PUMA 对胃癌 SGC-7901细胞增殖的影响

目的：研究外源性 p53正向细胞凋亡调控因子（p53 up-regulated modulator of apoptosis protein,PUMA）基因对胃癌 SGC-7901细胞增殖的影响。方法制备 PUMA 基因并插入 pcDNA 3．1（－）质粒,观察其转染胃癌SGC-7901细胞后 PUMA 蛋白的表达并用 MTT 法检测细胞的增殖力[实验设3组,分别为无转染空白胃癌细胞对照（SGC-7901）组,空载质粒转染胃癌细胞对照（SGC-7901-pcDNA3．1）组及重组 PUMA 质粒实验（SGC-7901-pcD-NA3．1-PUMA）组]。结果PUMA 经限制性核酸内切酶切及测序分析,与预期结果吻合。转染质粒后,SGC-7901组与 SGC-7901-pcDNA3．1组 PUMA 表达比较差异无统计学意义（P ＞0．05,相对表达量分别为0．24±0．01和0．23±0．01）,SGC-7901-pcDNA3．1-PUMA 组与另2组比较 PUMA 表达明显增高（P ＜0．05,相对表达量为0．39±0．01）。SGC-7901、SGC-7901-pcDNA3．1和 SGC-7901-pcDNA3．1-PUMA 组的 A 值分别为0．43±0．04、0．46±0．04和0．32±0．03,SGC-7901-pcDNA3．1-PUMA 组与另2组比较明显下降（均 P ＜0．01）,SGC-7901组与SGC-7901-pcDNA3．1组比较差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论外源性人类 PUMA 基因对胃癌细胞增殖有抑制作用。     

5-异丁基-3-( 2-氯) 苄氧基乙内酰脲对白血病细胞 K562 生长与凋亡的影响

目的：探讨5-异丁基-3-（2-氯）苄氧基乙内酰脲（YL3）对白血病细胞 K562细胞生长与凋亡的作用。方法将K562细胞置于含10％FBS的 RPMI-1640培养液中培养。实验分4个组：空白对照组、阴性对照组、阳性对照组（HU组）、受试药物组（YL3组）;除空白对照组外,其余3组均接种K562细胞;HU组、YL3组分5个亚组,分别加入10-3～10-7 mol·L-15个梯度浓度的 HU或 YL3。采用 MTT法检测 YL3对 K562细胞增殖的影响;AV/PI双染流式细胞术检测 YL3对 K562细胞凋亡的影响;瑞氏染色法观察细胞形态的变化。结果 YL3在10-3～10-6 mol·L-1浓度范围内显著抑制 K562细胞增殖（P＜0．01或 P＜0．05）,其半数细胞抑制浓度（IC50）值为88．5μmol·L-1;YL3有促进K562细胞凋亡的作用,其高剂量的凋亡率显著高于同剂量的 HU组（P＜0．01）,且呈量效关系（P＜0．05）。结论5-异丁基-3-（2-氯）苄氧基乙内酰脲具有抑制 K562细胞增殖,诱导其凋亡的作用。     

