蜂花粉中过氧化氢酶活性测定新法的探讨

过氧化氢酶作为蜂花粉的新鲜度一项重要指标，是国家标准ＧＢ／Ｔ１１７５８－８９评定蜂花粉质量的重要依据之一。因此，建立一种准确、简单、快速的测定方法有十分重要意义，该论文主要论述利用经典仪器－Ｗａｒｂｕｒｙ呼吸计测定过氧化氢酶活性的实验方法，该方法具有较好的精确度、重现性，变异系数亦很理想。可以上升为蜂花粉中过氧化氢酶活性测定的法定方法。     

油菜蜂花粉中不同分子量级分清除羟自由基的研究

本实验以油菜蜂花粉为原料,利用碱性蛋白酶对花粉蛋白进行降解,并用不同截留相对分子质量的超滤膜和纳滤膜对油菜蜂花粉酶解液进行相对分子质量分级,最后用Fenton体系测定了酶解物的不同相对分子质量级分清除羟自由基的能力。实验结果表明,酶解蜂花粉对Fenton体系产生的羟自由基的清除能力大于未酶解的水提物,经膜分离后得到的相对分子质量20010000D的级分抑制羟自由基的效果非常显著,尤其是相对分子质量5000-10000D的级分,说明油菜蜂花粉清除羟自由基的有效部位主要是在相对分子质量20010000D的级分中。实验结果显示,通过酶解和膜分离能有效地提高花粉清除羟自由基的能力。     

破壁方式对蜂花粉抑制α-葡萄糖苷酶活性的影响

以不同破壁方式处理过的油菜蜂花粉为研究对象,提取水溶活性成分,以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)作为底物,对蜂花粉作为天然α-葡萄糖苷酶活性抑制剂的功效进行了评价。结果表明:破壁方式对蜂花粉功能活性成分以及功效评价结果影响显著,温差破壁、超临界二氧化碳破壁、超声辅助酶解破壁及对照组对α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为(13.73±1.15)%,(-8.07±0.93)%,(16.70±0.87)%,(9.68±0.89)%;油菜蜂花粉多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率在(3.46±0.31)%~(-0.78±0.03)%,无明显线性关系;破壁后的样品多糖含量显著增加,但油菜蜂花粉多糖对α-葡萄糖苷酶活性无作用,可能与黄酮等其它成分相关。     

酶法破壁提取蜂花粉功能成分的工艺优化及抗氧化活性分析

目的 探索酶解结合超声和碱解从而高效破壁和提取蜂花粉中的活性成分。方法 采用扫描电镜对蜂花粉微观结构进行分析,并使用高效液相色谱法分析酚类物质的组成和含量变化。结果 经12.5%碱性蛋白酶酶解1 h后,蜂花粉可溶出部分的总酚、总黄酮和ABTS抗氧化值都达到最高值,分别为14.14±0.23 mg GAE/g dw, 2.34±0.04 mg RE/g dw和167.06±1.39 mg μM TE/g dw。将酶解辅以超声协同0.3 mol/L NaOH处理后,总酚、总黄酮、ABTS自由基清除能力及铁离子还原能力相比未处理花粉分别提高了191%、39%、69%和162%。扫描电镜结果显示,碱处理酶解后花粉细胞壁破碎程度显著增加,花粉内含物质从裂口处向外溢出,与理化指标趋势一致。最佳工艺条件为0.3 M NaOH超声-碱处理1 h,调节pH至7,12.5%的碱性蛋白酶于50℃下酶解1h。结论 超声碱处理可辅助酶解实现蜂花粉的高效破壁,同时小肽、多酚、黄酮等营养成分也进一步溶出,促进了蜂花粉的高值化利用。     

不同发酵法对油菜蜂花粉破壁的影响

采用自然发酵法、干性酵母直接发酵法、酵母发酵-酶解法对油菜蜂花粉进行破壁,比较3种破壁方法的破壁率、破壁花粉营养成分可溶性糖、游离氨基酸、总黄酮、维生素C及风味改善,从而筛选出最佳的破壁方法.结果表明,采用干性酵母直接发酵法、酵母发酵-酶解法得到的破壁率、营养成分及风味改善优于自然发酵法,从经济方面来考虑酵母发酵法为油菜蜂花粉的最佳破壁法.     

