探讨能力验证中霉菌酵母菌计数检验方法及注意事项

笔者分析研讨能力验证中霉菌酵母菌计数检验方法及注意事项,用马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基倾注法、孟加拉红培养基倾注法和各放置培养方式,如倒置培养法、正置培养法进行监测,分析其酵母菌、霉菌计数结果,对比差异。结果如下:孟加拉红培养基内,正向放置中,马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基霉菌数量比孟加拉红培养基低6.8%,其RSD指数为4.55%,倒置培养霉菌数量比正向培养方式低10.2%,其RSD指数为6.95%;马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基内,倒置培养霉菌数量比正向放置低7.2%,其RSD指数为4.87%,倒置培养中马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基霉菌数量比孟加拉红培养低3.5%,其RSD指数为2.47%。不管采用哪种培养方式,所计数的酵母菌总数基本一致。可见,马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基和孟加拉红培养基在霉菌酵母菌计数上,结果无明显性差异,正置培养方式的霉菌酵母菌检出率高于倒置培养法,可进一步应用。     

雪茄烟中霉菌计数方法的适用性评价

为明确霉菌计数方法对雪茄烟的适用性, 采用孟加拉红琼脂培养基、改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基和SYMPHONY Agar快速显色培养基对13种雪茄烟进行霉菌计数, 评价3种培养基在不同接种方式条件下雪茄烟中霉菌计数结果的一致性, 并对各霉菌计数方法进行比较。结果表明:①同种接种方式条件下, 3种培养基的霉菌计数结果的一致性较好;②相同培养基条件下, 平板涂布法操作更简便, 菌落分布均匀, 典型菌落更易判读;③3种霉菌计数培养基相比, SYMPHONY Agar快速显色培养基培养周期短, 霉菌典型菌落大小均匀, 更容易计数。因此, SYMPHONY Agar快速显色培养基和平板涂布法接种方式更适合于雪茄烟中的霉菌计数。      

烟草及烟草制品中霉菌数量检验用培养基的开发与应用

为开发适用于烟草及烟草制品中霉菌数量检验用的培养基,以烟草及烟草制品中8种常见的污染霉菌(黄曲霉、黑曲霉、局限曲霉、桔青霉、产黄青霉、总状毛霉、匍枝根霉和绿色木霉)为试验菌种,采用5种常见的霉菌培养基(孟加拉红琼脂、察氏琼脂、高盐察氏琼脂、含20％蔗糖的高渗察氏琼脂和马铃薯葡萄糖琼脂培养基)及4种研发的新型培养基进行烟草及烟草制品中霉菌数量检验用培养基的初筛和复筛研究.结果表明:与其他培养基相比,Ⅰ号改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基(马铃薯200 g,葡萄糖20.0 g,NaCl 30.0 g,琼脂16.0 g,氯霉素0.1g和蒸馏水1000 mL)具有检验霉菌菌相全面、获得霉菌数量结果准确等优点,适用于烟草及烟草制品中霉菌数量的检测.     

纸张中霉菌检测方法研究

使用马铃薯培养基和孟加拉红培养基对纸张中霉菌进行培养,在检测过程中有效识别污染源和污染途径,对培养的霉菌进行计数并与酵母菌进行区别,并通过镜检对霉菌进行定性分析。     

霉菌检测培养基改良实验研究

在国标法GB/T4789.15-2003孟加拉红培养基中分别添加不同浓度的葡萄糖、牛肉膏、酵母浸膏、磷酸二氢钾、吐温20、氯化钠,对黑曲霉和不同种类的食品进行霉菌总数的测定。结果表明,含2.0%的葡萄糖、0.15%的吐温20和0.25%的磷酸二氢钾的改良孟加拉红培养基对霉菌的检出率均高于国标法孟加拉红培养基,用改良孟加拉红培养基对不同食品中霉菌进行检测,其检出率较国标法孟加拉红培养基平均高出59.64%。改良孟加拉红培养基能提高食品中霉菌的检出率。     

