URI基因稳定表达对肝癌SMMC-7721细胞增殖能力的影响

目的:瞬转以及筛选出能够稳定表达URI(RPB5-mediating protein)基因的SMMC-7721细胞株,以其为模型研究URI基因对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响。方法:首先,抽提URI的重组质粒并转染到SMMC-7721细胞中,在G418药物的筛选下选出能够稳定表达URI基因的细胞株,RT-PCR法和酶切检测该稳定细胞中URI基因的表达效率以确认URI是否稳定表达,MTT法和克隆形成实验检测URI基因对SMMC-7721细胞增殖的影响。结果:成功建立URI基因过表达的稳定细胞株。与SMMC-7721细胞对照组比较,其URI mRNA表达水平显著上调,能稳定表达URI细胞株的增殖,克隆形成率明显升高。结论:pFLAG-CMV-4-URI重组质粒能使URI在肝癌SMMC-7721细胞内稳定表达,过表达URI基因有可能帮助细胞通过G2/M期检验点来提高肝癌细胞SMMC-7721的增殖能力。     

苦参碱对人胚肺成纤维细胞增殖和凋亡的干预作用

目的:观察苦参碱对人胚肺成纤维细胞增殖和凋亡的影响。方法:选择苦参碱为干预药物,以不同浓度梯度作用于体外培养的人胚肺成纤维细胞,采用MTT法检测细胞增殖,用流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率。结果:MTT结果显示,各干预组对HFL-1细胞生长均有显著抑制增殖作用,其强度呈时间-剂量依赖性。苦参碱作用于HFL-1细胞48 h后,各干预组细胞总凋亡率均明显高于对照组(P<0.05);与对照组比较,苦参碱各浓度组HFL-1细胞G0/G1期百分率显著上升(P<0.05)。结论:苦参碱可在一定程度上抑制人胚肺成纤维细胞增殖,并诱导其凋亡。     

刺梨提取物与氟尿嘧啶协同抗人肝癌SMMC-7721细胞的作用研究

目的:观察刺梨提取物(extract from Rosa roxburghii Tratt, CL)联合5-氟尿嘧啶(5-florouracil,5-FU)抗人肝癌细胞SMMC-7721的作用.方法:采用MTT法检测和生长曲线绘制分析CL联合5-FU对SMMC-7721细胞生长的影响;通过检测硝基四氮唑蓝(nitroblue tetrazolium,NBT)阳性细胞百分率和细胞培养上清液中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP )含量,分析CL联合5-FU对SMMC-7721细胞分化的影响;采用丫啶橙(acridine orange,AO)/溴化乙锭(ethidium bromide,EB)荧光染色法和FCM法检测CL联合5-FU对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响.结果:联合作用组的细胞生长曲线较5-FU和对应浓度CL单独作用组下移,且联合作用组的联合作用系数q值为0.85～1.15,表明CL联合5-FU具有抗肿瘤相加作用;与对照组相比较,5-FU、CL和2药联合均能提高NBT阳性细胞比率(P<0.05),且联合用药组的NBT阳性细胞比率比CL单独作用组高(P<0.05);CL组和CL联合5-FU组均能降低细胞AFP含量,且随着CL浓度的增加而下降,但2组间差异无统计学意义(P>0.05);CL单独作用组和联合作用组间的细胞凋亡率无明显差异(P>0.05);与阴性对照组比较,5-FU组能增加异倍体细胞比率(P<0.05),CL组和CL联合5-FU组均能增加G0/G1期细胞比率(P<0.05)、减少S期细胞比率(P<0.05),联合用药组还能降低G2/M期细胞比率(P<0.05).结论:CL与5-FU具有协同抗SMMC-7721细胞的作用,其机制可能与2者协同诱导细胞分化和抑制细胞增殖有关.     

丹参饮加味方对胃癌细胞SGC-7901体外生长抑制及细胞周期的实验研究

目的:探讨丹参饮加味方对胃癌细胞SGC-7901体外生长情况及细胞周期的影响。方法:采用MTT法和流式细胞仪检测丹参饮加味方不同浓度和不同作用时间对胃癌细胞抑制率和DNA含量的变化。结果:与空白对照组相比较,丹参饮加味方各浓度组细胞抑制率明显升高(P<0.05),G0/G1期细胞DNA含量明显升高(P<0.05)。结论:丹参饮加味方能抑制体外胃癌细胞SGC-7901的生长,且能将胃癌细胞周期阻滞在G0/G1期。     