蜂花粉及其滋补食品的蛋白质含量及酶活性测定

花粉是一类全营养佳品,富含蛋白质,其氨基酸、维生素、微量元素、激素、酶和辅酶等,也对人体代谢活动有重要作用。本文测定9种峰花粉和1５种蜂花粉滋补食品的蛋白质含量及6种酶（乳酸脱氢酶。EC1、1、1、27,LDH;门冬氨酸转氨酶,EC 2、6、l、１,AST即GOT;丙氨酸转氨酶EC2、6;1、2 ALT即 GPT;精氨酸酶,EC 3、5、3、ARG;腺苷脱氨酶EC3、5、4、4,ADA;碱性磷酸酶;EC3、1、3、1,ALP）的活性,为评价各种蜂花粉及蜂花粉滋补食品的营养价值提供客观依据。     

油菜蜂花粉多肽饮料的研制及抗氧化活性评价

通过单因素和正交试验,研究不同因素对复合蛋白酶水解油菜蜂花粉效果的影响,优化了复合蛋白酶水解的最佳工艺、蜂花粉多肽饮料的最佳配方并分析了蜂花粉多肽饮料的抗氧化活性。酶解的最佳工艺条件为:10.0%油菜蜂花粉浆液,复合蛋白酶添加量3.5%(碱性蛋白酶与中性蛋白酶质量比=2∶1),p H 8.5,酶解温度55℃、时间200 min;在该条件下,多肽的平均得率74.37%。油菜蜂花粉多肽饮料制作的最佳配方为:以油菜蜂花粉蛋白酶解液100%为基准,分别添加0.10%柠檬酸,4.00%蔗糖,0.25%黄原胶。利用该配方制作的产品口感清爽,酸甜适中,味感协调,柔和;浅黄色,质地均匀,无颗粒或者絮状沉淀物;有油菜蜂花粉特有的香气,无异味;多肽含量1.63%(m/V),各项理化指标和微生物指标均符合相应国家标准;该产品具有良好的抗氧化活性,对清除羟自由基和超氧阴离子分别为85.28%、46.52%。     

纤维素酶对油菜蜂花粉的破壁作用

研究纤维素酶对油菜蜂花粉破壁的影响。通过单因素试验分别考察料液比、加酶量、酶解温度、酶解时间对油菜蜂花粉破壁的影响,以油菜蜂花粉破壁率和多糖提取率为指标,根据单因素试验结果设计正交试验,得出油菜蜂花粉的最佳破壁条件为料液比1:50(g/mL)、加酶量为1.75%、酶解温度47.5℃、酶解时间5.0h,此条件下的油菜蜂花粉的破壁率为85.72%,多糖提取率为18.85%。     

不同贮存温度下茶花蜂花粉蛋白质组的初步研究

采用蛋白质组双向电泳技术,对窜温及-20℃贮存6个月的茶花蜂花粉蛋白质组差异进行了比较.结果表明,室温贮存6个月的茶花蜂花粉总蛋白质为261个,-20℃贮存6个月的茶花蜂花粉总蛋白质为396个,室温贮存6个月的茶花蜂花粉蛋白质较-20℃贮存6个月的茶花蜂花粉蛋白质数目明显减少,说明室温贮存可能会引起茶花蜂花粉内蛋白质的损失.同时发现,两种不同贮存条件下的茶花蜂花粉,也存在着蛋白质丰度的差异,其中24个蛋白质在室温贮存时丰度较大,而在低温贮存条件下丰度较小;112个蛋白质在室温贮存下丰度较小,而在低温贮存下丰度较大.可见,不同温度条件下贮存蜂花粉会对蛋白质种类及丰度均产生较大影响.冷冻贮存蜂花粉是一种比较好的贮存方法.     

茶花粉黄酮对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

为研究茶花粉黄酮对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,以茶花粉为原料,将提取、萃取及大孔吸附树脂处理得到的10个组分分别进行黄酮含量及α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定。结果表明,茶花粉粗提物经萃取后黄酮类物质主要在乙酸乙酯中富集,乙酸乙酯萃取相经大孔树脂层析后50%乙醇洗脱相中的黄酮含量最高(180.17 mg RE/g),当该样品浓度为5 mg/m L时,对α-葡萄糖苷酶的抑制率达82.67%,显著高于其它样品(p0.05);相关性分析表明,茶花粉黄酮含量与α-葡萄糖苷酶抑制活性呈极显著正相关关系(0.867,p0.01);酶动力学分析显示蜂花粉黄酮提取物对α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度为1.27 mg/m L,抑制类型为可逆非竞争型抑制,抑制常数为1.17 mg/m L。该研究结果为蜂花粉黄酮及α-葡萄糖苷酶天然抑制剂的制备提供理论依据。     