肿瘤抑制基因 PTEN对人气道平滑肌细胞迁移和增殖的影响

目的：观察肿瘤抑制基因 PTEN 对人气道平滑肌细胞（HASMCs）迁移和增殖的影响机制。方法用重组PTEN 腺病毒转染体外培养的 HASMCs（Ad-PTEN 组）,并与携带绿色荧光蛋白（GFP）的腺病毒空载体（Ad-GFP组）和空白对照（MOCK）组对比,采用 MTS 测定细胞增殖、Transwell 法观察细胞迁移、共聚焦显微镜观测细胞骨架的变化、免疫印迹法检测 PTEN、p-Akt、Akt、p-FAK、FAK 蛋白的表达。结果Ad-PTEN 组的吸光度（A）值和每单位面积迁移的细胞数显著低于 Ad-GFP 及 MOCK 组（均 P ＜0．05）,Ad-GFP 和 MOCK 两对照组间差异无统计学意义（P ＞0．05）,提示过表达 PTEN 基因能抑制 HASMCs 的增殖和迁移的作用。Ad-PTEN 组细胞轮廓变细,伪足及应力纤维明显变少,而 Ad-GFP、MOCK 组细胞有少量短而细的应力纤维,很少丝状伪足形成。与 Ad-GFP 及 MOCK 组比较,Ad-PTEN 组 p-Akt 表达水平和 FAK 蛋白的磷酸化水平显著下调（均 P ＜0．05）,Ad-GFP及 MOCK 两对照组间差异无统计学意义（P ＞0．05）,说明过表达 PTEN 能下调 Akt 蛋白和 FAK 蛋白的磷酸化水平。结论过表达 PTEN 可能通过下调 p-Akt 及 p-FAK 的表达,抑制 HASMCs 的增殖和迁移,参与哮喘气道重塑的调控。     

三羟基异黄酮对肝癌细胞SMMC7721生物学行为的影响

目的 探讨三羟基异黄酮(Genistein,Gen)对肝癌细胞SMMC7721增殖、黏附、迁移和侵袭等生物学行为的影响.方法 应用MTT法、Transwell、RT-PCR及Western印迹法检测三羟基异黄酮作用后,SMMC7721细胞增殖、黏附、迁移、侵袭能力及其Snail mRNA和蛋白表达的变化.结果 Genistein可显著抑制SMMC7721细胞的增殖,同一时间不同浓度各组细胞的生长抑制率有明显差异(P＜0.01),相同浓度下作用48 h和72 h组细胞的生长抑制率明显高于24 h组(P＜0.01).低毒剂量(10μmol/L)三羟基异黄酮作用SMMC7721细胞30、60、90和120 min时,细胞的黏附能力明显降低(P＜0.01),各时间点细胞的黏附抑制率分别为29.22％、27.35％、26.58％和24.19％.10μmol/L三羟基异黄酮作用SMMC7721细胞24 h后,迁移和侵袭的细胞数明显减少(P＜0.01),细胞的迁移和侵袭抑制率分别为54.79％和55.42％.10μmol/L三羟基异黄酮作用SMMC7721细胞3、5和7d后,细胞Snail mRNA和蛋白的表达水平逐渐下降(P＜0.05).结论 三羟基异黄酮能抑制肝癌细胞SMMC7721的增殖,低毒剂量的三羟基异黄酮具有抑制肝癌细胞SMMC7721黏附、迁移和侵袭的能力,其抗侵袭和转移的作用可能与下调细胞Snail的表达有关.     

三氧化二砷对耐伊马替尼K562细胞株增殖、凋亡和bcr/abl基因表达的影响

目的观察三氧化二砷（ATO）对耐伊马替尼K562（K562G）细胞增殖、凋亡和bcr/abl融合基因（bcr/abl基因）表达的影响。方法用不同浓度的伊马替尼（STI571）（0.25、2.50、10.00μmol.L-1）、ATO（1.0、5.0、10.0μmol.L-1）以及两者联合作用于K562G细胞,用MTT比色法测定药物对K562G细胞生长抑制率的影响、PI单染色法流式细胞仪检测K562G细胞凋亡率、荧光定量PCR检测K562G细胞bcr/abl基因的表达水平。结果 STI571作用于K562G细胞的细胞生长抑制率、细胞凋亡率和bcr/abl基因水平与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。与对照组比较,ATO作用于K562G细胞的细胞生长抑制率和细胞凋亡率明显增高（P〈0.05）,bcr/abl基因表达水平明显降低（P〈0.05）;细胞抑制率呈剂量依赖性,细胞凋亡率以中浓度5.0μmol.L-1时最明显。ATO＋STI571联合用药作用于K562G细胞的细胞生长抑制率和细胞凋亡率与对照组以及单用ATO组比较差异有统计学意义（均P〈0.05）,细胞抑制率呈剂量依赖性,细胞凋亡率以中浓度ATO（5.0μmol.L-1）＋STI571（2.50μmol.L-1）时最明显,bcr/abl基因水平降低比单用ATO组更明显（P〈0.05）。结论 K562G对≤10.0μmol.L-1浓度的STI571耐药;ATO能明显抑制K562G细胞生长和诱导K562G细胞凋亡,使K562G细胞bcr/abl基因表达水平降低;ATO与STI571联合用药作用于K562G细胞时,细胞抑制率和细胞凋亡率比单用ATO效果好,bcr/abl基因表达水平降低更明显,两者有协同作用。     