家园合力产生魅力

目的:探讨三氧化二砷((Arsenic trioxide,As2O3)对食管癌细胞株EC-1生长抑制作用及机制。方法:采用MTT法检测不同浓度As2O3(0.5、1、2、4、8、16、32、64μmol/L)在不同时间段(24、48、72 h)对EC-1细胞增殖的抑制率,计算半数抑制率(IC50)值。流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期变化。结果:三氧化二砷对食管癌EC-1细胞具有增殖抑制作用,呈剂量-效应和时间-效应关系(P<0.05)。IC50约为18.74μmol/L。As2O3可使细胞阻滞在G2/M期,使G0/G1期、S期细胞比例减少,增加细胞凋亡,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:As2O3能抑制食管癌EC-l细胞株的增殖,具有明显的量效和时效关系。其机制可能与改变周期,增加其细胞凋亡有关。     

重组人BMP-2对人肝癌SSMC-7721细胞迁移和侵袭能力的影响

目的观察重组人骨形成蛋白2（rhBMP-2）对人肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭能力的影响。方法以人肝癌SMMC-7721细胞株为研究对象,取对数期生长的SMMC-7721细胞随机分为4组：rhBMP-2200、400、600ug·L。组和对照组。rhBMP-2200、400、600ug·L。组分别加入rhBMP-2200、400、600ug·L-1,对照组加入2mLRPMI1640培养基。分别于12、24、48h后,用细胞划痕法检测细胞体外迁移能力,Transwell小室测定法检测细胞体外侵袭能力。结果rhBMP-2200、400、600ug·L-1组12、24、48hSMMC-7721细胞迁移率与对照组比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）,且rhBMP-2200、400、600ug·L-1组各组间差异具有统计学意义（P〈0．05）。rhBMP-2200、400、600ug·L-1组12、24、48hSMMC-7721细胞穿膜数与对照组比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）,rhBMP-2200、400、600ug·L-1组各组间差异具有统计学意义（P〈0．05）。rhBMP-2200、400、600ug·L-1组12、24hSMMC-7721细胞迁移率、细胞穿膜数与48h比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）,浓度与时间无交互作用。结论BMP-2可增加入肝癌SMMC-7721细胞的侵袭和迁移能力,且呈时间-浓度依赖性;阻滞BMP-2的表达可能成为抑制肝癌转移的一个潜在靶点。     

白藜芦醇对人上皮性卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究白藜芦醇抑制人上皮性卵巢癌细胞增殖并促进其凋亡的作用及机制。方法:将人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3细胞随机分为5组,即正常对照组、白藜芦醇高剂量组(40 mg·L~(-1))、白藜芦醇中剂量组(20 mg·L~(-1))、白藜芦醇低剂量组(10 mg·L~(-1))和顺铂组(40 mg·L~(-1))。干预48 h后,通过光学显微镜观察各组细胞形态,MTT比色法检测各组细胞增值抑制率。通过流式细胞仪分析细胞周期的改变、流式细胞术检测细胞凋亡并计算细胞凋亡率,采用RT-PCR法检测细胞Bcl-2 mRNA和Bax mRNA表达并计算Bax/Bcl-2比值,Western blot法检测细胞caspase-3蛋白表达。结果:与正常对照组比较,白藜芦醇高、中剂量组细胞出现变圆、脱壁、细胞间接触松散等状态,细胞抑制作用明显、增殖抑制率显著升高(P<0.01);白藜芦醇各剂量组细胞周期被阻滞于G2/M期,白藜芦醇高、中剂量组细胞凋亡率显著升高(P<0.01),同时可明显下调Bcl-2 mRNA而上调Bax mRNA表达,显著提高Bax/Bcl-2值(P<0.05,P<0.01),上调caspase-3蛋白表达(P<0.01)。结论:白藜芦醇能够通过抑制增殖并促进凋亡对人上皮性卵巢癌SKOV3细胞生长起到一定的抑制作用,其机制可能与白藜芦醇调节凋亡相关基因蛋白表达有关。     

丹参酮ⅡA下调凋亡抑制蛋白XIAP诱导人肝癌细胞凋亡的研究

目的:探讨丹参酮ⅡA对肝癌细胞中凋亡抑制蛋白XIAP的影响。方法:通过MTT实验、流式细胞术、细胞形态观察检测丹参酮ⅡA对细胞增殖和凋亡的影响,通过蛋白免疫印迹的方法检测丹参酮ⅡA对细胞中凋亡抑制蛋白XIAP、凋亡蛋白caspase-3以及PARP蛋白的影响。结果:MTT、细胞形态结果显示丹参酮ⅡA对SMMC-7721细胞的生长抑制作用成时间和剂量依赖性,免疫印迹结果显示,0.5μg/mL丹参酮ⅡA作用肝癌细胞24 h后,caspase-3前体、凋亡抑制蛋白XIAP表达明显下调,活化的caspase-3、剪切形式的PARP含量显著增加。结论:丹参酮ⅡA下调凋亡抑制蛋白XIAP,活化caspase-3,促进PARP剪切诱导肝癌细胞凋亡。     