六种蜂花粉多酚和黄酮类物质含量测定及抗氧化性的研究

对六种不同蜂花粉中多酚及黄酮类物质进行定量,并且进行了醇提物抗氧化性的初步探讨。结果表明,这六种蜂花粉均有比较强的DPPH·自由基清除能力以及还原能力,是一种优良的天然抗氧化剂。     

黑松和赤松花粉取粉处理和干燥贮藏技术研究

本实验测定出黑松和赤松花粉的生活力,制定了松花粉等级和质量指标;优选出黑松和赤松雄花穗采后取粉处理的最佳方法,确定了松花粉适宜的干燥温度和处理时间,确定了松花粉长期贮藏适宜的包装方式和含水量指标。     

13种植物源蜂花粉蛋白质的营养学评价

测定向日葵、益母草和五味子等3种植物源蜂花粉的蛋白质和氨基酸含量,并结合文献报道的向日葵和五味子蜂花粉及另外10种植物源蜂花粉的蛋白质和氨基酸含量数据,采用国际上通用的营养价值评价方法对13种植物蜂花粉的蛋白质含量、化学评分（chemical sore,CS）、必需氨基酸指数（essential amino acid index,EAAI）、氨基酸比值系数分（score of ratio coefficient of amino acid,SRCAA）、生物价（biological value,BV）和营养指数（nutritionalindex,NI）等进行综合评价。评价结果表明,蜂花粉的蛋白质含量为14.3%～29.0%,CS为64.4～89.3,EAAI为66.9～107.0,SRCAA为79.9～91.1,BV为61.2～104.9,NI为11.7～29.3;茶花蜂花粉的上述6项指标均高于平均值,分别为29.0、83.1、101.3、88.8、98.7和29.3,是所分析的13种蜂花粉中营养价值最均衡的蜂花粉。     

The hexosamine content of some seeds and pollens

Twenty-one Monocotyledon and 59 Dicotyledon seed samples, nine pollen samples and 12 fractions of seeds were analysed for their content of dry matter, total nitrogen and glycoprotein and total hexosamine. An estimate was made of the frequency of occurrence of hexosamine in the proteins of the samples. The dry matter contents (as g per 100 g sample) showed little variation (88.0-95.1, seeds and 84.1-90.9, pollens). The total nitrogen contents (as g per 100 g sample) varied from 0.84-3.29 (Monocotyledons), 1.42-7.13 (Dicotyledons) and 2.91-5.43 (pollens). The glycoprotein hexosamine content (as mmol per 100 g sample) varied from 0.078-0.32 (Monocotyledons), 0.11-0.73 (Dicotyledons) and 0.36-0.78 (pollens). The frequency of occurrence of hexosamine in the proteins (as hexosamine residues:amino acid residues) varied from 1:450 to 1:1940 (Monocotyledons), 1:300 to 1:3640 (Dicotyledons) and 1:330 to 1:760 (pollens). The decomposition of hexosamines during prolonged acid hydrolysis prevented accurate estimates of non-protein hexosamine contents being obtained but the results indicated that they varied from a few percent of, to about equal to, the contents of glycoprotein hexosamine in the samples examined.     

油菜、菊花和荷花蜂花粉中磷脂的色谱分析

以油菜、菊花、荷花蜂花粉为原料,采用薄层层析法(thin layer chromatography,TLC)法分离纯化蜂花粉中的磷脂,并用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)法测定磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰丝氨酸(PS)、脑磷脂(PE)、卵磷脂(PC)及溶血卵磷脂(LPC)的含量。结果表明：3种蜂花粉中总磷脂含量为1.19～3.98g/100g,3种花粉存在极显著差异(P＜0.01);PC是蜂花粉磷脂的主要成分,占总磷脂的34.30%～59.69%;在油菜蜂花粉中检测到PI、PS、PE、PC、LPC,菊花蜂花粉未测出PI,荷花蜂花粉未测出PI、LPC。结论：油菜蜂花粉中磷脂种类最丰富、总含量最高,是花粉磷脂的较好来源。     