安罗替尼对肺癌A549细胞增殖、迁移侵袭的影响

目的 研究安罗替尼对肺癌A549细胞增殖和迁移侵袭的影响。方法 采用不同浓度的安罗替尼作用于肺癌A549细胞，利用CCK8法检测细胞增殖能力；流式细胞术检测A549细胞凋亡情况；通过划痕实验测定各组细胞的迁移能力；Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果 安罗替尼处理后，CCK8结果显示A549细胞的增殖能力降低（P＜0.05）；划痕实验表明A549细胞迁移率降低（P＜0.05）；Transwell实验观察到穿过Transwell小室膜的A549细胞数减少（P＜0.05），侵袭能力受抑制；凋亡双染法发现A549细胞凋亡比例增高（P＜0.05）。结论 安罗替尼能够抑制肺癌A549细胞增殖、迁移侵袭，促进肺癌A549细胞凋亡。     

Aurora-B激酶特异性抑制剂AZD1152-HQPA对人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞的抑制作用

目的探讨激光（Aurora）-B激酶特异性抑制剂AZD1152-HQPA对人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞的抑制作用。方法用不同浓度的AZD1152-HQPA（0、10、50、100、500 nmol.L-1）体外作用于人骨肉瘤细胞株U2-OS24、48、72 h,采用噻唑蓝（MTT）检测AZD1152-HQPA对人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞的抑制作用;采用Western Blotting检测AZD1152-HQPA作用于人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞前后Aurora-B激酶的表达情况。结果 AZD1152-HQPA对人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞生长抑制作用明显,且抑制呈时间-浓度依赖性。50 nmol.L-1AZD1152-HQPA作用24、48、72 h,人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞中Aurora-B激酶的表达随作用时间的延长而降低。结论 AZD1152-HQ-PA能抑制U2-OS细胞生长,并且抑制作用呈时间-浓度依赖性。     

吗啡对 SH-SY5Y 细胞中 HSP70蛋白的调控作用

目的：观察吗啡对人神经母细胞瘤（SH-SY5Y）细胞中热休克蛋白70（HSP70）的调控作用。方法将维甲酸诱导分化的 SH-SY5Y 细胞随机分为4组：正常对照组（Con 组）,给予 PBS 作用48 h;吗啡组（Mor 组）,给予吗啡10μmol 作用48 h;吗啡＋纳络酮组（Mor＋Nal 组）,给予纳洛酮100μmol 作用30 min,之后给予吗啡10μmol 作用48 h;纳络酮组（Nal 组）,给予纳洛酮100μmol 作用48 h。采用免疫印迹方法检测各组 HSP70蛋白表达水平。结果与 Con 组比较,Mor 组 SH-SY5Y 细胞中 HSP70蛋白表达水平显著升高（P ＜0．001）;与 Mor 组比较,Mor＋Nal 组、Nal 组 SH-SY5Y 细胞中 HSP70蛋白表达水平均明显抑制（P ＜0．01或 P ＜0．001）。结论吗啡对 HSP70蛋白表达具有促进作用。     