Apelin-13促进骨髓间充质干细胞增殖

目的探讨apelin-13是否促进骨髓间充质干细胞增殖。方法分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞,用不同浓度apelin-13(0.1μmol/L、1.0μmol/L和10.0μmol/L)处理细胞24 h后,分别用流式细胞术和噻唑蓝比色法(MTT),观察apelin-13对骨髓间充质干细胞增殖的影响。结果倒置显微镜下观察到apelin-13促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖,流式细胞术检测结果表明,apelin-13刺激后处于S期和G2-M期的细胞数目显著增加,G0-G1期的细胞数目显著减少。进一步MTT结果表明,apelin-13处理后大鼠骨髓间充质干细胞增殖显著增加,并呈浓度依赖性。结论 apelin-13能促进骨髓间充质干细胞增殖。     

黄芪多糖抑制人胃癌MKN45、MGC-803细胞生长的作用机制

目的:探讨黄芪多糖抑制人胃癌细胞MKN45、MGC-803生长的作用机制。方法:将人胃癌细胞MKN45、MGC-803置于RPMI1640培养基中做传代培养,分为对照组、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)组和黄芪多糖(astragalus polysaccharides,APS)组。对照组采用1640培养基培养,5-FU组给予不同质量浓度的5-FU培养,黄芪多糖组给予不同质量浓度的黄芪多糖培养,采用四甲基偶氮噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验检测细胞生长抑制情况,使用流式细胞仪检测细胞周期,使用荧光显微镜观察细胞凋亡情况。结果:(1)培养24 h,APS质量浓度≥10.0 g·L~(-1)、5-FU质量浓度≥0.05 g·L~(-1)时,MKN45、MGC-803细胞受抑制作用均比较明显;培养48 h,APS质量浓度≥5.0 g·L~(-1)、5-FU质量浓度≥0.025 g·L~(-1)时,MKN45、MGC-803细胞受抑制作用均比较明显;(2)细胞培养48 h后,5-FU组和APS组MKN45、MGC-803细胞周期均改变,停留在G0/G1期的细胞比例显著高于对照组,处于S期和G2/M期细胞明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);(3)培养48 h后,5-FU组和APS组MKN45、MGC-803细胞凋亡率均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芪多糖可以抑制胃癌细胞MKN45、MGC-803的生长,其作用机制可能是使细胞停留在GO/G1期并诱导细胞发生凋亡。     

以燃气为燃料的燃料电池及其应用的探讨

1引言近年来,由于一次能源的匮乏和环境保护的突出需求,开发利用新的清洁再生能源的需求日益高涨。燃料电池发电技术就是一种高效、洁净的供能技术。受到世界各国的普遍重视。被誉为21世纪的能源。预期燃料电池会在国防和民用的电力、汽车、通信等诸多领域发挥重要作用。美国、     

光伏电池小知识

在投资太阳能屋顶前,重要的是要了解现有光伏电池的种类以及在给定条件下哪种技术最适合. 光伏电池由薄如刀片的若干层半导体材料组成,当太阳光照在电池上,可将太阳辐射能变成直流电,再经过逆变器由直流电转换成家庭用的交流电.     

燃料电池在民用建筑中的应用

为响应国家能源革命,搭载新能源利用的分布式能源技术在建筑领域迅速崛起。燃料电池在汽车领域已经得到大面积推广,在建筑领域的应用还未得到重视。不少发达国家已将燃料电池运用于居住建筑领域,通过国外应用经验可知,微型热电联产设备在市场上有良好的推广空间。通过对燃料电池发展现状进行分析,总结燃料电池发展情况与不足,为后续燃料电池在民用建筑的研究提供参考。     

燃料电池关键技术的发展趋势

叙述燃料电池的组成原理和结构材料以及该技术的开发意义和应用前景，讨论贵金属电极催化剂在燃料电池中的作用，并着重介绍了质子交换膜燃料电池的开发进展。     

过继细胞免疫疗法在多发性骨髓瘤中的进展

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是1种恶性浆细胞肿瘤,目前仍是1种不可治愈的疾病。近几年,过继细胞疗法(adoptive cell therapy,ACT)在血液系统肿瘤中发展迅猛,本文主要综述了从骨髓浸润淋巴细胞到基因改造T细胞,再到NK细胞在MM中的应用进展。总的来说,多发性骨髓瘤的ACT疗法逐渐向高特异性、强杀伤力方向发展,但寻找特异性靶向抗原及预防治疗毒性作用仍是ACT的两大难题。     

Lifestyles and mental health status are associated with natural killer cell and lymphokine-activated killer cell activities