不同产地油菜蜂花粉抗氧化活性比较研究

为研究不同产地油菜蜂花粉的抗氧化活性,本实验以青海、湖北、陕西、安徽、新疆、四川、福建7个油菜主产区的油菜蜂花粉为研究对象,测定其乙醇提取物的总酚含量、总黄酮含量、还原力和对DPPH自由基清除率,结果表明,新疆与湖北油菜蜂花粉提取物的抗氧化活性显著高于青海、陕西、福建、四川、安徽(P<0.05),安徽油菜蜂花粉提取物的抗氧化活性显著低于其他产地(P<0.05)。     

不同蜂花粉中磷脂成分的比较

采用薄层色谱、高效液相色谱分离测定蜂花粉中磷脂,并分析磷脂中不饱和脂肪酸的含量。结果表明：茶花、葵花、玫瑰、籽瓜、益母草蜂花粉中富含磷脂,其中茶花蜂花粉中总磷脂含量最高,主要由磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱及溶血卵磷脂组成;脂肪酸组成分析表明,蜂花粉中磷脂多不饱和脂肪酸含有较高含量的亚油酸和亚麻酸,5种蜂花粉磷脂中多不饱和脂肪酸含量均在50%以上,其中茶花蜂花粉磷脂中亚麻酸在脂肪酸含量中最高达56.0%。蜂花粉中多元不饱和磷脂具有广阔的开发前景。     

Flavonoids as biochemical markers of the plant origin of bee pollen

The flavonoid compounds present in almond (Prunus amygdalus, Rosaceae), Jara (Cistus sp Cistaceae), Echium sp (Boraginaceae) and Chrysanthemum sp (Compositae) bee pollens have been studied by TLC, 2D PC and HPLC techniques. These bee pollens show characteristic flavonoid patterns which allow their use as biochemical markers of their plant origin. In addition, the flavonoid patterns of natural almond and ?Jara’? pollens have been shown to be identical to those of the corresponding bee pollens confirming their use as chemical markers. The flavonoid aglycones obtained by acid hydrolysis of pollen flavonoids are also useful for identification purposes. Almond bee pollen contains 8-methoxykaempferol, kaempferol and quercetin 3-glycosides, ?Jara’? bee pollen produces quercetin and isorhamnetin 3-glycosides and trace amounts of myricetin and kaempferol 3-glycosides, Echium bee pollen contains mostly kaempferol 3-glycosides and traces of quercetin 3-glycosides, and Chrysanthemum contains kaempferol, apigenin, and quercetin 3-glycosides. The major compound in almond pollen, namely 8-methoxykaempferol 3-glycoside, was not detected in the related apple, pear, cherry and plum pollens.     

电感耦合等离子体质谱法测定荷花花粉和油菜花粉中镉含量的不确定度评定

目的评定荷花花粉和油菜花粉样品中镉含量可能产生的不确定度,以提高测量结果的准确性。方法采用NexIon 350X型电感耦合等离子体质谱仪对2种蜂花粉中镉的含量进行测定,建立实验过程的数学模型,对主要影响测量不确定度的样品称量、标准溶液的配制、标准曲线的拟合、测量的重复性等因素进行分析,并对各不确定度分量、合成标准不确定度以及扩展不确定度进行计算。结果荷花花粉中镉含量测定结果不确定度为:U=(0.166±0.010) mg/kg, k=2;油菜花粉中镉含量测定结果不确定度为:U=(0.0599±0.0033) mg/kg, k=2。结论影响测定荷花花粉和油菜花粉中镉含量的不确定度的主要来源为标准溶液稀释和样品重复性试验。电感耦合等离子体质谱法测定荷花花粉和油菜花粉中镉含量是可靠的。     

Drying and conservation conditions of pollen

In this study, drying and conservation conditions of pollens (for Anzer Honey) were experimentally investigated, and the general drying curve equation was derived by applying the Least Squares Method. Drying experiments were conducted in solar‐ and electric‐assisted dryers. Pollens were placed on the shelves as 50 each g in a single layer having a depth of 2.5 mm. During the drying experiments, the shelf temperatures of the drying cupboard were regulated between 40 °C and 45 °C. Weight losses, moisture contents and mass shrinkage of pollens and average temperatures in the shelves were determined and calculated based on drying time. Additionally, the experimental uncertainty values were calculated as approximately 18%, depending on the experimental results. It was concluded that pollens should be dried at temperatures between 40 °C and 45 °C for between 2.5 and 3 h so as not to change the colour, flavour, smell and structure, and conserved in brown bottles under vacuum in a shady medium. © 2000 Society of Chemical Industry