剥夺钙和血清对培养的骨髓基质细胞的影响

目的 探讨剥夺钙和血清对培养的骨髓基质细胞（BMSCs）的影响.方法 将传至第2代的BMSCs用DMEM培养液和无钙DMEM培养液按不同比例配制成细胞悬液,细胞浓度为2＆#215;104 mL-1,再根据是否加10%FBS分为6组：无10%FBS正常钙组（1组）、10%FBS正常钙组（2组,正常对照组）、10%FBS1/3正常钙组（3组）、10%FBS1/6正常钙组（4组）、10%FBS无钙组（5组）和无10%FBS无钙组（6组）.培养后4 h,1-7 d用CCK-8试剂盒检测BMSCs细胞增殖数.无10%FBS无钙组、无10%FBS正常钙组、10%FBS无钙组和10%FBS正常钙组在培养后0、4、12、24和48 h,0、1、3、5和7 d 时在倒置相差显微镜下观察贴壁生长BMSCs细胞形态的变化.结果 1组、6组培养后4 h,1-7 d 时细胞增殖数均明显低于2组（均P＜0.01）,3组培养后4 h,3-5 d时细胞增殖数明显低于2组（P＜0.05或P＜0.01）;4组培养后4 h,1、3和5 d时细胞增殖数均显著低于2组（均P＜0.01）,培养后7 d时细胞增殖数显著高于2组（P＜0.01）;5组培养后4 h,1-3、5 d时细胞增殖数均显著低于2组（均P＜0.01）.10%FBS无钙组、10%FBS正常钙组细胞形态正常,继续贴壁生长、增殖,细胞密度增加;无10%FBS无钙组、无10%FBS正常钙组细胞培养后4 h时开始贴壁细胞变小,培养后1、3 d时大量细胞漂浮、死亡,仅有极少数细胞保持贴壁.结论剥夺钙和血清均对细胞生存不利,低钙浓度对于BMSCs有短期抑制生存作用,但BMSCs能适应低钙环境,恢复活力和增殖.BMSCs适应低钙的意义与机制有待进一步探讨.     

雷帕霉素对K562细胞增殖和凋亡作用的影响

目的:探讨雷帕霉素(RAPA)对人慢性髓系白血病K562细胞株增殖和凋亡作用的影响。方法 :取对数生长期K562细胞,用不同浓度的雷帕霉素(25、50、100nmol/L)处理K562细胞24、48、72h后收集细胞,MTT比色法检测处理组细胞的生长抑制率,流式细胞术检测细胞早期凋亡率。结果:MTT法检测结果显示,与对照组相比,不同浓度的雷帕霉素对K562细胞的增殖均有明显的抑制作用,100nmol/L雷帕霉素处理72h后抑制率高达48%,且呈浓度和时间双重依赖性,与对照组相比具有统计学意义(t=6.691,p<0.05);流式细胞术检测25、50、100nmol/L雷帕霉素作用24h后,K562细胞早期凋亡率分别为13.12±0.32,18.56±0.12,25.95±0.16,均较对照组明显增高,48h、72h细胞凋亡率明显增高,两两比较差异具有统计学意义(t=4.900,t=14.640,t=16.830,p<0.05)。结论:雷帕霉素对K562细胞的生长具有抑制作用,并诱导细胞凋亡。     