We investigated the association of lifestyle and mental health status with natural killer (NK) cell and lymphokine-activated killer (LAK) cell activities in healthy males. NK cell activity was determined in 105 male workers and LAK cell activity was determined in 54 male workers. Peripheral blood was obtained from each subject and peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were isolated from the blood. These PBMC were used as effector cells. LAK cells were generated by incubation of PBMC with interleukin-2 for 72 h. NK cell activity against NK-sensitive K562 cells and LAK cell activity against NK-resistant Raji cells were examined by 51Cr release assay. Overall lifestyles were evaluated according to the answers on a questionnaire regarding eight health practices (cigarette smoking, alcohol consumption, eating breakfast, hours of sleep, hours of work, physical exercise, nutritional balance, mental stress). Subjects with a good overall lifestyle showed significantly higher NK cell (P < 0.05) and LAK cell (P < 0.05) activities than those with a poor overall lifestyles. Among eight lifestyle factors, cigarette smoking has relatively strong effects on NK cell and LAK cell activities. Subjects who complained of unstable mental status had significantly lower NK cell activity than those who reported stable mental status. When subjects were divided into four groups by lifestyle and mental health status, subjects who had poor or moderate lifestyle and reported unstable mental status showed the lowest NK cell activity and subjects who had good lifestyle and reported stable mental status showed the highest NK cell activity among four groups.     

CMOL电路容错单元映射

结合电路的拓扑排序优化映射初始解,利用进化算法进行单元映射,提出了基于蛇形编码的容错映射方法,实现了存在缺陷情况下的容错映射.与已有的方法相比,提出的算法具有求解电路规模大、速度快的优点。     

L-肉碱对胖头鱥肌肉细胞和草鱼性腺细胞抗氧化功能的调节作用

为研究L-肉碱对胖头鱥Pimephales promelas肌肉细胞(FHM)和草鱼Ctenopharyngodon idellus性腺细胞(GCO)抗氧化酶功能的调节作用,以两种鲤科鱼细胞FHM和GCO为研究对象,在培养基中添加不同浓度的L-肉碱(0、0. 001、0. 01、0. 1、0. 5、1、5 mmol/L)分别孵育FHM细胞6 h、GCO细胞12 h,采用生物化学法和荧光定量PCR法检测L-肉碱对细胞抗氧化酶活性和基因相对表达量的影响。结果表明:0. 01～5 mmol/L L-肉碱组FHM细胞SOD、CAT活性显著高于对照组(P<0. 05),仅5 mmol/L L-肉碱组GCO细胞SOD、CAT、GPX、γ-GCS活性显著高于对照组(P<0. 05);与对照组相比,L-肉碱组FHM细胞Cu Zn-SOD mRNA相对表达水平无显著变化(P>0. 05),0. 5、1、5 mmol/L L-肉碱组GCO细胞Cu ZnSOD mRNA相对表达水平显著上调(P<0. 05); 0. 01～5 mmol/L L-肉碱组FHM细胞CAT mRNA相对表达水平显著上调(P<0. 05),所有L-肉碱组GCO细胞CAT mRNA的相对表达水平显著上调(P<0. 05); 0. 5mmol/L L-肉碱组GCO细胞GPX mRNA相对表达水平显著上调(P <0. 05);仅0. 1 mmol/L L-肉碱处理FHM细胞GCLC mRNA相对表达量水平显著上调(P<0. 05),L-肉碱添加范围为0. 5～5 mmol/L时,GCO细胞GCLC mRNA的相对表达水平均显著上调(P<0. 05)。研究表明,在培养基中添加L-肉碱能明显上调FHM和GCO细胞的抗氧化酶活性及其相关基因的相对表达水平,在本试验条件下,细胞培养基中推荐L-肉碱的适宜添加浓度为0. 1～1 mmol/L。     

Free chlorine demand and cell survival of microbial suspensions

The utility of chlorine residual and chlorine demand as a surrogate for microbial contamination in the water distribution system was evaluated. The chlorine demanded by and cell survival of pure culture suspensions of Escherichia coli, Staphylococcus epidermidis, and Mycobacterium aurum were quantified in solutions with initial free chlorine concentrations of 0.20, 0.40, and 0.80 mg/L. The chlorine demand increased with initial concentration of cells and free chlorine for all species. At equivalent initial cell concentrations, chlorine demand was greatest for M. aurum, followed by S. epidermidis and E. coli. The chlorine contact time required for a 3-log inactivation of E. coli, S. epidermidis, and M. aurum was calculated as 0.032+/-0.009, 0.221+/-0.080, and 42.9+/-2.71 mg min/L, respectively. The ultimate chlorine demand and cell survival were directly proportional. No chlorine demand was observed at cell concentrations less than 10(5)CFU/mL for E. coli or 10(4)CFU/mL for S. epidermidis. M. aurum demanded chlorine at all initial cell concentrations including 10(3)CFU/mL, which was the detection limit of the cell quantification assay. Chlorine demand was determined to be a suitable surrogate indicator of the organisms studied and its utility may be enhanced in locations of the water distribution system that maintain a higher free chlorine residual.