对酱油中产膜性酵母菌检验的研究

酵母菌是发酵工业中经常使用的一株菌种,但在酱油生产中,有些酵母菌却能使酱油产生不愉快的臭气或形成白膜,检测成品酱油中的酵母菌就显得尤为重要。用马铃薯-葡萄糖琼脂培养基、孟加拉红培养基、高盐察氏琼脂培养基和酱油原汁培养基,分别对长白酱油、涨瓶酱油和正常酱油进行平板稀释培养,结果长白酱油可能污染了不同的产膜酵母,酱油原汁培养基的检出率最高。运用加热灭菌、清洁和正确按量使用防腐剂是防止酱油长白的有效方法。     

肉制品月饼的细菌及霉菌的检测研究

为了调查肉制品月饼的卫生情况,本实验选用肉松月饼与火腿月饼为研究对象,进行霉菌及细菌的生长规律研究。根据国家标准方法GB4789.15—2003、GB4789.2—2003对月饼中的微生物及水分进行测定。其中,霉菌的计数和鉴定培养是用孟加拉红琼脂培养基和马铃薯琼脂培养基(PDA)进行的,并且分离纯化霉菌菌落,观察菌落形态,用显微镜观察细胞形态进行鉴定。实验结果表明,肉制品月饼中的细菌总数及大肠菌群均未超标。霉菌种类主要有灰绿曲霉、杂色曲霉和黄曲霉三种。     

窖泥和黄泥微生物分离分析的培养基选择及评价

对黔型浓香型白酒习酒的发酵窖泥及环境土样中微生物区系构成情况进行调查分析,选择多种分别针对细菌、放线菌,酵母菌、丝状真菌等微生物茵群的分离培养基进行了调查探讨.实验结果显示:添加1600 u/mL青霉素钠的培养基可完全抑制原核类微生物菌落的长出.添加0.067%孟加拉红的培养基可抑制部分真菌的扩散生长;选择葡萄糖胰胨琼脂培养基、高氏一号培养基、YEPD培养基或卡尔氏培养基、孟加拉红培养基或淀粉培养基或查氏培养基等,分别用于分离培养细菌、放线茵、酵母菌,丝状真菌等微生物茵群,可获得较好的分离效果和获得更多种群的菌落.在方法学上,采用适合的分离培养基探讨窖泥和黄泥中微生物区系的基本构成是可行的.     

大米中霉菌快速计数与菌相分析

本文依据理想真菌计数培养基的评估原则，设计了孟加拉红嗜霉菌性琼脂，并成功地应用于快速计数大米中的霉菌总数，对大米中的霉菌菌相进行了镜检与分析，同时为国际中推荐的霉菌计数方法提出了合理化的修改建议。     

甘薯培养基上霉菌及酵母菌生长情况的实验报告

本文报导了甘薯培养基上霉菌与酵母菌的生长情况,並与PDA、麦芽汁、虎红(即孟加拉红)及蔡氏培养基进行了对比试验,结果该培养基上霉菌与酵母茵的生长与PDA相似,略差于麦芽汁,比孟加拉红与蔡氏佳,此外,对镰刀菌用该培养基培养三天,即可见较多的大分生孢子,优于以上四种培养基。用于霉菌及酵母菌分离培养的甘薯培养基,至今在国内外末见报导,並因甘薯价廉物美南方几省均有大量种植,值得推广应用。     

桐城风鸭产香真菌的筛选与鉴定

选用孟加拉红和马铃薯葡萄糖琼脂培养基筛选、分离桐城风鸭中产香真菌,经感官评价筛选得到1?株产香酵母Y1和1?株产香霉菌M3。采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱法测定2株产香菌在马铃薯葡萄糖培养体系和模拟肉体系下的挥发性代谢风味产物。与对照组相比,产香酵母Y1出现1-戊醇和苯乙醇两个吸收峰,产香霉菌M3出现苯甲醛和γ-癸内酯两个吸收峰。经酵母26S?rDNA和霉菌ITS核苷酸序列鉴定,该株产香酵母Y1为涎沫假丝酵母（Candida zeylanoides）,而产香霉菌M3为烟管菌（Bjerkandera）。     