二价阳离子对人SKOV3卵巢癌细胞株细胞黏附、细胞侵袭和细胞转移的影响

目的探讨二价阳离子对人SKOV3卵巢癌细胞株细胞黏附、细胞侵袭和细胞转移的影响。方法将人SKOV3卵巢癌细胞株按常规方法进行培养,待细胞长到80%~90%汇合时用0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液消化、传代。取生长良好的P3或P4代细胞按是否加入二价阳离子分为对照组（不加入二价阳离子）和实验组[加入二价阳离子：Ca2＋（2.5、5.01、0.0 mmol·L-1）组和Zn2＋（1.01、0.0 mmol·L-1）组]。在光学显微镜下对各组黏附细胞进行计数。在570 nm波长的酶标仪下测定各组侵袭和转移细胞的OD值,以OD值代表细胞侵袭率和细胞转移率。结果 Ca2＋对人SKOV3卵巢癌细胞黏附具有抑制作用,作用随药物浓度增加而增强,呈剂量依赖性。Ca2＋细胞黏附抑制率范围为10.2%~62.2%,各Ca2＋浓度组人SKOV3卵巢癌细胞黏附率与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。Zn2＋浓度在1.0 mmol·L-1时,黏附细胞略有增多,与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;在10.0 mmol·L-1时,黏附细胞数量显著降低,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。Ca2＋、Zn2＋对人SKOV3卵巢癌细胞侵袭和细胞转移的抑制作用随药物浓度增加而增强,呈剂量依赖性。细胞侵袭抑制率：Ca2＋范围为24.9%~63.2%,Zn2＋范围为66.1%~87.8%;细胞转移抑制率：Ca2＋范围为22.5%~55.6%,Zn2＋范围为73.1%~91.7%。各Ca2＋、Zn2＋浓度组人SKOV3卵巢癌细胞侵袭率和细胞转移率与对照组比较差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论人SKOV3卵巢癌细胞株细胞受到体外二价阳离子浓度的影响,提示配制适当的二价阳离子溶液进行术中冲洗可能会减少卵巢癌细胞的种植和转移。     

无介体微生物燃料电池的研究进展

微生物燃料电池的出现使得降解有机污染物的同时收获电能成为可能，因而受到广泛关注。从产电微生物和电池结构两部分介绍了无介体微生物燃料电池的研究进展，对产电微生物的研究主要从产电微生物的种类、影响微生物产电的因素以及产电机理等方面进行阐述；对微生物燃料电池结构的研究，主要从电池阳极及阳极室、阴极及阴极室、分隔材料、整体结构和运行方式等方面进行了阐述；从提高微生物燃料电池产电能力的角度出发，对微生物和电池结构提出了研究方向，并展望了产电微生物燃料电池的研究前景。     

奥沙利铂对人Burkitt-Raji细胞生长抑制与凋亡的影响

目的观察奥沙利铂对人Burkitt-Raji细胞的生长抑制和凋亡作用。方法将浓度为0、6.25、12.5、25、50、100μg.mL-1的奥沙利铂与人Burkitt-Raji细胞分别作用24、36、48 h,用CCK-8法检测奥沙利铂对人Burkitt-Raji细胞的生长抑制率,流式细胞仪分析细胞周期的变化、检测细胞凋亡率,用免疫组化的方法检测奥沙利铂对人Bur-kitt-Raji细胞ki-67蛋白、bax蛋白的影响。结果奥沙利铂对人Burkitt-Raji细胞有生长抑制、促凋亡作用,其对人Burkitt-Raji细胞的生长抑制率随药物浓度和作用时间的增加而增大,流式细胞仪分析显示奥沙利铂将人Bur-kitt-Raji细胞阻滞于G2/M期。奥沙利铂浓度为100μg.mL-1作用48 h,Raji细胞生长抑制率为（94.73±1.40）%,Raji细胞的早期凋亡率为（8.25±1.79）%、晚期凋亡和继发坏死率为（14.61±2.18）%。结论奥沙利铂能够抑制人Burkitt-Raji细胞的增殖,可诱导人Burkitt-Raji细胞发生一定的凋亡。     

掺硼金刚石薄膜电极电化学氧化对铜绿微囊藻的生长抑制

阳极材料采用掺硼金刚石薄膜板状电极,研究了电化学氧化中电流密度、电解时间、pH、氯离子浓度、硫酸根离子浓度对铜绿微囊藻生长抑制的影响,以及电解前后藻细胞形态的变化。结果表明,4个影响因素对铜绿微囊藻生长抑制效果显著。抑藻效果随电流密度、电解时间的增加而增加,电流密度为17mA/cm2时藻细胞出现破裂、细胞内物质流出的现象,抑藻效果较好;当电解时间为20min时,可完全抑制藻细胞生长;再增大电解时间,对抑藻效果无明显促进作用,初始pH在中性及酸性条件下可完全抑制藻细胞生长。抑藻效果与溶液中氯离子、硫酸根离子浓度成正相关,当溶液中氯离子浓度为6mg/L时,可完全抑制藻细胞生长;无氯离子时,藻细胞在4d后出现继续增长现象。     

