和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬荧光标记微球实验测定黑木耳多糖对小鼠巨噬细胞功能的影响。结果表明：影响黑木耳多糖提取得率的因素排序为,原料颗粒大小＞提取时间＞搅拌转速＞液料比。优化得到的黑木耳多糖提取最佳工艺条件为原料颗粒大小80 目、液料比30∶1（mL/g）、搅拌转速200 r/min、提取时间70 min、提取温度100 ℃（沸水浴加热）,此条件下黑木耳多糖提取得率可达8.46%。同时,黑木耳多糖对小鼠体质量、胸腺指数和脾脏指数无显著影响,但能明显提高小鼠单核-巨噬细胞的吞噬能力,说明黑木耳多糖具有提高动物非特异性免疫能力的作用。     

硒化乳酸菌胞外多糖对小鼠腹腔巨噬细胞及肿瘤细胞内游离Ca2+的影响

目的：研究硒化乳酸菌胞外多糖对小鼠腹腔巨噬细胞、SGC7901胃癌细胞及海拉细胞（Hela cells）内游离Ca2+的影响。方法：分离制备小鼠腹腔巨噬细胞,利用Ca2+荧光探针Fluo-3/AM及激光共聚显微镜测定加药后10 min细胞内Ca2+浓度的变化。结果：添加硒化多糖后,巨噬细胞内Ca2+浓度缓慢升高,而胃癌细胞与Hela细胞内Ca2+水平均有不同程度的下降。结论：通过对乳酸菌胞外多糖进行硒化修饰可增强其刺激巨噬细胞的能力,因而发挥其免疫功效。硒化多糖与肿瘤细胞表面受体结合后引起细胞内Ca2+内流的减少,提示硒化后的多糖可引起肿瘤细胞不同程
度的细胞凋亡。     

新疆产甘草品质评价及甘草多糖提取工艺研究

本文通过测定样品中甘草酸和甘草多糖的含量,比较不同新疆产甘草切片品质;并通过单因素和正交实验研究甘草多糖的提取条件.结果表明,人工种植甘草毛草的甘草酸及甘草多糖含量分别为2.9%和5.0%,高于统草(甘草酸2.2%和甘草多糖3.5%),而野生甘草样品中,含量最高的仅有2.4%和3.3%;十年生野生甘草中甘草酸和甘草多糖含量均为2.4%,与五年生及3-5年生甘草根切片无显著性差异;甘草多糖的提取条件为:30倍料/液比,90 ℃提取0.5 h,提取2次.     

甘草多糖提取纯化工艺研究

对甘草多糖提取纯化工艺进行了研究,通过单因素试验测定甘草多糖提取的影响,并进行正交试验优化,确定最佳提取纯化工艺条件。结果表明,甘草多糖最佳提取工艺为提取温度90℃、料液比1∶30 g/g、提取时间0.5 h、提取次数2次;最佳醇沉条件为乙醇浓度80%、絮凝时间12 h、室温下醇沉。     

甘草多糖对单核细胞增生性李斯特菌体内外生长的影响

目的：探讨甘草多糖对单核细胞增生性李斯特菌（Listeria monocytogenes,Lm）体内外生长的影响。方法：采用平板计数法和荧光显微镜、分光光度法及Bliss法分别分析甘草多糖对Lm生长速率和生物被膜形成的影响及计算细菌对小鼠半数致死量（median lethal dose,LD50）。观察低剂量（1 mg/kg）、中剂量（10 mg/kg）和高剂量（100 mg/kg）甘草多糖对感染100×LD50 Lm小鼠的保护力。小鼠感染0.01×LD50的Lm后1、7、14、21、28、35 d剖杀小鼠,检测脾脏、肝脏和肺脏中Lm分布的消长情况。结果：低质量浓度时（10、20、50 μg/mL）,甘草多糖随着质量浓度增加对Lm标准菌株10403S生长速率和生物被膜形成的促进作用呈上升趋势;但高质量浓度时（100、200 μg/mL）这种促进作用逐渐降低。Lm口服感染小鼠的LD50为2.70×108 CFU。高剂量甘草多糖对于100×LD50的Lm感染可提供50%的保护力。0.01×LD50的Lm感染小鼠,随着甘草多糖质量浓度增加小鼠脾脏、肝脏和肺脏的细菌量逐渐减少。结论：低质量浓度甘草多糖在体外对Lm的生长具有促进作用,但随着质量浓度增高促进强度逐渐降低,而甘草多糖可以提高小鼠抵抗Lm感染的能力。     

玉米蛋白粉中叶黄素和玉米黄素对小鼠巨噬细胞免疫调节活性的研究

采用体外细胞培养方法,研究小鼠腹腔巨噬细胞在LPS刺激的情况下,从玉米蛋白粉中提取的叶黄素和玉米黄素对其生成NO的影响作用.噻唑蓝（MTT）法检测淋巴细胞及巨噬细胞增殖,比色分析检测巨噬细胞吞噬中性红的能力,生物法测定肿瘤坏死因子α（TNF-α）活性,Griess法测定NO含量.结果表明：叶黄素和玉米黄素对小鼠腹腔巨噬细胞的生长有一定的促进作用,当叶黄素、玉米黄素分别为5μmol/L和2.5μmol/L时对小鼠腹腔巨噬细胞产生NO表现为抑制作用,而当叶黄素的浓度在10～40μmol/L、玉米黄素的浓度在5～30μmol/L时巨噬细胞NO的生成水平表现为能显著提高正常小鼠腹腔巨噬细胞产生NO,且呈现剂量效应关系.叶黄素在20～50μ mol/L,玉米黄素在10～40 μ mol/L的浓度范围内,能够促进巨噬细胞吞噬中性红的能力,并能诱导其分泌TNF-α.     

宁夏乌拉尔甘草多糖的提取及其体外抗氧化活性的测定

研究了甘草多糖的提取及体外抗氧化活性。采用水提醇沉法从宁夏乌拉尔甘草根中提取多糖,以Vc为标样,采用分光光度法测定了多糖溶液的总还原力,羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)、DPPH自由基(DPPH·)的清除作用及抗油脂氧化能力。结果表明:纯度88.03%的宁夏乌拉尔甘草多糖对羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)、DPPH自由基(DPPH·)具有良好的清除能力,同时还具有较强的还原能力和一定的抗油脂氧化能力,活性大小与多糖的浓度呈明显的线性关系。