4种方法测定矿泉水中产气荚膜梭菌测量审核结果的比较分析

目的比较分析4种方法对矿泉水中产气荚膜梭菌测量审核结果的影响。方法以测量审核作业指导书、GB 8538—2016《食品安全国家标准饮用天然矿泉水检验方法》为依据,GB 4789.13-2012《食品安全国家标准食品微生物学检验产气荚膜梭菌检验》为参考,分别采用两标准中的亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶(sulfite polymyxin sulphadiazine,SPS)琼脂培养基和胰(?)-亚硫酸盐-环丝氨酸(tryptose sulfite cycloserine,TSC)琼脂培养基,再以以滤膜法倾注上层培养基与不倾注上层培养基的方法同时检测测量审核样品和模拟水样。比较2种培养基的产气荚膜梭菌回收率,运用方差分析测量审核样品、运用配对t检验模拟水样,进而评价4种方法对矿泉水中产气荚膜梭菌计数结果一致性的影响。结果 4种方法检测结果无明显差异,但是经不倾注上层培养基培养后目标菌难显黑色,经倾注上层培养基培养后目标菌显黑色。3个厂家的SPS培养基、TSC培养基产气荚膜梭菌的平均回收率分别为:89%、98%。采用TSC培养基和滤膜法倾注上层培养基这一方法的标准差最小,最为稳定。测量审核样品|Z|2、空白样品为0 CFU/50 mL,结果满意。结论采用滤膜法倾注上层培养基的方法更适用于矿泉水中产气荚膜梭菌的检验,并建议优先采用TSC培养基,以确保检测结果的准确性和质量。     

葡萄糖对泡菜甘蓝亚硝酸盐含量的影响

文章在发酵甘蓝中加入1%,2%,3%,4%不同浓度的葡萄糖,研究葡萄糖对发酵甘蓝亚硝酸盐含量的影响。采用分光光度法测定亚硝酸盐浓度、MRS琼脂培养基培养乳酸菌法分离和计数乳酸菌数量。由研究结果可知,添加2%葡萄糖的发酵甘蓝中亚硝酸盐含量最低(5.185mg/kg);亚硝酸盐生成菌较其他处理低;乳酸菌数量在12天时高于其他发酵液。说明添加2%的葡萄糖浓度有利于降低发酵甘蓝中亚硝酸盐含量。     

马铃薯葡萄糖培养基制作方法的改进

对传统马铃薯葡萄糖培养基制作方法进行改良,以期得到一种制作简便、经济节约、对酵母菌检出率较高的马铃薯葡萄糖培养基。将马铃薯葡萄糖培养基制作方法改进为直接打浆、免除过滤的方式,通过对马铃薯浓度筛选实验、酵母菌性能测定实验以及酵母菌检出率实验检验改良马铃薯浓度培养基性能。结果表明最佳的马铃薯浓度为100g/L,与传统马铃薯葡萄糖培养基相比,在该浓度下对酵母菌的性能没有显著影响;改进后的培养基与传统方法制作的培养基相比,能够提高酵母菌检出率67.2%,t检验法分析二者有显著性差异。说明改进后的培养基相比传统的马铃薯葡萄糖培养基可达到节约制作时间、节省材料,并且在提高酵母菌检出率上性能更为优越。     

自然制曲的蚕豆曲中优势微生物的分离与初步鉴定

通过各种培养基进行分离培养,对自然制曲蚕豆曲中的细菌总数、芽孢杆菌、酵母菌、霉菌进行计数;对霉菌进行初步鉴定.结果:从自然制曲蚕豆曲中分离出的霉菌,经鉴定为米曲霉和总状毛霉;微生物菌群,以霉菌为主,米曲霉和毛霉数量分别为2.8×107,3.0×106cfu/g;其次为细菌,数量为5.3×104 cfu/g;酵母菌数量为2.6×102 cfu/g;芽孢杆菌:没有检出.     