Development of a transparent triaxial cell and observation of rock deformation in compression and creep tests

A transparent triaxial cell was designed and manufactured using acrylic resin. The cell was used to conduct strength and creep tests. Photographs were taken of the specimens at constant time intervals during the constant strain rate test. Photographs were also taken at constant intervals of strain during the creep test, but this rate was changed to one image per second when the specimens first showed tertiary creep. Comparison of the axial and lateral strains during the constant strain-rate and creep tests indicated no significant differences between the two tests. It is well known that the axial creep strain rate is inversely proportional to remaining life in tertiary creep. This study showed that the lateral creep strain rate is also inversely proportional to remaining life. The constant strain-rate tests were conducted with transparent end pieces attached firmly to the upper and lower ends of the specimens. Three holes were drilled into the end pieces, and water was expelled into the holes when the specimens were compressed. It was clearly observed that the water began flowing from the holes back into the specimen during the volumetric expansion of the specimen. The transparent triaxial cell permitted easy observation of water ejection and re-absorption into the specimens.     

医院改扩建中的功能环重铸

多组空间组合是综合医院的基本特性，在组合的过程中形成了功能环。医院发展到一定程度就会使之破裂，需要依据新的功能关系，重铸功能环。     

天然气在燃料电池中的应用

本文首先介绍了天然气制氢法的原理,然后对其在四种燃料电池中的应用现状及目前所面临的主要困难进行了讨论,最后对我国在这方面的发展提出了建议。     

基于单元平均应变的结构多损伤静态识别

利用长标距布喇格光纤光栅（FBG）传感器,可以测量结构一定长度的平均应变。在介绍单元平均应变的基础上,采用单元平均抗弯刚度和广义单元平均中性轴高度作为识别参数,通过工字形悬臂钢梁和简支钢梁的多损伤数值模拟进行了验证,说明基于单元平均应变的结构静态损伤识别方法是可行的。     

固定化细胞技术在废水处理中的应用研究进展

介绍了固定化细胞技术的概念、固定化细胞的制备方法以及固定细胞的载体,得出了固定化细胞技术具有活性高、可反复利用和对有毒物质抵抗能力强等优点,可用于处理含氮废水、重金属废水和难降解有机废水的结论.     

Lifestyles and mental health status are associated with natural killer cell and lymphokine-activated killer cell activities

We investigated the association of lifestyle and mental health status with natural killer (NK) cell and lymphokine-activated killer (LAK) cell activities in healthy males. NK cell activity was determined in 105 male workers and LAK cell activity was determined in 54 male workers. Peripheral blood was obtained from each subject and peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were isolated from the blood. These PBMC were used as effector cells. LAK cells were generated by incubation of PBMC with interleukin-2 for 72 h. NK cell activity against NK-sensitive K562 cells and LAK cell activity against NK-resistant Raji cells were examined by 51Cr release assay. Overall lifestyles were evaluated according to the answers on a questionnaire regarding eight health practices (cigarette smoking, alcohol consumption, eating breakfast, hours of sleep, hours of work, physical exercise, nutritional balance, mental stress). Subjects with a good overall lifestyle showed significantly higher NK cell (P < 0.05) and LAK cell (P < 0.05) activities than those with a poor overall lifestyles. Among eight lifestyle factors, cigarette smoking has relatively strong effects on NK cell and LAK cell activities. Subjects who complained of unstable mental status had significantly lower NK cell activity than those who reported stable mental status. When subjects were divided into four groups by lifestyle and mental health status, subjects who had poor or moderate lifestyle and reported unstable mental status showed the lowest NK cell activity and subjects who had good lifestyle and reported stable mental status showed the highest NK cell activity among four groups.