葡萄糖对发酵蔬菜微生物区系的影响

研究利用甘蓝为实验材料,对不同葡萄糖浓度下(0,1%,2%,3%,4%)的甘蓝泡菜中细菌、酵母菌、霉菌和乳酸菌进行计数,每隔4天用平板菌落计数方法涂菌培养后计数,4次计数发酵泡菜过程中各种微生物数量和种类的变化。实验结果显示:在同一葡萄糖浓度下的各种菌变化趋势相似,大致都呈现先上升后下降的趋势,都在某一时间段达到最大值,而且泡菜中乳酸菌的生长产生大量乳酸,从而对其他菌种产生抑制作用。结果表明:2%葡萄糖浓度为泡菜发酵的最适糖浓度。     

诗仙太白酒窖泥微生物的分离研究

针对诗仙太白浓香型白酒窖池窖泥中细菌、酵母、霉菌、放线菌、己酸菌及丁酸菌等微生物,选择多种培养基进行分离培养研究。结果表明,牛肉膏蛋白胨培养基+制霉菌素、孟加拉红培养基+氯霉素、孟加拉红培养基+链霉素、高氏Ⅰ号培养基+重铬酸钾+放线菌酮、巴氏培养基、丁酸菌培养基分别对诗仙太白浓香型白酒窖池窖泥中的细菌、酵母、霉菌、放线菌、己酸菌及丁酸菌具有较好的分离效果。     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定食品真菌影响因素的探讨

目的探讨培养基成分、培养时间对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析真菌的影响以及该法鉴别产毒和非产毒真菌的可能性。方法(1)实验模式菌株红曲菌分别接种于查氏酵母提取粉琼脂培养基(CYA)和麦芽提取粉琼脂培养基(MEA),曲霉属分别接种于CYA、查氏琼脂培养基(CA)、马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基(PDA)和麦芽汁琼脂培养基(MA),青霉属分别接种于CA、CYA和MA培养基,镰孢菌属分别接种于CA、MA和PDA培养基,培养10d(红曲菌)和7d后进行MALDI-TOF-MS分析;(2)模式菌株寄生曲霉接种于PDA培养基,在培养5、7、10和14d时进行MALDI-TOF-MS分析;(3)产毒和非产毒(或低产毒)红曲菌和黄曲霉分别接种于MEA和PDA培养基,培养7d后进行MALDI-TOF-MS分析。结果CYA、PDA、CA和MA分别是红曲菌、曲霉属黄绿组和镰孢菌属、曲霉属黑色组、青霉属进行MALDI-TOF-MS分析的最适培养基;真菌进行MALDI-TOF-MS分析的最佳培养时间为7d;从MALDI-TOF-MS质谱图上尚不能区分红曲菌高产毒株和低产毒株;黄曲霉产毒株和非产毒株的质谱图各异。结论MALDI-TOF-MS进行真菌鉴定时必须对培养基、培养时间进行标化。     

食品中霉菌和酵母菌计数的检测能力验证结果分析

目的分析食品中霉菌和酵母菌计数的检测能力验证的结果。方法依据GB 4789.15—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数》和食品中霉菌和酵母菌计数的检测能力验证(第一轮)[ACAS-PT899 (2020)]的指导书,对2份测试样品进行稀释、培养、计数。结果样品20-C229的检测结果:霉菌780CFU/mL,酵母菌70CFU/mL,霉菌和酵母菌850CFU/mL;样品20-K432的检测结果:霉菌1200 CFU/mL,酵母菌580 CFU/mL,霉菌和酵母菌1800 CFU/mL。经评价, 2个考核样品|Z|均小于2.0,结果评价均为满意。结论本实验室具备食品中霉菌和酵母菌计数的检测能力。